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miR-101通过靶基因GJA1参与再灌注性心律失常发生的机制研究的任务书任务书：miR-101通过靶基因GJA1参与再灌注性心律失常发生的机制研究一、研究背景再灌注性心律失常是冠心病患者在急性心肌梗死后，经过再灌注后出现的一种严重并发症，严重影响患者的生存质量和预后。目前对该病的发病机制还不完全清楚，缺乏有效的临床治疗手段。miRNA是一类长约21-24个核苷酸的非编码RNA分子，能够负调控调节基因的表达，进而影响重要的生理过程。目前有研究发现miR-101在心脏疾病发生中发挥重要作用，而gapjunctionalpha1(GJA1)是miR-101的预测靶基因，目前已有文献表明GJA1参与了心脏电传导过程。因此，本研究将探究miR-101在再灌注性心律失常发生中的作用及其与GJA1的配合，为寻找治疗该疾病的新靶点提供参考。二、研究目的本研究旨在探究miR-101在再灌注性心律失常发生中的作用及其与GJA1的相互作用，揭示其作用机制，为心脑血管疾病的诊断和治疗提供新的思路和方法。三、研究内容和方法1.对miR-101及其靶基因GJA1进行筛选使用生物信息学方法对miR-101及其预测靶基因GJA1进行筛选，通过多个公共数据库进行交叉验证，筛选出符合标准的miR-101和GJA1。2.构建miR-101和GJA1转染模型通过miRNA转染技术，将miR-101和siRNA靶向GJA1转染入心肌细胞中，利用荧光显微镜观察转染效果，并进行RNA提取，qPCR验证转染效果。同时建立miR-101和GJA1过表达的细胞模型，以便进行后续实验的比较分析。3.观察miR-101和GJA1对心肌细胞电传导的影响利用细胞电生理技术观察miR-101和GJA1对心肌细胞电传导的影响，并进行临床样本的实验验证。4.探究miR-101和GJA1对钙调蛋白的调控作用通过Westernblot分析，比较miR-101和GJA1的过表达和下调与心肌细胞内钙调蛋白的表达情况，探索miR-101和GJA1对心肌细胞内钙调蛋白的调节作用。5.观察miR-101和GJA1对再灌注性心律失常的影响建立小鼠冠状动脉阻塞再灌注模型，在各组小鼠中扩增miR-101或GJA1基因，观察再灌注后小鼠心肌的预存活状况和心肌梗死面积，比较不同组之间的差异，以揭示miR-101和GJA1对再灌注性心律失常发生的影响。四、研究预期成果1.筛选出miR-101及其预测靶基因GJA1并进行相关实验验证2.揭示miR-101和GJA1在心脏电传导中的作用机制，并且发现miR-101可逆转GJA1的表达，并通过电生理学和临床的实验验证。3.探究miR-101和GJA1对心肌细胞内钙调蛋白的调节作用4.阐明miR-101和GJA1在再灌注性心律失常发生中的作用机制，并为治疗该疾病提供新的思路和方法。五、研究意义本研究将探究miR-101在再灌注性心律失常发生中的作用及其与GJA1的配合，为寻

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