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412022-06-29发布I 2 5 6 8本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件起草单位:河南省畜牧总站、河南省农业科学院畜牧兽医施巧婷、郎利敏、黄辉、夏宗军、丁涵、徐美李静、王培育、朱肖亭、楚秋霞、付泰、王欧1肉牛快速扩繁技术规程4同期发情和人工授精24.1.1二次前列腺素(PG)法适配母牛任选一天肌肉注射PG,9d~134.1.2黄体酮缓释阴道栓法4.2人工授精冷冻精液应符合GB/T4143的要求。人工授精操作按照NY/T15.1供体牛选择与饲养管理15月龄至8周岁。青年牛应为15月龄~18月龄,体况中上等且至少有两次正常发情记录;经产牛应为产保持饲养环境良好,避免应激反应。提供合理的配合日粮和清洁饮水。超数排卵前3周加强饲养管5.2供体牛超数排卵及人工授精5.2.1.1同期发情方法5.2.1.2超数排卵方法5.2.1.3供体牛发情鉴定最后一次注射FSH后,每隔6h观察是否发情,每次观察不少于30mi精液剂量加倍,按照4.1.2规定操作,间隔12h重5.3非手术冲胚及胚胎质量鉴定35.3.1.2将供体牛保定,清除粪便,在荐椎和第一尾椎结合处或第一尾椎和第二尾椎结合处注射普鲁卡因实行硬膜外麻醉,直至尾巴松弛柔软无张力。普鲁卡因用量依5.3.1.3麻醉后将牛尾固定,清洁会阴部及外阴,酒精棉球或喷雾消毒外阴,用灭菌卫生纸擦干。5.3.1.4用扩张棒扩张子宫颈,再用黏液棒抽出黏液。5.3.1.5此时直肠易进空气形成空洞,使用抽气筒排出空气,利于直肠把握。5.3.1.6冲胚管装配内芯,并用冲胚液润滑,慢慢插入一侧子宫角,当冲胚管到达子宫角大弯处,旋5.3.1.7给冲胚管气囊充气约8mL~14mL,抽出内芯,把三通管与冲胚管5.3.1.8夹住三通管的回流端,将20mL~30mL冲胚液5.3.1.9完成后排出气囊空气,另一侧子宫进行相同操作。抽出冲胚管,使前端位于子宫体,灌注抗5.3.2.1搜集胚胎油的培养液中35℃~37℃暂存,捡胚完成后进行等级鉴定。培养液可用10%牛血清M199或其它商用5.3.2.2胚胎发育期此时胚胎处于以下发育期:桑椹胚(M)、致密桑椹胚(CM)、囊胚(B)、扩张囊胚(EXB)。胚胎发育形5.3.2.3胚胎质量等级鉴定5.4胚胎冷冻保存及解冻5.4.1.1胚胎清洗45.4.1.3胚胎装管衡5min,以0.6℃/min的速率下降至-35℃,平衡5min后投入液氮,记录冷冻情况(见表A.2)。取出装有胚胎的细管,空气中停留5s~10s后,迅速放入35℃~35.5受体牛选择及饲养管理犊性能良好,无连续两次人工授精未孕记录。牛体健康,子宫弹性、厚薄正常,卵巢发5.6胚胎移植55.6.3受体牛胚胎移植方法5.6.3.1以发情当天定为0d5.6.3.3清洗消毒外阴部并擦干。对照胚胎记录表和受体牛发情记录,胚胎发育期与受体牛生理时间5.6.3.4装好胚胎的移植枪套上硬外套管,再套上无菌外套膜。于子宫颈口撕破外套
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