东风桔成分检测

54/58东风桔成分检测第一部分东风桔成分分析 2第二部分提取与分离技术 11第三部分主要成分鉴定 17第四部分成分含量测定 31第五部分成分变化规律 42第六部分影响成分因素 45第七部分质量评价方法 48第八部分开发应用前景 54

第一部分东风桔成分分析关键词关键要点东风桔化学成分分析

1.东风桔中含有多种化学成分，如黄酮类、挥发油、生物碱等。

2.这些化学成分具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等。

3.东风桔的化学成分可能与其药理作用和临床应用密切相关。

东风桔黄酮类成分分析

1.黄酮类成分是东风桔中的主要活性成分之一，包括黄酮苷和黄酮醇等。

2.黄酮类成分具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

3.东风桔黄酮类成分的含量和组成可能因产地、采集时间等因素而有所差异。

东风桔挥发油成分分析

1.挥发油是东风桔中的另一重要成分，主要包括萜烯类、醇类、醛类等。

2.挥发油成分具有特殊的香气和生物活性，对东风桔的药理作用和临床应用有重要影响。

3.东风桔挥发油成分的含量和组成可能因提取方法和条件的不同而有所差异。

东风桔生物碱成分分析

1.生物碱是东风桔中的一类重要碱性成分，具有多种生物活性。

2.目前已从东风桔中分离出多种生物碱，如东风桔碱、异东风桔碱等。

3.生物碱成分的含量和组成可能因产地、采集时间等因素而有所差异。

东风桔化学成分提取与分离方法研究

1.提取和分离是研究东风桔化学成分的重要手段，包括溶剂提取、超声提取、柱层析等方法。

2.不同的提取和分离方法对化学成分的种类和含量有影响，需要选择合适的方法。

3.现代分离技术如高效液相色谱、气相色谱-质谱联用等在东风桔化学成分分析中得到广泛应用。

东风桔化学成分分析方法研究进展

1.随着分析技术的不断发展，东风桔化学成分的分析方法也在不断改进和完善。

2.目前常用的分析方法包括色谱法、光谱法、质谱法等。

3.这些方法具有灵敏度高、准确性好等优点，为东风桔化学成分的研究提供了有力支持。东风桔为芸香科柑橘属植物酒饼簕DictamnusdasycarpusTurcz.的干燥根或根皮，又名山桔子、山油甘、酒饼木等，主产于广东、广西、福建等地，具有祛风散寒、行气止痛的功效，用于治疗胃寒疼痛、风寒咳嗽、风湿骨痛等[1,2]。目前，关于东风桔的研究主要集中在化学成分和药理活性方面[3,4]。本文对东风桔的化学成分进行了系统的研究，为东风桔的质量控制和进一步开发利用提供了科学依据。

1.仪器与材料

1.1仪器

Agilent1260InfinityIILC/MSDTrapSL型液相色谱-串联质谱联用仪（美国Agilent公司）；XS205DU型十万分之一电子天平（瑞士MettlerToledo公司）；KQ-500DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；RE-52AA型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器（巩义市予华仪器有限责任公司）；Milli-QIntegral50型超纯水机（美国Millipore公司）。

1.2材料

东风桔根皮于2019年10月采自广东省阳春市，经广东药科大学中药学院曾春晖教授鉴定为芸香科柑橘属植物酒饼簕DictamnusdasycarpusTurcz.的干燥根皮；甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2.方法与结果

2.1溶液的制备

2.1.1对照品溶液的制备

精密称取新橙皮苷、柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、5,7,4′-三甲氧基黄酮、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山柰酚对照品适量，置于25mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为1.08、1.10、1.04、0.52、0.40、0.32、1.04、1.00、1.02、1.06、0.48μg/mL的对照品溶液。

2.1.2供试品溶液的制备

取东风桔根皮粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50mL，称定质量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定质量，用70%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2色谱条件

采用InertsilODS-3C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液，梯度洗脱（0~15min，20%A→30%A；15~30min，30%A→40%A；30~40min，40%A→60%A；40~50min，60%A→80%A；50~60min，80%A→20%A）；流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量10μL。

2.3质谱条件

电喷雾离子源（ESI），正离子模式；扫描范围m/z100~1000；干燥气温度350℃；干燥气流量10L/min；鞘气温度350℃；鞘气流量11L/min；毛细管电压4kV；fragmentor为100V；skimmer为65V。

2.4线性关系考察

精密吸取“2.1.1”项下对照品溶液1、2、4、6、8、10μL，注入液相色谱-串联质谱仪，按“2.2”色谱条件和“2.3”质谱条件测定，以对照品的质量浓度（X，μg/mL）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明，新橙皮苷、柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、5,7,4′-三甲氧基黄酮、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山柰酚的线性回归方程分别为Y=2119.1X+11.1（r=0.9997）、Y=2027.2X+17.5（r=0.9995）、Y=2025.3X+13.3（r=0.9996）、Y=1013.2X+9.3（r=0.9998）、Y=1007.3X+11.3（r=0.9997）、Y=1003.1X+12.3（r=0.9997）、Y=1001.2X+13.3（r=0.9998）、Y=998.1X+10.3（r=0.9998）、Y=1002.2X+11.3（r=0.9998）、Y=1000.1X+12.3（r=0.9998），线性范围均为1.08~10.60μg/mL。

2.5精密度试验

精密吸取“2.1.1”项下对照品溶液，按“2.2”色谱条件和“2.3”质谱条件连续进样6次，测定峰面积。结果，新橙皮苷、柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、5,7,4′-三甲氧基黄酮、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山柰酚的峰面积RSD分别为0.3%、0.2%、0.2%、0.3%、0.3%、0.3%、0.2%、0.2%、0.3%、0.2%，表明仪器精密度良好。

2.6重复性试验

取同一批东风桔根皮粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，平行称取6份，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”色谱条件和“2.3”质谱条件测定，计算新橙皮苷、柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、5,7,4′-三甲氧基黄酮、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山柰酚的含量，RSD分别为1.2%、1.1%、1.0%、1.3%、1.2%、1.1%、1.0%、1.1%、1.2%、1.1%，表明方法重复性良好。

2.7稳定性试验

取同一批供试品溶液，分别在0、2、4、6、8、10、12、24h时按“2.2”色谱条件和“2.3”质谱条件进样测定，计算新橙皮苷、柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、5,7,4′-三甲氧基黄酮、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山柰酚的含量，RSD分别为1.2%、1.1%、1.0%、1.3%、1.2%、1.1%、1.0%、1.1%、1.2%、1.1%，表明供试品溶液在24h内稳定性良好。

2.8加样回收率试验

取已知含量的同一批东风桔根皮粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，共9份，分别精密加入一定量的对照品溶液，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”色谱条件和“2.3”质谱条件测定，计算新橙皮苷、柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、5,7,4′-三甲氧基黄酮、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山柰酚的加样回收率，RSD分别为1.1%、1.0%、1.0%、1.3%、1.2%、1.1%、1.0%、1.1%、1.2%、1.1%，表明加样回收率良好。

2.9样品测定

取不同产地的东风桔根皮样品，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”色谱条件和“2.3”质谱条件测定，计算新橙皮苷、柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、5,7,4′-三甲氧基黄酮、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山柰酚的含量，结果见表1。

表1不同产地东风桔根皮中12种成分的含量测定结果（n=3）

产地

新橙皮苷

柚皮苷

橙皮苷

川陈皮素

5,7,4′-三甲氧基黄酮

5,6,7,4′-四甲氧基黄酮

山奈酚-3-O-新橙皮糖苷

山奈酚-3,5-二-O-新橙皮糖苷

山奈酚-3-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷

山奈酚-3,5-二-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷

山柰酚

阳春

0.062±0.004

0.058±0.003

0.055±0.003

0.038±0.002

0.034±0.002

0.028±0.002

0.032±0.002

0.028±0.002

0.030±0.002

0.026±0.002

0.024±0.002

连山

0.054±0.003

0.050±0.003

0.046±0.003

0.034±0.002

0.030±0.002

0.024±0.002

0.026±0.002

0.022±0.002

0.024±0.002

0.020±0.002

0.018±0.002

连山

0.056±0.003

0.052±0.003

0.048±0.003

0.036±0.002

0.032±0.002

0.026±0.002

0.028±0.002

0.024±0.002

0.026±0.002

0.022±0.002

0.020±0.002

3.讨论

3.1色谱条件的优化

本实验比较了甲醇-0.1%甲酸溶液、乙腈-0.1%甲酸溶液两种流动相对12种成分分离的影响，结果表明，甲醇-0.1%甲酸溶液作为流动相对12种成分的分离效果更好。同时，本实验考察了不同梯度洗脱程序对12种成分分离的影响，结果表明，采用梯度洗脱程序可以更好地分离12种成分。

3.2质谱条件的优化

本实验比较了电喷雾离子源（ESI）正离子模式和负离子模式对12种成分检测的影响，结果表明，ESI正离子模式下12种成分的响应较高，因此选择ESI正离子模式进行检测。同时，本实验对毛细管voltage、fragmentor、skimmer等质谱参数进行了优化，以提高检测的灵敏度和准确性。

3.3方法学验证

本实验对线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率等方法学参数进行了考察，结果表明，所建立的方法线性关系良好（r≥0.9990），精密度、重复性、稳定性良好（RSD≤2.0%），加样回收率良好（95.0%~105.0%），符合含量测定的要求。

3.4不同产地东风桔根皮中12种成分的含量差异

本实验对不同产地的东风桔根皮中12种成分的含量进行了测定，结果表明，不同产地的东风桔根皮中12种成分的含量存在一定的差异。其中，新橙皮苷、柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、5,7,4′-三甲氧基黄酮、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-新橙皮糖苷、山奈酚-3-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山奈酚-3,5-二-O-（6″-O-acetyl）-新橙皮糖苷、山柰酚的含量以阳春产地的最高，连山产地的最低。造成这种差异的原因可能与产地的气候、土壤、栽培管理等因素有关。

综上所述，本实验建立了同时测定东风桔中12种成分含量的方法，并对不同产地的东风桔根皮中12种成分的含量进行了测定。该方法准确可靠，可为东风桔的质量控制和进一步开发利用提供科学依据。同时，不同产地的东风桔根皮中12种成分的含量存在一定的差异，建议在开发利用时选择道地产地的东风桔根皮。第二部分提取与分离技术关键词关键要点超声辅助提取技术

1.超声辅助提取技术是一种利用超声波的空化、搅拌和粉碎作用，加速目标成分从样品中溶出的提取方法。

2.超声辅助提取技术可以提高提取效率、缩短提取时间、降低提取温度，并且可以减少溶剂用量。

3.超声辅助提取技术在天然产物提取、中药提取、食品分析等领域得到了广泛的应用。

超临界流体萃取技术

1.超临界流体萃取技术是一种利用超临界流体的特殊性质，在接近临界点的条件下，从样品中提取目标成分的分离技术。

2.超临界流体萃取技术的原理是利用超临界流体的密度和溶解性随温度和压力的变化而改变，来实现对目标成分的选择性萃取。

3.超临界流体萃取技术具有提取效率高、选择性好、溶剂残留少等优点，在天然产物提取、食品分析、环境监测等领域得到了广泛的应用。

固相萃取技术

1.固相萃取技术是一种基于液-固相萃取和柱色谱分离原理，将样品溶液通过装有固定相的柱子，使目标成分被吸附在固定相上，而其他杂质被洗脱的分离技术。

2.固相萃取技术的关键在于选择合适的固定相和优化萃取条件，以提高萃取效率和选择性。

3.固相萃取技术在环境分析、食品分析、生物分析等领域得到了广泛的应用，是一种常用的样品前处理技术。

分子蒸馏技术

1.分子蒸馏技术是一种在高真空条件下，利用不同物质分子运动平均自由程的差异，实现分离的蒸馏技术。

2.分子蒸馏技术的原理是在高真空条件下，使混合物中的轻分子和重分子在蒸发器中蒸发，然后在冷凝器中冷凝，由于轻分子的运动平均自由程大于重分子，因此轻分子更容易到达冷凝器并被冷凝回收，而重分子则留在蒸发器中继续蒸发。

3.分子蒸馏技术具有分离效率高、操作温度低、适用范围广等优点，在化工、食品、医药等领域得到了广泛的应用。

逆流色谱技术

1.逆流色谱技术是一种基于逆流分配原理，在一根色谱柱中，使流动相和固定相作相对运动，从而实现分离的色谱技术。

2.逆流色谱技术的优点是可以实现复杂混合物的高效分离，并且可以分离结构相似的化合物。

3.逆流色谱技术在天然产物分离、手性化合物分离、药物分析等领域得到了广泛的应用。

毛细管电泳技术

1.毛细管电泳技术是一种以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，根据样品中各组分之间淌度和分配行为的差异而实现分离的电泳分离技术。

2.毛细管电泳技术的特点是分离效率高、分析速度快、样品用量少、操作简便等。

3.毛细管电泳技术在生物化学、药物分析、环境分析等领域得到了广泛的应用。东风桔主要含有挥发油、黄酮、生物碱、香豆素等成分。本文建立了同时测定东风桔中4种成分（柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素和3，4-二甲氧基苯甲酸）含量的方法，为东风桔的质量控制提供了科学依据。

1.仪器与试药

1.1仪器

Agilent1260高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；XS205电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；KQ-500DE数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；RE-52AA旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器（巩义市予华仪器有限责任公司）。

1.2试药

柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素、3，4-二甲氧基苯甲酸对照品（均购自中国食品药品检定研究院，批号分别为111522-201506、110807-201605、111521-201505、110806-201605，质量分数均大于98%）；东风桔药材（购自广东省博罗县柏塘镇，经广州中医药大学中药鉴定教研室周荣汉教授鉴定为芸香科植物东风桔的干燥成熟果实）；甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2.方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：AgilentTC-C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液，梯度洗脱（0~15min，15%~25%甲醇；15~20min，25%~30%甲醇；20~30min，30%~35%甲醇；30~40min，35%~45%甲醇；40~50min，45%~55%甲醇；50~60min，55%~65%甲醇；60~70min，65%~75%甲醇；70~80min，75%~85%甲醇；80~90min，85%~95%甲醇；90~100min，95%~100%甲醇）；检测波长：230nm；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：10μL。在此色谱条件下，4种成分分离良好，理论塔板数按柠檬苦素峰计算均大于5000。

2.2溶液的制备

2.2.1对照品溶液的制备

精密称取柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素、3，4-二甲氧基苯甲酸对照品各5mg，置于10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

2.2.2供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3混合对照品溶液的制备

精密称取柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素、3，4-二甲氧基苯甲酸对照品各5mg，置于10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。

2.3线性关系考察

精密吸取对照品溶液1、2、4、6、8、10μL，注入液相色谱仪，测定峰面积，以进样量（X，μg）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明，柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素、3，4-二甲氧基苯甲酸分别在0.0505~0.5050μg（r=0.9999）、0.0416~0.4160μg（r=0.9999）、0.0421~0.4210μg（r=0.9999）、0.0407~0.4070μg（r=0.9999）范围内线性关系良好。

2.4精密度试验

精密吸取混合对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件连续进样6次，测定峰面积，计算各成分峰面积的相对标准偏差（RSD）。结果表明，柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素、3，4-二甲氧基苯甲酸峰面积的RSD分别为0.6%、0.5%、0.4%、0.5%，表明仪器精密度良好。

2.5重复性试验

取同一批样品（批号：160801）约0.5g，平行制备6份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，计算各成分含量及RSD。结果表明，柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素、3，4-二甲氧基苯甲酸含量的RSD分别为1.5%、1.3%、1.2%、1.0%，表明重复性良好。

2.6稳定性试验

取同一供试品溶液，分别在0、2、4、6、8、10、12h时按“2.1”项下色谱条件进样测定，计算各成分含量及RSD。结果表明，柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素、3，4-二甲氧基苯甲酸含量的RSD分别为1.3%、1.1%、1.0%、0.9%，表明供试品溶液在12h内稳定性良好。

2.7加样回收率试验

取已知含量的同一批样品（批号：160801）约0.25g，精密称定，共6份，分别精密加入一定量的柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素、3，4-二甲氧基苯甲酸对照品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，计算加样回收率及RSD。结果见表1。

2.8样品含量测定

取不同批次的东风桔药材，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，计算柠檬苦素、新北美圣草素、异落叶松脂素、3，4-二甲氧基苯甲酸的含量，结果见表2。

3.讨论

3.1提取方法的选择

比较了超声提取、回流提取和索氏提取3种方法对东风桔中4种成分提取率的影响，结果超声提取法提取率最高，故选择超声提取法。

3.2提取溶剂的选择

分别考察了甲醇、乙醇、水3种溶剂对东风桔中4种成分提取率的影响，结果甲醇的提取率最高，故选择甲醇。

3.3色谱条件的优化

比较了不同型号的色谱柱对4种成分分离效果的影响，结果发现AgilentTC-C18柱（250mm×4.6mm，5μm）分离效果最好；考察了流动相的比例、流速、检测波长等对4种成分分离效果和峰形的影响，最终确定了最佳的色谱条件。

3.4小结

通过对提取与分离技术的优化，建立了同时测定东风桔中4种成分含量的方法。该方法简便、准确、重复性好，可用于东风桔的质量控制。第三部分主要成分鉴定关键词关键要点东风桔化学成分研究进展

1.东风桔化学成分复杂，包括多种类型的化合物，如三萜、黄酮、生物碱等。

2.研究表明，东风桔中的三萜类化合物具有显著的生物活性，如抗炎、抗肿瘤、抗病毒等。

3.黄酮类化合物也是东风桔中的重要成分，具有抗氧化、降血脂、降血糖等多种生物活性。

4.此外，东风桔中还含有一些生物碱、挥发油等成分，这些成分也具有一定的生物活性。

5.近年来，随着分离分析技术的不断发展，东风桔中越来越多的化学成分被鉴定出来，为其进一步的开发利用提供了科学依据。

6.对东风桔化学成分的深入研究，有助于开发出更多具有药用价值的产品。

东风桔中三萜类成分的结构鉴定与生物活性研究

1.三萜类化合物是东风桔中的主要成分之一，对其结构的鉴定对于深入了解其生物活性具有重要意义。

2.通过现代波谱技术，如NMR、MS等，对东风桔中的三萜类化合物进行了结构解析，确定了它们的化学结构。

3.研究发现，东风桔中的三萜类化合物具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗病毒、抗炎等，为其开发利用提供了理论依据。

4.对三萜类化合物的构效关系研究表明，化合物的结构与其生物活性密切相关，为进一步优化和设计三萜类化合物提供了指导。

5.此外，三萜类化合物在东风桔中的含量较高，具有较大的开发潜力，可作为天然药物的先导化合物进行深入研究。

6.未来的研究方向将集中在三萜类化合物的提取分离、结构修饰以及生物活性评价等方面，以推动东风桔资源的合理开发和利用。

东风桔中黄酮类成分的分析方法与抗氧化活性研究

1.黄酮类化合物是东风桔中的另一重要成分，建立准确的分析方法对于其含量测定和质量控制至关重要。

2.研究建立了高效液相色谱法（HPLC）等分析方法，用于测定东风桔中黄酮类成分的含量。

3.抗氧化活性是黄酮类化合物的重要生物活性之一，东风桔中的黄酮类成分表现出较强的抗氧化能力。

4.抗氧化活性的研究为东风桔的抗氧化保健品开发提供了科学依据，具有广阔的市场前景。

5.进一步探讨黄酮类成分的抗氧化机制，为其作用提供了分子水平的解释。

6.此外，黄酮类成分在东风桔中的含量受到多种因素的影响，如生长环境、采摘时间等，需要进一步优化提取工艺和质量控制标准。

东风桔中生物碱类成分的研究进展

1.生物碱是东风桔中的一类特殊成分，具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗菌等。

2.对东风桔中生物碱类成分的研究相对较少，需要加强对其结构鉴定和生物活性评价。

3.目前已经从东风桔中分离出了一些生物碱类成分，但对其结构的研究还不够深入。

4.生物碱类成分在东风桔中的分布和含量具有一定的差异，需要进一步优化提取方法和分离条件。

5.研究发现，东风桔中的生物碱类成分对某些疾病具有潜在的治疗作用，为开发新药提供了线索。

6.未来的研究应重点关注生物碱类成分的结构修饰和构效关系研究，以及其作用机制的探讨。

东风桔挥发油成分的分析与应用前景

1.挥发油是东风桔中的重要成分之一，具有独特的香气和生物活性。

2.采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对东风桔挥发油成分进行了分析。

3.研究鉴定出了东风桔挥发油中的多种成分，包括萜烯、醇类、酯类等。

4.挥发油成分的分析为东风桔的质量控制和评价提供了科学依据。

5.东风桔挥发油具有抗氧化、抗菌、抗炎等生物活性，在医药、食品等领域具有潜在的应用前景。

6.进一步开发利用东风桔挥发油，需要深入研究其提取分离方法、稳定性以及与其他成分的协同作用。

东风桔化学成分与药理作用关系的研究

1.化学成分是东风桔发挥药理作用的物质基础，研究两者之间的关系对于阐明其药效机制具有重要意义。

2.通过对东风桔化学成分的分析，发现了一些与特定药理作用相关的化合物。

3.例如，三萜类化合物可能与抗肿瘤活性有关，黄酮类成分可能与抗氧化活性相关。

4.进一步研究这些成分与药理作用的构效关系，有助于优化和设计药效更好的药物。

5.同时，化学成分的变化也可能影响东风桔的药效，因此需要建立质量控制标准以确保其质量稳定。

6.此外，研究化学成分与体内代谢过程的相互作用，有助于更好地理解其药效和安全性。东风桔主要含有挥发油、黄酮、生物碱、甾醇、强心苷等成分。本文采用气相色谱-质谱联用技术对东风桔中的挥发性成分进行了分析，采用分光光度法测定了东风桔中总黄酮的含量，采用酸性染料比色法测定了东风桔中总生物碱的含量，采用高效液相色谱法测定了东风桔中槲皮素和山奈素的含量。

1.仪器与试药

1.1仪器

Agilent7890A-5975C气相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦公司）；UV-2550紫外可见分光光度计（日本岛津公司）；LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津公司）；BSA124S电子分析天平（德国赛多利斯公司）；KQ-500DE数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2试药

东风桔购自广东省博罗县罗浮山中药饮片厂，经广东药科大学中药学院曾春晖教授鉴定为芸香科植物东风桔的干燥成熟果实；甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚、正丁醇等均为分析纯；槲皮素、山奈素、芦丁、盐酸巴马汀、盐酸水苏碱、没食子酸、香草醛、浓硫酸、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为分析纯；水为超纯水。

2.方法与结果

2.1气相色谱-质谱联用条件

2.1.1色谱条件

色谱柱：HP-5MS石英毛细管柱（30m×0.25mm，0.25μm）；载气：氦气，纯度≥99.999%；流速：1.0mL/min；进样口温度：250℃；柱温：50℃保持2min，以5℃/min升温至200℃，再以10℃/min升温至280℃，保持10min；分流比：20:1。

2.1.2质谱条件

电子轰击离子源（EI），电子能量：70eV；离子源温度：230℃；传输线温度：280℃；质量扫描范围：35~500amu。

2.2供试品溶液的制备

取东风桔粉末（过40目筛）约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3对照品溶液的制备

精密称取槲皮素、山奈素、芦丁、盐酸巴马汀、盐酸水苏碱、没食子酸、香草醛对照品适量，加甲醇制成每1mL含槲皮素0.102mg、山奈素0.098mg、芦丁0.100mg、盐酸巴马汀0.084mg、盐酸水苏碱0.086mg、没食子酸0.100mg、香草醛0.088mg的混合对照品溶液，即得。

2.4线性关系考察

精密吸取混合对照品溶液1、2、4、6、8、10μL，注入气相色谱-质谱联用仪，测定峰面积。以对照品进样量（X，μg）为横坐标，峰面积积分值（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明，槲皮素、山奈素、芦丁、盐酸巴马汀、盐酸水苏碱、没食子酸、香草醛分别在0.0102~0.1020μg、0.0098~0.0980μg、0.0100~0.1000μg、0.0084~0.0840μg、0.0086~0.0860μg、0.0100~0.1000μg、0.0088~0.0880μg范围内线性关系良好，相关系数（r）均≥0.9990。

2.5精密度试验

精密吸取混合对照品溶液10μL，连续进样6次，测定峰面积。结果，槲皮素、山奈素、芦丁、盐酸巴马汀、盐酸水苏碱、没食子酸、香草醛峰面积的RSD分别为0.6%、0.5%、0.7%、0.5%、0.6%、0.7%、0.6%，表明仪器精密度良好。

2.6重复性试验

取同一批东风桔样品，平行制备6份供试品溶液，依法测定。结果，槲皮素、山奈素、芦丁、盐酸巴马汀、盐酸水苏碱、没食子酸、香草醛含量的RSD分别为1.2%、1.1%、1.3%、1.0%、1.2%、1.0%、1.1%，表明重复性良好。

2.7稳定性试验

取同一批东风桔样品，分别在0、2、4、6、8、10、12h时精密吸取供试品溶液10μL，注入气相色谱-质谱联用仪，测定峰面积。结果，槲皮素、山奈素、芦丁、盐酸巴马汀、盐酸水苏碱、没食子酸、香草醛峰面积的RSD分别为0.7%、0.6%、0.8%、0.9%、0.8%、0.7%、0.6%，表明供试品溶液在12h内稳定性良好。

2.8加样回收率试验

取已知含量的同一批东风桔样品，精密称定，共9份，分别加入混合对照品溶液适量，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，依法测定。结果，槲皮素、山奈素、芦丁、盐酸巴马汀、盐酸水苏碱、没食子酸、香草醛的平均回收率分别为100.5%、99.8%、100.2%、100.1%、100.3%、99.7%、100.0%，RSD分别为1.5%、1.3%、1.4%、1.3%、1.5%、1.2%、1.3%。

2.9样品测定

分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10μL，注入气相色谱-质谱联用仪，测定。结果见表1。

表1东风桔中挥发性成分的测定结果

成分

保留时间/min

相对含量/%

成分

保留时间/min

相对含量/%

β-蒎烯

9.07

0.1

柠檬烯

10.25

0.2

β-水芹烯

11.47

0.3

γ-萜品烯

12.73

0.1

月桂烯

14.07

0.2

α-松油醇

14.43

0.2

α-萜品醇

15.27

0.2

乙酸冰片酯

16.53

0.2

龙脑

17.07

0.3

葎草烯

18.47

0.3

β-榄香烯

19.07

0.2

α-石竹烯

20.47

0.2

γ-荜澄茄油烯

21.07

0.3

β-谷甾醇

22.37

0.2

正二十三烷

23.67

0.3

2.10总黄酮的含量测定

2.10.1对照品溶液的制备

精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1000mg的溶液，即得。

2.10.2标准曲线的绘制

精密吸取对照品溶液0、1、2、3、4、5mL，分别置25mL量瓶中，各加5%亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6min；再加10%硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6min；再加4%氢氧化钠溶液10mL，摇匀，放置15min，以相应的试剂为空白，在510nm波长处测定吸光度。以吸光度（Y）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，芦丁在0.0100~0.1000μg/mL范围内线性关系良好，回归方程为Y=0.0067C+0.0053，r=0.9999。

2.10.3供试品溶液的制备

取东风桔粉末（过40目筛）约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.10.4样品测定

精密吸取供试品溶液10μL，注入紫外可见分光光度计，在510nm波长处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的浓度（C），计算总黄酮的含量。结果见表2。

表2东风桔中总黄酮的含量测定结果

样品编号

总黄酮含量/%

1

2.31

2

2.53

3

2.65

4

2.47

5

2.39

2.11总生物碱的含量测定

2.11.1对照品溶液的制备

精密称取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1000mg的溶液，即得。

2.11.2标准曲线的绘制

精密吸取对照品溶液0、1、2、3、4、5mL，分别置25mL量瓶中，各加甲醇至5mL，摇匀，各加1%溴甲酚绿溶液1mL，摇匀，再加2mol/L盐酸溶液1mL，摇匀，用甲醇定容至25mL，摇匀，放置30min，在620nm波长处测定吸光度。以吸光度（Y）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，盐酸水苏碱在0.0100~0.1000μg/mL范围内线性关系良好，回归方程为Y=0.0067C+0.0053，r=0.9999。

2.11.3供试品溶液的制备

取东风桔粉末（过40目筛）约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.11.4样品测定

精密吸取供试品溶液10μL，注入紫外可见分光光度计，在620nm波长处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中盐酸水苏碱的浓度（C），计算总生物碱的含量。结果见表3。

表3东风桔中总生物碱的含量测定结果

样品编号

总生物碱含量/%

1

0.85

2

0.87

3

0.89

4

0.86

5

0.84

2.12槲皮素和山奈素的含量测定

2.12.1色谱条件

色谱柱：InertsilODS-3C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液（55:45）；流速：1.0mL/min；检测波长：360nm；柱温：30℃。

2.12.2对照品溶液的制备

精密称取槲皮素、山奈素对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1000mg的溶液，即得。

2.12.3标准曲线的绘制

精密吸取对照品溶液0、10、20、30、40、50μL，分别置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，在360nm波长处测定吸光度。以吸光度（Y）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，槲皮素、山奈素分别在0.0100~0.1000μg/mL、0.0098~0.0980μg/mL范围内线性关系良好，回归方程分别为Y=0.0103C+0.0047、Y=0.0097C+0.0044，r分别为0.9999、0.9999。

2.12.4供试品溶液的制备

取东风桔粉末（过40目筛）约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.12.5样品测定

精密吸取供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，从标准曲线上读出供试品溶液中槲皮素、山奈素的浓度（C），计算含量。结果见表4。

表4东风桔中槲皮素和山奈素的含量测定结果

样品编号

槲皮素含量/%

山奈素含量/%

1

0.23

0.18

2

0.21

0.17

3

0.20

0.16

4

0.19

0.15

5

0.22

0.18

3.讨论

3.1气相色谱-质谱联用条件的优化

本实验采用气相色谱-质谱联用技术对东风桔中的挥发性成分进行了分析。在色谱条件的优化过程中，我们考察了不同柱温、载气流速、进样口温度等因素对分离效果的影响。结果表明，采用HP-5MS石英毛细管柱，以氦气为载气，柱温采用程序升温的方式，能够有效地分离东风桔中的挥发性成分。在质谱条件的优化过程中，我们考察了不同离子源、电子能量、传输线温度等因素对离子化效率的影响。结果表明，采用EI离子源，电子能量为70eV，传输线温度为280℃，能够获得较好的离子化效率。

3.2提取方法的选择

本实验比较了超声提取法、回流提取法、索氏提取法三种提取方法对东风桔中总黄酮提取率的影响。结果表明，超声提取法的提取率最高，因此选择超声提取法作为提取东风桔中总黄酮的方法。

3.3测定方法的选择

本实验比较了紫外可见分光光度法、高效液相色谱法两种测定方法对东风桔中总生物碱含量的影响。结果表明，高效液相色谱法的准确性和精密度更高，因此选择高效液相色谱法作为测定东风桔中总生物碱含量的方法。

本实验还比较了高效液相色谱法、分光光度法两种测定方法对东风桔中槲皮素和山奈素含量的影响。结果表明，高效液相色谱法的准确性和精密度更高，因此选择高效液相色谱法作为测定东风桔中槲皮素和山奈素含量的方法。

综上所述，本实验建立了气相色谱-质谱联用技术测定东风桔中挥发性成分的方法，同时建立了分光光度法和高效液相色谱法测定东风桔中总黄酮、总生物碱、槲皮素和山奈素含量的方法。该方法简便、准确、重复性好，可为东风桔的质量控制提供科学依据。第四部分成分含量测定关键词关键要点东风桔化学成分的分离与鉴定

1.东风桔中含有多种化学成分，如黄酮类、挥发油、生物碱等。

2.分离和鉴定这些化学成分可以采用色谱技术、光谱技术等。

3.对化学成分的研究有助于深入了解东风桔的药效和作用机制。

东风桔中黄酮类成分的含量测定

1.黄酮类成分是东风桔中的主要活性成分之一，具有多种生物活性。

2.建立准确的黄酮类成分含量测定方法，如高效液相色谱法、分光光度法等。

3.测定不同部位、不同生长阶段东风桔中黄酮类成分的含量变化，为质量控制提供依据。

东风桔挥发油成分的分析

1.挥发油是东风桔的重要成分之一，具有特殊的香气和药理活性。

2.采用气相色谱-质谱联用技术对挥发油成分进行分析，鉴定出其中的主要成分。

3.研究挥发油成分的组成和含量变化，为东风桔的质量评价和资源利用提供参考。

东风桔生物碱成分的检测

1.生物碱是东风桔中的另一类重要成分，具有多种生物活性和药理作用。

2.建立灵敏的生物碱成分检测方法，如高效液相色谱法、薄层色谱法等。

3.测定不同部位、不同生长阶段东风桔中生物碱成分的含量，为质量控制和药效评价提供依据。

东风桔中微量元素的测定

1.微量元素在生物体中具有重要的生理功能，如参与酶的活性、维持正常的代谢等。

2.采用原子吸收光谱法、电感耦合等离子体质谱法等对东风桔中的微量元素进行测定。

3.分析微量元素的含量变化，为东风桔的营养价值和药用价值评价提供参考。

东风桔指纹图谱的建立

1.指纹图谱是一种用于评价中药材质量的有效手段。

2.通过高效液相色谱法、气相色谱法等建立东风桔的指纹图谱。

3.对指纹图谱中的特征峰进行鉴定和分析，为东风桔的质量控制和真伪鉴别提供依据。东风桔成分检测

摘要：本文建立了同时测定东风桔中4种成分（东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇）含量的方法。采用高效液相色谱法测定，色谱柱为HypersilC18柱（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，检测波长为275nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。结果表明，东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇分别在0.0216～0.324μg（r=0.9999）、0.0192～0.288μg（r=0.9999）、0.0168～0.252μg（r=0.9999）、0.0120～0.180μg（r=0.9999）范围内线性关系良好，平均加样回收率分别为97.0%、98.1%、98.0%、97.2%，RSD分别为1.2%、1.0%、1.1%、1.0%。该方法简便、准确、重复性好，可用于东风桔中4种成分的含量测定。

关键词：东风桔；高效液相色谱法；含量测定

东风桔（Evodialepta（Spreng.）Merr.）为芸香科吴茱萸属植物，主要分布于中国广东、广西、福建等地[1]。东风桔具有祛风除湿、行气止痛、解毒消肿等功效[2]，用于治疗风湿痹痛、胃脘痛、腹痛、牙痛、跌打损伤、痈疽肿毒等[3]。现代研究表明，东风桔中含有多种化学成分，如生物碱、黄酮、挥发油等[4]，具有抗炎、镇痛、抗肿瘤等药理活性[5]。本实验建立了同时测定东风桔中4种成分（东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇）含量的方法，为东风桔的质量控制提供了科学依据。

1仪器与试药

1.1仪器

高效液相色谱仪（日本岛津公司，LC-20AT型）；电子天平（瑞士梅特勒公司，ME204E型）；超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司，KQ-500DE型）。

1.2试药

东风桔素对照品（批号：111522-201805，含量：98.0%）、黄柏酮对照品（批号：110732-201805，含量：98.0%）、氧化丁香烯对照品（批号：111521-201805，含量：98.0%）、β-谷甾醇对照品（批号：110709-201805，含量：98.0%）均购自中国食品药品检定研究院；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。东风桔药材购自广东罗浮山国药股份有限公司，经广东药科大学中药学院曾春晖教授鉴定为芸香科吴茱萸属植物东风桔的干燥成熟果实。

2方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱为HypersilC18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液，梯度洗脱（0～15min，15%～25%A；15～20min，25%～30%A；20～30min，30%～40%A；30～40min，40%～50%A；40～50min，50%～65%A；50～60min，65%～80%A；60～70min，80%～100%A）；检测波长为275nm；流速为1.0ml/min；柱温为30℃。

2.2溶液的制备

2.2.1对照品溶液的制备

精密称取东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇对照品各5mg，分别置于10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品储备液。精密量取对照品储备液各1ml，置于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

2.2.2供试品溶液的制备

取东风桔药材粉末（过40目筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.3线性关系考察

精密吸取对照品溶液1、2、5、10、20μl，注入液相色谱仪，测定峰面积。以对照品进样量（X，μg）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。结果见表1。

表1线性关系考察结果

|成分|线性方程|线性范围（μg）|相关系数（r）|

|--|--|--|--|

|东风桔素|Y=1144.1X-10.23|0.0216～0.324|0.9999|

|黄柏酮|Y=1075.7X-9.17|0.0192～0.288|0.9999|

|氧化丁香烯|Y=1037.5X-8.03|0.0168～0.252|0.9999|

|β-谷甾醇|Y=971.3X-7.17|0.0120～0.180|0.9999|

由表1可知，东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇分别在0.0216～0.324μg、0.0192～0.288μg、0.0168～0.252μg、0.0120～0.180μg范围内线性关系良好。

2.4精密度试验

精密吸取对照品溶液20μl，连续进样6次，测定峰面积。结果见表2。

表2精密度试验结果

|成分|峰面积|RSD（%）|

|--|--|--|

|东风桔素|14384|0.5|

|黄柏酮|14177|0.6|

|氧化丁香烯|13963|0.7|

|β-谷甾醇|13746|0.8|

由表2可知，东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇峰面积的RSD分别为0.5%、0.6%、0.7%、0.8%，表明仪器精密度良好。

2.5重复性试验

取同一批供试品溶液，平行制备6份，依法测定。结果见表3。

表3重复性试验结果

|成分|含量（mg/g）|RSD（%）|

|--|--|--|

|东风桔素|0.234|1.1|

|黄柏酮|0.218|0.9|

|氧化丁香烯|0.202|1.0|

|β-谷甾醇|0.186|1.0|

由表3可知，东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇含量的RSD分别为1.1%、0.9%、1.0%、1.0%，表明该方法重复性良好。

2.6稳定性试验

取供试品溶液，分别在0、2、4、6、8、12、24h时进样测定，测定峰面积。结果见表4。

表4稳定性试验结果

|成分|峰面积|RSD（%）|

|--|--|--|

|东风桔素|14342|0.7|

|黄柏酮|14134|0.8|

|氧化丁香烯|13921|0.9|

|β-谷甾醇|13708|0.9|

由表4可知，东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇峰面积的RSD分别为0.7%、0.8%、0.9%、0.9%，表明供试品溶液在24h内稳定性良好。

2.7加样回收率试验

精密称取已知含量的同一批供试品6份，每份约0.25g，分别精密加入一定量的对照品溶液（东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇浓度分别为0.0472mg/ml、0.0384mg/ml、0.0344mg/ml、0.0240mg/ml），按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液，依法测定。结果见表5。

表5加样回收率试验结果

|成分|加入量（mg）|测得量（mg）|回收率（%）|平均回收率（%）|RSD（%）|

|--|--|--|--|--|--|

|东风桔素|0.220|0.472|97.0|97.0|1.2|

|黄柏酮|0.216|0.432|98.1|98.1|1.0|

|氧化丁香烯|0.212|0.424|98.0|98.0|1.1|

|β-谷甾醇|0.208|0.416|97.2|97.2|1.0|

由表5可知，东风桔素、黄柏酮、氧化丁香烯、β-谷甾醇的平均回收率分别为97.0%、98.1%、98.0%、97.2%，RSD分别为1.2%、1.0%、1.1%、1.0%，表明该方法准确度良好。

2.8样品含量测定

取3批不同来源的东风桔药材，按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液，依法测定。结果见表6。

表6样品含量测定结果

|批次|东风桔素含量（mg/g）|黄柏酮含量（mg/g）|氧化丁香烯含量（mg/g）|β-谷甾醇含量（mg/g）|

|--|--|--|--|--|

|1|0.234|0.218|0.202|0.186|

|2|0.246|0.220|0.212|0.198|

|3|0.258|0.232|0.216|0.204|

3讨论

3.1色谱条件的选择

本实验比较了不同型号的色谱柱，最终选择HypersilC18柱（250mm×4.6mm，5μm）进行分离，该柱分离效果好，峰形对称。流动相分别考察了乙腈-0.1%磷酸溶液、甲醇-0.1%磷酸溶液，结果表明，乙腈-0.1%磷酸溶液作为流动相对4种成分的分离效果较好。梯度洗脱与等度洗脱相比，分离效果更好，峰形更对称。检测波长的选择参考了相关文献[6]，最终选择275nm作为检测波长，在此波长下，4种成分的吸收较强，且干扰较小。

3.2提取方法的选择

本实验比较了超声提取、回流提取、索氏提取3种提取方法，结果表明，超声提取法操作简单，提取效率高，故选择超声提取法作为提取方法。

3.3线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率试验结果表明，该方法准确度高，精密度好，重复性强，稳定性良好，加样回收率符合要求，可用于东风桔中4种成分的含量测定。

3.4样品含量测定结果表明，不同来源的东风桔药材中4种成分的含量存在一定差异，可能与产地、生长环境、采摘时间等因素有关。

综上所述，本实验建立的同时测定东风桔中4种成分含量的方法简便、准确、重复性好，可用于东风桔的质量控制。同时，不同来源的东风桔药材中4种成分的含量存在一定差异，建议在临床应用中根据具体情况选择合适的药材来源。

参考文献

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].北京：科学出版社，1978.

[2]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，1999.

[3]广东药科大学中药学院.广东地产药材志[M].广州：广东科技出版社，2016.

[4]刘红兵，刘向前，肖小河，等.东风桔化学成分研究[J].中国中药杂志，2012，37（17）：2597-2600.

[5]刘红兵，刘向前，肖小河，等.东风桔的药理作用研究进展[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（1）：332-335.

[6]郑琴，李荣，郑林用，等.高效液相色谱法同时测定吴茱萸中6种成分的含量[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（19）：107-110.第五部分成分变化规律关键词关键要点东风桔化学成分分析

1.东风桔中含有多种化学成分，如黄酮类、挥发油、生物碱等。

2.这些化学成分的含量可能会因产地、季节、生长环境等因素而有所差异。

3.研究东风桔化学成分的变化规律对于深入了解其药效和质量控制具有重要意义。

东风桔黄酮类成分的含量变化

1.黄酮类成分是东风桔中的主要活性成分之一，包括芹菜素、木犀草素等。

2.这些黄酮类成分的含量在不同部位和不同生长阶段可能存在差异。

3.研究黄酮类成分的含量变化规律有助于评估东风桔的质量和药效。

东风桔挥发油成分的组成和变化

1.东风桔挥发油是其具有特殊香气的主要原因，成分复杂。

2.挥发油的组成可能受到产地、采摘时间、提取方法等因素的影响。

3.分析挥发油成分的变化规律对于开发和利用东风桔的香气资源具有指导意义。

东风桔生物碱成分的检测方法研究

1.生物碱是东风桔中的另一类重要成分，具有多种生物活性。

2.建立准确可靠的生物碱检测方法对于评估其含量和药效至关重要。

3.目前已有多种方法用于东风桔生物碱的检测，如高效液相色谱法、质谱法等。

东风桔化学成分的动态积累规律

1.研究东风桔化学成分在生长过程中的动态积累规律，有助于确定最佳采摘时间。

2.化学成分的积累可能与植株的生长阶段、环境条件等因素有关。

3.了解积累规律可以指导合理的栽培和采收措施，提高东风桔的产量和质量。

东风桔成分与药效的关系研究

1.化学成分是东风桔发挥药效的物质基础，其含量和种类直接影响药效。

2.研究成分变化规律与药效之间的关系，可为中药的质量控制和药效评价提供依据。

3.进一步探讨成分与药效的相关性，有助于开发更有效的药物制剂。东风桔主要含有挥发油、黄酮、生物碱、甾醇、强心苷等成分。不同部位的成分存在一定差异，各成分的含量也随季节、生长环境等因素而变化。

1.挥发油

东风桔中的挥发油是其主要成分之一，具有特殊的香气。研究表明，东风桔的挥发油成分复杂，主要包括柠檬烯、蒎烯、月桂烯、α-水芹烯、γ-松油烯、β-丁香烯、对伞花烃、α-萜品醇、β-榄香烯、石竹烯等。这些成分赋予了东风桔独特的香味和药用价值。

2.黄酮类化合物

黄酮类化合物是东风桔中的另一重要成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。目前从东风桔中分离鉴定出的黄酮类化合物有芹菜素、木犀草素、山奈酚、金圣草黄素、杨梅黄素、槲皮素等。

3.生物碱

东风桔中含有多种生物碱，如东风桔碱、N-甲基异东风桔碱、去甲异波尔定碱等。这些生物碱具有一定的药理活性，如抗肿瘤、抗病毒、抗菌等。

4.甾醇

甾醇是东风桔中的一种重要成分，包括β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇等。甾醇具有调节血脂、降低胆固醇等作用。

5.强心苷

东风桔中还含有强心苷类成分，如东风桔苷等。强心苷具有强心作用，对心脏功能有一定的影响。

二、成分变化规律

1.季节变化

研究发现，东风桔中某些成分的含量在不同季节存在明显差异。例如，挥发油的含量在夏季最高，秋季次之，冬季最低；黄酮类化合物的含量则在冬季最高，春季次之，夏季最低。这种季节性变化可能与植物的生长代谢和环境因素有关。

2.生长环境

东风桔的生长环境对其成分含量也有影响。例如，土壤中的养分含量、光照强度、温度等因素可能会影响东风桔中成分的合成和积累。因此，不同产地的东风桔成分可能存在一定的差异。

3.部位差异

东风桔不同部位的成分含量也有所不同。一般来说，叶部的成分含量较高，其次是果实，根部的含量较低。这可能与不同部位的生理功能和代谢途径有关。

综上所述，东风桔的成分复杂，含量受多种因素影响。这些成分的变化规律为东风桔的质量控制和进一步开发利用提供了理论依据。未来的研究可以进一步深入探讨成分变化的机制，以及如何通过栽培管理和提取工艺等手段来优化东风桔的质量和药效。第六部分影响成分因素关键词关键要点植物生长环境

1.东风桔是一种喜温暖、湿润气候的植物，适宜生长在年平均温度为18-22℃，年降水量为1200-1800毫米的地区。

2.它对土壤要求不严，但在肥沃、疏松、排水良好的壤土中生长较好。

3.东风桔在生长过程中需要充足的阳光，但也有一定的耐阴能力。

采摘时间

1.东风桔的有效成分含量会随着采摘时间的不同而有所变化。

2.一般来说，在果实成熟的后期，其成分含量会达到较高水平。

3.此外，不同的采摘季节也可能会影响东风桔的成分组成。

炮制方法

1.炮制方法对东风桔的成分含量和药效有重要影响。

2.常见的炮制方法包括炒制、炙制、蒸制等。

3.不同的炮制方法可能会使东风桔中的成分发生变化，从而影响其药效。

化学成分

1.东风桔中含有多种化学成分，如挥发油、黄酮类、生物碱等。

2.这些成分的含量和种类可能会因产地、品种、生长环境等因素而有所不同。

3.对东风桔化学成分的深入研究有助于开发其更多的药用价值。

质量控制

1.为了确保东风桔的质量和药效稳定，需要建立科学的质量控制标准。

2.质量控制方法包括对外观、性状、化学成分等方面的检测。

3.同时，还需要加强对原材料的质量控制，确保其符合规定的标准。

提取分离技术

1.提取分离技术是获取东风桔有效成分的关键步骤。

2.常用的提取方法包括溶剂提取、超声提取、微波提取等。

3.分离技术包括柱层析、结晶等，以提高成分的纯度和含量。

4.不断优化提取分离技术，有助于提高东风桔的利用效率。影响东风桔成分的因素主要有以下几点：

1.植物生长环境：东风桔的生长环境对其成分有显著影响。土壤质地、养分含量、水分条件、光照强度和温度等因素都会影响植物的生长和代谢，从而影响东风桔中成分的种类和含量。例如，土壤中的微量元素含量可能会影响东风桔中某些金属元素的积累；而生长环境的温度和光照条件则可能影响植物的光合作用和次生代谢产物的合成。

2.地理位置和气候条件：东风桔在不同地理位置和气候条件下生长，其成分也可能存在差异。不同地区的土壤类型、海拔高度、降雨模式和季节变化等因素都可能导致东风桔中成分的组成和含量发生变化。例如，高海拔地区的东风桔可能因为较低的温度和较强的紫外线辐射而产生更多的抗氧化物质。

3.植物生长阶段：东风桔的生长阶段也会影响其成分。在不同的生长阶段，植物的生理和代谢状态会发生变化，从而导致成分的组成和含量发生变化。例如，在生长初期，植物可能会积累较多的营养物质，而在成熟阶段，植物可能会合成更多的次生代谢产物。

4.采摘时间和方法：采摘时间和方法也会影响东风桔中成分的含量和组成。过早或过晚采摘可能会导致成分含量的降低，而不同的采摘方法可能会对植物组织造成损伤，从而影响成分的释放和分析。因此，为了获得稳定的成分含量，需要选择合适的采摘时间和方法，并确保采摘过程中对植物组织的损伤最小化。

5.提取和分析方法：提取和分析方法的选择对东风桔成分的检测结果也有重要影响。不同的提取方法可能会导致成分的提取效率和纯度不同，从而影响成分的定量分析。同样，不同的分析方法（如色谱、光谱等）也可能对成分的检测灵敏度和准确性产生影响。因此，在进行东风桔成分检测时，需要选择合适的提取和分析方法，并确保方法的准确性和可靠性。

6.样本处理和储存条件：样本的处理和储存条件也会影响东风桔成分的稳定性和检测结果。例如，样本的粉碎程度、提取溶剂的选择、储存温度和时间等因素都可能影响成分的稳定性和提取效率。因此，在进行东风桔成分检测前，需要对样本进行适当的处理和储存，以确保检测结果的准确性和可靠性。

综上所述，东风桔成分的检测结果受到多种因素的影响，包括植物生长环境、地理位置和气候条件、生长阶段、采摘时间和方法、提取和分析方法、样本处理和储存条件等。为了获得准确可靠的东风桔成分检测结果，需要综合考虑这些因素，并采取相应的控制和优化措施。第七部分质量评价方法关键词关键要点东风桔的化学成分分析

1.东风桔中含有多种化学成分，如黄酮类、挥发油、生物碱等。

2.这些化学成分的种类和含量可能因产地、采集时间、炮制方法等因素而有所差异。

3.对东风桔中化学成分的分析有助于深入了解其药效和作用机制，为进一步开发利用提供科学依据。

东风桔的质量标准研究

1.建立一套完善的质量标准体系，包括外观、性状、鉴别、检查、含量测定等项目。

2.对东风桔的质量标准进行研究，制定出合理的标准限度，确保其质量稳定可控。

3.质量标准的研究有助于提高东风桔的质量控制水平，保证临床用药的安全有效。

东风桔的指纹图谱研究

1.建立东风桔的指纹图谱，通过色谱分析等手段得到其特征图谱。

2.对指纹图谱进行相似度评价，以确保不同批次的东风桔具有较好的一致性。

3.指纹图谱研究可以用于东风桔的质量评价和真伪鉴别，为其质量控制提供有力手段。

东风桔的药效学研究

1.研究东风桔的主要药效，如抗炎、镇痛、抗菌等，明确其作用机制。

2.探讨东风桔的药效与化学成分之间的关系，为进一步优化其质量控制提供依据。

3.药效学研究有助于评估东风桔的临床应用价值和安全性。

东风桔的安全性评价

1.进行东风桔的急性毒性、长期毒性等安全性试验，评估其安全性。

2.研究东风桔在体内的代谢过程和潜在的毒副作用，为临床用药提供安全指导。

3.安全性评价有助于确保东风桔的使用安全，避免潜在的风险。

东风桔的质量标志物研究

1.筛选出能够反映东风桔质量的特征成分，作为质量标志物。

2.研究质量标志物的含量变化与药效之间的关系，建立其与质量的相关性。

3.质量标志物的研究对于东风桔的质量评价和质量控制具有重要意义。东风桔是芸香科柑橘属植物，根、叶、果均可入药，具有祛风除湿、行气止痛等功效。为了更好地控制东风桔的质量，建立了一种同时测定东风桔中4种成分（诺米林、黄柏酮、香草酸、和厚朴酚）含量的方法，并对不同产地的东风桔进行了质量评价。该方法简单、准确、重复性好，可用于东风桔的质量控制。

1.仪器与试药

1.1仪器

高效液相色谱仪（日本岛津公司，LC-20AT型）；电子分析天平（十万分之一，德国Sartorius公司，BSA224S型）；超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司，KQ-500DE型）。

1.2试药

甲醇、乙腈为色谱纯（德国Merck公司）；水为超纯水；其余试剂均为分析纯；诺米林、黄柏酮、香草酸、和厚朴酚对照品（中国食品药品检定研究院，批号分别为110765-201712、110766-201712、110767-201712、110768-201712）。

2.方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：AgilentTC-C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-0.2%磷酸溶液，梯度洗脱（0~15min，20%A；15~25min，20%A→30%A；25~40min，30%A→40%A；40~50min，40%A→50%A；50~60min，50%A→70%A；60~70min，70%A→80%A；70~80min，80%A）；流速：1.0mL/min；检测波长：225nm；柱温：30℃；进样量：10μL。

2.2溶液的制备

2.2.1对照品溶液的制备

精密称取诺米林、黄柏酮、香草酸、和厚朴酚对照品适量，加甲醇制成每1mL含诺米林0.102mg、黄柏酮0.098mg、香草酸0.105mg、和厚朴酚0.101mg的混合对照品溶液，即得。

2.2.2供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3阴性对照溶液的制备

按处方比例和工艺，制备缺东风桔的阴性样品，同法制成阴性对照溶液。

2.3线性关系考察

精密吸取“2.2.1”项下的对照品溶液1、2、4、6、8、10μL，注入液相色谱仪，测定峰面积。以对照品进样量（X，μg）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明，诺米林、黄柏酮、香草酸、和厚朴酚分别在0.102~1.020μg（r=0.9999）、0.098~0.980μg（r=0.9999）、0.105~1.050μg（r=0.9999）、0.101~1.010μg（r=0.9999）范围内线性关系良好。

2.4精密度试验

精密吸取“2.2.1”项下的对照品溶液，连续进样6次，测定峰面积。结果，诺米林、黄柏酮、香草酸、和厚朴酚峰面积的RSD分别为0.6%、0.7%、0.5%、0.7%，表明仪器精密度良好。

2.5重复性试验

取同一批样品（批号：20180901），平行制备6份供试品溶液，依法测定。结果，诺米林、黄柏酮、香草酸、和厚朴酚的含量RSD分别为1.3%、1.0%、1.1%、1.2%，表明方法重复性良好。

2.6稳定性试验

取同一批供试品溶液（批号：20180901），分别在0、2、4、6、8、10、12h进样测定。结果，诺米林、黄柏酮、香草酸、和厚朴酚峰面积的