第六章中药新药质量标准研究

第六章中药新药质量标准研究第一节中药材质量标准的制定要求第二节中药新制剂质量标准的制定第三节举例第一节中药材质量标准的制定要求名称、汉语拼音、药材拉丁名来源性状鉴别检查浸出物测定含量测定加工炮制功能与主治、用量与用法、禁忌注意及贮藏等第二节中药新制剂质量标准的制定一、药品标准的定义与要求二、质量标准的分类三、质量标准的特性四、质量标准制定的前提五、质量标准设计原则与研究程序六、质量标准的内容七、质量标准起草说明八、举例一、药品标准的定义与要求在《药品标准工作管理办法》总则中规定：1、药品标准是国家对药品质量及检验方法所作的技术规定，是药品生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的法定依据。2、制定药品标准必须坚持质量第一，充分体现“安全有效，技术先进，经济合理”的原则，择优发展的作用。3、凡正式生产的药品、辅料和基质都要制定标准。二、质量标准的分类1、法定标准2、企业标准1、法定标准经过国家药监局批准的药典、局颁标准。法定标准对产品的质量指标仅是一些基本要求，是企业应达到的起码合格要求。新药被批准后其生产用质量标准再经过二年试行期即转为局（部）颁标准。2、企业标准分两种一为检验方法尚不够成熟，但能达到某种程度的质量控制。一为高于法定标准要求，主要指多增加了检验项目或提高了限度标准，作为创优，企业竞争，特别是对保护优质产品本身，严防假冒等的重要措施。三、质量标准的特性药品应具有哪些性质？安全性、有效性、稳定性、可控性质量标准在保证药品的上述性质的同时，本身应具有：权威性科学性进展性进展性实例血竭的质量评价根据血竭在270nm处有最大吸收，制订其一定浓度在270nm吸收度不少于一定值。问题：货源不稳定，牌号多，质量差异大；掺入色素更难以判定其质量改用TLC、HPLC法，效果满意。四、质量标准制定的前提处方组成固定原料稳定对贵重药材及常用紧缺药材，要加强真伪的检验，最好备有标准药材对照品。地区习惯用药应注意区分，确保药材品种来源正确。制备工艺稳定穿心莲提取工艺与含量的关系五、质量标准设计原则（一）同步进行原则（二）样品要有代表性（三）对照原则（四）重复性原则（一）同步进行原则质量标准的各项试验，应在处方确定后与制剂工艺研究同步进行；制剂原料研究与质量控制同步；制备工艺研究与质量控制同步。（二）样品要有代表性原料的代表性品种的影响（野葛2.4%；甘葛藤0.3%）产地（栀子海南5.5%；贵州4.7%；四川3.5%）药材部位、采收季节等其他方面质量标准所制订的指标应具有代表性所选择的制剂质量指标、项目、限量皆与功能主治相符。质量标准具有可控性质量标准所采用的对照物要有可靠性（三）对照原则设立对照阴性对照处方中仅缺一味药物并严格按照制备工艺所得到的阴性样品。双阴性阳性对照有效成分对照品单味药材对照的等量性取样量、制备条件复方制剂中陈皮、荆芥鉴别（四）重复性原则研究过程中质量控制内容需要有良好的重复性；生产过程中质量控制内容需要有良好的重复性；流通过程中质量控制内容需要有良好的重复性。六、质量标准的内容（一）名称、汉语拼音（二）处方（三）制法（四）性状（五）鉴别（六）检查（七）含量测定（八）浸出物或总固体（九）功能与主治（十）用法与用量（十一）注意（十二）规格（十三）贮藏（二）处方1、处方药味应用三级标准的名称。2、处方药味排序应按君、臣、佐、使排列。3、处方中有炮制或特殊处理的应注明。4、处方药味的法定计量单位为¡°g¡±、¡°ml¡±，并根据剂型不同，折算成1000个单位。5、处方原辅料均应附标准。6、处方原料为药材，而制剂有浸膏等制成，浸膏制法及要求在制备工艺中记述，不必另附标准。（三）制法要求：简要概括记述工艺全过程，对质量有影响的关键工艺，应列出控制的技术条件。(四)性状对中药制剂的颜色、外观、气味依次描述。一柱天胶囊本品为胶囊剂，内容物为灰棕色至黄棕色粉末，气微腥，味微甜苦。十滴水软胶囊本品为棕色的软胶囊，内容物为含有少量悬浮固体浸膏的黄色油状液体；气芳香，味辛辣。（五）鉴别鉴别药味的选择：要求对方中君药、贵重药、毒药首选，若因特征不明显，或处方中用量较少而不能检出者，可选其他药材加以鉴别。要求对所有药材进行鉴别研究，不能检出的说明原因，总收入正文药味数不少于50％。常用的鉴别方法：1、经验鉴别2、显微鉴别3、理化鉴别4、色谱鉴别1、经验鉴别包括形状、表面、颜色、质地、断面、气、味、水试、火试、水火共试等。取麝香仁少量，撒于炽热的坩埚中灼烧，初则迸裂，随即融化膨胀起泡似珠，香气浓烈四溢，应无毛、肉焦臭，无火焰或火星出现。灰化后，残渣呈白色或灰白色。2、显微鉴别通过动植物组织细胞或内含物的形态鉴别的方法，适用于含有生药或部分生药粉末的制剂。具有快速、简便覆盖面大的特点。中药新制剂显微鉴别分析步骤：（1）处方组分的分析及其资料的查阅直接取样法乱取法研磨取样法离心取样法（3）制片临时制片固定制片（4）观察与检定要求：应有三个批次的样品，每批次应不少于5张片。（5）正文描述先主要，后次要，先植物，次动物，最后矿物。（6）绘图3、理化鉴别是反映中药新制剂所含的有效成分或有效部位及其特征成分的理化性质，来鉴别真伪、纯度或存在。一般情况下不宜作为标准中的最终鉴别项目，所作的理化鉴别工作写入说明中。包括荧光法、显色法、沉淀法、升华法、结晶法等。4、色谱鉴别采用薄层色谱、气相色谱和液相色谱对中药进行真伪鉴别。（1）TLC鉴别的作用（2）TLC鉴别的要求（3）仪器与材料（4）操作步骤（5）影响薄层色谱法分析的主要因素（6）其他色谱法（1）TLC鉴别的作用①可以特征成分鉴别药材，如以党参苷Ⅰ为对照品鉴别党参。②可区别异构体，如冰片中的龙脑与异龙脑。③可鉴别真伪，如有人对西洋参的薄层鉴别检出¡°洋参丸¡±中掺有人参。④可以区别不同药用部位，如人参的主根与须根。⑤可鉴别未知成分。⑥可同时鉴别多个药材的多种成分。（2）TLC鉴别的要求①薄层板的选用，多用硅胶G板，亦可用硅胶H，硅胶G、F254，氧化铝，聚酰胺等。②要设阴性对照，试验条件要经过优选，薄层色谱图通过三批以上样品均有重视。③实验条件的展开剂应选择三种以上，均能证明被鉴别成分与对照品的层析行为一致，再从中选取较好的一个条件列入正文中，其余展开方法写入说明中。常用吸附剂性能表④使用的对照品和对照药材应来源于中国药品生物制品检定所。⑤样品、对照品和阴性对照应在同一板上展开，显色，并拍摄彩照，以反映真实情况，尚附相应的文字资料说明。（3）仪器与材料①薄层板预制板与手工板硅胶G板、硅胶GF254，硅胶H、氧化铝、聚酰胺等。②涂布器③点样器材④层析缸（展开箱）⑤显色与检测仪器（4）操作步骤①铺板②供试液制备溶剂：要求溶解度不宜太大、粘度不宜太高、沸点适中。分离：液液萃取法、分段萃取法、固液萃取法③点样（活化1小时）④展开（饱和）⑤检测（5）影响薄层色谱法分析的主要因素①供试液制备应尽可能地分离纯化，除去多数杂质或有干扰成分。如：一捻金中人参稀酸水解直接氯仿萃取与经碱性氧化铝柱吸附净化比较，前者人参二醇与三醇难以辨认。②点样a.点样圆正，直径<3mm，高效薄层直径2mm。b.点样量控制在10ul以下，高效不超过2ul。c.原点忌点成空心，尽可能一次点样成功，防止损伤薄层板面。d.可点成线形。③相对湿度对吸附剂的活性影响硅胶的硅醇亲水性基团，容易吸附水分而成为水合硅醇基，从而降低活性。因此，展开时环境的相对湿度对色谱质量影响较大。如：苍术、赤白芍鉴别控制方法：a.采用双槽展开箱，控制相对湿度。b.点样后放置一定相对湿度环境中一定时间。取出，迅速放入展开箱中展开。④温度的影响如：人参的薄层鉴别⑤溶剂蒸汽在薄层色谱中的作用展开前有无预平衡、平衡时间对色谱质量有较大的影响。如：人参的薄层鉴别⑥溶剂质量如：大黄薄层鉴别中的乙酸乙酯。（6）其他色谱法。（六）检查指控制药材或制剂中可能引入的杂质或与药品质量有关的项目。可归纳为三类：1.质量参数类型;2.剂型的要求类型;3.污染的控制类型。1.质量参数类型与质量直接有关的专定检查项目如川乌、草乌炮制后乌头碱的限量;药物纯度及安全性等。2.剂型的要求类型不同的剂型有不同的质量要求，如固体制剂要求测水份;酊剂要求测含醇量、总固体量、相对密度、pH值等。常见剂型要求检查项目3.污染的控制类型

异物污染化学污染——有机磷残留、有机溶剂残留、农药残留昆虫及微生物污染（七）含量测定1.含量测定选定原则2.含量测定方法3.方法学考察4.样品测定5.含量限度的制定6.含量测定对照品的要求1.含量测定选定原则（1）项目与药味的选定①至少要建立一项较为完善的含量测定方法，包括准确、灵敏、考核实验数据齐全，累积相当数量，限度制定合理等。②单方制剂及中药注射剂所含成分必须基本清楚。③复方制剂处方原则有君、臣、佐、使之分，应首先选其君药、贵重药及毒剧药或微量药建立含量测定项。④对前述药味基础研究薄弱或在测定中干扰成分多，也可依次选定臣药等其他药味进行含量测定。（2）测定成分的选定①有效成分或指标成分清楚的可针对性定量。②成分类别清楚的可对总成分进行定量，但必须无干扰，且有针对性和控制质量的意义。③所测成分应归属于某一单味药。④对于因药材原料产地和等级不同而含量差异较大的成分，需注意检测选择指标的选定产地的限定。⑤含量过低的成分较难真正反映成药的内在质量。含量低于万分之一者，应增加一个含量测定指标或浸出物测定。⑥检测成分应尽可能与中医用药的功能相近。⑦中西药结合的药，不仅要测中药君药含量，而且所含西药必须建立含量测定项目。⑧复方制剂无法建立含量测定指标时，也可考虑建立生物测定等其他方法。2.含量测定方法（1）常用方法容量法、重量法、比色法、可见－紫外分光光度法（二、三波长等）、导数光谱法、气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、薄层扫描法（TLC）、GC－MS、高效毛细管电泳、薄层－分光光度法或比色法及生物测定法等。（2）实验设计（3）供试品溶液的制备（4）色谱条件及测定法（5）结果与讨论3.方法学考察（1）提取条件的测定a.常用的提取方法：冷浸、热浸回流、索氏提取器提取、超声波提取等。b.提取液的取舍取全量取一定量（2）分离纯化（3）测定条件的选择分光光度法：λmax、药液的浓度气相液相色谱法：固定相、流动相、检测波长、柱温、流速、理论塔板数等。薄层扫描法：内标法，内标物的选择外标法，一点法或二点法延胡索乙素含量测定延胡索乙素含量测定用色谱条件：色谱柱：InertsilODS-3C18柱，5μm,4.6(i.d)×250mm;流动相：甲醇－水－三乙胺（55:45:0.1）;检测波长：280nm;柱温：室温;流速：1ml/min(柱压约1300psi);理论塔板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000，延胡索乙素与其它组分的分离度应不低于1.5。（4）空白试验用除去被测成分或药材的模拟制剂作对照，以考察是否有干扰，确定测定指标是否仅为被测成分的响应。（5）标准曲线的制备目的：a.确定样品浓度与峰面积或峰高是否呈线性关系;相关系数应在0.999以上，薄层扫描法可在0.995以上。b.确定线性范围（适用的样品点样或进样量的确定）;c.直线是否通过原点，以确定是用一点法或二点法测定计算。（6）测定方法稳定性试验目的：是选定最佳的测定时间范围。操作：制备好样品后，分别2、4、6、8、12、24h进样，测定，计算峰面积RSD（%）一般小于2%（7）精密度试验要求：测定5个数据，分光光度法、气相色谱和液相色谱法RSD<3％;而薄层扫描法RSD<5％。目的：考察仪器的精密度。（8）重复性试验（重现性）按含量测定方法，对同一样品5份，分别按样品测定方法测定（至少5次），RSD低于5％。同一人测定多次称为重复性不同人或实验室测定称为再现性目的：考察测定方法的可靠性（9）检测灵敏度或检测下限的测定一般以工作曲线的斜率表示。如：色谱法常用峰高/对照品量表示，最小检出量即检出下限。（10）回收率试验以回收率估计分析的误差和操作过程的损失，以评估方法的可靠性。方法：①加样回收②以成药空白，精密加入被测化学成分纯品，依法测定。③取成药空白，精密加入已知被测成分含量的药材，依法测定。要求：一般要求在95～105％。至少进行5次试验或三组平行试验。①加样回收此法不用制备空白对照，模拟真实性好。注意：a.纯品的加入量与取样量中被测定成分之和必须在标准线