2025届新疆阿克苏市农一师高级中学高三联合考试生物试题试卷含解析

2025届新疆阿克苏市农一师高级中学高三联合考试生物试题试卷注意事项：1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列关于遗传物质的探索的叙述，正确的是（）A．将加热杀死的S型菌与R型活菌混合后注射到小鼠体内，小鼠体内的S型菌都由R型菌转化而来B．将S型菌的DNA、蛋白质、多糖等物质分别与R型活菌混合培养，培养基中均有R型菌C．赫尔希和蔡斯的实验中，离心后细菌主要存在于沉淀物中，新形成的噬菌体都带有35SD．用B型TMV（烟草花叶病毒）的RNA和A型TMV的蛋白质重组而成的病毒感染烟草，会得到2种子代病毒2．某种H+-ATPase是一种位于膜上的载体蛋白，具有ATP水解酶活性，能够利用水解ATP释放的能量逆浓度梯度跨膜转运H+。①将某植物气孔的保卫细胞悬浮在一定pH的溶液中（假设细胞内的pH高于细胞外），置于暗中一段时间后，溶液的pH不变。②再将含有保卫细胞的该溶液分成两组，一组照射蓝光后溶液的pH明显降低；另一组先在溶液中加入H+-ATPase的抑制剂（抑制ATP水解），再用蓝光照射，溶液的pH不变。根据上述实验结果，下列推测不合理的是（）A．H+-ATPase位于保卫细胞质膜上，蓝光能引起细胞内的H+转运到细胞外B．蓝光通过保卫细胞质膜上的H+-ATPase发挥作用，使H+以主动运输的方式跨膜运输C．H+-ATPase逆浓度梯度跨膜转运H+所需的能量可由蓝光直接提供，从而建立膜两侧质子的电化学势能D．溶液中的H﹢不能以自由扩散的方式透过细胞膜进入保卫细胞3．某种遗传病由X染色体上的b基因控制。一对夫妇（XBXb×XBY）生了一个患病男孩（XbXbY）。下列叙述正确的是（）A．患病男孩同时患有多基因遗传病和染色体异常病B．若患病男孩长大后有生育能力，产生含Y精子的比例理论上为1/3C．患病男孩的染色体异常是由于母亲减数第一次分裂X染色体未分离导致的D．患病男孩的致病基因XbY来自祖辈中的外祖父或外祖母4．科研人员提取出真核细胞中的RNA后，将其作为探针与基因组DNA进行分子杂交，得到如下的实验结果。以下关于实验的叙述中，正确的是（）A．图中突起的环状结构是DNA或RNA分子B．不完全杂交的原因是DNA中存在非基因片段C．科研人员提取的RNA经过了剪接加工过程D．RNA经逆转录后再做分子杂交，不会出现突起5．下列有关细胞的生物膜的叙述中，正确的是（）A．小麦细胞中的中心体与核糖体不具有生物膜B．内质网、高尔基体的膜都参与血红蛋白的合成、运输以及分泌等过程C．不借助细胞膜表面的受体，也能进行细胞间的信息交流D．动物细胞融合与细胞膜的选择透过性有关6．研究表明，核糖体在细胞内不是以整体的形式存在，而是在产生mRNA后，构成核糖体的两个亚基直接结合在mRNA上，形成完整的核糖体，进行蛋白质的合成。下列相关叙述错误的是（）A．细胞内的RNA均由DNA转录而来，只有mRNA携带控制蛋白质合成的信息B．mRNA的合成可与核糖体的组装同步进行，且一个mRNA上可结合多个核糖体C．核糖体结合在mRNA上的初始位置是起始密码，且与起始密码相同的密码子只出现一次D．核糖体与mRNA的结合处有两个tRNA的结合位点，且一个tRNA可先后结合两个位点二、综合题：本大题共4小题7．（9分）人和哺乳动物的尿液中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。如何有效分解尿素就成了某校生物研究性学习的课题，课题组成员欲从土壤中筛选能高效分解尿素的细菌。请回答下列问题：（1）给农作物施用尿素，主要是为了给植物提供______________元素。为了筛选能分解尿素的细菌，在配制培养基时需要添加KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_______________________（答出两点即可）。（2）要从土壤中分离分解尿素的细菌，必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有_____________________（至少答2种）。分离实验的关键思路是_____________________。（3）为对分离得到的菌种作进一步的鉴定，可以用____________（选择/鉴别）培养基，即在固体培养基中加入酚红试剂，菌落周围会出现_________________，该区域越大，表明该菌株利用尿素的能力_______________。8．（10分）COVID-19感染者的主要症状是发热、干咳、全身乏力等，其中发热与机体的免疫增强反应有关。COVID-19感染人体后，作用于免疫细胞，后者分泌白介素-1、白介素-6、肿瘤坏死因子和干扰素，这些物质可作为内源性致热原进一步引起发热症状。根据所学知识回答下列问题：（1）白介素-1、白介素-6、肿瘤坏死因子和干扰素等属于免疫系统中的_______。（2）内源性致热原直接或通过中枢介质作用于下丘脑____________的神经细胞，通过系列生理活动使产热增加，如肝脏和骨骼肌细胞中有机物氧化放能增强；散热减少，如_____________（至少答两点），体温达到一个更高的调定点，此时机体的产热量______（填“大于”、“小于”或“等于”）散热量。（3）研究表明，在一定范围内的体温升高(41℃～42℃)对特异性免疫应答有普遍增强影响，其中包括T细胞介导的_________和B细胞介导的_______。9．（10分）微生物食品检测是通过微生物检验，判断食品加工环境及食品卫生情况，能够对食品被细菌汚染的程度作出正确的评价，为各项卫生管理工作提供依据，目前受到高度关注。请回答下列问题。方法一：微生物培养法（1）培养细菌最常用到牛肉膏蛋白胨培养基，其中蛋白胨的作用是_____________________________。（2）对食品中具有生命活性的微生物进行检测，看其数量是否超标，通常采用的接种方法是___。培养一段时间后，通过对菌落_________________的观察也可初步确定待检样本中的微生物种类。（3）用上述方法计算每克样品中菌株数的公式为（C/V）×M，其中C代表______________。若培养结果中，有的菌落连成一片，最可能的原因是______________________________________（答出一点即可）。方法二：特殊物质检测法（4）将待测样品的微生物接种在含有14C标记的葡萄糖的培养液中，培养一段时间，通过测定生物代谢所产_______________________（填一种气体）的放射性强度，间接推测待测样品中微生物的数量。但该方法只适用于部分食品中微生物的检测，理由是____________________________________________。10．（10分）回答下列（一）、（二）小题：（一）开发山楂果醋恰好让山楂中的有机酸丰富了果醋的酸味，同时也弥补生食山楂酸味大的缺陷，具体酿制山楂果醋分为以下三个阶段，请将具体过程补充完整。（1）制备山楂果原汁：选成熟的山楂果，在清水冲洗山楂果_______（填“之前”或“之后”）去梗。将山楂果切片并去籽，再添加_______，酶解适宜时间后压榨取果汁。（2）乙醇发酵：由于山楂果原汁_______，故发酵液中添加适量蔗糖，以获得酒精含量较高的果酒。果汁中加入活化的________后，在适宜环境下发酵一段时间，当发酵液中停止_______，发酵完毕待过滤，或发酵至_______，上清液即为果酒，用虹吸法取出。（3）醋酸发酵：将醋化醋杆菌进行扩大培养后，经检查菌体生长正常并无杂菌污染后接种于山楂酒-水中进行发酵，整个发酵过程需要通入_______。在发酵后期加入1．3~1．4%的食盐，其目的是调味和_______，以防止果醋被发酵分解。（二）下图为转基因抗虫烟草的培育流程，①②③④表示过程，其中②表示利用农杆菌转入受体细胞。回答下列相关问题：（1）在①过程构建重组质粒时，若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段，使两者形成粘性末端用于拼接，这种方法的明显缺点是目的基因和质粒________（答出2点即可）。另外，影响拼接效率的主要因素，除以上缺点和盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素外，还有_______（答出2点即可）。（2）在②过程中，将图示重组Ti质粒导入农杆菌时可用______处理农杆菌，以提高转化效率。操作之后，需要特定的培养基对农杆菌进行筛选，其原因是_______，最终筛选到的对象在相应选择培养基上的存活情况是________。（3）在③过程常通过调节_______的适当配比，从愈伤组织诱导出芽和根的_____，并由此再生出新植株。获得转基因烟草后，再通过[④]_______过程实现多个世代组织培养。11．（15分）雌性家鼠的体细胞中有两条X染色体，但只有一条X染色体上的基因可以表达，另一条则因严重固缩而失活，在同一个体的体细胞中，X染色体的表达或失活是随机的。家鼠的鼠色与浅色分别由X染色体上的B、b基因控制，现有两只染色体正常的鼠的杂交实验，结果如下表:性别雌雄P鼠色浅色F1鼠色浅色相同鼠色F2鼠色:鼠色浅色相间=1:1鼠色:浅色=1:1请回答下列问题:（1）失活的X染色体上的基因由于不能正常进行__________过程而无法表达。（2）F1中的雌鼠的基因型为__________，其表现为鼠色浅色相间的原因是____________________。（3）若亲本杂交多次，偶然在子代中出现一只鼠色浅色相间雄鼠，该雄鼠出现的可能原因是________。（4）一对尾部正常的鼠交配，产下多只子代，其中仅有一只雄鼠的尾部异常。有人认为，该异常鼠的出现是基因突变的直接结果（控制尾型的基因显隐性未知，突变只涉及一个亲本常染色体上对等位基因中的一个基因）。假设这只雄鼠能正常生长、发育和繁殖，且后代可成活。请设计一杂交方案来验证该说法是否正确（写出实验思路，相应的结果及结论）。_________________________________________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

肺炎双球菌体外转化实验与噬菌体侵染细菌实验的比较：肺炎双球菌体外转化实验噬菌体侵染细菌实验不同点方法不同直接分离：分离S型细菌的DNA、多糖、蛋白质等，分别与R型菌混合培养同位素标记：分别用32P和35S标记DNA和蛋白质结论不同证明DNA是遗传物质，蛋白质不是遗传物质证明DNA是遗传物质，不能证明蛋白质不是遗传物质（因蛋白质没有进入细菌体内）相同点①均使DNA和蛋白质区分开，单独处理，观察它们各自的作用；②都遵循了对照原则；③都能证明DNA是遗传物质，但都不能证明DNA是主要的遗传物质【详解】A、将加热杀死的S型细菌与R型活菌混合后注射到小鼠体内，小鼠体内的S型细菌一部分是由S型细菌转化而来，一部分是由转化后的R型细菌分裂而来，A错误；B、将S型细菌的DNA、蛋白质、多糖等物质分别与R型活菌混合培养，培养基中均有R型菌，B正确；C、赫尔希和蔡斯的实验中，离心后细菌主要存在于沉淀物中，新形成的噬菌体都不含35S，C错误；D、用B型TMV（烟草花叶病毒）的RNA和A型TMV的蛋白质重组而成的病毒感染烟草，会得到B型TMV一种病毒，D错误。故选B。2、C【解析】

题意分析：H+-ATPase是身兼载体和ATP酶双重角色一种特殊载体。由实验可知，蓝光可以使细胞液中的H+进入细胞外液，导致溶液的pH明显降低；而H+-ATPase的抑制剂（抑制ATP水解）阻止细胞液中的H+进入细胞外液。【详解】A、分析题意可知，H+-ATPase位于保卫细胞质膜上，蓝光能够引起细胞内的H+转运到细胞外，A正确；B、蓝光通过保卫细胞质膜上的H+-ATPase发挥作用导致H+逆浓度梯度跨膜运输，即主动运输跨膜运输，B正确；C、H+-ATPase逆浓度梯度跨膜转运H+所需的能量由ATP水解提供，C错误；D、由①中的实验可知，最初细胞内pH高于细胞外，即细胞内H+浓度低于细胞外，但暗处理后溶液浓度没有发生变化，说明溶液中的H+不能通过自由扩散的方式透过细胞膜进入保卫细胞，D正确。

故选C。3、D【解析】

某种遗传病由X染色体上的b基因控制，属于伴X隐性遗传病。一对夫妇（XBXb×XBY）所生后代的基因型应为XBXB、XBXb、XBY、XbY，现生了一个患病男孩（XbXbY），说明发生了染色体变异，是母亲减数第二次分裂后期着丝点分裂后，含b基因的X染色体未分离导致的。【详解】A、患病男孩同时患有单基因遗传病和染色体异常病，A错误；B、若患病男孩长大后有生育能力，产生的配子有XbXb、Y、Xb、XbY，比例为1：1：2：2，其中含Y精子的比例理论上为1/2，B错误；C、患病男孩的染色体异常是由于母亲减数第二次分裂两条X染色单体未分离导致的，C错误；D、患病男孩的致病基因Xb来自母亲，母亲的致病基因Xb来自祖辈中的外祖父或外祖母，D正确。故选D。4、C【解析】

真核细胞还是原核细胞的基因都是由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区组成；真核细胞基因的编码区是间隔的，不连续的，分为外显子：能够编码蛋白质的序列和内含子：不能编码蛋白质的序列。【详解】A、真核生物RNA与基因组DNA杂交后，突起的是基因中的内含子片段，是DNA而非RNA，A错误；B、RNA是基因转录出来的，没有配对的部分也是基因DNA中的内含子片段，而不是非基因片段，B错误；C、转录出来的RNA经过剪接加工，切除了内含子对应的RNA片段，C正确；D、RNA逆转录形成的cDNA也没有内含子，与基因组DNA杂交仍然会出现突起，D错误。故选C。5、C【解析】

真核细胞内存在着丰富的膜结构，他们将细胞内部划分成相对独立的区室，保证多种生命活动高效有序的进行，这些膜结构又可以相互转化，在结构和功能上构成一个统一整体。细胞膜和包括核膜在内的多种细胞器膜，共同构成细胞的生物膜系统。生物膜主要是由磷脂和蛋白质分子组成。【详解】A、小麦细胞中没有中心体，A错误；B、血红蛋白不属于分泌蛋白，B错误；C、高等植物细胞之间通过胞间连丝相互连接，可以通过胞间连丝进行物质交换和信息交流，C正确；D、动物细胞融合与细胞膜的流动性有关，D错误。故选C。6、C【解析】

翻译：翻译是指以mRNA为模板，合成具有一定氨基酸排列顺序的蛋白质的过程。翻译的场所：细胞质的核糖体上。翻译的本质：把DNA上的遗传信息通过mRNA转化成为蛋白质分子上氨基酸的特定排列顺序。【详解】A、细胞内的RNA都由DNA转录而来，包括tRNA、rRNA、mRNA等，但是只有mRNA携带控制蛋白质合成的信息，A正确；B、在原核细胞中及线粒体、叶绿体中，转录和翻译可以同时进行，即mRNA的合成可与核糖体的组装同步进行，一个mRNA上可结合多个核糖体，短时间内翻译出大量的蛋白质，B正确；C、mRNA上核糖体结合的初始位置是起始密码，一个mRNA与起始密码相同的密码子可出现多次，只是在mRNA的其他位置为普通的密码子，C错误；D、核糖体与mRNA结合的位置有两个tRNA的结合位点，在翻译的过程中，处在第二个位点的tRNA在与前面的氨基酸结合后，随着核糖体的移动，移到第一个位点，D正确。故选C。本题易错点是C选项中区分mRNA上的起始密码子和普通密码子，理解翻译过程的进行。二、综合题：本大题共4小题7、氮为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌用尿素为唯一氮源的培养基选择培养鉴别红色越强【解析】

1、实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌（如接种环）、干热灭菌（如培养皿）、高压蒸汽灭菌（如培养基）等。2、可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH升高，使指示剂变为红色。【详解】（1）尿素中含N元素，给农作物施用尿素，主要是为了给植物提供氮元素。为了筛选能分解尿素的细菌，在配制培养基时需要添加KH2PO4

和Na2HPO4，其作用有为细菌生长提供无机营养，同时还可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH。（2）用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等都必需是无菌的，常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌。要从土壤中分离目标菌（能高效分解尿素的细菌），关键的实验思路是：用尿素为唯一氮源的培养基选择培养，在该培养基上不能合成脲酶的微生物无法分解尿素获取氮源，生长受到抑制。（3）分解尿素的细菌产生的脲酶催化尿素分解生成氨，使pH值上升，酚红试剂在碱性条件下由无色变红色，菌落周围出现红色环。因此，为对分离得到的菌种作进一步的鉴定，常在固体培养基中加入酚红试剂，该培养基为鉴别培养基，若菌落周围出现红色环，可以初步鉴定该种细菌为目标菌。菌落周围的红色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力越强。本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记土壤中分解尿素的细菌的分离原理，掌握相关实验原理和操作，再结合所学的知识准确答题。8、免疫活性物质体温调节中枢汗腺分泌减少，毛细血管收缩，血流量减少等于细胞免疫体液免疫【解析】

免疫系统组成：免疫器官、免疫细胞和免疫活性物质。免疫包括非特异性免疫（第一道防线：皮肤、粘膜等；第二道防线：体液中杀菌物质和吞噬细胞）和特异性免疫（第三道防线：体液免疫和细胞免疫）。【详解】（1）免疫活性物质指由免疫细胞或其他细胞产生的发挥免疫作用物质，如：抗体、淋巴因子、溶菌酶等。因此免疫细胞分泌的白介素-1、白介素-6、肿瘤坏死因子和干扰素属于免疫系统中的免疫活性物质。（2）体温调节中枢在下丘脑，内源性致热原可直接作用于体温调节中枢的神经细胞，散热减少的途径包括：汗腺分泌减少，毛细血管收缩，血流量减少。人体维持体温恒定的原理是机体的产热量=散热量，体温达到一个更高的调定点，此时机体的产热量等于散热量。（3）在一定范围内的体温升高（41℃～42℃）对特异性免疫应答有普遍增强影响，其中包括T细胞介导的细胞免疫和B细胞介导的体液免疫。答题关键在于掌握免疫调节和体温调节过程，建立知识内在联系，形成知识网络。9、提供碳源、氮源、维生素稀释涂布平板法形状、颜色、大小、隆起程度等某个稀释度下平板上生长的平均菌落数接种的菌液浓度过高CO2有的微生物不利用葡萄糖；有的微生物氧化分解葡萄糖的同时不产生气体等【解析】

牛肉膏蛋白胨培养基属于完全培养基，其中蛋白胨主要提供碳源、氮源、维生素。微生物培养中的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法两种，稀释涂布平板法相比较于平板划线法可以计数。【详解】（1）牛肉膏蛋白胨培养基，其中蛋白胨的作用是提供碳源、氮源、维生素；（2）若要对微生物进行计数，一般选择的接种方法为稀释涂布平板法；待长出菌落以后，一般通过菌落的形状、颜色、大小、隆起程度等特征进行初步辨认；（3）用稀释涂布平板法进行计数时，常常需要数出平板上长出的菌落数，一般一个菌落表示一个活细胞，再比上滴加到平板的体积后乘稀释倍数，所以C表示的是某个稀释度下平板上生长的平均菌落数；若平板上菌落连成一片，没有分散成单个菌落，很可能是因为接种的菌液浓度过高；（4）微生物以葡萄糖为代谢底物，分解葡萄糖释放二氧化碳，因此可以通过测定生物代谢所产生的二氧化碳的放射性强度，间接推测待测样品中微生物的数量；但对于不利用葡萄糖的微生物，或者分解葡萄糖后不产生二氧化碳的微生物是无法用该方法检测的。该题主要考察了微生物培养的基础知识，难点为微生物计数时若使用稀释涂布平板法，需要掌握计数的原理，由于在平板上长出的一个菌落相当于最开始的一个活菌，因此用培养后的菌落数比上体积则是密度，如果进行了稀释，还需要乘稀释倍数，用公式总结为（C/V）×M。10、之后果胶酶（和果胶甲酯酶）含糖量较低干酵母（悬液）出现气泡酵母下沉无菌空气/氧气抑制杂菌反向拼接/倒接、（自身）环化且的基因的浓度、质粒的浓度、反应时间氯化钙CaCl2不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒在含四环素培养基上存活，在含青霉素培养基上死亡营养物质和生长调节剂/植物激素项端分生组织继代培养【解析】

1.酿酒和制醋是最古老的生物技术。与酒和醋的生产有关的微生物分别是酵母菌和醋杆菌，它们各有不同的菌种。菌种的不同，所产生的酒和醋的风味也不同。本实验的内容是制作果酒和果醋，所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖进行酒精发酵(乙醇发酵)的产物。酵母菌只有在无氧条件下才能进行酒精发酵，即将葡萄糖氧化成乙醇，而且当培养液中乙醇的浓度超过16%时，酵母菌就会死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反应式如下。醋杆菌在有氧条件下才能将乙醇氧化为醋酸，醋杆菌所产生的醋酸可使培养液中醋酸的含量高达13%。2.基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．【详解】（一）（1）制备山楂果原汁通常选成熟的山楂果，为了避免杂菌污染，通常在用清水冲洗山楂果之后去梗。将山楂果切片并去籽，为了提高出汁率和澄清度，通常需要添加果胶酶（和果胶甲酯酶）处理，酶解适宜时间后压榨取果汁。（2）乙醇发酵时通常需要在发酵液中添加适量蔗糖，以弥补山楂果原汁含糖量较低的不足，同时也是为了满足酵母菌发酵需要的底物量，从而获得酒精含量较高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母（悬液）后，置于适宜环境下进行发酵，由于酵母菌无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳，所以在发酵过程中会有气泡产生，当发酵液中不再出现气泡时，意味着发酵完成，然后过滤获得果酒；也可发酵至酵母下沉后，用虹吸法取出上清液即为果酒。（3）醋酸发酵中，由于醋化醋杆菌在有氧气的条件下将酒精变为为乙醛，进而变为乙醇，所以整个发酵过程需要通入无菌空气/氧气。在发酵后期加入1．3~1．4%的食盐，食盐起到了调味和抑制杂菌的作用，进而防止果醋被其他微生物发酵分解。（二）（1）①为构建基因表达载体的过程，若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段，则两者会出现相同的粘性末端从而使得拼接变得容易，但这种方法存在明显的缺点是在拼接时会出现反向拼接/倒接、（自身）环化等情况。影响拼接效率的因素主要有盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素，除此外，还有且的基因的浓度、质粒的浓度和反应时间也会影响拼接的效率。（2）②过程为将目的基因导入受体细胞的过程，将图示重组Ti质粒导入农杆菌时，为了提高导入的成功率，可用氯化钙CaCl2处理农杆菌，以提高转化效率。因为导入的成功率较低，也就是说，并不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒，可能有的导入的是普通质粒，或者没有导入成功，所以需要在特定的培养基对农杆菌进行筛选，由于图中重组质粒上含有标记基因四环素抗性基因，而抗青霉素的基因被破坏，为了筛选出成功导入重组质粒的农杆菌，需要将待筛选的农杆菌分别接种在含