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文档简介

PAGE1-DNA的粗提取与鉴定(30分钟100分)一、选择题(共5小题,每小题8分,共40分)1.下列关于用簇新的菜花进行DNA粗提取的叙述,正确的是 ()A.向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌即可释放核DNAB.加入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜并溶解DNAC.利用DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,可粗提取DNAD.在滤液中加入冷却酒精的目的是使DNA溶于酒精【解析】选C。菜花细胞为植物细胞,有细胞壁爱护,因此加蒸馏水不会吸水涨破,A错误;加入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜,但不能溶解DNA,B错误;利用DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同可粗提取DNA,C正确;DNA不溶于酒精,加入冷却酒精的目的是使某些蛋白质溶于酒精,D错误。2.在DNA的粗提取过程中,初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品分别是()①0.1g/mL的柠檬酸钠溶液②2.00mol/L的NaCl溶液③0.14mol/L的NaCl溶液④体积分数为95%的冷酒精溶液A.①③B.②③C.②④D.③④【解析】选D。在DNA的粗提取过程中,初步析出DNA时所用试剂为0.14mol/L的NaCl溶液,此浓度下DNA的溶解度最低;由于DNA不溶于酒精,而某些蛋白质可溶于酒精,因此可用体积分数为95%的冷酒精获得较纯净的DNA。3.DNA粗提取试验中,应尽可能避开DNA断裂和降解。下列相关操作正确的是()A.以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进DNA溶解B.向DNA溶液中快速加入蒸馏水,使DNA快速析出C.将丝状物溶解到2mol·L-1NaCl溶液中后,加水析出D.向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌【解析】选D。植物细胞有细胞壁爱护着,所以以菜花为试验材料时须要研磨,加入食盐和洗涤剂,不须要加热,A错误;加入蒸馏水时要缓慢,B错误;DNA丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中,加体积分数为95%的冷酒精析出DNA,C错误;DNA不溶于酒精,因此可向DNA溶液中加入体积分数为95%的冷酒精并沿同一方向缓慢搅拌析出DNA,D正确。4.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”试验操作的说法中,正确的是 ()A.该试验中有两次加入蒸馏水,均是为了析出DNAB.该试验中多次要求用玻璃棒单向搅拌,目的是搅拌匀称C.该试验中有3次过滤,过滤时运用尼龙布层数与DNA的存在状态有关D.试验3次加入NaCl溶液,其次次的目的是析出DNA【解析】选C。两次加蒸馏水,第一次是为了使细胞吸水裂开释放出DNA,其次次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA,故A项不正确。该试验操作中6次用到玻璃棒搅拌,除最终一步未强调方向外,其余均要求单向搅拌,其目的是防止DNA细丝被打碎,B项不正确。该试验中有3次过滤,过滤时运用尼龙布层数与DNA存在状态有关,C项正确。试验中3次加入NaCl溶液,均是为了溶解DNA,其中其次次加入NaCl溶液溶解DNA后,再用蒸馏水调整NaCl溶液的浓度至0.14mol/L,DNA才析出,D项不正确。【学问总结】影响DNA提取量的因素分析(1)DNA是否充分释放。①鸡血细胞等动物细胞是否充分裂开。②植物细胞研磨是否充分。(2)DNA是否能够充分析出。①调整NaCl溶液浓度时肯定要调到0.14mol/L,高于或低于该浓度时DNA析出均不充分。②酒精溶液是否经过冷却处理,冷却的酒精溶液中DNA溶解度更低。5.下列利用菜花进行“DNA的粗提取与鉴定”试验的叙述,正确的是 ()A.采纳不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除部分杂质B.在切碎的菜花中加入肯定量的洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤后弃去滤液C.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L,用单层滤纸过滤获得析出物D.将白色丝状物溶解在NaCl溶液中,加入二苯胺试剂后振荡,视察颜色改变【解析】选A。DNA和蛋白质在NaCl溶液中的溶解度不同,因此采纳不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除部分杂质,A项正确。在切碎的菜花中加入肯定量的洗涤剂和食盐,充分研磨,此时DNA呈溶解状态,过滤后应保留滤液,B项不正确。用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L,此时DNA析出,应用多层尼龙布过滤,获得析出物,C项不正确。加入二苯胺试剂后,应在沸水浴中加热后,视察颜色改变,D项不正确。【互动探究】C项中假如用单层滤纸过滤,其结果会有何影响?提示:由于滤纸吸附DNA,析出物会附着于滤纸上不易脱离。二、非选择题(共4小题,共60分)6.(15分)“DNA的粗提取与鉴定”试验中,A、B、C、D、E五个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均相同且正确,但试验结果却不同。组别试验材料提取核物质时加入的溶液去除杂质时加入的溶液DNA鉴定时加入的试剂A鸡血蒸馏水体积分数为95%的酒精(25℃)二苯胺B菜花蒸馏水体积分数为95%的酒精(冷却)双缩脲C人血浆蒸馏水体积分数为95%的酒精(冷却)二苯胺D人血细胞2mol/L的氯化钠0.14mol/L的氯化钠双缩脲E鸡血蒸馏水体积分数为95%的酒精溶液(冷却)二苯胺(1)试验材料选择错误的组别是__________________,其缘由是__

_______________________________________________。

(2)试验步骤(不包括试验材料)均正确,但得不到DNA的组别是____________。

(3)沸水浴中试管颜色变蓝的组别是______________;蓝色较淡的是________________,其缘由是__

_____________________________。

(4)B组试验不胜利的最主要缘由是

_____________________________。

【解析】(1)人的血浆中没有细胞结构,人成熟的红细胞没有细胞核,在这些材料中不能得到DNA或得到的DNA很少。(2)血细胞中有少量的白细胞,其中有DNA,所以只有C组人血浆中没有DNA。(3)冷却的酒精溶液对DNA有较好的凝集效果,而A组中为25℃的酒精溶液。(4)菜花细胞外有细胞壁起爱护作用,在蒸馏水中不会裂开,所以不能得到DNA。答案:(1)C、D人的血浆中没有细胞结构,人成熟的红细胞中没有细胞核,选用这些材料得不到DNA或得到的DNA很少(2)C(3)A、EA冷却的酒精溶液对DNA的凝集效果较佳,该组运用的是25℃的酒精溶液(4)菜花细胞在蒸馏水中不能被破坏,得不到DNA(应采纳研磨的方法)7.(15分)在“DNA的粗提取与鉴定”试验中,A、B、C三个小组分别选择不同材料进行试验,表中①~⑤表示不同的操作,请分析回答:组别材料选择提取核物质纯化DNA鉴定DNAA鸡血①B洋葱②C猪肝③④⑤(1)鸡血是志向的试验材料,理由是____________________________________。

(2)简要说明①操作的基本过程:______________________________。

(3)下列是④操作的两个方案,请分析其原理。方案一:干脆在滤液中加入嫩肉粉,反应10~15min。原理:

______________________________________________________。

方案二:将滤液放在60~75℃的恒温水浴箱中保温10~15min,留意严格限制温度范围。原理:

______________________________________________________。

(4)⑤过程须要用到的试剂是________________________________。

【解析】(1)鸡血细胞中DNA含量丰富,材料易得,鸡血细胞极易吸水涨破,是志向的试验材料。(2)采纳鸡血提取核物质的基本操作是:先加入肯定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,让红细胞吸水涨破,再过滤收集滤液即可。(3)嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,能分解蛋白质,不分解DNA,从而纯化DNA;DNA和蛋白质对高温耐受性不同,在60~75℃的条件下,蛋白质变性,而DNA不受影响,从而将蛋白质与DNA分开。(4)在沸水浴条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。答案:(1)鸡血细胞中DNA含量丰富,材料易得;鸡血细胞极易吸水涨破(2)先加入肯定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可(3)嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解蛋白质,而对DNA无影响,从而除去蛋白质杂质DNA和蛋白质对高温耐受性不同,60~75℃的条件下,蛋白质变性,而DNA不受影响,从而将DNA与蛋白质分开(4)二苯胺试剂8.(15分)试验中对DNA进行鉴定时,按下表所示的操作进行,结果如图所示:试管序号AB1加2mol/LNaCl溶液5mL加2mol/LNaCl溶液5mL2不加提取的丝状物加入提取的丝状物并搅拌3加4mL二苯胺,混匀加4mL二苯胺,混匀4沸水浴5min沸水浴5min(1)本试验的原理是________________。

(2)试验现象是:A____________;B________________。

试验结论是_____________________________________。

(3)B试管完成1、2、3的操作后溶液颜色是_______________________。

(4)在沸水中加热的目的是____________________,同时说明DNA对高温有较强的________________。

(5)A试管在试验中的作用是____________________。

(6)B试管中溶液颜色的改变程度主要与____________________________有关。

【解析】(1)DNA在沸水浴的状况下与二苯胺反应会呈现蓝色。(2)由于A试管内没加提取的丝状物,因此A试管中溶液不变蓝,B试管中溶液渐渐变蓝色,由此得出结论:提取的丝状物为DNA。(3)DNA与二苯胺反应的条件是沸水浴,未进行沸水浴时溶液不变蓝,因此B试管完成1、2、3的操作后不变蓝。(4)试验中沸水浴加热5min的目的是加快颜色反应速度,同时说明DNA分子对高温有较强的耐受性。(5)A试管未加入提取的丝状物,其他操作均与B试管相同,因此作为比照试验。(6)B试管中溶液颜色的改变程度主要与加入试管中的DNA(丝状物)的多少有关,DNA含量越多,颜色越深。答案:(1)DNA在沸水浴的状况下与二苯胺反应呈现蓝色(2)溶液不变蓝色溶液渐渐变蓝色提取的丝状物为DNA(3)基本不变(不呈浅蓝色)(4)加快颜色反应速度耐受性(5)比照(6)加入试管中的DNA(丝状物)的多少9.(15分)如图为“DNA的粗提取与鉴定“试验的相关操作。(1)图中试验材料A可以是________等,研磨前加入的B应当是________。

(2)通过上述所示步骤得到滤液C后,再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是________________________,再过滤得到滤液D,向滤液D中加入蒸馏水的目的是________________________________。

(3)在该试验中,将含有肯定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL的4种溶液中,经搅拌后过滤,获得如下表所示的4种滤液,含DNA最少的是滤液______________。

1B液中搅拌研磨后过滤滤液E22mol/L的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液F30.14mol/L的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液G4冷却的95%的酒精溶液中搅拌后过滤滤液H(4)DNA鉴定的原理是_______________________________________________。

【解析】(1)用洋葱、菜花等作为试验材料,在裂开细胞时,研磨前需加入肯定量的洗涤剂和食盐,洗涤剂可以溶解细胞膜,有利于DNA的释放,食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。(2)在含有DNA的滤液中,加入2

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