专题16 发酵工程和基因工程-5年（2020-2024）高考1年模拟生物真题分类汇编（解析版）

2020-2024年五年高考真题分类汇编PAGEPAGE1专题16发酵工程和基因工程考向五年考情考情分析发酵工程和基因工程2024年6月浙江卷第10、11、14、19、20题2024年1月浙江卷第1题2023年6月浙江卷第11、12、19题2023年1月浙江卷第2、19题2022年1月浙江卷第21题2021年6月浙江卷第17、20题2021年1月浙江卷第10题2020年7月浙江卷第19、24题两个模块的考查形式基本一致，利用真实的发酵和基因工程的情景，学生通过分析题干信息，结合课堂所学知识进行解答，考查学生基础知识掌握能力、分析和获取信息的能力以及知识应用能力。（2024年6月浙江卷）阅读下列材料，完成下面小题。柿子具有较高的营养价值和药用价值。采用液体发酵法可酿制出醋香浓郁、酸味纯正的柿子醋，提高了柿子的经济价值。柿子醋的酿造工艺流程如图所示。1.下列关于酒精发酵和醋酸发酵的叙述，错误的是（）A.酒精发酵是吸能反应 B.酒精发酵在无氧条件下进行C.醋酸发酵是放能反应 D.醋酸发酵在有氧条件下进行2.下列关于柿子醋酿造过程的叙述，错误的是（）A.加酶榨汁环节加入果胶酶，有利于提高柿子汁产量B.酒精发酵前可对柿子汁进行杀菌，以利于酒精发酵C.若柿子酒的酒精度过高，应稀释后再用于醋酸发酵D.用不同品种和成熟度的柿子酿造的柿子醋风味相同【答案】1.A2.D【解析】〖祥解〗酒精发酵是利用的酵母菌的无氧呼吸，需要的是无氧条件；醋酸发酵利用的是醋酸菌的有氧呼吸，需要的是有氧条件。【1题详析】A、酒精发酵是利用的酵母菌的无氧呼吸，属于放能反应，A错误；B、酒精发酵是利用的酵母菌的无氧呼吸，需要的是无氧条件，B正确；C、醋酸发酵利用的是醋酸菌的有氧呼吸，属于放能反应，C正确；D、醋酸发酵利用的是醋酸菌的有氧呼吸，需要的是有氧条件，D正确。故选A。【2题详析】A、加酶榨汁环节加入果胶酶，破坏其细胞壁，有利于提高柿子汁产量，A正确；B、酒精发酵前可以可对柿子汁进行杀菌，再接种酵母菌，以利于酒精发酵，B正确；C、醋酸菌是好氧细菌当阳气糖原充足时可以将糖分解成醋酸，当缺少糖原时可以将乙醇转化为一圈，再有乙醛转化为醋酸，因此若柿子酒的酒精度过高，应稀释后再用于醋酸发酵，C正确；D、用不同品种和成熟度的柿子酿造的柿子醋风味不相同，D错误。故选D。3、（2024年6月浙江卷）脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是（）A.镍是组成脲酶的重要元素B.镍能提高尿素水解反应的活化能C.产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖D.以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌【答案】B【解析】〖祥解〗1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。2、只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。【详析】A、根据题意，脲酶被去除镍后失去活性，说明镍是组成脲酶的重要元素，A正确；B、脲酶催化尿素水解的机理为降低化学反应所需的活化能，镍作为脲酶的重要组成元素，应该与降低尿素水解反应的活化能有关，B错误；C、产脲酶细菌可利用NH4Cl里的氮源进行代谢活动，因此产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖，C正确；D、产脲酶细菌能利用脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源，不能产脲酶的细菌则无法分解尿素获得氮源，因此以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌，D正确。故选B。（2024年6月浙江卷）阅读下列材料，完成下面小题。疟疾是一种严重危害人类健康的红细胞寄生虫病，可用氯喹治疗。疟原虫pfcrt基因编码的蛋白，在第76位发生了赖氨酸到苏氨酸的改变，从而获得了对氯喹的抗性。对患者进行抗性筛查，区分氯喹敏感患者和氯喹抗性患者，以利于分类治疗。研究人员根据pfcrt基因的序列，设计了F1、F2、R1和R2等4种备选引物，用于扩增目的片段，如图甲所示。为选出正确和有效的引物，以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图乙所示。4.下列关于引物F1、F2、R1和R2的叙述，错误的是（）A.F1-R1引物可用于特异性地扩增目的片段B.F1-R2引物不能用于特异性地扩增目的片段C.F2为无效引物，没有扩增功能，无法使用D.R2引物可用于特异性地扩增目的片段5.为了筛查疟原虫感染者，以及区分对氯喹的敏感性。现有6份血样，处理后进行PCR。产物用限制酶ApoⅠ消化，酶解产物的电泳结果如图所示。1~6号血样中，来自于氯喹抗性患者的是（）A.1号和6号 B.2号和4号C.3号和5号 D.1号、2号、4号和6号【答案】4.D5.B【解析】〖祥解〗引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸，用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸。【4题详析】A、根据图乙结果显示可知，F1-R1引物只扩增出一条片段,说明能够用于特异性扩增目的片段，A正确；B、根据图乙信息可知，F1-R2引物扩增条带为三条，说明其不能用于特异性扩增目的片段，B正确；C、根据图乙信息可知，F1-R1能扩增目的1条带，F2-R1无法扩增目的条带，所以F2为无效引物，没有扩增功能，无法使用，C正确；D、根据图乙显示可知，F1-R1引物只扩增出一条片段，F1-R2引物扩增条带为三条，说明R2引物无法特异性的扩增目的条带，D错误。故选D。【5题详析】根据题干信息可知，疟原虫pfcrt基因编码的蛋白，在第76位发生了赖氨酸到苏氨酸的改变，从而获得了对氯喹的抗性。根据酶切位点可知，在具有氯喹抗性的基因组没有ApoⅠ酶切位点，而敏感性基因组中具有该酶切位点，因此对6份血样处理后进行PCR，产物用限制酶ApoⅠ消化，酶解产物的电泳出现两条带则为敏感型，只有一条带的为抗性，所以1~6号血样中，来自于氯喹抗性患者的是2号和4号，B正确，ACD错误。故选B。6、（2024年1月浙江卷）关于生物技术的安全与伦理问题在我国相关法规明令禁止的是（）A.试管动物的培育 B.转基因食品的生产C.治疗性克隆的研究 D.生物武器的发展和生产【答案】D【解析】〖祥解〗1、我国政府一再重申四不原则:不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。2、2010年，在第65届联合国大会上，我国政府重申支持《禁止生物武器公约》的宗旨和目标，全面、严格履行公约义务，支持不断加强公约的约束力，并主张全面禁止和彻底销毁生物武器等各类大规模杀伤性武器。【详析】A、试管动物的培育属于胚胎工程，没有禁止，A正确；B、我过目前不反对转基因食品的生产，B正确；C、中国政府禁止生殖性克隆，支持治疗性克隆，C正确；D、生物武器致病能力强、攻击范围广，世界范围内应全面禁止生物武器，D错误。故选D。（2023年6月浙江卷）阅读下列材料，完成下面小题。小曲白酒清香纯正，以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。7.小曲白酒的酿造过程中，酵母菌进行了有氧呼吸和无氧呼吸。关于酵母菌的呼吸作用，下列叙述正确的是（）A.有氧呼吸产生的[H]与O2结合，无氧呼吸产生的[H]不与O2结合B.有氧呼吸在线粒体中进行，无氧呼吸在细胞质基质中进行C.有氧呼吸有热能的释放，无氧呼吸没有热能的释放D.有氧呼吸需要酶催化，无氧呼吸不需要酶催化8.关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（）A.糖化主要是利用霉菌将淀粉水解为葡萄糖B.发酵液样品的蒸馏产物有无酒精，可用酸性重铬酸钾溶液检测C.若酿造过程中酒变酸，则发酵坛密封不严D.蒸熟并摊晾的原料加入糟醅，立即密封可高效进行酒精发酵【答案】7.A8.D【解析】〖祥解〗有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和[H]，合成少量ATP；第三阶段是氧气和[H]反应生成水，合成大量ATP。【7题详析】A、有氧呼吸产生的[H]在第三阶段与O2结合生成水，无氧呼吸产生的[H]不与O2结合，A正确；B、有氧呼吸的第一阶段在细胞质基质中进行，第二和第三阶段分别在线粒体基质和线粒体内膜中进行，无氧呼吸的两个阶段都在细胞质基质中进行，B错误；C、酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸过程中释放的能量均大多以热能散失，但无氧呼吸是不彻底的氧化分解过程，大部分能量存留在酒精，C错误；D、有氧呼吸和无氧呼吸过程都需要酶的催化，只是酶的种类不同，D错误。故选A。【8题详析】A、由于酿酒酵母不能直接利用淀粉发酵产生酒精（乙醇），故糖化过程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶将淀粉分解为葡萄糖，以供发酵利用，A正确；B、发酵液样品的蒸馏产物有无酒精，可用酸性重铬酸钾溶液检测，若存在酒精，则酒精与酸性的重铬酸钾反应呈灰绿色，B正确；C、酿造过程中应在无氧条件下进行，若密封不严，会导致醋酸菌在有氧条件下发酵产生醋酸而使酒变酸，C正确；D、蒸熟并摊晾的原料需要冷却后才可加入糟醅，以免杀死菌种，且需要在有氧条件下培养一段时间，让酵母菌大量繁殖，此后再密封进行酒精发酵，D错误。故选D。9、（2023年6月浙江卷）某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（）A.Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达B.翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白C.2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子D.若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子【答案】B【解析】〖祥解〗PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。【详析】A、分析图中可知，启动子在左侧，GFP基因整合Gata3基因的右侧，启动子启动转录后，可以使GEP基因转录，Gata3基因的启动子能控制GFP基因的表达，A错误；B、因启动子在左侧，转录的方向向右，合成的mRNA从左向右为5′→3′，刚好是翻译的方向，所以翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正确；C、整合GFP基因后，核酸片段变长，2号个体只有大片段，所以是Gata3-GFP基因纯合子，4号个体只有小片段，是野生型，C错误；D、用引物1和引物3进行PCR扩增，无法区分杂合子和纯合子，因为二者扩增后只得到小片段，D错误。故选B。10、（2023年1月浙江卷）以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。对生物技术应用于人类，在安全与伦理方面有不同的观点，下列叙述正确的是（）A.试管婴儿技术应全面禁止B.治疗性克隆不需要监控和审查C.生殖性克隆不存在伦理道德方面的风险D.我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验【答案】D【解析】〖祥解〗生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。两者有着本质的区别。【详析】A、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，但治疗性克隆可在有效监控和严格审查下实施，A错误；B、我国政府同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题，主张对治疗性克隆进行有效监控和严格审查，B错误；C、生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念，C错误；D、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，D正确。故选D。11、（2023年1月浙江卷）某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（）A.培养基pH需偏碱性 B.泡菜汁需多次稀释后才能划线接种C.需在无氧条件下培养 D.分离得到的微生物均为乳酸菌【答案】C【解析】〖祥解〗泡菜是利用附生在蔬菜表面的植物乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等发酵制成的。这些微生物一般为厌氧、兼性厌氧或微好氧菌。它们的发酵产物不仅有乳酸，还会有醇、酯等，因而使泡菜具有特殊的风味。【详析】A、因为乳酸菌经过无氧呼吸产生乳酸，故其生活的环境是酸性，培养基pH需偏酸性，A错误；B、平板划线接种时不需要稀释，B错误；C、乳酸菌是厌氧型微生物，所以需在无氧条件下培养，C正确；D、参与泡菜发酵的微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等，所以分离得到的微生物除了乳酸菌，还会有其他耐高盐的微生物，D错误。故选C。12、（2022年1月浙江卷)羊瘙痒病是感染性蛋白粒子PrPSc引起的。某些羊体内存在蛋白质PrPc，但不发病。当羊感染了PrPSc后，PrPSc将PrPc不断地转变为PrPSc，导致PrPSc积累，从而发病。把患瘙痒病的羊组织匀浆接种到小鼠后，小鼠也会发病。下列分析合理的是（）A.动物体内的PrPSc可全部被蛋白酶水解B.患病羊体内存在指导PrPSc合成的基因C.产物PrPSc对PrPc转变为PrPSc具有反馈抑制作用D.给PrPc基因敲除小鼠接种PrPSc，小鼠不会发病【答案】D【解析】〖祥解〗基因敲除是用含有一定已知序列的DNA片段与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组，整合至受体细胞基因组中并得到表达的一种外源DNA导入技术。它是针对某个序列已知但功能未知的序列，改变生物的遗传基因，令特定的基因功能丧失作用，从而使部分功能被屏蔽，并可进一步对生物体造成影响，进而推测出该基因的生物学功能。【详析】A、由题干可知PrPSc可将PrPc不断地转变为PrPSc，导致PrPSc在羊体内积累，说明PrPSc不会全部被蛋白酶水解，A错误；B、患病羊体内不存在指导PrPSc合成的基因，但存在指导蛋白质PrPc合成的基因，PrPc合成后，PrPSc将PrPc不断地转变为PrPSc，导致PrPSc积累，从而使羊发病，B错误；C、由题干可知当羊感染了PrPSc后，PrPSc将PrPc不断地转变为PrPSc，导致PrPSc积累，从而使羊发病，说明产物PrPSc对PrPc转变为PrPSc不具有反馈抑制作用，C错误；D、小鼠的PrPc基因敲除后，不会表达产生蛋白质PrPc，因此小鼠接种PrPSc后，不会出现PrPc转变为PrPSc，也就不会导致PrPSc积累，因此小鼠不会发病，D正确。故选D。13、(2021年6月浙江卷)下列关于原生质体和细胞计数的叙述，错误的是（）A.测定植物原生质体密度时，可用血细胞计数板B.红墨水不能进入活细胞，可用于检测细胞的存活状态并计数C.涂布分离法和划线分离法均能得到单菌落，都可用于细胞计数D.酵母菌在液体培养基中培养一段时间后，可用比浊计测定其密度【答案】C【解析】〖祥解〗微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。其中稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数，而平板划线法不能。【详析】A、可用血细胞计数板对原生质体进行计数，一般计数总数不少于300个细胞，A正确；B、活细胞的细胞膜具有选择透过性，红墨水中的色素分子不能透过细胞膜，当细胞死亡后，细胞膜失去选择透过性，红墨水中的色素分子能进入细胞，所以可用红墨水检测细胞的存活状态并计数，B正确；C、划线分离法不能用于细胞计数，C错误；D、酵母细胞的密度与浑浊度指标存在一定的数量关系，所以酵母菌在液体培养基中培养一段时间后，可用比浊计测定其密度，D正确。故选C。14、(2021年6月浙江卷)采用CRISPR/Cas9基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因定点插入到受精卵的Y染色体上，获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小鼠交配，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是（）A.基因编辑处理的受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液B.基因编辑处理的受精卵经体外培养至2细胞期，须将其植入同期发情小鼠的子宫，才可获得表达EGFP的小鼠C.分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠D.通过观察早期胚胎的荧光，能表达EGFP的即为雄性小鼠胚胎【答案】B【解析】〖祥解〗分析题意可知，通过基因编辑技术将EGFP基因定点插入到受精卵的Y染色体上，使含有该Y染色体的小鼠能够发出绿色荧光，转基因鼠将Y染色体传递给子代的雄性个体，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。【详析】A、依据胚胎在不同发育阶段对培养条件的特定需要，受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液，A正确；B、基因编辑处理的受精卵一般经体外培养至桑椹胚或囊胚阶段，进行胚胎移植，可获得表达EGFP的小鼠，B错误；C、分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术，可获得大量的转基因小鼠，C正确；D、由分析可知，通过基因编辑技术将Y染色体用绿色荧光蛋白基因标记，通过观察早期胚胎的荧光，能表达EGFP的个体含有Y染色体，即为雄性小鼠胚胎，D正确。故选B。15、(2021年1月浙江卷)用白萝卜制作泡菜的过程中，采用适当方法可缩短腌制时间。下列方法中错误的是（）A.将白萝卜切成小块 B.向容器中通入无菌空气C.添加已经腌制过的泡菜汁 D.用沸水短时处理白萝卜块【答案】B【解析】〖祥解〗1、泡菜腌制过程中起作用的主要是假丝酵母和乳酸菌，在无氧条件下乳酸菌无氧呼吸产生乳酸。2、泡菜的制作流程是：选择和处理原料、洗净泡菜坛、调味装坛、密封发酵。

【详析】A、将白萝卜切成小块可以扩大白萝卜与腌料的接触面积，缩短腌制时间，A正确；B、泡菜制作所需菌种为乳酸菌，制作过程中应保持无氧环境，向容器中通入无菌空气不利于腌制，B错误；C、泡菜汁中含有一定量的发酵菌种，所以在腌制过程中，加入一些已经腌制过泡菜汁可缩短腌制时间，C正确；D、用沸水短时处理，可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品质，也可缩短腌制时间，D正确。故选B。16、(2020年7月浙江卷)下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是（）A.利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B.配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pHC.酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D.适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化【答案】A【解析】〖祥解〗1、微生物培养的关键是防止杂菌污染；培养基制作完成后需要进行灭菌处理，培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌；2、接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。【详析】A、利用尿素固体培养基，由于不能利用尿素做氮源的微生物不能生长繁殖，而保留利用尿素的微生物，并非杀死，A错误；

B、不同的微生物所需的pH不同，所以配置培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH，B正确；

C、酵母菌不能直接利用淀粉，应用酒曲中的根霉和米曲霉等微生物把淀粉糖化，再用酵母菌发酵得到糯米酒，C正确；

D、醋化醋杆菌在有氧条件下利用酒精产生醋酸，D正确。

故选A。17、(2020年7月浙江卷)下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A.若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定B.抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个稳定遗传转基因品系，抗性鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关C.抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株，其DNA检测均含目的基因，抗性鉴定为抗除草剂和不抗除草剂。表明一定是前者表达了抗性蛋白而后者只表达抗性基因RNAD.已知不同分子量DNA可分开成不同条带，相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带。表明该质粒上一定至少有3个被该酶切开的位置【答案】D【解析】〖祥解〗基因工程中通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按一定的程序进行操作，包括目的基因的获得、重组DNA的形成、重组DNA导入受体细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。【详析】A、若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则该酶会对进入受体的重组质粒进行切割，不利于其保持结构稳定，A错误；B、抗除草剂基因转入抗盐植物，获得了抗除草剂抗盐品系和抗除草剂不抗盐品系，不抗盐品系的产生可能是转入的抗除草剂基因插入到抗盐基因内，影响其表达造成，B错误；C、转基因植物中均含抗除草剂基因，但存在抗除草剂和不抗除草剂两种植株，前者表达了抗性蛋白，后者可能抗除草剂基因未转录出mRNA，或转录出的mRNA未能翻译成蛋白质，C错误；D、某种限制性内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带，即3种不同分子量DNA，因此环状质粒上至少有3个酶切位点，D正确故选D。选择题1．（2024·浙江温州·三模）食醋酿造过程中，由于生产工艺的限制，极易遭到黄曲霉毒素的污染。为筛选能在醋酸发酵过程中高效降解黄曲霉毒素的酵母菌菌株，下列叙述错误的是（

）A．发酵底物和发酵菌株均会影响食醋的风味B．可从被污染的食醋中采样筛选目标酵母菌C．须在无氧环境下测定菌株降解毒素的能力D．还需要检测酵母菌菌株对食醋品质的影响【答案】C〖祥解〗参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸【详析】A、发酵底物和发酵菌株都会影响发酵产物中的物质种类，会影响食醋的风味，A正确；B、被污染的食醋中存在能在黄曲霉毒素中存活的酵母菌，可用于筛选目标酵母菌，B正确；C、醋酸发酵过程使在有氧环境下，应在有氧环境下测定菌株降解毒素的能力，C错误；D、目标酵母菌要添加在发酵过程中，因此还需要检测酵母菌菌株对食醋品质的影响，D正确。故选C。（2024·浙江金华·模拟预测）阅读以下资料，完成以下小题。链霉菌是一类高等放线菌（原核生物），以能够产生丰富的次级代谢产物而著称。链霉菌会代谢产生四环素、缬氨霉素等多种抗生素。其中缬氨霉素是由12个氨基酸组成的脂溶性环形肽。2．将缬氨霉素嵌入脂质体后，不仅能提高K+顺浓度梯度运输的速率，而且还会抑制线粒体中ATP的合成。下列有关说法错误的是（）A．合成缬氨霉素时，需脱去12分子水B．缬氨霉素的加工、分泌与内质网和高尔基体有关C．缬氨霉素嵌入脂质体时，处于磷脂分子的尾部位置D．肌肉细胞使用缬氨霉素后，会抑制K+的主动转运3．实验将某种链霉菌与金黄葡萄球菌共培养，探究某一类营养成分对该链霉菌产生四环素的影响。实验结果如表，下列说法错误的是（）组号探究的营养成分（40g）抑菌圈直径（mm）1KNO34.0g：黄豆粉36.0g12.102NH4NO34.0g：黄豆粉36.0g20.403KNO34.0g：蛋白胨36.0g11.404NH4NO34.0g；蛋白胨36.0g18.40A．本实验所用培养基均为天然培养基B．链霉菌对蛋白胨的利用效率低于黄豆粉C．本实验自变量是碳源，因变量是抑菌圈大小D．本实验最有利于链霉菌产生四环素的是组号2【答案】2．B3．C〖祥解〗1、原核生物与真核生物相比主要的特征是没有成形的细胞核。原核生物只有一个细胞器就是核糖体。2、据实验结果分析，2组的抑菌圈直径最大，说明链霉菌产生的抗生素最多，故最有利于实验室培养链霉菌产生抗生素的是2组。2．A、缬氨霉素是由12个氨基酸组成的环形肽，合成缬氨霉素时，需脱去12分子水，A正确；B、缬氨霉素是链霉菌产生的次级代谢产物，链霉菌是原核生物，无内质网和高尔基体，B错误；C、缬氨霉素是脂溶性环形肽，缬氨霉素嵌入脂质体时，处于磷脂分子的亲脂尾部位置，C正确；D、缬氨霉素会抑制线粒体中ATP的合成，K+的主动转运需要消耗能量，肌肉细胞使用缬氨霉素后，会抑制K+的主动转运，D正确。故选B。3．A、天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料，如牛肉膏、蛋白胨等，这些物质配成的培养基虽然不能确切的知道它的化学成分，但营养丰富、配制方便，本实验所用培养基均为天然培养基，A正确；B、分析1、3组或2、4组可知，链霉菌对蛋白胨的利用效率低于黄豆粉，B正确；C、分析4组实验的营养成分可知，该实验的自变量是氮源的种类，因为蛋白胨、黄豆粉的主要为微生物提供氮源，KNO3和NH4NO3也是含氮化合物；因变量是抑菌圈大小，C错误；D、据实验结果分析，2组的抑菌圈直径最大，说明链霉菌产生的四环素最多，故最有利于实验室培养链霉菌产生抗生素的是2组，D正确。故选C。4．（2024·浙江绍兴·模拟预测）某种除草剂(一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，按下图过程选育能降解该除草剂的细菌。下列叙述正确的是（

）A．分解除草剂能力最强的是E菌株，应对其扩大培养B．药品称量、溶化、和倒平板等操作都必须在酒精灯火焰旁进行C．图中接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数D．培养基上形成的5个菌落中的细菌都能以该除草剂为氮源【答案】A〖祥解〗该实验是从土壤中筛选分离能降解除草剂的微生物的过程。这样的实验要将土壤稀释处理，以除草剂为唯一的氮源进行处理筛选土壤微生物，以菌落计数法进行统计计数。【详析】A、分解除草剂能力最强的是E菌株，应对其扩大培养，因为E菌落外围的透明圈和E菌落直径的比例最大，A正确；B、药品称量、溶化是进行培养基配置的过程，培养基配制后才需要灭菌，故称量和溶化不需要无菌操作，倒平板过程需要进行无菌操作，B错误；C、稀释涂布平板法才可以用于菌体计数，平板划线法不能计数，C错误；D、培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同，有透明圈的，是能够利用除草剂中的氮源，没有透明圈的，不能利用除草剂中的氮源，D错误。故选A。5．（2024·浙江金华·模拟预测）酒曲白酒通常以大米、大麦、小麦等为原料，以酒曲为发酵剂酿造而成。酒曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酒曲白酒的传统酿造工艺流程如下图所示。下列叙述错误的是：（

）A．随着发酵时间的延长，坛内微生物的种类和数量不断增加B．乳酸菌在发酵过程中产生的乙醛、双乙酰等可为白酒增添风味C．酿造过程中若密封不严，会导致醋酸菌在有氧条件下发酵产生醋酸而使酒变酸D．酒曲中的好氧型微生物霉菌分泌的淀粉酶将淀粉分解为葡萄糖供酿酒酵母利用【答案】A〖祥解〗果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。【详析】A、随着发酵时间的延长，坛内无氧环境会抑制好氧型微生物霉菌、醋酸菌的生存，发酵过程中产生的酒精会抑制乳酸菌的生存，且随着营养物质减少，酵母菌数量也不会一直增加，A错误；B、乳酸菌在白酒发酵过程中产生的乳酸与酵母菌发酵产生的酒精发生反应生成酯类，同时乳酸菌代谢过程中产生乙醛和双乙酰，它们都与白酒特殊的风味有关，B正确；C、醋酸菌为需氧菌，可将酒精变成醋酸，因此酿造过程中若密封不严，会导致醋酸菌在有氧条件下发酵产生醋酸而使酒变酸，C正确；D、酵母菌可利用葡萄糖分解形成酒精，酒曲中的好氧型微生物霉菌分泌的淀粉酶将淀粉分解为葡萄糖供酿酒酵母利用，D正确。故选A。6．（2024·浙江绍兴·模拟预测）微生物气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的微生物及颗粒物形成，其采集方法包括自然沉降法、采样器采样法和过滤法等。自然沉降法是利用带培养基的培养皿收集微生物，再进行培养计数。下列叙述错误的（

）A．利用采样器采样法，采样前需对采样器进行无菌处理B．自然沉降法收集的样品在进行恒温培养时需将平板倒置C．自然沉降法检测的微生物气溶胶浓度一般比实际值偏高D．各种方法均需要收集同一条件下的多个样品，用于计数并取平均值【答案】C〖祥解〗稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。【详析】A、为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的双手进行消毒，A正确；B、纯化培养时，为防止污染培养基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B正确；C、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，C错误；D、微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3个菌落数目在30～300的平板进行计数，以确保实验的准确性，D正确。故选C。7．（2024·浙江绍兴·模拟预测）谷物饮料深受大众喜爱，某种专利产品生产工艺流程为：干谷物→浸泡、糊化→打浆→液化(a-淀粉酶)→糖化→发酵→调配→成品(注；a-淀粉酶水解淀粉产物以葡萄糖为主，还有少量麦芽三糖及麦芽糖，发酵过程使用乳酸菌调节口感和改善肠道pH)。下列叙述错误的是（

）A．以干谷物为原料，解除了选择新鲜谷物的季节性限制B．检测液化是否完全，应使用碘—碘化钾溶液C．糖化是将液化后的非单糖进一步水解，为发酵提供原料D．发酵过程需要通入无菌空气，并定期取样监测发酵进程【答案】D〖祥解〗1、酶的特性：高效性、专一性和作用条件温和的特性。2、乳酸菌是厌氧菌，在无氧条件下，将葡萄糖分解成乳酸。【详析】A、干谷物可以长期保存，以干谷物为原料，解除了选择新鲜谷物的季节性限制，A正确；B、淀粉遇碘液变蓝，检测液化是否完全，应使用碘-碘化钾溶液，B正确；C、糖化过程是将复杂的碳水化合物进一步水解成单糖，为发酵提供原料，C正确；D、乳酸菌是厌氧菌，发酵过程需要密封，D错误。故选D8．（2024·浙江·三模）种子扩大培养是指将保存在冷冻干燥管中的工业菌种接入试管斜面，再经逐级放大培养而获得一定数量和质量的纯种过程，一般流程如下：斜面菌种→一级种子培养（摇瓶）→二级种子培养（种子罐）→发酵（发酵罐）。下列叙述错误的是（

）A．优良菌种无需扩大培养可直接接种到发酵罐中B．接入试管斜面的目的是让处于休眠状态的菌种活化C．将菌种放入摇瓶进行振荡培养，有利于充分获得营养物质和O2D．种子罐的培养基应接近发酵罐培养的成分和条件，以便菌体适应发酵环境【答案】A〖祥解〗发酵工程的基本环节：（1）菌种的选育：性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。（2）扩大培养：在发酵之前还需要对菌种进行扩大培养。（3）培养基的配制：在菌种确定之后，要选择原料制备培养基。在生产实践中，培养基的配方要经过反复试验才能确定。（4）灭菌：培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。（5）接种：将菌种接种到发酵罐培养液中。（6）发酵：这是发酵工程的中心环节。①在发酵过程中，要随时检测培养波中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。②要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。（7）产品的分离、提纯：①如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后采用过滤沉淀等方法将菌体分离和干燥，即得到产品。②如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。【详析】A、优良菌种也需要扩大培养，A错误；B、接入试管斜面的目的是让处于休眠状态的菌种活化，使之恢复为正常的生活状态，B正确；C、将菌种放入摇瓶进行振荡培养，振荡培养有利于物质充分利用，也能为目的菌的生长繁殖提供充足的氧气，C正确；D、种子罐是为了扩大菌种的数量，发酵罐是为了得到发酵产物，种子罐的培养基应接近发酵罐培养的成分和条件，以便菌体适应发酵环境，D正确。故选A。9．（2024·浙江·模拟预测）某研究性学习小组利用特定的平板培养基进行了不同种类抗生素的抑菌效果实验。下列有关叙述错误的是（

）

A．图示结果是在涂布法接种于固体培养基上呈现的B．①处滤纸片浸泡的是无菌水，与②、③和④形成对照C．②处滤纸片周围抑菌圈最小，最可能是其抑菌效果最好D．③处抑菌圈边缘的细菌对抗生素甲的抗药性不一定都强【答案】C〖祥解〗纸片扩散法是药敏试验一种常用的方法，它将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后便不断向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈。【详析】A、图示结果应使用涂布法接种，使菌液均匀地涂抹在培养基上，A正确；B、①处无抑菌圈出现，说明①区域没有抗生素，放置的是用无菌水浸泡地滤纸片，与②、③和④处形成对照，B正确；C、抑菌效果越好，抑制细菌生长的作用越大，因此滤纸片周围的抑菌圈最大的代表该处的抗生素抑菌效果最好，C错误；D、在抑菌圈边缘抗生素浓度较低，可能存在具有耐药性(对抗生素不敏感)的细菌，但抑菌圈边缘的细菌对抗生素甲的抗药性不一定都强，D正确。故选C。10．（2024·浙江·三模）液体深层发酵是指以获得大量发酵产品为目的的发酵罐大容量液体培养，可通过调节培养液的pH和温度、营养条件以及气体环境促使微生物迅速生长繁殖或产生大量代谢产物。控制主发酵罐内的发酵过程是保证发酵生产高效顺利进行的重要措施。下列说法正确的是（

）A．发酵罐内的微生物在培养过程中会出现贴壁生长、接触抑制的现象B．发酵罐内的温度、pH等环境条件越有利于菌体繁殖，获得的发酵产物就越多C．发酵终点需根据菌体的浓度和生理状态、产物浓度等因素综合判断D．发酵产品均可采用萃取、蒸馏、层析、离子交换等方法进行提取【答案】C〖祥解〗菌种的繁殖、有机物的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成的。【详析】A、微生物在培养过程中不会出现贴壁生长、接触抑制的现象，动物细胞培养时，会出现贴壁生长、接触抑制的现象，A不符合题意；B、发酵罐内的温度、pH等环境条件越有利于菌体繁殖，说明微生物呼吸产生的能量用于繁殖的越多，用于发酵的能量越少，获得的发酵产物就越少，B不符合题意；C、液体深层发酵是指以获得大量发酵产品为目的的发酵罐大容量液体培养，所以发酵终点需根据菌体的浓度和生理状态、产物浓度等因素综合判断，C符合题意；D、发酵产品不同，分离、提纯的方法不同，如果发酵产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取，D不符合题意。故选C。11．（2024·浙江宁波·二模）宁波大曲是采用优质糯高粱和小麦为原料，以传统的“老五甑（蒸馏酒用的锅）”生产法为基础精心酿造而成。老五甑酿造法的主要特点是混蒸混烧、续渣配料、多轮次发酵蒸酒。下列叙述正确的是（）A．糯高粱、小麦中的淀粉和纤维素都是发酵微生物生命活动的能源物质B．该工艺可以提高酒粮的利用率和出酒率，增加香味物质的积累C．若酿造过程中酒变酸，可能与农杆菌大量繁殖有关D．发酵过程中的物种丰富度保持不变【答案】B〖祥解〗果酒发酵的原理是酵母菌在有氧条件下大量增殖，无氧条件下产生酒精；果醋发酵菌种为醋酸菌，原理为当O2、糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸；当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸。【详析】A、纤维素是植物细胞细胞壁的主要成分，不能成为发酵微生物的生命活动的能源物质，A错误；B、该工艺混蒸混烧、续渣配料、多轮次发酵蒸酒，其中多轮次发酵蒸酒等过程可以提高酒粮的利用率和出酒率，同时也可以增加香味物质的积累，B正确；C、酿造过程中酒变酸，可能与醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸有关，C错误；D、发酵过程中应为酒精的积累以及发酵液pH的下降，导致某些微生物死亡，物种丰富度会降低，D错误。故选B。12．（2024·浙江台州·二模）无菌操作是微生物培养成功的关键。在利用工业发酵罐进行醋酸发酵时，进入罐体的空气通常采用下列哪种方式除菌（

）A．高压蒸汽灭菌 B．紫外线灭菌 C．灼烧灭菌 D．过滤除菌【答案】D〖祥解〗常用的灭菌法：1、高压蒸气法：应用最普遍，效果亦很可靠。高压蒸气灭菌法用于能耐高温的物品，如金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶制品等；2、煮沸法：适用于金属器械、玻璃制品及橡胶类等物品；3、火烧法：适用于金属器械；4、药液浸泡法：适用于锐利器械、内镜和腹腔镜等不适于热力灭菌的器械；5、甲醛蒸气熏蒸法：适用于金属器械、玻璃、搪瓷及各种导管。【详析】对热不稳定的体积小的液体培养基（如动物血清、蛋白质、酶、维生素等）及气体的灭菌采用过滤除菌法，故在利用工业发酵罐进行醋酸发酵时，进入罐体的空气通常采用过滤除菌，D正确。故选D。13．（2024·浙江·二模）塑料制品中的DBP（分子式C16H22O4）对人体有一定的危害，研究者从污染严重的河底淤泥中分离得到能分解DBP的微生物。下列叙述错误的是（

）A．可用平板划线法分离获得单菌落B．以DBP为唯一碳源的液体培养基实现扩大培养C．可用接种环挑取单菌落接种至斜面培养基中保存D．接种、分离后使用过的器皿须先彻底灭菌再洗涤【答案】B〖祥解〗1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。实验室中微生物的筛选，应用了同样的原理，即人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。2、进行选择培养时，培养基中需加入脂肪作为唯一的碳源，其作用是允许降解脂肪的微生物生长，抑制或阻止其他种类微生物的生长。【详析】A、为分离获得单菌落可采用平板划线法，A正确；B、扩大培养不一定以DBP为唯一碳源，B错误；C、获得单菌落后，利用划线法接种至斜面培养基中保存，C正确；D、接种、分离后，使用过的器皿须先经彻底灭菌后再洗涤，以免造成环境污染，D正确。故选B。14．（2024·浙江宁波·模拟预测）支原体能独立生活、自行繁殖，其结构如下图。关于其代谢和预防的叙述正确的是（

）

A．支原体没有细胞结构，故无法使用培养基直接培养B．镇海中学常对教室进行消毒，展于切断其传播途径C．可以使用抑制其细胞壁形成的抗生素对息者进行治疗D．用涂布器将支原体菌种接种到斜面培养基，低温保存【答案】B〖祥解〗原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核（没有核膜、核仁和染色体）；原核生物没有复杂的细胞器，只有核糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质等结构，也含有核酸（DNA和RNA）和蛋白质等物质。【详析】A、支原体是原核生物，具有细胞结构，可以用培养基直接培养，A错误；B、预防传染病的措施包括控制传染源、切断传播途径、保护易感人群等，镇海中学常对教室进行消毒，展于切断其传播途径，B正确；C、由于支原体无细胞壁，所以抑制细胞壁合成的抗生素不能治疗支原体引起的疾病，C错误；D、用接种针将支原体菌种接种到斜面培养基，低温保存，D错误。故选B。15．（2024·浙江绍兴·二模）红茶菌液是一种以糖茶水为原料的微生物发酵饮料，能帮助消化，治疗多种胃病。红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生体，其制备流程为：红茶糖液→接种红茶菌种→发酵→红茶菌液。下列叙述错误的是（）A．为防止杂菌污染，接种前要将红茶糖液煮沸杀菌B．可通过加入陈红茶菌液的方法进行接种C．温度高低既会影响发酵速度，也会影响菌液口味D．发酵过程需要在严格的无氧条件下进行【答案】D〖祥解〗根据题目信息可知，红茶菌是由含酵母菌、醋酸菌和乳酸菌三种菌的混合菌液共同发酵完成，酵母菌为兼性厌氧菌，醋酸菌为好氧菌，乳酸菌为厌氧菌。【详析】A、接种前要将红茶糖液煮沸杀菌，目的是防止杂菌污染，A正确；B、可通过加入陈红茶菌液的方法进行接种，目的是增加菌种的数量，B正确；C、温度会影响细胞呼吸酶的活性，所以温度高低既会影响发酵速度，进而影响菌液口味，C正确；D、酵母菌属于兼性厌氧菌，醋酸菌属于严格的好氧细菌，乳酸菌属于厌氧细菌，活菌饮料由3种菌共同发酵产生，因此发酵的整个过程不需要在严格的无氧条件下进行，D错误。故选D。16．（2024·浙江杭州·二模）单细胞蛋白是一种富含蛋白质的微生物菌体，可通过发酵工程大量制备并用于饲料添加等领域。下列关于单细胞蛋白制备过程的叙述，正确的是（

）A．配制培养基时添加琼脂糖以作为能源物质B．接种时加入多种菌体细胞以提高发酵效率C．发酵过程需监控温度、pH、溶氧量等参数D．对发酵液离心并取上清液以获得单细胞蛋白【答案】C〖祥解〗发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身；产品不同，分离提纯的方法一般不同：①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。【详析】A、发酵工程培养基采用液体培养基，而琼脂糖常做凝固剂，A错误；B、发酵工程采用单一菌种，B错误；C、发酵过程需要需监控温度、pH、溶氧量等参数，环境条件既会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢产物的形成，C正确；D、单细胞蛋白是微生物菌体，不需要对发酵液离心，只需要采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来即可，D错误。故选C。17．（2024·浙江温州·二模）随着咖啡豆销量的增加，产生大量咖啡果皮果肉等附属产物。咖啡果皮果肉营养物质丰富，可将其加工成果醋。某研究小组利用含葡萄糖和酒精成分的M和N培养基，从自然发酵的咖啡果醋中分离出产酸能力高的醋酸菌，工艺流程大致如下。下列叙述错误的是（

）A．培养基M、N均需要在121℃下灭菌B．过程②应采用稀释涂布法进行接种C．培养基N比培养基M中多了凝固剂D．过程③挑取菌落与透明圈直径比值小的单菌落【答案】A〖祥解〗选择培养和扩大培养：（1）选择培养：通常根据菌落的特征选择菌株，应采用固体培养基进行培养。（2）扩大培养：主要目的是让菌体快速繁殖和将营养物质充分利用，常采用液体培养基进行培养。【详析】A、M培养基加了葡萄糖，而葡萄糖不耐高温，需要过滤除菌，或降低温度延长灭菌时间，A错误；B、过程②是分离得到单菌落，应采用稀释涂布法进行接种，B正确；C、培养基N是固态，而扩大培养一般使用液态培养基，所以培养基N比培养基M中多了凝固剂，C正确；D、过程③挑取菌落与透明圈直径比值小的单菌落，代表分解能力强，D正确。故选A。18．（2024·浙江宁波·二模）科研人员利用诱变方式选育可高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌的过程如图所示。未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。下列叙述正确的是（）A．将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率B．进行③操作时，应选择直径较小的橙红色菌落中的菌株继续接种培养C．能在添加β-紫罗酮的培养基上长成菌落的细菌，其遗传物质不一定发生改变D．经过程①紫外线照射的三孢布拉霉负菌有的不能在含β-紫罗酮的培养基上生长【答案】D〖祥解〗培养基配制时的注意事项：①全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染。②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板。操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基。③平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。④在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。【详析】A、将培养基分装于三角烧瓶中后灭菌，可降低培养基污染的概率，灭菌后再分装到培养皿中，A错误；B、随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色，橙红色的菌体为高产菌，进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养，B错误；C、根据题干可知，未突变的三孢布拉霉负菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长，因此能在添加β-紫罗酮的培养基上长成菌落的细菌，发生了突变，其遗传物质一定发生了改变，C错误；D、过程①紫外线照射的作用是利用物理因素诱导基因突变，被照射的三孢布拉霉负菌有的突变，有的没有，未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长，D正确。故选D。19．（2024·浙江·模拟预测）马奶酒是具有民族传统特色的高级活性保健饮料，其发酵机理是乳酸菌和酵母菌进行乳酸发酵及酒精发酵。马奶酒酵母菌株不同于一般微生物优先利用葡萄糖，而是在生长起始期就能优先利用半乳糖，然后同时利用这两种糖进行生长。下列有关叙述错误的是（

）A．一般发酵食品中的酵母菌细胞中不能合成半乳糖酶B．纯化马奶中“特殊”酵母菌常用的方法之一是平板划线法C．马奶酒酵母菌株能优先利用半乳糖的原因是其发生了变异D．乳酸菌和酵母菌都可进行乳酸发酵和酒精发酵【答案】D〖祥解〗接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。【详析】A、一般发酵食品中的酵母菌细胞中不能合成半乳糖酶，因此不能利用半乳糖，A正确；B、平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，B正确；C、马奶酒酵母菌株能优先利用半乳糖的原因是其发生了基因突变，C正确；D、乳酸菌是厌氧型细菌，只能进行乳酸发酵，D错误。故选D。20．（2024·浙江·模拟预测）纯菌种发酵已成为泡菜工业的一个发展方向，相比于传统生产工艺，纯菌种发酵酸菜发酵速度快，产品稳定，更适宜工业化生产。以下叙述错误的是（

）A．泡菜发酵过程中所用的菌种主要是乳酸菌B．工业生产中可通入无菌空气以减少杂菌污染C．工业生产中可用发酵控制装置实时监控泡菜发酵情况D．选育优质发酵菌种是泡菜工业生产新工艺所必须的【答案】B〖祥解〗泡菜的制作原理:泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。【详析】A、泡菜发酵过程中所用的菌种主要是乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，A正确；B、泡菜工业生产中，所用的菌种主要是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，只能生活在无氧环境下，不需要通入无菌空气，B错误；C、工业生产中可用发酵控制装置实时监控泡菜发酵情况，保障发酵按预定的最佳过程进行，C正确；D、选育高产、优质的菌种是发酵工业的前提条件，是泡菜工业生产新工艺所必须的，D正确。故选B。（2024·浙江·模拟预测）阅读下列材料，完成下面小题。癌症是人类健康第一大杀手。癌症患者体内T淋巴细胞产生的抗癌因子IFN-γ会减少，科学家尝试用“细菌疗法”以提高患者体内IFN-γ的含量来治疗癌症。已知Clts基因表达Clts蛋白能抑制启动子P和启动子R，在大于42℃时Clts蛋白失活。用超声诱导可产生短暂热效应，提高温度。具体过程如图所示。

21．关于癌细胞和细菌疗法治疗癌症的特点，下列叙述正确的是（

）A．细胞发生癌变后，细胞形态结构改变和细胞周期变长B．癌细胞膜上的糖蛋白减少，导致其在体内分散和转移C．通过细菌疗法治疗癌症，不可以实现肿瘤的靶向治疗D．工程细菌通过注射方式进入机体内，可持久发挥效应22．关于细菌疗法治疗癌症的具体过程，下列叙述错误的是（

）A．双启动子P和R的作用可能是保证IFN-γ基因的高效转录B．将受体菌放于低温、低浓度的CaCl2溶液中可提高转化效率C．能在卡那霉素培养基中生长的是含重组温控质粒的工程细菌D．机体在37℃条件下产生的Clts蛋白可以阻碍IFN-γ基因的表达【答案】21．B22．C〖祥解〗启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，是转录的起始位点，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质。有时为了满足应用需要，会在载体中人工构建诱导型启动子，当诱导物存在时，可以激活或抑制目的基因的表达。终止子相当于一盏红色信号灯，使转录在所需要的地方停下来，它位于基因的下游，也是一段有特殊序列结构的DNA片段。21．A、细胞发生癌变后，能无限增殖，细胞形态结构改变和细胞周期变短，A错误；B、糖蛋白能增加细胞之间的黏附性，癌细胞膜上的糖蛋白减少，导致其在体内分散和转移，B正确；C、细菌在侵染宿主细胞具有专一性，因此采用“细菌疗法”治疗癌症能实现肿瘤的靶向治疗，对正常细胞伤害小，C错误；D、工程菌发挥作用后会被机体免疫系统清除，不能持久发挥效应，D错误。故选B。22．A、启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，是转录的起始位点，双启动子P和R的作用可能是保证IFN-γ基因的高效转录，A正确；B、低温、低浓度的CaCl2溶液中处理受体菌，可使受体菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态，可提高转化效率，B正确；C、据题意可知，插入目的基因不会破坏标记基因（氨苄青霉素抗性基因），因此重组质粒和非重组质粒都能在氨苄青霉素培养基中生长，C错误；D、Clts基因表达Clts蛋白能抑制启动子P、R，在大于42℃时Clts蛋白失活，因此37℃条件下产生Clts蛋白可以阻碍IFN-γ基因的表达，D正确。故选C。23．（2024·浙江杭州·模拟预测）大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（

）A．提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解B．将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理D．根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶I和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点【答案】D〖祥解〗DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。【详析】A、由于蛋白质可溶于酒精，而DNA在冷酒精中溶解度很低，所以在提取DNA时加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解，而让DNA析出，A正确；B、由于DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度较大，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，所以将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，B正确；C、DNA带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；D、因为质粒的本质是环状的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。故选D。24．（2024·浙江绍兴·模拟预测）电穿孔法通过将高浓度动物细胞悬液短暂暴露于高压脉冲电流中，外源DNA可经高电压在细胞膜上形成的可复性闭合小孔进入细胞并整合到染色体上，以实现细胞转染。下列叙述正确的是（

）A．培养动物细胞悬液需要定期添加KCl以维持pH稳定B．小孔形成后，适当降温可以延长外源DNA分子可进入时间C．贴壁生长细胞比悬浮生长细胞更适合用电穿孔法进行转染D．采用高电压和高浓度细胞悬液可提高细胞成活率和转染成功率【答案】B〖祥解〗动物细胞培养条件(1)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。(2)营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等天然成分。(3)温度：哺乳动物最适温度多是36.5℃±0.5℃；最适pH是7.2～7.4。(4)气体环境：95%空气＋5%CO2，其中O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。【详析】A、培养动物细胞悬液需要定期提供CO2以维持pH稳定，KCl也没有涉及到氢离子，A错误；B、小孔形成后，适当降温可以降低细胞膜的流动性，延长外源DNA分子可进入时间，B正确；C、电穿孔法通过将高浓度动物细胞悬液短暂暴露于高压脉冲电流中，所以悬浮生长细胞比贴壁生长细胞更适合用电穿孔法进行转染，C错误；D、高电压会导致大部分细胞坏死，采用高浓度细胞悬液可提高转染成功率，D错误。故选B。25．（2024·浙江杭州·模拟预测）镰刀型细胞贫血症是一种常染色体隐性遗传病，是由正常血红蛋白基因突变为镰刀型细胞贫血症基因引起的，相关片段如下图。对胎儿基因检测的主要原理是：MstII限制酶处理扩增后的DNA；加热使被酶切的DNA片段解旋，用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交；凝胶电泳分离。下列叙述正确的是（

）

A．PCR扩增时预变性时间较长是为了使模板DNA充分变性B．需要设计能与血红蛋白基因结合的双链DNA作为PCR引物C．电泳中需要加入亚甲基蓝作为电泳指示剂D．若出现3条电泳条带，可判断该个体为杂合子【答案】A〖祥解〗1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的；2、图为正常人和患者血红蛋白基因的部分片段，可见镰刀形细胞贫血症是碱基对发生替换导致的，碱基发生改变后，中间位置的MstII限制酶切割位点消失，即致病基因中MstII限制酶切割位点减少了一个。【详析】A、预变性是破坏DNA中可能存在的较难破坏的二级结构，使DNA充分变性，减少DNA复杂结构对扩增的影响，以利于引物更好的和模板结合，A正确；B、 PCR技术要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，并且引物为单链，B错误；C、 在蛋白质电泳中，亚甲基蓝被用作染色剂，可以将蛋白质染成蓝色，而不是作为电泳指示剂，C错误；D、由图可知，HbA片段有MstII限制酶三个酶切位点，Hbs片段有MstII限制酶2个酶切位点，因此MstII限制酶切割后出现3条电泳条带不一定是杂合子，也可能是HbAHbA，D错误。故选A。26．（2024·浙江·三模）基因芯片技术是一种可同时检测不同基因片段的新型检测技术，芯片制作和使用过程如图所示：下列叙述错误的是（

）A．探针和样品都必须是单链B．基因芯片上具有多种不同序列的探针C．探针和样品上都需携带相同的荧光标记D．洗脱的目的是去除未与探针杂交的样品【答案】C〖祥解〗基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。【详析】AC、基因芯片是利用核酸分子杂交原理进行基因检测的，因此探针和样品都必须是单链，同时应该在样品上放置荧光标记的探针，从而才能通过是否出现荧光来判定是否有特定序列，A正确，C错误；B、基因芯片的测序原理是杂交测序方法，基因芯片可以放置多种探针，检测多种不同序列，B正确；D、样品和探针的杂交后，需要将未结合的样品去除，避免影响信号检测，D正确。故选C。27．（2024·浙江·三模）在无氧条件下，酿酒酵母可将木糖转化为乙醇，大致过程如下图。科学家利用蛋白质工程可提高乙醇产量。下列叙述正确的是（

）A．NADPH提供氢给木糖后转化为NAD+B．木糖转化为乙醇过程中释放的能量大部分转化为热能耗散C．木糖转化为乙醇的场所在细胞溶胶和线粒体基质D．利用蛋白质工程直接改造酶分子结构来提高乙醇产量【答案】B〖祥解〗细胞呼吸就是细胞内进行的将糖类等有机物分解成无机物或者小分子有机物，并且释放出能量的过程。【详析】A、NADPH提供H+、e-给木糖后转化为NAD+，A错误；B、木糖转化为乙醇过程中释放的能量大部分转化为热能耗散，少部分转化为ATP的化学能，B正确；C、木糖转化为乙醇的场所在细胞溶胶，C错误；D、利用蛋白质工程可以改造基因，从而间接改造酶分子结构来提高乙醇产量，D错误。故选B。28．（2024·浙江金华·二模）将某转基因植株（导入了抗除草剂基因G）连续自交后获得后代群体。为检测该群体中含G植株的比例，用4种方法分别进行检测，预测所得结果最低的是（）方法检测方法检测对象检出的含G基因植株的比例1PCR扩增G基因x12分子杂交G基因转录产物x23抗原-抗体杂交G基因编码的蛋白质x34喷洒除草剂幼苗对除草剂的抗性x4A．方法1 B．方法2 C．方法3 D．方法4【答案】D〖祥解〗检测目的基因是否导入和转录用PCR技术，检测目的基因是否翻译用抗原-抗体杂交技术。【详析】PCR扩增技术可以在体外大量增殖目的基因，含量较多；导入到受体细胞中的目的基因不一定完成转录，则利用分子杂交检测目的基因转录产物，含量不一定多；导入到受体细胞中的目的基因不一定完成表达，则利用抗原-抗体杂交检测目的基因翻译产物，含量不一定多；将目的基因（抗除草剂基因）导入受体细胞的概率较小，则喷洒除草剂检测幼苗，其中抗除草剂幼苗出现的概率较低，故D项检出的含目的基因植株的比例最小。故选D。29．（2024·浙江·二模）某研究小组构建了能表达ACTA1-GFP融合蛋白的重组质粒，该重组质粒的部分结构如下图所示。下列叙述错误的是（

）

注：F1和F2表示上游引物，R1和R2表示下游引物A．RNA聚合酶与启动子结合，调控ACTA1基因和GFP基因的表达B．仅用F2和R1一对引物，即可确定ACTA1基因插入方向是否正确C．ACTA1基因转录的模板链是a链，引物F1与a链的部分序列相同D．若用引物F2和R2进行PCR，能更好地区分ACTA1-GFP基因纯合子和杂合子【答案】C〖祥解〗基因工程的关键步骤是构建基因表达载体，基因表达载体主要由启动子、目的基因、标记基因和终止子组成，其中标记基因用于筛选重组DNA分子，可以是四环素、氨苄青霉素等抗性基因，也可以是荧光蛋白基因或产物能显色的基因。【详析】A、据图可知，ACTA1基因和GFP基因位于启动子和终止子之间，故RNA聚合酶与启动子结合，调控ACTA1基因和GFP基因的表达，A正确；B、据图可知，引物F2与R1结合部位包含ACTA1基因的碱基序列，因此推测为了确定ACTA1基因连接到质粒中且插入方向正确，进行PCR检测时，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物F2和R1，B正确；C、ACTA1基因转录的模板链是a链，引物F1与b链均可以和a链互补配对，二者部分序列相同，C错误；D、若用引物F2和R2进行PCR，可根据电泳条带数目能更好地区分ACTA1-GFP基因纯合子和杂合子，D正确。故选C。（2024·浙江·二模）阅读下列材料，完成下面小题：肺炎支原体（MP）是原核细胞，无细胞壁，其形态易发生变化，是引发肺炎的病原体之一、MP进入呼吸道后会粘附、侵入上皮细胞，并释放多种毒素，引起宿主细胞损伤。MP的多种抗原决定簇与人体心、肺等重要组织有相同抗原结构，进入机体后会引起自身组织损伤。实验室检测肺炎支原体的方法包括培养法、血清学检测、核酸检测等，个人还可用抗原检测试剂盒进行自检。30．下列关于MP的叙述，错误的是（

）A．MP中既有DNA又有RNA B．MP含有核糖体，能独立合成蛋白质C．MP形态的变化体现了生物膜的流动性 D．MP必须寄生在细胞内才能完成正常生命活动