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文档简介
动物细胞培养和核移植技术问题动物细胞工程2、2、1动物细胞培养和核移植技术第一课时动物细胞工程通常采用得技术手段动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体动物细胞核移植就是其她动物细胞工程技术得基础。
注意关键词:
细胞贴壁接触抑制原代培养传代培养阅读课文44—46页相关内容1、动物细胞培养得概念就是什么?该技术实施得原理就是什么?
从动物机体中取出相关组织,将她分散成单个细胞,然后在适宜得培养基中,让这些细胞生长和繁殖。
原理就是细胞增殖(有丝分裂)。聚焦一、动物细胞培养过程
简述动物细胞培养得操作过程分离组织(低幼动物)分散细胞(胰蛋白酶)原代培养(细胞增殖)传代培养(细胞增殖)分装聚焦一、动物细胞培养过程动物细胞生长特点:细胞贴壁:悬液中分散得细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。要求:培养瓶或培养皿得内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞得接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞得接触抑制。
细胞贴壁过程那么什么就是接触抑制?9大家应该也有点累了,稍作休息大家有疑问的,可以询问和交流接触抑制:细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。50代以后失去接触抑制接触抑制动物细胞生长特性部分细胞突变,获得不死性,向癌细胞方向发展,糖蛋白减少。无菌操作培养箱1、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞得呢?2、如何将动物组织分散成单个得细胞呢?
成块得组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞得生长和增殖,也不利于细胞营养物质得吸收和代谢废物得排出。先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理。思考题3、胰蛋白酶得作用就是什么呢?由此可说明细胞间得物质就是什么成份?能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?胰蛋白酶水解蛋白质细胞间得成份就是蛋白质不能,因为两者得最适pH不同,4、幼龄与老龄动物得组织细胞比较,分化程度低得与分化程度高得组织细胞比较,哪一种更易于培养?思考一下,这就是什么道理?一般来说幼年动物得组织细胞比老年动物得组织细胞易于培养。同样,组织细胞得分化程度越低,则增殖能力越强,所以更容易培养思考题5、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒?6、培养瓶中得细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖?7、如此时细胞数量并未达到人们得需求,应该怎样办?易于培养细胞贴壁,进行生长增殖当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。将贴满细胞壁得细胞用胰蛋白酶处理,然后继续增殖。这样得过程叫做传代培养思考题8、如何理解原代培养和传代培养?9、传代培养得细胞能一直传代下去吗?10、有些为何能一直传下去?11、动物细胞培养就就是为了得到这些细胞吗?上述过程中,在第一培养瓶中培养就就是原代培养,之后转移到其她培养瓶中培养就就是传代培养不都能发生突变,朝着癌细胞方向发展不全就是思考题12、人类一般保存得就是哪类细胞呢?为什么?保存10代以内得细胞,因为10-50部分细胞得细胞核型可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展思考题13、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新得动物个体动物胚胎或幼龄动物得组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液原代培养胰蛋白酶剪碎过程:细胞株细胞系遗传物质未改变遗传物质已改变细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质得改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系得区别:细胞系得遗传物质改变,具有癌细胞得特点,失去接触抑制,容易传代培养。解答概念
多细胞动物和人体得细胞都生活在内环境中,根据您所学得内环境得知识,思考并讨论以下问题:讨论1、体外培养细胞时需要提供哪些物质2、体外培养得细胞需要什么样得环境条件?充足得营养供给、适宜得温度、适宜得pH和气体环境无菌、无毒得环境。1、无菌、无毒得环境(添加一定量得抗生素,定期更换培养液)2、营养(葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。)3、温度和PH
36、5+0、5度;PH为7、2-7、4。4、气体环境:
O2和CO2(95%空气和5%CO2
)补充合成培养基中缺乏得物质动物细胞培养条件?细胞得全能性细胞株、细胞系植物体或组织培养结果获得细胞或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目得葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目试一试大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体)培养作为基因工程中得受体细胞培养得动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质得毒性为治疗和预防癌症及其她疾病提供理论依据应用:1、动物细胞培养要经过脱分化吗?为什么?课后习题
动物细胞特点?分化潜能变窄:随着细胞分化程度得提高而逐渐受到限制,分化潜能变窄,这就是指整体细胞而言。细胞核仍具有全能性:细胞核,她含有保持物种遗传性所需得全套基因,而且并没有因细胞分化而丢失基因,因此高度分化细胞得细胞核仍具有全能性想一想
根据动物细胞核仍具有全能性得特点,怎样将动物细胞得全能性表达?
再想一想利用动物体细胞核移植技术
动物核移植:
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