弱毒牛型治疗用布氏菌病菌苗制造及检定规程短棒状杆菌菌苗制造及检定规程

弱毒牛型治疗用布氏菌病菌苗制造及检定规程本品系用弱毒牛型布氏菌经加热杀菌制成。专供治疗亚急性、慢性布氏菌病使用。1菌种有关菌种的规定及菌种检定按《冻干皮上划痕人用布氏菌病活菌苗制造及检定规程》1.1～1.4项及1.5.1～1.5.5项执行。2制造2.1可用肝浸液琼脂或其他适宜培养基制造。2.2启开冻干菌种，接种于肝琼脂斜面或其他适宜培养基上，37℃培育44～48小时为第1代菌种。第1代菌种在2～8℃可以保存15日。2.3将第1代菌种移种肝琼脂或其他适宜培养基上，放37℃培育44～48小时，为第2代菌种，经肉眼纯菌检查合格后，用灭菌生理盐水洗下菌苔制成悬液。2.4用第2代菌悬液接种肝琼脂或其他适宜培养基，放37℃培育44～48小时，肉眼逐瓶检查，有杂菌者废弃。2.5用灭菌生理盐水洗下菌苔或刮取菌苔，制成菌液。用绸布袋过滤，合并至灭菌瓶内。2.6合并后菌液按中国细菌浊度标准将菌液的浓度调为每ml含150亿～300亿菌，随后放70～80℃水浴摇动1小时杀菌。2.7无菌试验除按《生物制品无菌试验规程》进行外，另接种2管肝琼脂斜面，放37℃培育7天，应无杂菌及本菌生长。2.8用灭菌生理盐水将无菌试验合格的菌液稀释为含菌30亿/ml，稀释后应取样做无菌试验，不应有菌生长。2.9菌苗内不加防腐剂。稀释菌液分装安瓿后应加热70～80℃1小时。3成品检定3.1物理性状检查菌苗应呈均匀菌悬液，无摇不散的菌块及异物。3.2无菌试验按《生物制品无菌试验规程》进行。3.3浓度测定按中国细菌浊度标准测定。每ml含菌30亿±20%。3.4鉴别试验菌苗应与布氏菌诊断血清发生凝集反应。3.5安全试验每批菌苗用体重18～20g小白鼠5只，每只皮下注射0.5ml，注射后7日内小白鼠不得有死亡。凡有死亡者应复试，仍有死亡者则该批菌苗应废弃。4保存与效期应保存于2～8℃。自检定合格之日起效期为2年。治疗用布氏菌病菌苗使用说明书本品系用弱毒牛型布氏菌经加热杀菌制成，每ml含菌30亿。专供治疗亚急性、慢性布氏菌病使用。本品为乳白色均匀菌悬液，不应有摇不散的菌块及其他异物。用法1.用灭菌生理盐水进行稀释。2.可采用静脉注射或肌内注射。（1）静脉注射法注射部位为肘部正中静脉。每次注射分作两针注入，间隔1.5～2小时。如患者可以耐受，可酌情加大下一次注射剂量。例如：第1次1、2针剂量均为3万个菌，第2次1、2针可分别加至10万和15万个菌。但最后1、2针的最大剂量分别不应超过500万个菌和1000万个菌。每1疗程包括数次以至十余次注射不等，每次间隔3天、5天或7天。所用剂量及注射间隔应视反应及效果决定。（2）肌内注射法注射处以臀部为宜。可在臀部两侧肌内交替注射。每个疗程约为6～10次，第1次可注射1亿个菌，渐次增大，最后可用50亿个菌。间隔2天、3天或5天。如效果不良时，还可考虑加大剂量。禁忌有下列情况者不得使用本菌苗治疗。1.严重心脏病，心肌损害，显著的心血管硬化，心内膜炎，急性实质性肝炎及其他有肝功能损害的肝脏疾病，急性或慢性肾炎，活动性结核，妊娠后期等。2.极度衰弱及重症贫血者。3.消化道及呼吸系统有反复\o"书籍相关：出血"出血者。4.重症布氏菌病患者。5.有骨骼损害者，布氏菌病性脊椎炎，骨髓炎，髋关节炎，脓漏。反应1.注射菌苗后，体温可有升高，有的高达40℃左右，个别伴有休克样反应。应对此类反应密切注意，及时处理或治疗。2.本品不含防腐剂，安瓿开封后一次用不完应予废弃。3.病人应住院治疗。治疗室应备有急救药品。保存应保存于2～8℃暗处。

短棒状杆菌菌苗制造及检定规程本品系用具有免疫调节及抑\o"书籍相关：瘤"瘤等活性的厌氧棒状杆菌经培养后制成悬液，加甲醛杀菌，以无菌缓冲生理盐水稀释而成。用于恶性肿\o"书籍相关：瘤"瘤及其他疾病的免疫治疗。1菌种1.1菌种来源制造菌苗用的菌种采用厌氧短棒状杆菌H75010或其他经试验证明安全有效的菌株。生产用菌种和检定用血清，由中国药品生物制品检定所分发或经同意。1.2菌种检定1.2.1培养特性检定菌种用碎肉半流体、肝硫乙醇酸钠培养基或其他适宜培养基。本菌应为革兰氏阳性短棒状菌，有异染颗粒。1.2.2生化反应应发酵葡萄糖，不发酵棉子糖、HYPERLINK\o"中药材：麦芽"麦芽糖、蔗糖，液化明胶，靛基质、硝酸盐反应阳性。1.2.3血清学试验应属Ⅰ型。Ⅰ型血清由中国药品生物制品检定所供应或经同意。1.2.4脾激活试验用体重18～20g纯种小白鼠（C3H、615或C57BL），试验及对照各10只，雌雄各半。试验组每只腹腔注射菌液0.5ml（15亿菌），对照组注射同量生理盐水，14天处死小白鼠，分别称体重、脾重、计算脾指数，其指数应不低于2.0。脾指数=试验组脾重（mg）/总体重（g）÷对照组总脾重（mg）/总体重（g）1.2.5抑\o"书籍相关：瘤"瘤试验（艾氏腹水\o"书籍相关：癌"癌）用体重18～20g纯种小白鼠（C3H、615、C57BL或K-LACA），试验及对照组各10只。雌雄各半，每只腹腔注射活的\o"书籍相关：瘤"瘤细胞100万/0.2ml（用传代5～8天非血性腹水）。试验组于注射\o"书籍相关：瘤"瘤细胞前1天及攻\o"书籍相关：瘤"瘤后次日起，连续腹腔注射菌液0.25ml（15亿）3～5次，每次间隔1天，对照组同时注射同量生理盐水，由对照组小白鼠全部因\o"书籍相关：癌"癌性腹水死亡起点计算试验组小白鼠存活率，观察期最长30天，其存活率应不低于70%。1.2.6毒性试验小白鼠及分组要求同1.2.4项，称总体重，试验组每只小白鼠腹腔注射0.5ml菌液（15亿），对照组注射同量生理盐水，观察1周，到期称总体重，不得较试验前减轻或死亡。1.3菌种保存菌种应冻干，置2～8℃保存。2菌苗制造2.1制造用培养基可用蛋白胨、肝或酵母透析液培养基或其他适宜培养基。2.2原液制造2.2.1接种连续2～4次传代的种子液接种于大瓶或培养罐，36～37℃厌氧培养4～6天。2.2.2采集到期之培养物采集前逐瓶或逐罐镜检，有杂菌污染者废弃。2.2.3杀菌采集之菌体加入不超过0.5%(ml/ml)甲醛溶液，杀菌48小时后进行无菌试验，不得有任何菌生长。2.2.4菌液洗涤无菌试验合格的菌液经离心沉淀后，用新鲜无菌生理盐水洗涤3次，其最后一次用无菌生理盐水做成悬液，加温60～65℃1小时，逐瓶做无菌试验，合格后合并。2.2.5原液合并无菌试验合格的菌液合并成批，放2～8℃保存。2.3原液检定2.3.1镜检菌形正常，至少观察10个视野，应无杂菌。2.3.2无菌试验按《生物制品无菌试验规程》进行。2.3.3浓度测定按中国细菌浊度标准测定。2.3.4毒性试验按1.2.6项进行。2.3.5脾激活试验除脾指数应不低于1.5个，余同1.2.4项。2.3.6抑\o"书籍相关：瘤"瘤试验同1.2.5项。样品应先按2.6项加温处理。2.4菌液稀释2.4.1稀释根据2.3.3项测定的原液浓度用无菌磷酸盐缓冲液生理盐水（pH7.2～7.4）稀释成每ml含菌体60亿±的菌苗。2.4.2分批同一天由同一批原液稀释的菌苗作为1批，如1批有数瓶，应分亚批。2.4.3检定稀释的菌苗应逐瓶做无菌试验。2.5分装经2.4.3项检定合格的菌苗在充分摇匀下分装。2.6加热处理分装安瓿后立即60℃±2℃加热30分钟。3成品检定3.1理化检定菌苗应为乳白色悬液，pH6.6～7.2，无异味，无摇不散的菌块及异物。甲醛含量不得超过0.006%（ml/ml）。3.2无菌试验按《生物制品无菌试验规程》进行。3.3脾激活试验按2.3.5项进行3.4抑\o"书籍相关：瘤"瘤试验按1.2.5项进行（检定合格的原液在半年内分装者，成品可不再作3.3～3.5项检定）。3.5浓度测定按2.3.3项测定，每ml应含菌体60亿±10%。3.6安全试验用18～20g白小鼠5只，每只皮下注射菌苗0.5ml，观察7日，不得有局部脓肿或死亡。4保存与效期应保存于2～8℃。自原液采集之日起效期为2年半。短棒状杆菌菌苗使用说明书本品系用具有免疫调节及抑\o"书籍相关：瘤"瘤等活性的厌氧短棒状杆菌经培养后制成悬液，加甲醛杀菌，以无菌缓冲生理盐水稀释制成。本品为乳白色悬液，无异味，无摇不散的菌块及异物，每ml含菌体60亿。主要用于\o"书籍相关：癌"癌性胸水，结合手术治疗早、中期肺\o"书籍相关：癌"癌。并可合理配合常规治疗方法进行乳腺\o"书籍相关：癌"癌、鼻咽\o"书籍相关：癌"癌、晚期肺\o"书籍相关：癌"癌、黑色素\o"书籍相关：瘤"瘤以及\o"书籍相关：癌"癌症的体表转移灶等的治疗。本菌苗对牛皮\o"书籍相关：癣"癣（银屑病）、再生障碍性贫血、女阴白斑、感染性哮喘等也有一定疗效。剂量浓度60亿/ml菌苗，初次注射0.5～1.0ml，以后可酌情逐次增加0.5ml，直至2ml。肌内、腔内及多点注射可酌情增量，最多4.0ml（皮下不宜超过2.0ml）。用法一般为皮下或肌内注射。腔内注射以氯化钠注射液进行适当稀释。\o"书籍相关：瘤"瘤内或\o"书籍相关：瘤"瘤周采用上述剂量，多点注射以减轻局部反应，女阴白斑等可在患部涂抹，每日1次，每次1.0～2.0ml，症状减轻，可根据需要，延长用药间隔。副作用注射局部常