临床检验课件-分泌物检验

阴道分泌物实验原理实验目的实验器材实验试剂操作步骤注意事项目

录CONTENTS实验目的协助女性生殖系统炎症、肿瘤诊断，用于雌激素水平判断，用于性传播疾病的实验室检查。实验原理

用显微镜观察阴道分泌物涂片，根据多视观察到的白细胞(或脓细胞)、上皮细胞、乳杆菌、杂菌的多少，将阴道清洁度分成I～Ⅳ度，以反映阴道自洁程度。通过形态学特征查找病原体如霉菌、滴虫等。试验器材、试剂显微镜、载玻片

实验器材试剂生理盐水

操作步骤（一）01准备

（1）取一个干净的玻片。

（2）在标本中加入生理盐水。02涂片

将用生理盐水稀释的标本，涂在干净的玻片上。03镜检

放在显微镜上进行观察。注意事项（一）取样前准备1标本采前24小时内，禁止性交、盆浴、阴道灌洗和局部上药等。注意用药影响2取阴道分泌物时应停止外用药2~3天，以提高阳性检出率。操作3应执行无菌操作。阴道分泌物检查雌性生殖系统卵巢输卵管子宫阴道外生殖器卵巢输卵管尿道子宫阴道膀胱子宫阴道卵巢

阴道分泌物（vaginaldischarge，VS）俗称“白带”（leucorrhea）。阴道分泌物检查常为女性生殖系统炎症、性传播疾病、肿瘤等的诊断、疗效观察及预后判断提供重要依据。常见的阴道炎：非特异性阴道炎、真菌性阴道炎、滴虫性阴道炎等标本采集1般性状检查2CONTENTS

其他微生物学检查3检查新进展4质量控制5标本采集标本的采集要注意

1．医护人员

2．标本采集前24h禁止性交、盆浴、阴道检查以及注意治疗药物的影响

3．取材要适宜：一般用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部、穹后部及宫颈口擦拭，制成生理盐水涂片，及时送检。

4.标本处理盐水涂片，巴氏染色，瑞特染色，革兰染色。。一般性状检查外观正常异常：①脓性白带②豆腐渣样白带③血性白带④黄色水样白带⑤奶油状白带PH正常pH为4～4.5外观及PH值清洁度检验阴道分泌物清洁度分度

清洁度阴道杆菌球菌上皮细胞脓细胞或白细胞Ⅰ＋＋＋＋－＋＋＋＋0～5/HPⅡ＋＋－＋＋0～15/HPⅢ－＋＋－15～30/HPⅣ－＋＋＋＋－＞30/HP

阴道清洁度的判定标准：Ⅰ度镜下以阴道杆菌为主，并可见大量上皮细胞；Ⅱ度有部分阴道杆菌，可见上皮细胞，有部分脓细胞和杂菌；Ⅲ度只有少量阴道杆菌和上皮细胞，有大量脓细胞和其他杂菌Ⅳ度镜下无阴道杆菌，几乎全是脓细胞和大量杂菌。Ⅰ～Ⅱ为正常，Ⅲ～Ⅳ为异常

【方法学评价】湿片法涂片染色法【参考值】I～II度【临床意义】阴道分泌物清洁度是阴道炎症和生育期妇女卵巢性腺分泌功能的判断指标。

寄生虫检验真菌检验其他病原微生物检验盐水涂片找滴虫盐水涂片找真菌孢子、菌丝或纤毛菌丛涂片染色并细菌培养鉴定能确诊病原学检查方法学评价湿片法

涂片染色法胶乳凝集试验体外培养法参考值阴性阴道毛滴虫（TV）临床意义阳性见于滴虫性阴道炎患者方法学评价湿片法、浓集法、培养法参考值阴性真菌检查临床意义阳性见于真菌性阴道炎其他微生物学检查细菌性阴道炎（bacterialvaginosis，BV）实验室诊断根据：①线索细胞（cluecell）②分泌物pH>4.5③胺试验：阳性④乳酸杆菌减少，加德纳菌和厌氧菌增加阴道加德纳菌（gardnerellavaginalis，GV）方法学评价湿片法、浓集法、培养法参考值阴性真菌检查临床意义阳性见于真菌性阴道炎方法学评价（1）涂片染色法：（2）培养法：WHO推荐的唯一金标准方法。（3）其他方法：直接荧光抗体染色法PCR直接玻片协同凝集反应参考值阴性淋球菌检查临床意义淋球菌是目前发病率较高的STD检查新进展4检查新进展1．分子生物学方法和技术的应用2．流式细胞术在阴道分泌物检查的应用3.激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）在阴道涂片检查的应用4.计算机在阴道涂片筛选中的应用质量控制5检查新进展1．分子生物学方法和技术的应用2．流式细胞术在阴道分泌物检查的应用3.激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）在阴道涂片检查的应用4.计算机在阴道涂片筛选中的应用质量控制1.涂片2.显微镜检查遵守操作规程，观察标准一致3.统一报告方式4.加强室内质控和室间质评患者，女，25岁，突起尿频、尿痛。检查：体温37℃，脉搏80次/分、血压正常、心肺未见异常，腹软无压痛、腰无叩痛。尿常规：蛋白(±)、红细胞0～2/HP，白细胞15～40/HP，最可能的诊断为：

A.慢性肾盂肾炎B.急性肾盂肾炎C.急性膀胱炎D.急性肾炎E.急性盆腔炎病例1患者，男，24岁，急起高热，头痛呕吐、腹泻、腰痛3天，极度疲乏。球结膜及软腭粘膜有数个出血点，应首先作下列哪项检查明确诊断？

A.一般检查B.血培养C.血脂检查D.脑脊液检查E.血液和尿液一般检查病例2患者，女，58岁，上腹痛反复发作10年，近2月来加剧，无返酸，呕血，黑便。体检：慢性病容，无黄疸，腹平软，上腹轻压痛，肝脾未及，有胃溃疡病史5年。大便隐血试验连续3次均为阳性，目前最可能的诊断是：

A.慢性胃溃疡活动期B.胃癌C.胃溃疡慢性穿孔D.胃溃疡癌变E.胃溃疡亚急性穿孔精液检查标本采集1理学检查2CONTENTS

显微镜检查3化学检查4免疫学检查5计算机辅助精子分析6检查新进展7临床应用8男性生殖系统睾丸附睾

贮精囊前列腺阴茎射精管精曲小管间质细胞产生精子结缔组织曲细精管分泌雄性激素输精管（两条）间质细胞精原细胞初级精母细胞次级精母细胞精子细胞精子支持细胞睾酮曲细精管切面图精子生成精液组成：精子精囊液精浆前列腺液尿道球腺液

概述检验目的：①评估男性生育功能②计划生育和科研③辅助诊断男性生殖系统疾病④体外受精和精子库筛选优质精子⑤婚前检查⑥法医学鉴定标本采集标本采集01准备工作（1）临床医师、（2）检验人员、（3）病人03标本运送采集后应立即送检02标本采集的方法手淫法是标准采集方法04标本采集的次数间隔1～2周检查一次，连续检查2～3次理学检查01正常2.0～6.0ml，平均3.5ml02减少（<1.5ml）常见于精囊腺和前列腺病变03增多（>8ml）可见于附属性腺功能亢进或禁欲时间较长量01正常：呈灰白色，自行液化后为半透明乳白色，03黄色：脓性精液，见于前列腺炎或精囊炎02红色或酱油色：为血精，见于精囊炎、前列腺炎、生殖系统结核、肿瘤或结石。颜色和透明度液化时间及临床意义液化时间LWHO规定：所采集的精液标本在室温超过60min仍未液化，则称为精液迟缓液化症，应视为异常。前列腺炎时，可使液化时间延长或根本不液化。临床意义精液精囊腺分泌的凝固蛋白胶胨状精液

前列腺分泌的蛋白分解酶液化粘稠度参考值临床意义(1)滴管法：对30min不液化的精液粘稠度分3级：I级为30min基本液化，II级为60min不液化，III级为24h仍未液化，（2）玻棒法（3）粘度计法①滴管法或玻棒法：拉丝<2cm。②粘度计法为精浆性质提供了客观数据.粘稠度、参考值及临床意义正常精液具有栗花和石楠花的特殊气味，由前列腺液产生。气味02正常：7.2～8.0pH<7：并伴有少精症，可能是由于输精管、精囊腺或附睾发育不全。pH>8：可能伴有急性附属性腺炎或附睾炎。PH值（精液pH应在离体后1h内测定）01PH值和气味精子的运动成熟精子附睾输精管贮精囊前列腺分泌物分泌物精子＋＋精液（贮藏）精液为碱性，富含葡萄糖和果糖，可为精子运动提供能量显微镜检查湿片法、精子活体染色法。方法学评价①湿片法：>70%②伊红染色法：≥75%参考值精子活动率检查主要用于男性不育症的诊断。正常精液排出后60min内，精子活动率为80%～90%，至少>60%临床意义精子活动率a级：快速前向运动b级：慢或呆滞前向运动c级：非前向运动d级：不动WHO将活力分4级（用百分率表示）显微镜检查、连续摄影法、精子质量分析仪测定等方法方法学评价精子活力射精60min内，a级精子应>25%；或a和b级精子之和>50%参考值连续检查，精子活率不足40%，且以c级活动力精子为主，则可能为男性不育的原因之一。精子活动力下降，见于①精索静脉曲张②生殖系统非特异性感染及使用某些药物临床意义精子计数（1）显微镜计数法：血细胞计数板、Makler计数盘（2）计算机辅助精液分析方法学评价临床意义<20×109/L为不正常，连续3次检查皆低下者可确定为少精症精子形态学检查正常精子形态异常精子形态.精子形态方法学评价参考值（1）湿片法

（2）涂片染色法正常精液中异常精子数<20%临床意义如正常形态精子<30%，称为畸形精子症（WHO），畸形精子>40%，即会影响精液质量，>50%常可致不育。电镜下的精子精液中非精子细胞成分检查未成熟生殖细胞包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和发育不完全的精子细胞

其他细胞WBC用正甲苯胺蓝过氧化酶染色法或免疫细胞化学法区分、上皮细胞、外周血细胞

高倍镜10个视野凝集超过10个为阳性，可能存在免疫性不育精子凝集的检查化学检查4【参考值】①间苯二酚比色法：9.11-17.67mmol/L②吲哚比色法≥13μmol/1次射精【临床意义】果糖由精囊腺分泌，降低见于精囊炎和雄性激素分泌不足；果糖为零见于先天性双侧精囊缺如、双侧输精管完全缺如及精囊阻塞；精囊以上输精管阻塞及附睾病变时果糖含量升高精浆果糖（fructose）

【临床意义】

LD-X活性与精子浓度特别是活精子浓度呈良好线性关系，活性降低可致生育力下降，可作为男性生殖功能的良好指标。睾丸萎缩、精子生成缺陷及少精症或无精症患者，LD-X活性降低或消失，也是评价睾丸生精功能的良好指标。精浆乳酸脱氢酶同工酶X活性测定(lactatedehydrogenase-X，LD-X）精浆酸性磷酸酶（ACP）广泛机体组织体液中，前列腺最丰富。前列腺炎时，精浆ACP活性降低，前列腺肥大和前列腺癌时，精浆ACP活性性增高。4.精浆α-葡糖苷酶由附睾分泌，是附睾的特异性和标记酶，活性受雄性激素水平影响。精子顶体酶活性顶体酶为蛋白水解酶，常以酶原形式存在，水解卵细胞的透明带，使卵子和精子融合。促进生死道中的激肽释放，增强精子的活力。其活性降低可致不育。

精液中的锌以蛋白结合形式存在，保护精子膜，维持精子活力。锌缺乏可影响垂体分泌促性腺激素，使性腺功能减退。精浆锌免疫学检查5AsAb按其对精子作用分为凝集性、制动性和结合性，作用机制为：①由于精子制动抗体的作用或因精子被粘附在宫颈粘液上，影响精子通过子宫颈管。②抑制精子顶体酶的活性，使精子不易穿透包绕卵细胞的卵丘、放射冠和透明带。③抑制精子与卵细胞膜的融合。④导致胚胎死亡或流产。抗精子抗体测定(AsAb)【方法学评价】（1）酶联免疫吸附试验：AsAb确诊试验。（2）精子凝集试验:过筛试验。（3）精子制动试验：过筛试验。（4）免疫珠试验：WHO推荐方法。（5）混合免疫抗免疫球蛋白试验：【参考值】阴性【临床意义】血清和生殖道局部的AsAb是引起免疫性不育（孕）的主要原因，AsAb检测对免疫性不育诊断、治疗和预后观察等提供有价值的参考指标。

【方法学评价】在排卵期或近排卵期性交后9～24h内（最佳时间为6～10h），检查宫颈粘液活精子数量、活率及活动力。【参考值】①性交后4～6h后：a级精子数>25/HP。②性交后6～8h后：a级精子数>70/HP【临床意义】①精子本身有遗传或代谢障碍、逆行射精等②免疫性不育的初筛试验③宫颈粘液异常体内穿透试验,亦称性交后试验（PCT）计算机辅助精子分析6

（1）曲线速度（2）直线速度（3）平均路径速度（4）鞭打频率（5）直线性（6）前向性（7）摆动性（8）精子头侧摆幅度（9）平均移动角度（10）运动精子密度：

CASA运动参数检测指标含义(1)患者病历姓名：年龄：籍贯：病历号：标本号：取精日期：取精时间：取精方式：未排精天数：（2）检验分析结果精液量：颜色：pH： 液化时间：粘稠度：稀释比：检验精子总数：a级（快速向前运动活动精子总数：b级（慢速或呆滞前向运动）精子密度：c级（非向前运动）精子活动率：d级（极慢或不动）平均曲线运动速度（VCL）：直线运动精子数：平均直线运动速度（VSL）：直线运动精子的活率：平均路径速度（VAP）：直线运动精子密度：呈直线快速运动精子数（个）：运动的直线性（LIN）：呈直线快速运动精子密度：运动的摆动性（WOB）：呈直线快速运动精子活率：运动的前向性（STR）：精子平均侧摆幅值（ALH）：平移动角度（MAD）：精子平均鞭打频率（BCF）：检测所用时间（T）：(3)静态分析结果精子形态：正常比例：畸形比例：畸形分类：头形畸形：比例：体部畸形：比例：尾部畸形：比例：混合畸形：比例：精液其他成分：上皮细胞：红细胞：白细胞：生精细胞：其他：检验日期：检验医师：分析报告如下：检查新进展7检查新进展01精液分析仪应用于精液检查02生精细胞凋亡的分析03分子生物学方法和技术在精液检查中的应用04流式细胞术在精子（精液）检查中的应用05超微成像显微镜（成像仪）在精液检查中的应用06精液新的检查指标临床应用8

精液检查主要指标与生育力的关系

参数