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文档简介
DB14山西省市场监督管理局发布I 1 1 1 1 1 2 3 4本标准由山西省农业农村厅提出并监督实施。本标准起草单位:山西省动物疫病预防控制中心、武汉科1禽流感病毒H7亚型抗体竞争ELISA检测方法本标准规定了应用竞争酶联免疫吸附法检测血清中禽流感病毒H7亚型抗体方法的缩略语、实验原HRP:辣根过氧化物酶(horseradishperoxidas禽流感病毒血凝抑制试验抗原吸附到固相载体的表面,将待检血清和特异性酶标单抗同时加入包被板实验操作在15℃~25℃下进行。未灭活的感染性材料的实验活动,应在Ⅱ级生物安全柜内进行。4.2仪器禽流感病毒H7亚型包被抗原、HRP标记的禽流感病毒H7亚型HA蛋白的单克隆抗体(酶标记物)、底5.2样品准备2取动物全血,待血液充分凝固后,4000r/min离心10min,收集血清。也可等5.3包被5.4封闭5.5待检血清的稀释5.6操作步骤5.6.1加样取抗原包被板,先用洗涤液洗涤抗原包被板1次,稀释好的待检血清、阴性对照和阳性对照各取505.6.2洗涤5.6.4洗涤每个反应孔加入底物液100μL,置20℃~25℃下避光显色15min。试验成立的条件:阴性对照的平均OD450nm值大于1.0,阳性对照的抑制率(P3若被检样品的抑制率小于40%,该样品判为禽流感病毒H7亚型抗体阴性。若被检样品的抑制率大于操作区应有专门的固体和液体废弃物收集容器。废4试剂配制方法A.1包被液加800mL蒸馏水充分溶解,定容至10A.2洗涤液氯化钠(NaCl)十二水磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2A.3底物液A.4终止液A.5样品稀释液A.6封闭液牛血清白蛋白(
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