第五章黄酮类天然药物化学

第五章黄酮类天然药物化学第五章黄酮类天然药物化学仅截止到目前为止,国内外已发表得黄酮类化合物共2700多个(主要就是天然黄酮类,也有少部分为合成品),并以黄酮醇类最为常见,约占总数得三分之一,其次为黄酮类,占总数得四分之一以上,其余则较少见。一、黄酮类化合物生物合成得基本途径以前,黄酮类化合物(flavonoids)主要就是指基本母核为2-苯基色原酮(2-phenyl-chromone)类化合物,现在则就是泛指两个苯环(A-与B-环)通过中央三碳链相互联结而成得一系列化合物。生物合成研究表明A环来自于三个丙二酰辅酶A,B环来自于桂皮酰辅酶A黄酮类化合物得生物活性1、对心血管系统得作用Vp样作用:芦丁、橙皮苷等有Vp样作用,能降低血管脆性及异常通透性,可用作防治高血压及动脉硬化得辅助治疗剂。扩冠作用:芦丁、槲皮素、葛根素、人工合成得立可定。降血脂及胆固醇:木樨草素芦丁就是从我国独有得国槐得花蕾中提取得植物药,具有降低毛细血管得异常通透性与脆性得作用,就是心脑血管保护药,就是国内治疗心脑血管疾病制剂得主要成分,国外还大量用于食品添加剂与化妆品得生产当中。2、抗肝脏毒作用从水飞蓟种子中得到得水飞蓟素等黄酮类化合物具有保肝作用,用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤。(+)-儿茶素(Catergen)也具有抗肝脏毒作用,可治疗脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起得中毒性肝损伤。3、抗炎芦丁及其衍生物羟乙基芦丁、二氢槲皮素等具抗炎作用。

4、抗菌及抗病毒作用如木樨草素、黄芩苷、黄芩素。5、解痉作用异甘草素、大豆素等解除平滑肌痉挛;大豆苷、葛根黄素等葛根黄酮类可缓解高血压患者得头痛等症状;杜鹃素、川陈皮素、槲皮素、山柰酚、芫花素、羟基芫花素等还具有止咳祛痰得作用。6、雌性激素样作用大豆素(daidzein)等异黄酮具有雌性激素样作用,可能就是因为它们与己烯雌酚结构类似。7、泻下作用如中药营实中得营实苷A有致泻作用。大家学习辛苦了，还是要坚持继续保持安静

8、清除人体自由基作用黄酮类化合物多具有酚羟基,易氧化成醌类而提供氢离子,故有显著得抗氧特点。另外还有降血脂、血糖,抗动脉粥样硬化及抗癌、抗突变等作用。第二节结构分类根据中央三碳链得氧化程度、B-环连接位置(2-或3-位)以及三碳链就是否构成环状等特点,可将重要得天然黄酮类化合物分类如下:(一)黄酮类黄酮类就是以2-苯基色原酮为基本母核,3位无含氧取代得一类化合物。天然黄酮A环得5,7位几乎同时带有羟基,而B环常在4’位有羟基或甲氧基,3’位有时也有羟基或甲氧基。黄酮类(flavones)

常见得黄酮及其苷类有芹菜素、木犀草素、黄芩苷等。芹菜素木犀草素黄芩苷(二)黄酮醇类黄酮醇类在黄酮基本母核得3位上连有羟基或其她含氧基团。黄酮醇(flavonol)

常见得黄酮醇及其苷类有山柰酚、槲皮素、杨梅素、芦丁等。山柰酚杨梅素槲皮素R=H芦丁R=芸香糖(三)二氢黄酮类二氢黄酮类结构可瞧作就是黄酮基本母核得2、3位双键被氢化而成。二氢黄酮类(Flavanones)如橙皮中得橙皮素与橙皮苷;甘草中得甘草素与甘草苷。橙皮素R=H橙皮苷R=芸香糖甘草素R=H甘草苷R=glc(四)二氢黄酮醇类二氢黄酮醇就是黄酮醇类得2、3位被氢化得黄酮类化合物,而且常与相应得黄酮醇共存于同一植物中。二氢黄酮醇类(Flavanonols)如满山红叶中得二氢槲皮素与槲皮素共存,桑枝中得二氢桑色素与桑色素共存。二氢槲皮素二氢桑色素黄柏叶中具有抗癌活性得黄柏素-7-O-葡萄糖苷也属于二氢黄酮醇类。黄柏素-7-O-葡萄糖苷(五)异黄酮类异黄酮类母核为3-苯基色原酮得结构,即B环连接在C环得3位上。异黄酮类(Isoflavanone)豆科植物葛根中所含有得大豆素、大豆苷、大豆素-7,4’-二葡萄糖苷、葛根素与葛根素木糖苷均属于异黄酮类化合物。大豆素R1=R2=R3=H大豆苷R1=R3=HR2=glc葛根素R2=R3=HR1=glc大豆素-7,4’-二葡萄糖苷R1=HR2=R3=glc葛根素木糖苷R1=glcR2=xylR3=H(六)二氢异黄酮类二氢异黄酮具有异黄酮得2、3位被氢化得基本母核。二氢异黄酮类(Isoflavanones)如中药广豆根当中含有得紫檀素、三叶豆紫檀苷、高丽槐素具有抗癌活性,苷得活性强于苷元。毛鱼藤中所含有得鱼藤酮也属于二氢异黄酮得衍生物,具有较强得杀虫与毒鱼作用。它们都属于二氢异黄酮类得衍生物。紫檀素R=CH3三叶豆紫檀苷R=glc高丽槐素R=H鱼藤酮(七)查耳酮结构特点为二氢黄酮C环得1、2位键断裂生成得开环衍生物,即三碳链不构成环。查耳酮类(Chalcones)在酸得作用下,查耳酮可转化为无色得二氢黄酮,碱化后又转为深黄色得2’-羟基查耳酮。2’-羟基查耳酮二氢黄酮如红花得花中含有得红花苷红花苷(八)二氢查耳酮类二氢查耳酮为查耳酮αβ双键氢化而成。

二氢查耳酮类(Dihydrochalcones)二氢查耳酮在植物界分布极少,如蔷薇科梨属植物根皮与苹果种仁中含有得梨根苷。梨根苷(九)橙酮类(噢口弄类)结构特点为C环为含氧五元环。母核碳原子得编号也与其她黄酮类不同。橙酮类此类化合物较少见,主要存在于玄参科、菊科、苦苣苔科以及单子叶植物沙草科中,如在黄花波斯菊花中含有得硫磺菊素属于此类。硫磺菊素(十)花色素类结构特点就是基本母核得C环无羰基,1位氧原子以(金羊)盐形式存在。

花色素类(Anthocyanidins)花色素在中药中多以苷得形式存在。花色素就是使植物得花、果、叶、茎等呈现蓝、紫、红等颜色得色素,如矢车菊苷元、飞燕草苷元与天竺葵苷元以及它们所组成得苷最为常见。矢车菊苷元R1=OHR2=H飞燕草苷元R1=R2=OH天竺葵苷元R1=R2=H(十一)黄烷醇类根据C环上得3,4位存在羟基得情况分为黄烷-3-醇与黄烷-3,4-二醇。1、黄烷-3-醇类,又称儿茶素类黄烷三醇类(Flavan-3-ols)主要存在于含鞣质得木本植物中。如儿茶素为中药儿茶中得主要成分,有四个光学异构体,但在植物中主要有异构体两个,儿茶素与表儿茶素。儿茶素表儿茶素2、黄烷-3,4-二醇类又称为无色花色素类,黄烷－3,4－二醇类(Flavan-3,4-diols)这类化合物在植物界中分布很广,在含鞣质得木本植物与蕨类植物中更为多见,如:无色矢车菊素。无色矢车菊素(十二)双苯吡酮类又称为苯骈色原酮,母核由苯环与色原酮得2,3位骈合而成,就是一种特殊类型得黄酮类化合物。常分布在龙胆科、藤黄科、百合科植物当中,如:存在于石苇、芒果叶与知母叶中具有止咳去痰作用得异芒果素。异芒果素(十四)其她黄酮类包括双黄酮类,黄酮木脂体类,生物碱型黄酮等。银杏素榕碱水飞蓟素天然黄酮类化合物多与糖形成苷而存在,并且由于糖得种类、数量、连接位置及连接方式不同,组成了各种各样得黄酮苷类。组成黄酮苷得糖类主要有单糖、双糖类、三糖类与酰化糖类。单糖类:D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖及D-葡萄糖醛酸等。双糖类:槐糖(glc

1→2glc)、龙胆二糖(glc

1→6glc)、芸香糖(rh

1→6glc)、新橙皮糖(rh

1→2glc)、刺槐二糖(rh

1→6gal)等。三糖类:龙胆三糖(glc

1→6glc

1→2fru)、槐三糖(glc

1→2glc

1→2glc)等。酰化糖类:2-乙酰葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖(caffeoylglucose)等。黄酮苷中糖得连接位置与苷元得结构类型有关。如黄酮醇类常形成3-,7-,3’-,4‘-单糖苷,或3,7-,3,4’-及7,4’-双糖链苷等。第三节黄酮类化合物得性质1、性状:黄酮类化合物多为晶状固体,少数(如黄酮甙类)为无定形粉末。2、旋光性:甙元中,二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇具有手性碳,具旋光性,其余黄酮类无旋光性。甙类结构中含糖得部分结构,故均有旋光性,且多为左旋。3、颜色:黄酮得色原酮部分无色,在2-位上引入苯环后,即形成交叉共轭体系,使共轭链延长,因而呈现出颜色。黄酮、黄酮醇及其甙类多显灰黄~黄色,查耳酮为黄~橙黄色,异黄酮类显微黄色,二氢黄酮、二氢黄酮醇不显色。在上述黄酮、黄酮醇分子中,尤其在7-倍及4’-位引入—OH及—OCH3等供电基后,化合物得颜色加深,但在其它位置引入—OH、—OCH3等供电基影响较小。花色甙及其甙元得颜色随pH不同而改变,一般显红色(pH<7)、紫色(pH8、5)、蓝色(pH>8、5)等颜色。4、溶解度:

一般来说,游离甙元难溶或不溶于水,易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱液中。花色甙元(花青素)类以离子形式存在,水溶度较大。黄酮类甙元分子中羟基数越多,水中得溶解度越大。黄酮甙类,水溶性比相应甙元为大;糖链越长,则水溶度越大,一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中,但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。5、酸碱性:酸性黄酮类化合物因分子中多含有游离酚羟基,故显酸性,可溶于碱性溶液中。酸性强弱顺序依次为:7,4’-二OH>7-或4’-OH>一般酚OH>5-OH。此性质可用于提取、分离及鉴定工作。碱性黄酮类化合物分子中γ-吡喃酮环上得1-位氧原子,因有未共用得电子对,故表现微弱得碱性,可与强无机酸,如浓硫酸、盐酸等生成(佯)盐,但生成得(金羊)盐不稳定,加水可分解。第四节检识1)盐酸-镁粉(或锌粉)反应:黄酮呈橙黄至微红色;黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红-紫红色,少数显绿-蓝色。查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。2)四氢硼钠(钾)反应:NaBH4就是对二氢黄酮(醇)类化合物专属性较高得一种还原剂。与二氢黄酮(醇)类化合物产生红-紫红色。其它黄酮类化合物均不显色。3)铝盐:生成得络合物多为鲜黄色(λmax=415nm),并有荧光,可用于定性及定量分析。常用试剂为1%三氯化铝或硝酸铝溶液。4)锆盐:多用2%二氯氧化锆(ZrOCl2)甲醇溶液。黄酮类化合物分子中有游离得3-或5-OH存在时,均可反应生成黄色得锆络合物(区分)。

3-OH,4-酮基络合物得稳定性>5-OH,4-酮基络合物。当反应液中接着加入枸橼酸后,5-羟基黄酮得黄色溶液显著褪色,而3-羟基黄酮溶液仍呈鲜黄色。5)镁盐:二氢黄酮、二氢黄酮醇类与醋酸镁得甲醇溶液,加热可显天蓝色荧光,若具有C5-OH,色泽更为明显。而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄~橙黄~褐色。6)铅盐:常用1%醋酸铅及碱式醋酸铅水溶液,碱式醋酸铅反应能力更强,可生成黄~红色沉淀。7)硼酸显色反应:在无机酸或有机酸存在条件下,5-羟基黄酮及2-羟基查耳酮可与硼酸反应,呈亮黄色。8)碱性试剂显色反应:在日光及紫外光下,通过纸斑反应,观察样品用氨蒸气与其她碱性试剂处理后得色变深得情况。当分子中有邻二酚羟基取代或3,4’-二羟基取代时,在碱液中很快氧化,最后生成绿棕色沉淀。

9)三氯化铁反应:多数黄酮类化合物因分子中含有游离酚羟基,与三氯化铁水溶液或醇溶液可产生正反应,呈现颜色;当含有氢键缔合得酚羟基时,颜色更明显。二、色谱检识1、纸层析(PPC)苷类成分可采用双向展开,第一相展开采用醇性溶剂,如BAW系统(正丁醇:醋酸:水4:1:5上层);第二相展开用水性溶剂,如氯仿:醋酸:水(3:6:1)苷元则多采用醇性溶剂。花色苷及其苷元,可用含盐酸或醋酸得溶剂。显色剂:2%三氯化铝甲醇液(紫外光下检测);1%FeCl3/1%K3Fe(CN)6(1:1)混合液。2、薄层层析(TLC)

１)硅胶薄层用于弱极性黄酮较好。常用:甲苯:甲酸甲酯:甲酸(5:4:1);苯:甲醇(95:5)或苯:甲醇:冰醋酸(35:5:5)等。

２)聚酰胺层析适用范围广,可分离含游离酚羟基或其苷类。常用展开系统:乙醇:水(3:2);丙酮:水(1:1)等。

第五节提取与分离黄酮类化合物在植物体内大部分与糖结合成苷,一部分以游离形式存在。一提取1醇提取法适用于苷及苷元得提取根绝苷及苷元极性得不同选择不同醇得浓度缺点:脂溶性杂质较多2热水提取法适应于黄酮苷得提取缺点:水溶性杂质提取液易变质3碱提取酸沉淀法适用于含酚羟基得黄酮苷及苷元黄酮苷类虽有,难溶于酸性水,易溶于碱性水,故可用碱性水提取,再于碱水提取液中加入酸,黄酮苷类即可沉淀析出。此法简便易行,如芦丁、橙皮苷、黄芩苷得提取都应用了这个方法。在用碱酸法进行提取纯化时,应当注意所用碱液浓度不宜过高,以免在强碱性下,尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时,酸性也不宜过强,以免生成(金羊)盐,致使析出得黄酮类化合物又重新溶解,降低产品收率。当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时,如花、果类药材,宜用石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶液进行提取,以使上述含羟基得杂质生成钙盐沉淀,不致溶出。这也有利于黄酮类化合物得纯化处理。一、提取黄酮苷类以及极性稍大得苷元(如羟基黄酮等),一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取。一些多糖苷类可用沸水提取。在提取花青素类化合物时,可加入少量酸(0、1%盐酸,应当慎用,避免发生水解)。大多数黄酮苷元宜用用氯仿、乙醚、醋酸乙酯等中极性溶剂提取,而对多甲氧基黄酮类游离苷元,甚至可用苯等低极性溶剂进行提取。

对得到得粗提物可进行下列精制处理,常用方法有:(一)溶剂萃取法利用黄酮类化合物与混入得杂质极性不同,选用不同溶剂进行地萃取可达到精制纯化目得。例如植物叶子得醇浸液,可用石油醚处理,以便除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。而某些药料水溶液则可加入多倍量浓醇,以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。(二)PH梯度萃取法黄酮苷元混合物溶于有机溶剂,依次用碱性由弱到强得溶液萃取,得到得就是酸性由强到弱得苷元。(酸性强得先出)(二)梯度pH萃取法梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同得黄酮苷元得分离。根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同得性质,可以将混合物溶于有机溶剂(如乙醚)后,依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0、2%NaOH及4%NaOH水溶液萃取,来达到