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DB34DB34/T3283—2018副猪嗜血杆菌的分子分型MLST方法MultilocussequencetypingdetectionmethodforHaemophilusparasuis2018-12-29发布2019-01-29实施安徽省市场监督管理局发布I14.4dNTP：dATP、dTTP），24.115×TBE电泳缓冲液：445mmo物。引物在使用前按照引物合成时的既定浓3后使用Lasergene7.1对序列进行ClustalV分析，将上下游序列整合后得到完整序列，为减小误差首尾的几个碱基不计算入序列测定结果。最后将测序结果上传至MLST网站()进行在线数据分析，得到的结果与MLST数据库进行比对。将所得到的副猪嗜血杆菌7个管家基因核酸扩增片段DNA序列进行MLST分析，获得菌株所对应的等位基因图谱，确定副猪嗜血杆菌分离株的序），），4ATP合成酶β链基因(βchainofATPsynthase）苹果酸脱氢酶基因（malatedehyd6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因（6-phosphogluco3-磷酸甘油醛脱氢酶基因（glyceraldehyde-3-phosphatedeh延胡索酸还原酶基因（fumaratereduCGTCCATATAGTGAATTTCTCTAATACTTTGTTTGAGT5将所得到的副猪嗜血杆菌7个管家基因核酸扩增片段DNA序列进行MLST分析，获得菌株所对应的等位基因图谱，确定副猪嗜血杆菌分离株的序列型(Sequence国际菌株的资料进行比较。在确定STs的基础上应用eBURST程序将菌株分为各个谱系组(clonal

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