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文档简介
实验复习之二——物质鉴定类
实验复习之三
——物质鉴定类考查内容等级要求abc1.检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质
√
14.模拟尿糖的检测√20.DNA的粗提取与鉴定
√
【学习目标】《考试说明》要求:尝试用化学试剂检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质、DNA和淀粉【自主先学】请大声朗读【自主先学】1、2,解决以下问题。1.请分别说出鉴定可溶性还原糖、脂肪、蛋白质、DNA的试剂是什么?反应前后分别呈现什么颜色?2.哪些实验需要加热的?3.哪个实验需要显微镜?4.哪些实验需要用到酒精,所用酒精的体积分数及其作用?【实验原理】教材规定实验中的“染色剂”归纳试剂被染成分呈现颜色斐林试剂还原糖砖红色沉淀苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液脂肪橘黄色(或红色)双缩脲试剂蛋白质紫色二苯胺试剂(甲基绿染液)DNA蓝色绿色吡罗红染液RNA红色龙胆紫溶液染色体紫色醋酸洋红溶液红色改良苯酚品红染液红色淀粉绿色橘黄色红色蓝色紫色砖红色灰绿色还原性糖脂肪蛋白质DNARNA染色体纤维素乙醇苏丹Ⅲ染液苏丹Ⅳ染液酸性重铬酸钾醋酸洋红改良品红苯酚刚果红甲基绿吡罗红双缩脲试剂二苯胺试剂碘液龙胆紫斐林试剂班氏试剂材料试剂颜色【连连看】2.三类有机物检测在操作步骤上的“三个唯一”(1)唯一需要加热——还原糖检测,且必须水浴加热,不能用酒精灯直接加热。若不加热,则无砖红色沉淀出现。(2)唯一需要显微镜——脂肪检测。(3)唯一使用酒精——脂肪的鉴定,实验用体积分数为50%的酒精洗去浮色。【知识链接】3.检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质的实验中,哪些实验需要加热?哪些实验需要用显微镜观察?(1)只有检测还原糖的实验需要加热,且实验中需要用温水浴加热,不用酒精灯直接加热。(2)只有检测脂肪的实验需要用显微镜观察,因为脂肪颗粒储存于细胞中,必须用显微镜观察。【合作探究】学案P26【方法步骤】下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理,2min后试管内将呈现何种颜色?试加以分析说明。应为蓝色(斐林试剂的颜色,因未经水浴加热,只有将试管置于50~65℃温水中,经水浴加热后,方可呈现“砖红色沉淀”)。(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂,经加热若出现砖红色沉淀,则表明试管内含有葡萄糖,对吗?不对。只能证明含有“还原糖”,不能具体证明是哪种还原糖。【方法步骤】下图为某种物质鉴定方案,请推测:(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质,其中“某试剂”是什么?A液、B液分别指什么?
(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色?(1)蛋白质及多肽化合物;双缩脲试剂;A为0.1g/mLNaOH溶液;B为0.01g/mLCuSO4溶液。(2)紫色。1.在检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的实验中,对于选材有什么要求?(1)含量较高,如检测还原糖时宜选用苹果,苹果含大量还原糖,不能选择甘蔗、甜菜等,因为这两种实验材料中含蔗糖较高,蔗糖不具有还原性。(2)颜色为白色或浅色。白色或浅色的材料可以避免材料本身的颜色遮盖反应结果,如检测还原糖时一般不选择西瓜,检测蛋白质时一般不选择血红蛋白等。【合作探究】
2.蔗糖溶液中加入斐林试剂后呈现什么颜色?蔗糖属于非还原糖,不与斐林试剂发生反应。观察到的现象不是无色,而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。【合作探究】4.用蛋清稀释液作为实验材料鉴定蛋白质,
为什么一定要稀释到一定程度?如果不充分稀释蛋清液,与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不容易洗刷干净。5.鉴定还原糖时使用的斐林试剂为何要现配现用?因为斐林试剂很不稳定,容易产生蓝色的Cu(OH)2沉淀,所以应将甲液和乙液分别配制,使用时现配现用。【合作探究】6.斐林试剂与双缩脲试剂成分相同,但在使用时,斐林试剂甲液与乙液必须混合使用,而双缩脲试剂则先滴加A液,再滴加B液,请分析原因。
两个实验的反应原理不同,所以使用方法不同(1)检测还原糖:反应原理是Cu(OH)2与还原糖反应生成砖红色的Cu2O沉淀,所以先将甲液和乙液混合生成Cu(OH)2后再与还原糖反应。(2)检测蛋白质:反应原理是肽键(含2个以上)在碱性环境中与Cu2+反应产生紫色络合物,所以先滴加A液的目的是制造碱性环境。【合作探究】【知识链接】1.区分斐林试剂与双缩脲试剂的“一同三不同”【方法步骤】脂肪的鉴定取材制片(染色、去浮色、装片)观察结论切片苏丹Ⅲ染液将花生子叶切片中的脂肪染成橘黄色有绿色光泽的棕红色苏丹Ⅳ染液将液体中的脂肪染成红色深褐色7.脂肪的鉴定中,使用酒精的浓度、作用和原理是什么?体积分数50%,洗去浮色
,染液溶于酒精【合作探究】【实验成功关键点】(1)不宜选取有颜色的材料,否则会干扰实验结果的颜色变化。(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精,故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。(3)蛋白质鉴定中,若用大豆作材料,必须提前浸泡;若用蛋清作材料,必须稀释,防止其黏在试管上不易刷洗。(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验,若需进一步设立对照实验,对照组应加入成分已知的物质,如验证唾液淀粉酶是蛋白质,对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。【自主先学】DNA的鉴定项目2只20mL的试管1号2号实验步骤加入2mol/L的NaCl溶液5mL5mL加入丝状物(DNA)--+玻璃棒搅拌--+加入二苯胺试剂4mL4mL沸水浴加热5min5min观察现象不变蓝变蓝DNA的鉴定DNA的鉴定几类物质鉴定实验总结实验名称试剂颜色生物材料备注淀粉的鉴定碘液蓝色脱色的叶片
还原糖的鉴定斐林试剂砖红色沉淀苹果或梨匀浆等现配现用、水浴加热脂肪的鉴定苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液橘黄(或红)色花生种子切片需用高倍镜观察实验名称试剂颜色生物材料备注蛋白质的鉴定双缩脲试剂紫色豆浆、稀蛋清等
先加A液,后
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