2022年人教版生物高考阶段复习滚动检测试卷及答案(七)

阶段滚动检测（七）（第十单元）

（75分钟100分）

一、选择题:本题共20小题,每小题2分，共40分。每小题只有一个选项符合题目要求。

1.以苹果汁为原料,先接种酵母菌,发酵96小时后再接种老陈醋的醋醋（含醋酸菌），酿造苹果

醋。下列分析错误的是（）

A.酵母菌在发酵早期进行有氧呼吸大量繁殖

B.酵母菌在发酵后期进行无氧呼吸产生酒精和CO?

C.酒精发酵中有机物的能量大部分留在发酵产物中

D.96小时后,应通入无菌空气并适当降低发酵温度

【解析】选D。在发酵早期，由于发酵瓶内有氧气，所以酵母菌进行有氧呼吸，产生大量能量，

进行繁殖,A正确;在酒精发酵后期，由于发酵瓶中缺少氧气，所以酵母菌进行无氧呼吸产生酒

精和C02lB正确；酒精发酵过程中，其产物是酒精和CO?,同时释放部分能量,而大部分的能量留

在发酵产物酒精中,C正确;96小时后接种醋酸菌,酿造苹果醋，醋酸菌是需氧型微生物,此时

应该通入无菌空气,并适当升高发酵温度,D错误。

2.（2022•黄冈模拟）微生物实践和技术中常常涉及颜色的变化,下列有关说法错误的是（）

A.葡萄酒呈红色是因为酵母菌发酵产物中产生了红色的副产物

B.DNA的粗提取实验中，以鸡血为原料,最终析出的白色丝状物即为DNA

C.可以用滤膜法来测定饮用水中的大肠杆菌的数目，在伊红美蓝培养基上的大肠杆菌菌落呈

现黑色

D.在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，再与NT-蔡基乙二胺盐酸盐

结合形成玫瑰红色染料

【解析】选A。葡萄酒呈红色是因为随着酒精度数的增加，红葡萄皮中的色素进入了发酵液,A

错误;鸡的红细胞中有细胞核,是提取DNA的理想材料,DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度

最低,最终析出的白色丝状物即为DNA,B正确;滤膜法是检测水样中大肠细菌群的方法，将一

定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中,经过抽滤,细菌被截留在滤膜上,将滤膜贴于伊红

美蓝培养基上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的大肠菌群菌落即可推测计算出水样中的大

肠杆菌数。在伊红美蓝培养基上的大肠杆菌菌落呈现黑色,C正确;在酸性条件下,亚硝酸盐与

对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与NT-蔡基乙二胺盐酸盐结合,生成的溶液呈玫瑰红色,D正

确。

3.（2022•武汉模拟）BQ-1醋酸菌分离自番茄表面,在番茄表面具有很强的生长能力，可应用于

番茄果醋的酿造。该醋酸菌在培养温度低于27.5℃时菌体生长很弱，产酸量低，高于30C时,

培养基中乙酸含量随培养时间延长而下降。下列相关叙述正确的是（）

A.BQ-1醋酸菌酿醋时以酒精作碳源最好

B.摇床或搅拌器转速可调整培养液溶氧量,酿醋时转速越快越好

C.确定醋酸菌培养温度为27~30℃,是因为要考虑到乙酸在30°C以上时挥发量明显增加

D.通过基因工程改变该菌株中与乙酸生产相关酶的合成量或活性,可明显增加生产成本

【解析】选C。醋酸菌是好氧菌，在氧气充足、糖源丰富的条件下，醋酸菌大量繁殖并将其氧

化分解为乙酸,BQT醋酸菌分离自番茄表面，在番茄表面具有很强的生长能力，番茄表面乙醇

很少，糖源丰富，因此应用糖作为碳源,A错误;摇床或搅拌器转速确实可调整培养液溶氧量，但

是搅拌过快会影响醋酸菌发酵,还可能导致醋的酸度过高,B错误;确定醋酸菌培养温度为

27~30℃,是因为要考虑到乙酸在30℃以上时挥发量明显增加，乙酸含量会随培养时间延长

而下降,C正确;通过基因工程改变该菌株中与乙酸生产相关酶的合成量或活性,可有效降低成

本,提高产酸效率,D错误。

4.由于酸奶制作工艺并不复杂,一些人会在家里自制“原始状态”的酸奶。因为没有添加剂，

而且刚做出来的酸奶入口即化,带有独特的发酵味,深得人们喜爱。常见的操作流程是向经过

杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵即可。下列有关叙述正确的是

（）

A.常温下保存的销售酸奶可用作接种的菌种

B.应该先对制作用具和原料进行灭菌处理,再接种纯的菌种,并控制发酵条件

C.选用含有抗生素的牛奶进行发酵效果会更好，因为可以有效避免杂菌的污染

D.采用煮沸法对牛奶进行消毒处理,可以最大程度地保证营养物质不被破坏

【解析】选B。常温下保存的销售酸奶乳酸菌已经失活，因此不可用作接种的菌种,A错误;应

该先对制作用具和原料进行灭菌处理,再接种纯的菌种,并控制发酵条件,B正确;抗生素具有

杀菌作用，能将乳酸菌杀死,因此不能用含有抗生素的牛奶进行发酵,C错误;采用煮沸法对牛

奶进行消毒处理时会破坏牛奶的营养物质,D错误。

5.（2022•随州模拟）尿酸氧化酶能分解尿酸（C5HNQ3）,为获取尿酸氧化酶高产菌株用以研制治

疗高尿酸血症的酶类药物,科研人员从海洋泥土中取样后富集培养,3天后吸取培养液梯度稀

释到10工然后接种到固体培养基上分离培养。挑取单菌落检测尿酸氧化酶的酶活力（用每分

钟转化1口mol尿酸所需要的酶量表示），结果如表所示。下列分析错误的是（）

菌株1234

酶活力100501420

A.从海洋泥土中取的样品需要在无菌条件下富集培养

B.需要在以尿酸为唯一氮源的固体培养基上分离培养

C.菌株3的酶活力最高,可作为实验所需的目的菌

D.分离培养时利用了平板划线法进行接种

【解析】选Do为获得纯净培养物,避免杂菌污染,应进行无菌操作,A正确;实验目的是为获取

尿酸氧化酶高产菌株，故需要在以尿酸为唯一氮源的固体培养基上分离培养,B正确;酶活力用

每分钟转化1umol尿酸所需要的酶量表示,故所需酶量越少,说明酶活力越大,可知菌株3的

酶活力最高,可作为实验所需的目的菌,C正确;根据题意可知,分离培养时利用了稀释涂布平

板法进行接种,D错误。

6.如图表示以某种杂合体名贵花卉的绿色叶片为材料,利用植物组织培养技术繁殖该植物过

程中出现的不同结果。下列分析正确的是（）

A.不同结果的出现主要是由是否提供光照造成的

B.A通过脱分化得到B通过再分化得到C

C.利用花粉粒进行单倍体育种也能培养出该杂合体花卉

D.B组细胞的全能性高于A组和C组

【解析】选D。不同结果的出现主要是细胞分裂素与生长素的比例不同导致的,A错误；愈伤组

织B在不同植物激素比例下分化为A根或C丛芽,B错误;利用花粉粒进行单倍体育种得到的

一般为纯合体,C错误;B组细胞分化程度很低,其全能性最高,D正确。

7.研究人员用一定量的紫外线辐射消除某烟草细胞的细胞核,获得保留细胞质且具有链霉素

抗性的烟草细胞甲，去除烟草细胞甲和烟草细胞乙（无链霉素抗性）的细胞壁,将二者进行融合,

获得杂种细胞丙。下列叙述错误的是（）

A.去除细胞壁前需要对烟草细胞甲和乙进行灭菌处理以防杂菌感染

B.经纤维素酶处理得到的原生质体需置于等渗溶液中以维持其活性

C.在添加链霉素的选择培养基上能进行增殖的细胞只有杂种细胞丙

D.杂种细胞丙需要经过脱分化、再分化等过程才能够获得杂种植株

【解析】选A。去除甲乙细胞壁时，需要对其进行消毒处理（灭菌条件太高,高温、干热、化学

试剂,会导致细胞死亡），否则会导致杂菌侵染，培养失败,A错误;去除细胞壁的原生质体需要

在等渗溶液中培养,如果渗透压过大会使细胞失水死亡,渗透压过小会使细胞吸水涨破,B正确;

在添加链霉素的选择培养基上可以增殖的细胞只有杂种细胞丙，细胞甲虽然有抗性但是不可

以增殖,C正确;想要获得杂种植株,杂种细胞丙需要先进行脱分化再进行再分化,D正确。

8.（2022•哈尔滨模拟）植物组织培养过程可以归纳为①出色@坐"@一（④,下列相关叙

述错误的是（）

A.通常选取根尖、茎尖等诱导形成愈伤组织

B.②一③再分化过程中,细胞增殖的方式为有丝分裂

C.①一③培养过程中，应在培养基中加入水、无机盐、蔗糖、氨基酸、植物激素等物质

D.将①经脱分化培养成②时,得到胚状体

【解析】选D。植物组织培养过程中，外植体通常选用根尖、茎尖等容易诱导形成愈伤组织的

部位,A正确;②f③再分化过程中,细胞增殖的方式为有丝分裂,B正确;①一③培养过程中，

应在培养基中加入水、无机盐、蔗糖、氨基酸、植物激素等物质,C正确;将①经脱分化培养

成②时，得到愈伤组织,将②经再分化培养成③时,得到胚状体,D错误。

9.（滚动交汇考）（2022•十堰模拟）如图是人体内某些生命活动的调节过程示意图（a~e表示信

息分子），下列相关叙述错误的是（）

传入神经内分泌腺T细胞e

卜/Xl

（rig）⑨、管细度）

Ild1

骨骼肌战栗水分重吸收增强细胞代谢加强增殖分化

A.免疫细胞除了图中的B细胞和T细胞,还有巨噬细胞

B.图中a、b、c、d、e的化学本质都是蛋白质

C.成年人体内d过少时会表现出精神萎靡等症状

D.若d偏高,机体会通过调节作用，使c的含量发生变化

【解析】选B。免疫细胞除了图中的B细胞和T细胞，还有巨噬细胞,A正确;信息分子a所示

的神经递质的种类很多，主要有乙酰胆碱、多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素、5-羟色胺、氨

基酸类、一氧化氮等,其中的一氧化氮属于无机物,d为甲状腺激素,本质为氨基酸衍生物,B错

误；甲状腺激素能提高中枢神经系统的兴奋性,故成年人体内甲状腺激素过少时表现为精神萎

靡,C正确;信息分子d若偏高,对垂体进行负反馈调节,减少信息分子c,D正确。

10.荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量,其原理是在PCR体系中每加入一对引

物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针,当山〃酶催化子链延伸至探针处,会水解探

针,使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次,就有一个荧光分子生成。下列叙述错误的

是（）

m小，…荧光探针

引物］Q__J

51

513'

引物2

荧光

3'5'

5131

A.引物与探针均具有特异性,与模板结合时遵循碱基互补配对原则

B.反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈负相关

C.全q酶催化DNA合成的方向总是从子链的5'端到3'端

D.若用cDNA作模板,上述技术也可检测某基因转录水平

【解析】选B。引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则,A正确；由荧光

定量PCR技术原理“每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针”“即每

扩增一次,就有一个荧光分子生成”推测可知,反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量

呈正相关,B错误；由图分析可知，根据图中引物延伸的方向可以确定，窗q酶可以催化子链沿

着5'端到3'端方向延伸,C正确；由于cDNA是以某基因转录形成的mRNA为模板逆转录形成的,

若用cDNA作模板,需要检测出总mRNA数目和某基因的mRNA数目，故上述技术也可检测某基因

的转录水平,D正确。

11.2016年初,首位由“三合一”胚胎人工授精技术培育的婴儿出生，其培育过程如图所示。

下列相关说法，错误的是（）

麻砸令⑵G一

卵母细胞B

体夕陛精,

移

植

入

子

宜

继一“三亲婴儿”

续

育

胚胎培养发

A.“三亲婴儿”孕育过程中使用了动物细胞培养、核移植等技术

B.融合激活后的卵母细胞要培养到减数分裂II中期才能完成受精作用

C.卵母细胞A的捐献者携带的血友病基因能遗传给“三亲婴儿”

D.“三亲婴儿”培育技术可以用来避免细胞质遗传病的遗传

【解析】选C。由图可知，“三亲婴儿”孕育过程中使用了动物细胞培养、体外受精、核移植

等技术,A正确;融合激活后的卵母细胞要培养到减数分裂II中期才具备受精能力,从而完成受

精作用,B正确；卵母细胞A的捐献者提供的是细胞质，而其携带的血友病基因位于细胞核内的

染色体上,所以其携带的血友病基因不能遗传给“三亲婴儿”，C错误；“三亲婴儿”培育技

术可以通过核移植来避免细胞质遗传病的遗传,D正确。

12.从黑色、白色、黄色鼠的卵裂期胚胎中分别提取部分细胞，制成一个“嵌合胚胎”，再经过

早期胚胎培养和胚胎移植后，培育出三色皮毛的嵌合鼠，培育流程如图所示。下列说法正确的

是（）

黑鼠早期胚胎通）的

卵裂球

白鼠早期胚胎①®②.鬻「

卵裂球

黄鼠早期胚胎隔）做

卵裂球

嵌合胚胎

A.嵌合鼠培育依据的原理是基因重组和细胞全能性

B.过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的滋养层

C.过程②中可利用灭活病毒诱导卵裂球细胞发生融合

D.过程③操作前需要对代孕母鼠进行同期发情处理

【解析】选D。嵌合鼠培育过程并没有发生基因重组,A错误;过程①中需利用相关技术去除早

期胚胎外的透明带,B错误;过程②中并没有发生细胞融合,因此不需要利用灭活病毒诱导,C

错误;过程③是胚胎移植,该操作前需要对代孕母鼠进行同期发情处理,使胚胎移植入相同的

生理环境,D正确。

13.（滚动交汇考查）小聚碱也叫黄连素,是从中药黄连中分离出来的一种生物碱,具有抗炎、解

热等功能。热激蛋白HSP70是体温调节中的重要因子，也是小粱碱这种解热作用的靶点。小累

碱可降低TBP蛋白与HSn0基因启动子区域内的“TATAbox”的结合，抑制HSP10基因的转录，

使其表达水平下降，最终抑制体温的升高。下列叙述错误的是（）

A.服用小聚碱可以缓解体温升高的症状

B.HSP70含量降低会抑制体温升高

C.体温升高过程中机体的产热量大于散热量

D."TATAbox”是DNA聚合酶的结合位点

【解析】选D。小聚碱最终使得网70基因表达水平下降，抑制体温升高,A正确;〃沏0基因

转录受抑制会抑制体温升高，由此可推测HSP70的存在促使体温升高，因此HSP70含量降低会

抑制体温升高,B正确;机体体温升高的过程中，产热量会大于散热量,从而使得体温升高,C正

确;TBP蛋白与的0基因启动子区域内的“TATAbox”结合，抑制作用0基因的转录，由此可

推测“TATAbox”是RNA聚合酶的结合位点,D错误。

14.（滚动单独考查）生态足迹是指现有条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一个国

家或全人类）生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积。生态承载力是指在一定环

境条件下,生态系统中某种个体存在数量的最大值。下列有关说法错误的是（）

A.餐厨垃圾分类、回收与利用能实现能量的多级利用，可以减小生态足迹

B.改善饮食结构、减少肉食摄取比例可以缩短食物链从而减小生态足迹

C.建立沙滩保护区、持续《值强度的捕捞量等均有利于提高生态承载力

D.培育农作物良种、建设生态农业等措施均有利于提高生态承载力

【解析】选C。餐厨垃圾分类、回收与利用能实现能量的多级利用，可以减小生态足迹,A正确；

改善饮食结构、减少肉食摄取比例可以缩短食物链,提高能量的利用率,从而减小生态足迹,B

正确;建立沙滩保护区有利于提高生态承载力，持续人值强度的捕捞量会降低生态承载力,C错

误；培育农作物良种、建设生态农业等措施可优化资源配置,从而提高生态承载力,D正确。

15.在基因工程操作过程中，科研人员利用识别两种不同序列的限制酶（R和RJ处理基因载体,

进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果如图所示。以下相关叙述,错误的是（）

MarkerRiR?R1+R2

800

600

400

200

A.该载体最可能为环状DNA分子

B.两种限制酶在载体上各有一个酶切位点

C.限制酶C与R2的切点最短相距约200bp

D.限制酶作用位点会导致氢键和肽键断裂

【解析】选Do当仅用一种限制酶切割载体时，仅产生一种长度的DNA片段,因此该载体最有

可能为环状DNA分子,A正确；当仅用一种限制酶切割载体时,两种限制酶切割产生的DNA片段

等长,而两种限制酶同时切割时则产生两种长度的DNA片段,所以两种限制酶在载体上各有一

个酶切位点,B正确;两种限制酶同时切割时产生600bp和200bp两种长度的DNA片段,所以

两种限制酶的酶切位点至少相距200bp,C正确邛艮制酶切割DNA分子,破坏的是作用位点上两

个脱氧核甘酸之间的磷酸二酯键,D错误。

16.（滚动交汇考查）（2021•辽宁选择考）下列有关病毒在生物学和医学领域应用的叙述，错误

的是（）

A.灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合

B.用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体

C.基因工程中常用噬菌体转化植物细胞

D.经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防

【解析】选C。促进动物细胞融合除了物理方法和化学方法外，还可以采用灭活的病毒,A正确；

病毒作为抗原可刺激机体发生特异性免疫，产生抗体，用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗

体,B正确;基因工程中常用农杆菌转化植物细胞,农杆菌的特点是其细胞内的Ti质粒上的

T-DNA片段能够转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上,C错误;经过灭活或减毒处理

的病毒可以作为免疫学中的疫苗,用于免疫预防,D正确。

17.精氨酸营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶,不能在缺少精氨酸的

培养基上生长但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精

氨酸营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌并进行筛选的过程示意图，过程②将紫外线照射处理的菌液

接种在某培养基上。培养基上的菌落不再增加时，平板上的菌落如图甲所示。过程③向培养基

中添加某种物质继续培养得到如图乙所示平板,下列叙述正确的是（）

A.紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生基因突变或染色体变异

B.图乙中菌落B为精氨酸营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌

C.过程③向培养基中添加的某种物质是谷氨酸

D.过程②所用培养基是一种鉴别培养基

【解析】选Bo谷氨酸棒状杆菌为原核生物,其细胞中不含染色体,因此不会发生染色体变异,A

错误；由分析可知，图乙中菌落B为精氨酸营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌,B正确;过程③向培养

基中添加的某种物质是精氨酸,C错误;过程②所用培养基缺少精氨酸，只有能产生精氨酸的微

生物才能生存,因此该培养基是一种选择培养基,D错误。

18.早期胚胎细胞异常凋亡是目前克隆猪成功率低的主要原因。用实时荧光逆转录PCR技术

（RT-qPCR）检测细胞凋亡抑制基因Bcl-2的表达水平,有助于了解胚胎发育不同时期Bcl-2表

达水平与细胞凋亡的关系。下列说法错误的是（）

胚胎

卵母细胞核移植建组早期移植受体

一克隆猪

良种猪一体细胞;^胞一胚，脸二7壬官‘

不同发育

|I时期提取

细胞裂解物RT-qPW扩增产物

A.对重组细胞进行培养时需加入血清等天然成分

B.卵母细胞采集后,要在体外培养成熟再去核作为受体细胞

C.根据RT-qPCR荧光强度可计算出基因Bcl-2在相应细胞中的翻译水平

D.胚胎在受体子宫发育过程中，其遗传特性不受影响

【解析】选C。对重组细胞进行培养时需加入血清等天然成分,A正确；卵母细胞采集后，要在

体外培养成熟再去核，作为核移植受体细胞,B正确;根据RT-qPCR最终的荧光强度不可能计算

出基因Bcl-2在相应细胞中的翻译水平，只有在荧光信号指数扩增阶段,PCR产物量的对数值

与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析,C错误;胚胎在受体

子宫发育过程中,其遗传特性不受影响,受体子宫只不过提供了一个发育的场所,D正确。

19.如图的双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法,利用细胞工程技术制备的单克

隆抗体能增强该过程的有效性,下列相关叙述正确的是（）

固相酶标检测台0繁产物

誓.抗原工■三抗体河底物白

A.将相关抗原注射到小鼠体内，可从小鼠脾脏中获得所需的单克隆抗体

B.固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于两者结构相同

C.加入酶标抗体的目的是通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量

D.该方法与只使用单克隆抗体相比,能增加识别抗原的种类

【解析】选C。将相关抗原注射到小鼠体内，可从小鼠脾脏中获得能产生相应抗体的B淋巴细

胞,A错误;据图可知，固相抗体和酶标抗体分别与抗原的不同部位结合，说明两者的结构不

同,B错误;加入酶标抗体的目的是酶催化检测底物反应,可通过测定酶反应产物量来判断待测

抗原量,C正确;据图可知，该方法没有增加识别抗原的种类,D错误。

20.（滚动单独考查）位于朝鲜半岛中部狭长地带的“非军事区”，50多年来无人打扰,在被战

火吞噬的地方逐渐出现了湿地、森林等自然景观，成为各种野生动植物、外来物种的栖息地。

下列说法错误的是（）

A.该区域形成的多种生态系统类型与不同的自然环境有关

B.该区域发生群落演替的前提是具有适合地衣生长的岩石

C.外来物种迁入导致该区域的物种丰富度和抵抗力稳定性升高

D.若在“非军事区”开垦农田，则演替的速度和方向会改变

【解析】选B。自然环境会影响区域内动植物的分布和种类，故该区域形成的多种生态系统类

型与不同的自然环境有关,A正确;战火吞噬后的地区仍保留了土壤和部分植被条件，故该区域

发生的演替为次生演替,起始条件不是裸岩和地衣,B错误;若外来物种不会对本地物种的生存

造成威胁,则其迁入会导致该区域的物种丰富度和抵抗力稳定性升高,C正确;若在“非军事区”

开垦农田，则物种的种类会趋向单一,演替的速度和方向会改变,D正确。

二、非选择题:本题共4小题，共60分。

21.（15分）（2022•孝感模拟）科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐

烟草,培育过程如图1所示，图2为相关限制酶识别序列及切割位点。请回答下列问题。

含抗盐基

烟草幼苗

图1

限制酶BamHIBcl\3AI/7/wdin

识别序G*GATCCA'AGCTT

TGATCAGATC

列及切

CCTAGfACTAGJCTAGfTTCGA,

割位点

图2

(1)利用PCR技术扩增抗盐基因前,需先获得细菌的,在设计引物时需要

在两种引物的一端分别加上_______________________________序列，以便重组质粒的构建

和筛选。

(2)若用Sa43AI不同程度的酶切过程①获得的重组质粒,最多可能获得种大小不同

的DNA片段。若SauAAI酶切的DNA末端与Ba流I酶切的DNA末端连接,对于该连接部位,能

否被MI酶识别?(填“能”“不能”或“不一定能”)。

(3)步骤①所使用的载体中未标出的必需元件还有；步骤②中需先用

处理农杆菌以便将重组质粒导入农杆菌细胞;步骤③中通常需要添加酚类物质，其

目的是o

(4)将转入抗盐基因的烟草细胞在固体培养基上培育成完整的植株需要用

技术，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加o

巨质粒q菌落内处,吃)培养基B

CT噎逐…

图3

（5）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图3表示

运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基

因表达载体是否导入了农杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基B还含有

o从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是菌落中的

细菌。

【解析】（1）利用PCR技术扩增抗盐基因前，需先获得细菌的基因组DNA,才有PCR扩增基础。

通过题意分析可知，构建重组质粒时，抗盐基因被重组到质粒的&加I和〃力?dIII切割位点

之间，故在设计引物时需要在两种引物的一端分别加上GGATCC和AAGCTT序列，以便重组质粒

的构建和筛选。（2）根据图2分析可知，Sau3AI酶能切害U及?屈H、a/I和Sau3AI三种切

割位点，只切割1个切割位点可获得1种大小的DNA片段,只切割2个切割位点可获得6种大

小的DNA片段,3个切割位点全切害％在前有的基础上不增加某种大小的DNA,故最多可能获得

7种大小不同的DNA片段。若Sau3AI酶切的DNA末端与BanHI酶切的DNA末端连接,对于

该连接部位，序列可能是GGATCC,也可能不是，不一定能被6a/出I酶识别。（3）基因表达载体

的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点，步骤①所使用的载体中未标出

的必需元件有启动子、终止子;步骤②中需先用C『处理农杆菌，让细胞膜通透性增加，以便将

重组质粒导入农杆菌细胞;为吸引农杆菌移向烟草细胞，有利于目的基因成功转化，通常需要

在步骤③中添加酚类物质。（4）运用植物组织培养技术,能将转入抗盐基因的烟草细胞在固体

培养基上培育成完整的植株。题中植物组织培养过程除营养物质外还必须向培养基中添加植

物激素（生长素和细胞分裂素），以促进细胞增殖分化产生根、茎等。（5）基因工程中的检测筛

选是一个重要的步骤。常根据标记基因设计培养基，最终筛选出导入了重组质粒的农杆菌。图

3表示影印培养法,分析可知,培养基B除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,还含有氨茉青霉

素（或氨苇青霉素和四环素），能在此培养基上生长的农杆菌含有非重组质粒（有氨茉青霉素抗

性基因），不能在此培养基上生长的农杆菌只含有重组质粒（重组质粒构建破坏了氨革青霉素

抗性基因,农杆菌失去相应抗性），与培养基A作对比可知,含有目的基因（重组质粒）的是4和

6菌落中的细菌。

答案：（1）基因组DNAGGATCC和AAGCTT（2）7不一定能（3）启动子、终止子Ca2*吸引

农杆菌移向烟草细胞，有利于目的基因成功转化（4）植物组织培养植物激素（生长素和细

胞分裂素）（5）氨苇青霉素（或氨苇青霉素和四环素）4和6

22.（15分）（2022•襄阳模拟）甘蓝型油菜中，抑制两基因的表达可提高油菜籽的含油量。通

过基因工程将郎基因反向连接在启动子后，构建转反义期基因油菜是提高油菜籽含油量的

常用技术路径。请回答下列问题：

A链

上游------►下游

B链

PEP基因

BamH1Seal

,P\\ntp终止子

Ti质粒

GFP:绿色荧光蛋白基因

〃伊:新霉素抗性基因

（1）为将的基因反向连接在启动子后,构建反义位基因，需要将限制酶切割位点设计在引物

上，期基因的上游引物和下游引物中应分别引入酶切割位点。

（2）用激光照射油菜愈伤组织时,可在细胞膜上打出一个穿孔,转反义必尸基因表达载体由此

小孔进入油菜细胞,几秒种后小孔封闭，该过程体现了细胞膜具有o目的基因表达

载体进入细胞后,Ti质粒上的___________区段可转移到油菜细胞的基因组中。

（3）筛选时,需在油菜愈伤组织培养基中加入进行初步选择。在激光照射下,存活

的细胞一般会发出o为检测反义砂基因是否整合到染色体上,研究者通常检

测细胞中是否存在基因，而不检测的基因。不直接检测的基因的原因是

（4）已知郎基因的转录模板链为A链,则反义曲基因的转录模板链为。转反义PEP

基因油菜中期基因的表达受阻,原因是

【解析】（1）为将郎基因反向连接在启动子后，构建反义的基因，根据图中启动子和终止子

的位置以及质粒上的限制酶种类分析,若要构成反义发尸基因表达载体,需要将限制酶切割位

点设计在引物上，的基因的上游引物和下游引物中应分别引入Sea\、Ba而I酶切位点。

（2）用激光照射油菜愈伤组织时,可在细胞膜上打出一个穿孔,转反义恸基因表达载体由此

小孔进入油菜细胞,几秒种后小孔封闭,该过程依赖细胞膜具有一定的流动性来实现。目的基

因表达载体进入细胞后,Ti质粒上的T-DNA区段可转移到油菜细胞的基因组中，进而实现目的

基因的转移。（3）筛选时,需在油菜愈伤组织培养基中加入新霉素进行初步选择,能保留下来的

是导入了目的基因的细胞。在激光照射下,存活的细胞一般会发出绿色荧光,因为目的基因与

新霉素抗性基因以及绿色荧光蛋白基因同时进行了转移从而能检测目的基因是否进行了成功

导入。检测反义郎基因是否整合到染色体上,研究者通常检测细胞中是否存在九0基因,而

不检测的基因，原因是油菜细胞的基因组中本身有的基因，而没有〃加基因，而〃粒基因的

存在能说明目的基因成功导入。（4）已知的基因的转录模板链为A链，由于目的基因进行了

反接,则反义两基因的转录模板链为B链,进而使转反义叱基因油菜中的基因的表达受

阻,因为以B链为模板链转录出的RNA与以A链为模板链转录出的RNA配对形成双链，抑制了

的基因的翻译过程,进而无法表达,从而实现了油菜籽中含油量的提高。

答案：（l）Scal、艮血H（2）流动性T-DNA（3）新霉素绿色荧光油菜细胞的基因组中

本身有发尸基因（4）B链以B链为模板链转录出的RNA与以A链为模板链转录出的RNA配

对形成双链,抑制了必尸基因的表达

23.（15分）胚胎干细胞必须从胚胎中获取，但这涉及伦理问题，因而限制了它在医学上的应用。

科学家通过体外诱导成纤维细胞,获得了类似胚胎干细胞的一种细胞,称为诱导多能干细胞

（简称iPS细胞）。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，因

此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示

意图Klf4、So嵬和庞L3/4等基因与细胞的脱分化有关）。回答下列问题：

c：Myc、K阴、Sox2、Ocf-3,

成纤维细胞类似胚眼干细胞

।②

iPS细胞

I血干细胞

.为胰岛B细胞

神经细胞

（1）在对成纤维细胞进行培养时,常用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞,这说明细胞间的物

质为o（填“能”或“不能”）用胃蛋白酶处理成纤维

细胞，原因是o

（2）在培养iPS细胞的过程中，培养基中应含有细胞所需的各种营养物质，并定期更换培养液。

定期更换培养液的目的是O

为了给培养物提供无菌环境,可进行的操作是o

⑶过程③④为iPS细胞提供的条件