3显微镜计数死活细胞的鉴_第1页
3显微镜计数死活细胞的鉴_第2页
3显微镜计数死活细胞的鉴_第3页
3显微镜计数死活细胞的鉴_第4页
3显微镜计数死活细胞的鉴_第5页
已阅读5页，还剩11页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验三、显微镜计数、死活细胞

的鉴别一、实验目的

1、学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。2、学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。实验1：微生物数量的测定

平板计数法；比浊法（分光光度计）；

显微直接计数法。实验材料（1）酵母菌悬液载玻片盖玻片血球计数板计数器显微镜酵母菌显微直接计数

方法：总菌计数法——血球计数板或霍瑟（PeroffHausser）细菌计数板。不要从高处往下滴！取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加盖血盖片。取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡。用10×镜观察并将计数室移至视野中央。在40×镜下计数：计数5个中格的平均值，然后求得每个中格的平均值。乘上25就得出计数区总菌数，最后再换算到每mL菌液中的含菌数。每个记数室体积为0.1立方毫米。注意事项：计上不计下，计左不计右。出芽计一半计数步骤：注意事项：①

从盖玻片与计数室缝隙间滴进样品液；②

加样后静置3-5min，酵母菌均匀到一个水平上；※浊度：a、每格5—10个菌体为宜；

b、两个计数室计得的值来计算样品的含菌量。计算：通常数五个中方格的总菌数（A），然后求得每个中方格的平均值，再乘上25（25个中方格），就得出大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数，乘上稀释倍数（B），即原液中的总菌数。总菌数（个/ml）=A/5×25×10000×B。

实验报告1、结果记录在P92的表格：各中格中菌数AB二室平均值菌数/ml12345第一室第二室实验2：酵母菌死活鉴定死活鉴定：美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型呈无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。器材（2）1、染液：吕氏碱性美蓝染液2、菌种：酿酒酵母液3、仪器和其他用具：显微镜、载玻片、盖玻片等操作步骤2

美蓝浸片的观察：（斜面）1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀。染液不宜过多或过少，否则在盖上盖玻片时菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。盖玻片不宜平放着放下，以免产生气泡影响观察。3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并据颜色来区别死活细胞。4）染色约0.5h后再次进行观察，注意死活细胞数量是否增加。美蓝浸片的观察：（斜面）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌菌液放在染液中，混合均匀。思考题根据你的

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论