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DB41河南省质量技术监督局发布I1小麦品种冬春季抗寒性鉴定与评价本标准规定了冬小麦品种冬春季抗寒性鉴定的术语和定义、鉴定方法本标准适用于小麦种质资源和品种的抗寒性凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)NY/T496-2010肥料合理使用准则通则小麦在越冬期经历0℃以下连续低温或剧烈降温天气而导致的小麦生长停滞、叶片枯死或死苗的又称倒春寒,春季气温回暖后温度骤降到0℃(冰点温度)以上低温对小麦造4抗寒性鉴定4.1鉴定前准备4.1.1种子选择待测试小麦种质资源和品种的种子质量应符合GB4404.1-4.1.2播种大田2盆栽4.1.3人工气候室设置冬季冻害鉴定,温度为白天-10℃,夜间-13℃。春季寒害鉴定,温度为白天0℃,夜间-3℃。4.1.4取样基本要求冬季冻害春季寒害4.1.5仪器与试剂4.2鉴定方法4.2.1抗寒性指标测定可溶性糖含量采用蒽酮比色法。实验步骤和结果计算见附录A中A.2和采用氮蓝四唑(NBT)光化还原法。实验步骤和结果计算见附录B中B.采用硫代巴比妥酸(TBA)反应法。实验步骤和结果计算见附录C中C.235.1性状相对值计算Xj=(xj/CKj)×100%…………(1)Xj—第j个指标的性状相对值,作为评价材料抗寒性的指标;CKj—第j个指标的对照处理测定值。5.2隶属函数值计算各参试小麦材料相对性状的隶属函数值计算见公式(u(XijXij-Xmin)/(Xmax-Xmin与抗寒性呈正相关的指标) ( u(Xij)—第i个样品,第j个指标的隶属函数值;Xij—第i个样品,第j个指标的性状相对值;Xmax和Xmin—某指标性状相对值的最大值和最小值。5.3抗寒性评价值计算5.4抗寒性分级抗寒性评价值(D)1强23弱4A.1试验准备A.1.1材料A.1.2仪器设备分光光度计;电子分析天平;水浴锅;100mL容量A.1.3试剂及配制-1蔗糖标准母液:准确称取蔗糖100mg于烧杯加少量水溶解后,洗入100mL容量瓶中定A.2.1蔗糖标准曲线制作012345010A.2.2样品提取取低温胁迫后的新鲜小麦叶片约1g,剪碎混匀后放入试管5),管壁迅速加入蒽酮试剂6.5mL,立刻摇动混合均匀,置于试管架上显色,冷却至室温后,以空白管作对A.3结果计算6),分光光度计;高速冷冻离心机;荧光灯(反应试管处照度为4000Lx)、微量磷酸缓冲液配制:A液:0.2M的KH2PO4溶液称取分析纯KH2PO427.216g,用蒸馏水定容至1000mL。B液:0.2M的K2HPO4溶液称取分析纯K2HPO4•3H2O45.644g,用蒸馏水定容至1000mL。0.05M磷酸缓冲液(pH=7.8):A液21.25mL+B液228.25130mMMet(甲硫氨酸):取1):2:取0.0372gEDTA-Na在冰浴上研磨成浆,加缓冲液使最终体积为5mL,在4℃冷冻离心4000r/min为SOD酶粗提液,置于0℃~4℃下保存待用。取透明度较好的5mL离心管4支,2支为测定管,2支为对照管,1支做光反应对照,1支做空白(对照、空白不加酶液,以缓冲液代替)。按表B.1–27––式中:AE—样品管的吸光度;8称取低温胁迫后的小麦叶片1g,加入少量石英砂和10%三氯乙酸2mL,研磨至匀三氯乙酸进一步研磨,匀浆以4000r/m取4支干净试管,编号,3支为样品管(三个重复各加入提Cm=6.45×(A532-A6000.56×A4509

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