miR-27a及其靶基因PLK-2在喉癌中作用和功能研究的任务书

miR--27a及其靶基因PLK--2在喉癌中作用和功能研究的任务书任务书任务名称：miR-27a及其靶基因PLK-2在喉癌中作用和功能研究研究背景：喉癌是一种常见的头颈肿瘤，由于病因复杂，目前尚无针对喉癌的有效治疗方法。因此，研究miRNAs及其靶基因在喉癌中的作用和功能，有望为喉癌的治疗提供新的思路和策略。miRNAs（microRNAs）是一类非编码RNA分子，通过与mRNA的3'非编码区域结合，调节mRNA的翻译和降解。越来越多的研究表明，miRNAs在肿瘤的发生和发展中发挥重要作用。PLK-2（Polo-likekinase2）是一个靶基因，与细胞周期的调节紧密相关。近些年来的研究表明，PLK-2在肿瘤的发生和发展中也起着重要的作用。因此，研究miR-27a及其靶基因PLK-2在喉癌中的作用和功能，将有助于深入理解喉癌的发病机制，为喉癌的早期筛查和治疗提供新的思路和方法。研究内容：1.检测miR-27a在喉癌组织和正常组织中的表达水平，并通过生物信息学方法，预测其靶基因。2.构建miR-27a的上调和下调模型。分别对miR-27a上调和下调的细胞株进行检测，比较其与对照组细胞株的生长、转移、凋亡等指标。3.筛选miR-27a中的靶基因，并通过qRT-PCR等方法确定其表达水平。进一步研究miR-27a和靶基因PLK-2在喉癌中的相互作用和调节机制。4.利用CRISPR/Cas9技术，对PLK-2基因进行敲除或过表达，检测其对喉癌细胞的增殖、转移、凋亡等生物学行为的影响。5.通过免疫荧光、免疫印迹等方法，研究miR-27a和PLK-2对喉癌细胞的信号通路和蛋白质水平的调控作用。研究意义：1.深入理解miR-27a在喉癌中的作用和功能，有助于发现新的早期诊断标志物和治疗靶点。2.通过研究miR-27a调节PLK-2的机制，可以更好地理解PLK-2在喉癌发生和发展中的作用。3.研究结果有望为开发新的治疗喉癌的策略和新药物提供理论依据。4.拓展miRNAs在肿瘤领域中的应用，为肿瘤治疗的精准化提供新的方法和思路。预期成果：1.成功构建miR-27a上调和下调的细胞模型。2.筛选出miR-27a的靶基因，并证明靶基因PLK-2在喉癌中发挥了重要作用。3.深入研究miR-27a和PLK-2的相互作用和调节机制，为喉癌的治疗和预防提供理论指导。4.发表相关研究论文，提高课题组的学术水平和影响力。研究成员及分工：1.主要研究人员：负责课题的整体设计、实验操作和数据分析，及论文撰写。2.实验技术人员：负责实验的具体操作和数据采集、整理、分析。3.相关专家：提供咨询和指导，以确保实验的规范性和有效性。经费预算：本研究的经费主要用于实验室耗材采购、设备维护、专业人员的薪资、出版费用等方面。总预算为100万元，根据实际需要进行调整。时间计划：本研究的时间计划为两年。第一年主要完成miR-27a和PLK-2的表达水平检测及靶基因筛选，并构建上调和下调的细胞模型；第二年主要开展细胞模型的实验验证和机制探究，以及论文撰写和发表。如实验进度情况出现延误，时间计划可做适当调整。参考文献：1.ChenW,ZhengR,BaadePD,etal.CancerstatisticsinChina,2015[J].CA:acancerjournalforclinicians,2016,66(2):115-132.2.CalinGA,DumitruCD,ShimizuM,etal.Frequentdeletionsanddown-regulationofmicro-RNAgenesmiR15andmiR16at13q14inchroniclymphocyticleukemia[J].ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica,2002,99(24):15524-15529.3.LioCJ,Laird-OffringaIA.MinimizingRNAprecipitationformicroRNAmicroarrayanalysesinbiofluids[J].Methods,2013,59(1):S22-S27.4.GanslmayerM,EderT,PapadopoulosT,etal.Polo-likekinase2isamediatorofhedgehogsurvivalsignalinginchondrosarcoma[J].Journalofpathology,2016,238(4):543-554.5.WangY,ChenT,HuangH,etal.miR-27a-3pandmiR-27a-5pinhibitcoloncancer