维生素B1鉴别(赵云腾制作)

维生素B1的质量分析组长：赵云腾组员：闫雪娜齐云环

1.维生素B1概述

2.维生素B1理化性质

3.维生素B1鉴别试验4.维生素B1片含量测定维生素B1概述维生素B1主要存在于种子的外皮核赔亚种，如米糠和麸皮中含量很丰富，在酵母菌中含量也极丰富。瘦肉、白菜和芹菜中含量也较丰富。缺乏维生素B1时，可引起多种神经炎症，如脚气病菌。维生素B1理化性质维生素B1（盐酸硫胺）：

氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)氨基嘧啶环噻唑环维生素B1为白色结晶或结晶性粉末；有微弱的特臭；味苦；干燥在空气中讯即吸收约4﹪的水分。易溶于水，在乙醇中微溶，在乙醚中不溶。水溶液显酸性，且在酸性溶液中稳定。维生素B1中的噻唑环在碱性介质中可开环，在与嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化生成具有荧光的硫色素。维生素B1分子结构中含有杂环，可与硅钨酸等生物碱沉淀试剂反应生成沉淀。维生素B1分子结构中具有共轭双键，对紫外光有吸收。维生素B1理化性质维生素B1鉴别试验氯化物反应硫色素反应沉淀反应红外光谱硝酸铅反应紫外吸收光谱方法维生素B1（5mg）氢氧化钠（2.5mL）铁氰化钾（0.5mL）正丁醇（5mL）蓝色荧光荧光消失溶解＋强力振摇H＋OH－放置分层硫色素反应鉴别方法：维生素B1＋NaOHNa2S共热黄经棕Na2S＋Pb(NO3)2PbS2黑色硝酸铅反应紫外吸收光谱紫外分光光度计光源单色器样品室检测器显示紫外吸收光谱基本组成：（动画）1.光源

在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。

可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。

紫外区：氢、氘灯。发射185～400nm的连续光谱。紫外吸收光谱

2.单色器将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。入射狭缝：光源的光由此进入单色器；准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；

色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅；

聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；⑤出射狭缝。紫外吸收光谱3.样品室

样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。4.检测器

利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。5.结果显示记录系统

检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理紫外吸收光谱分光光度计的类型:1.单光束

简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。2.双光束

自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。紫外吸收光谱3.双波长将不同波长的两束单色光(λ1、λ2)快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△

=1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。紫外吸收光谱分光光度计原理：

物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。

紫外吸收光谱操作步骤及使用方法：准备工作：

将以装好的仪器接入220V的市电，开机，同时开启所需光源（钨灯和氘灯，不需要用氘灯时请不要打开氘灯开关）。开机后仪器显示800-3，表示主机进入预热十分钟。

预热完毕后，显示器将显示HELLO，表示仪器可以进入工作状态。（在预热过程中，如果想直接进入工作状态，可以按STOP键进入HELLO工作状态。仪器要求开机后预热十分钟以使仪器工作更稳定。）仪器进入工作状态后，首先根据实际测量的需求调节好光源、波长、狭缝、滤色片。选择后即可准备好样品进行各种测量。根据所需的测量进入相应的测量功能（T、A、C）。测量工作：1.确定工作波长2.建立工作曲线3.测试带测样品紫外吸收光谱测量样品透射比（T）：

将参比、样品放入样品池，拉动样品池拉杆使参比的比色皿对准光线通道，按100%T键（调百），待显示ｔ100.0，然后打开样品池盖，按Clear键（调零），待显示ｔ0000，盖上样品池盖再次按100%T键，待显示ｔ100.0，拉动样品池拉杆使样品的比色皿对准光线通道，按Enter键后等待显示结果。

紫外吸收光谱测量样品吸光值（A）：

将参比、样品放入样品池，拉动样品池拉杆使参比的比色皿对准光线通道，按ABSO键，待显示A0.000，然后打开样品池盖，按Clear键，待显示A0000，盖上样品池盖再次按ABSO键，待显示A0.000，拉动样品池拉杆使样品的比色皿对准光线通道，按Enter键后等待显示结果。紫外吸收光谱测量样品浓度（C）：

在测量浓度之前，必须建立标准曲线才能进行浓度测量。如没有建立标准曲线则不能进行浓度测量，仪器会提示操作出错。

测量浓度应该按以下过程操作：

A：建立标准曲线（共有三种方法选择）；

B：工作曲线的修正（自己认为工作曲线没问题可以不修正）；

C：测量浓度。紫外吸收光谱工作曲线的修正

工作曲线方程为C=K×A+B，最多测量标准液的样点为20个。因此在建立曲线时是选20个样点的平均值建立方程，因此总有其中的样点离曲线较远（坏点），可以剔除该样点来达到修正曲线的目的，方法是在建立完曲线显示K、B、R后按STOP键，则程序会自动剔除坏点，按一次STOP键则剔除一个坏点，最多可以有n-1次（n个标准液）。cAc0A`

配置一系列不同浓度的标准溶液，以不含被测组分的溶液为参比溶液，测定标准系列溶液的吸光度，以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标，绘制吸光度-浓度曲线，称为标准曲线。在相同条件下测定样品溶液的吸光度，从校正曲线上找出与之相对应的未知组分的浓度，用于单组分的定量分析。参比容液的选择：1.溶剂参比2.试剂参比3.样品参比4.平行操作溶液参比标准曲线法仪器的维护保养与注意事项当显示错误信息时一定查阅错误故障表，找出原因，再继续操作。放入样品池架时，要检查是否定位准确平稳，不能出现歪斜现象。当仪器执行程序发生错误时，先用STOP键转出，让显示器显示HELLO。如果出现的错误比较严重，不能转出的话，可以用复位键Reset键复位。仪器运行期间，注意仪器附近电磁干扰比较严重的电器应该关闭。以免仪器受到电磁干扰。仪器开电后不要用手拨保护光闸片，因为仪器的接收器不能受强光的照射。为了延长仪器的使用寿命，一般情况下，如果不使用氘灯，请最好不要开氘灯。氘灯关闭后，要等几分钟才能重新点燃。关闭仪器前，请先关氘灯。红外光谱取本品适量，加水溶解，水浴蒸干，在105℃干燥2h测定。本品的红外光吸收图谱应与对应的图谱一致。维生素B1可与多种生物碱沉淀试剂反应，生成不同的颜色的沉淀。如：维生素B1＋碘

红色沉淀维生素B1＋碘化汞钾淡黄色沉淀维生素B1＋硅钨酸白色沉淀维生素B1＋苦味酸黄色沉淀沉淀反应氯化物反应维生素B1是一种盐酸盐，固本品水溶液显氯化物的鉴别反应。盐酸盐维生素B1含量测定原理：本品的12.5ug/ml盐酸液(9

1000)，在246nm波长处测定吸收度吸，收系数为421。根据吸光系数法测定维生素B1片含量.UV共轭双键λmax=246nm

取本品20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液(91000)约70ml，振摇15min使维生素B1

溶解，加盐酸溶液(91000)稀释至刻