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文档简介
1/1提取工艺改进-酶辅助或超声破碎第一部分酶辅助提取原理 2第二部分超声破碎机理 4第三部分酶辅助提取工艺参数优化 6第四部分超声破碎工艺参数调节 10第五部分酶辅助与超声破碎对比 12第六部分提取效率提升机制 15第七部分产品质量影响研究 17第八部分工程化放大应用 19
第一部分酶辅助提取原理关键词关键要点酶辅助提取原理:
主题名称:生物催化原理
1.酶作为生物催化剂,具有高度特异性,可定向催化目标化合物的释放和转化。
2.酶促反应通常在温和条件下进行,能有效避免热敏性化合物的降解,保持其生物活性。
3.针对特定靶标化合物,通过合理选择和组合酶,可实现高效、选择性提取。
主题名称:酶-底物相互作用
酶辅助提取原理
酶辅助提取利用酶的催化活性,提高目标化合物从原料中的释放和溶出,是一种绿色高效的提取技术。其原理主要包括以下几个方面:
1.酶解作用:
酶作为一种生物催化剂,能特异性地催化底物的化学反应。在酶辅助提取中,酶与原料中的目标化合物结合,发生酶解反应,使目标化合物转化为水溶性或易溶于溶剂的产物。例如,蛋白酶可以催化蛋白质的降解,纤维素酶可以催化纤维素的分解。
2.细胞壁破坏:
酶还可以降解植物细胞壁的成分,如纤维素、半纤维素和果胶等。这些成分是细胞壁的主要结构组成部分,阻碍了目标化合物的释放。酶通过分解这些成分,破坏细胞壁的完整性,促进目标化合物的渗透和溶出。
3.渗透性增强:
酶解过程中产生的反应产物,如游离氨基酸、糖类等小分子物质,可以增加细胞膜的渗透性。这些小分子物质会与细胞膜上的载体蛋白结合,形成水通道或离子通道,使得目标化合物更容易通过细胞膜,进入到溶剂中。
4.非特异性吸附减少:
酶辅助提取还能减少目标化合物与原料中其他成分的非特异性吸附。酶解反应会产生大量的亲水性产物,这些产物可以与原料中的杂质和非靶化合物结合,形成亲水性的络合物。这些络合物更容易溶解在溶剂中,从而减少了目标化合物的非特异性吸附,提高提取效率。
酶辅助提取的优势:
与传统提取技术相比,酶辅助提取具有以下优势:
*选择性高:酶具有高度的特异性,可以靶向降解目标化合物的结合形式,而不影响其他成分。
*反应条件温和:酶辅助提取通常在温和条件下进行,避免了高温、高压等极端条件对目标化合物造成的破坏。
*效率高:酶催化反应速率快,能显著缩短提取时间,提高提取效率。
*绿色环保:酶是一种天然催化剂,不产生有毒有害物质,符合绿色环保理念。
酶辅助提取工艺优化:
为了提高酶辅助提取效率,需要优化酶的用量、反应温度、反应时间、酶解液pH值和搅拌速度等工艺参数。通过系统优化,可以最大限度地发挥酶的催化作用,提高目标化合物的提取率。第二部分超声破碎机理关键词关键要点超声破碎机理
主题名称:声学空化
1.超声波在液体介质中传播时产生交替压缩和膨胀的循环。
2.在负压周期,形成空泡,当空泡达到临界尺寸时,会发生剧烈崩塌,释放巨大的能量。
3.空泡崩塌时的冲击波和微射流可破坏细胞壁和细胞质膜,实现破碎效果。
主题名称:机械剪切力
超声破碎机理
超声破碎技术是一种利用高频超声波的机械能来粉碎细胞和组织的方法。其机理涉及多个物理过程,包括空化、声流、声辐射力和剪切力。
空化
超声波在液体中传播时会产生高压和低压交替循环。当超声波频率足够高时,液体中的气泡会迅速膨胀和破裂,形成冲击波和微射流。这种过程称为空化,它可以产生强大的剪切力,破坏细胞膜和释放细胞内容物。
声流
超声波在液体中传播时会产生声流,即液体微小体积的定向运动。声流可以对细胞施加持久的剪切力,导致细胞破裂和溶解。
声辐射力
声辐射力是指超声波在介质中传播时对粒子施加的力。这种力与粒子的体积和声波的强度成正比。对于较大的颗粒,声辐射力可以将其推离超声波传播的方向,导致细胞团的破裂和分散。
剪切力
超声波在液体中传播时会产生剪切力,即平行于声波传播方向的力。剪切力可以破坏细胞膜和释放细胞内容物。
破碎效率的影响因素
超声破碎的效率受以下因素影响:
*超声波频率:更高的频率会产生更小的空泡,从而产生更强的空化效应。
*超声波强度:更高的强度会产生更强的机械力,从而增加破碎效率。
*处理时间:破碎时间越长,破碎效率越高。
*温度:较高的温度会降低液体粘度,从而增强空化效应。
*细胞类型:不同类型的细胞具有不同的耐受性,对超声破碎的敏感性不同。
*介质特性:液体介质的粘度、密度和表面张力会影响空化和声流的发生。
优化超声破碎条件
通过优化超声破碎条件,可以提高破碎效率,降低处理时间,并最大限度地减少细胞损伤。以下是一些优化建议:
*选择合适的超声波频率和强度。
*控制处理时间以避免过度破碎。
*在适宜的温度下进行处理。
*根据细胞类型调整处理参数。
*优化介质特性,例如添加表面活性剂或改变粘度。
超声破碎的应用
超声破碎技术广泛应用于生物样品的制备,包括:
*细胞裂解和匀浆
*组织匀浆
*核酸提取
*蛋白质提取
*脂质提取
*疫苗制备
*纳米颗粒合成第三部分酶辅助提取工艺参数优化关键词关键要点酶活性和提取效率的影响因素
*酶的浓度:随着酶浓度的增加,提取效率先增加后减少,需优化酶浓度以最大化提取效率。
*酶的种类:不同酶对不同化合物的亲和力不同,选择合适的酶至关重要。
*酶的活性:酶的活性受温度、pH值和抑制剂等因素影响,需控制这些因素以保持酶的活性。
提取时间和温度的优化
*提取时间:提取时间过短,提取效率较低;过长,可能导致提取物的降解或变性。
*提取温度:温度过低,酶活性降低;过高,酶可能失活。需根据酶的最佳活性温度进行优化。
酶处理后的样品预处理
*酶失活:提取后需失活酶以防止进一步水解或变性。
*样品澄清:去除酶和固体残渣,可通过离心或过滤进行澄清。
*样品浓缩:可通过蒸发、冻干或超滤浓缩样品,提高提取物的浓度。
提取工艺的规模化
*设备选择:选择合适的反应器和提取系统,确保有效混合和酶的稳定性。
*酶剂成本:大规模生产需考虑酶剂的成本,可通过优化酶利用率或寻找更具成本效益的酶源。
*产品质量控制:建立完善的质量控制体系,监控提取物的纯度、活性和其他质量指标。
新兴技术在酶辅助提取中的应用
*微波辅助提取:利用微波快速加热样本,提高酶反应效率。
*超临界流体萃取:利用超临界流体的高溶解性和选择性,提取难以溶解的化合物。
*在线监测技术:实时监测提取过程中的参数变化,以便实时调整和优化工艺。
酶辅助提取工艺的未来趋势
*高通量筛选技术:开发高通量筛选技术,快速优化酶辅助提取工艺参数。
*酶工程:通过酶工程技术改进酶的活性、特异性和稳定性。
*绿色和可持续提取:探索绿色和可持续的酶辅助提取方法,减少溶剂使用和环境影响。酶辅助提取工艺参数优化
1.酶浓度优化
酶浓度是影响酶辅助提取效率的关键因素。酶浓度过低会导致酶催化反应速率慢,提取效率低;而酶浓度过高又会导致酶的自身抑制作用,进而降低提取效率。因此,需要优化酶浓度以获得最大的提取率。
*实验方法:在其他提取条件(如温度、时间等)保持不变的情况下,分别使用不同浓度的酶处理样品,并测定提取物的产量。
*分析方法:绘制酶浓度与提取率的关系曲线,确定最佳的酶浓度,即提取率达到最大值时的酶浓度。
2.酶反应时间优化
酶反应时间也是影响提取效率的因素。反应时间过短会导致酶催化反应不完全,提取率低;而反应时间过长又会增加成本和时间的浪费。因此,需要优化酶反应时间以达到最佳提取效果。
*实验方法:在其他提取条件(如温度、酶浓度等)保持不变的情况下,分别在不同反应时间下处理样品,并测定提取物的产量。
*分析方法:绘制反应时间与提取率的关系曲线,确定最佳的反应时间,即提取率达到最大值时的反应时间。
3.酶反应温度优化
酶的催化活性受温度的影响。酶辅助提取的反应温度应控制在酶最适温度附近,以获得最佳的酶催化效率。不同的酶具有不同的最适温度,需要根据所用酶的特性进行优化。
*实验方法:在其他提取条件(如酶浓度、反应时间等)保持不变的情况下,分别在不同温度下进行酶催化反应,并测定提取物的产量。
*分析方法:绘制反应温度与提取率的关系曲线,确定最佳的反应温度,即提取率达到最大值时的反应温度。
4.pH值优化
酶的催化活性也受pH值的影响。大多数酶在特定的pH值范围内具有较高的催化活性,偏离该范围会降低酶的活性。因此,需要优化pH值以获得最佳的提取效率。
*实验方法:在其他提取条件(如酶浓度、反应时间等)保持不变的情况下,分别在不同pH值条件下进行酶催化反应,并测定提取物的产量。
*分析方法:绘制pH值与提取率的关系曲线,确定最佳的pH值,即提取率达到最大值时的pH值。
5.酶与底物料比优化
酶与底物料比是指酶的量与样品的量的比值。适宜的酶与底物料比可以确保酶催化反应充分进行,提高提取效率。
*实验方法:在其他提取条件(如反应时间、温度等)保持不变的情况下,分别使用不同酶与底物料比处理样品,并测定提取物的产量。
*分析方法:绘制酶与底物料比与提取率的关系曲线,确定最佳的酶与底物料比,即提取率达到最大值时的酶与底物料比。
6.超声处理条件优化
超声处理可以破坏细胞壁和组织结构,促进酶催化反应的进行,提高提取效率。因此,需要优化超声处理条件以获得最佳的辅助提取效果。
*超声频率:超声频率是指超声波的振动频率,较高的超声频率可以产生更强的机械效应,破坏细胞结构。
*超声功率:超声功率是指超声波的能量,较高的超声功率可以产生更强的超声波,促进细胞破壁。
*超声时间:超声时间是指超声处理的持续时间,适当的超声时间可以保证细胞结构的充分破坏。
优化方法:
*采用单因素优化法,分别优化各工艺参数,确定各参数的最佳值。
*采用响应面优化法,通过构建数学模型,综合考虑各工艺参数的交互作用,求解出工艺参数的最佳组合。
*利用人工智能技术,结合实验数据和理论模型,建立预测模型,快速筛选和优化工艺参数,缩短优化时间。第四部分超声破碎工艺参数调节关键词关键要点超声破碎工艺参数调节
频率调节
1.频率影响超声波的穿透深度和破碎效果。
2.较低频率(20-100kHz)具有更高的穿透深度,适用于大颗粒材料。
3.较高的频率(100-1000kHz)具有较强的剪切力,适用于小颗粒材料。
功率调节
超声破碎工艺参数调节
超声破碎工艺的关键参数包括超声频率、超声功率、破碎时间和温度。通过调节这些参数,可以优化超声破碎效果,提高提取效率。
超声频率
超声频率是指超声波的振动频率,单位为千赫(KHz)。通常,超声破碎中使用的频率范围为20KHz至10MHz。频率越高,产生的空化气泡越小,破碎效果越显著。然而,过高的频率会增加设备成本和能耗。一般来说,对于细胞壁较薄的微生物,如细菌和酵母,建议使用较高频率(>1MHz)的超声波;而对于细胞壁较厚的植物组织和真菌,则需要较低频率(<100KHz)的超声波。
超声功率
超声功率是指超声波的能量输出,单位为瓦(W)或千瓦(KW)。超声功率越大,产生的空化效应越强,破碎效果越好。然而,过高的超声功率会导致样品过热和降解。因此,需要根据样品的特性选择合适的超声功率。通常,对于较难破碎的样品,需要较高的超声功率(>100W);而对于易碎的样品,则需要较低的超声功率(<50W)。
破碎时间
破碎时间是指超声破碎持续的时间,单位为分钟(min)或小时(h)。破碎时间越长,破碎效果越明显。然而,过长的破碎时间会导致样品过热和降解。因此,需要根据样品的特性选择合适的破碎时间。通常,对于较难破碎的样品,需要较长的破碎时间(>30min);而对于易碎的样品,则需要较短的破碎时间(<10min)。
温度
温度是影响超声破碎效果的重要因素。一般来说,在适宜的温度范围内,温度升高有利于空化气泡的形成和破碎效果的增强。然而,过高的温度会导致样品变性失活。因此,需要根据样品的耐热性选择合适的破碎温度。通常,对于耐热性较强的样品,可以采用较高的破碎温度(>40℃);而对于耐热性较差的样品,则需要较低的破碎温度(<25℃)。
具体参数优化方法
对于不同的样品,超声破碎工艺参数的最佳组合可能不同。因此,需要根据样品的特性进行具体参数优化。一般来说,可以采用以下步骤进行优化:
1.固定超声频率和功率,逐渐增加破碎时间,直到破碎效果达到最佳。
2.固定超声频率和破碎时间,逐渐增加超声功率,直到破碎效果达到最佳。
3.固定超声功率和破碎时间,逐渐增加破碎温度,直到破碎效果达到最佳。
通过以上步骤,可以确定超声破碎工艺的最佳参数组合,从而提高提取效率和样品完整性。第五部分酶辅助与超声破碎对比关键词关键要点【酶辅助与超声破碎对比】
主题名称:酶催化机制
1.酶作为生物催化剂,能特异性地识别和切割特定化学键,高效地破坏植物细胞壁。
2.酶催化反应温和,可以在常温常压下进行,有利于保护提取物的活性成分。
3.酶反应的速率和专一性受酶的种类、浓度、温度、pH值等因素影响,需要优化反应条件。
主题名称:超声波作用机制
酶辅助与超声破碎对比
原理
*酶辅助:使用酶促反应催化细胞壁的降解,释放出细胞内的目标化合物。
*超声破碎:利用超声波的高频振动产生空化效应,破坏细胞壁并释放出胞内物质。
优势
酶辅助
*高选择性:酶具有高度的特异性,可以针对特定细胞壁成分进行降解,减少污染和副反应。
*温和条件:酶辅助提取通常在温和的条件(例如室温、中性pH值)下进行,避免了目标化合物热敏性的破坏。
*环境友好:酶是由天然来源制成的,对环境影响较小。
超声破碎
*高效:超声破碎效率高,可以快速释放胞内物质。
*广谱性:超声波可以破坏各种类型的细胞壁,适用于不同物种和组织。
*可扩展性:超声破碎设备可以很容易地放大到工业规模。
劣势
酶辅助
*酶成本高:酶的生产和纯化成本可能较高,这会影响提取过程的经济可行性。
*反应时间长:酶促反应需要足够的时间才能完成,这可能会延长提取过程。
*酶活性受限:酶的活性受环境条件(例如温度、pH值)的影响,需要优化反应条件以获得最佳提取效率。
超声破碎
*能量消耗高:超声破碎需要消耗大量的能量,这可能会影响提取过程的成本效益。
*局部过热:超声波产生的空化效应可能会导致局部过热,从而可能破坏热敏性化合物。
*噪音污染:超声破碎过程会产生高强度噪音,需要采取适当的声学隔离措施。
选择标准
*目标化合物性质:选择合适的提取方法取决于目标化合物的性质,例如热敏性、选择性要求等。
*细胞壁组成:不同物种和组织的细胞壁组成不同,影响酶辅助或超声破碎的效率。
*规模:提取规模的大小决定了设备选择和成本考虑。
*经济性:必须考虑酶成本、能量消耗和设备投资等因素。
应用
酶辅助和超声破碎广泛应用于各种生物材料的提取,包括:
*植物提取物(例如多酚、精油)
*微生物提取物(例如蛋白质、酶)
*动物组织提取物(例如胶原蛋白、肽)
优化策略
为了优化提取效率,可以采用以下策略:
*酶辅助:选择特异性高、活性高的酶,优化反应条件(酶浓度、温度、pH值)。
*超声破碎:优化超声波频率、功率、破碎时间,控制温度避免局部过热。
*联合方法:结合酶辅助和超声破碎,可以提高提取效率和selectivity。
结论
酶辅助和超声破碎都是广泛用于生物材料提取的有效技术。选择最佳方法取决于目标化合物的性质、细胞壁组成、提取规模和经济性等因素。通过优化提取参数和联合方法,可以实现更有效和高效的提取过程。第六部分提取效率提升机制酶辅助提取
机制:酶辅助提取利用酶的催化作用,降解细胞壁和其他组织结构,释放目标化合物。
效率提升:
*提高细胞壁渗透性:酶能水解细胞壁成分,如果胶、纤维素和半纤维素,增加细胞壁的孔隙率,提高溶剂的渗透性。
*破坏亚细胞结构:酶可以降解细胞质、细胞器膜和其他亚细胞结构,释放目标化合物。
*促进物质转移:酶可以催化底物和溶剂之间的反应,促进目标化合物从细胞内向溶剂中转移。
超声破碎提取
机制:超声破碎提取利用超声波产生的空化效应,破裂细胞并释放目标化合物。
效率提升:
*空化效应:超声波在液体中传播时产生空化气泡,这些气泡迅速膨胀和破裂,产生冲击波和剪切力,破裂细胞。
*机械破碎:超声波通过介质的振动直接冲击和破碎细胞。
*促溶:超声波空化产生的热量和声流效应可以促进溶剂的渗透性和溶解速率,提高目标化合物的提取效率。
对比分析
适用性:
*酶辅助提取适用于对热敏感、易氧化或易水解的化合物,因为酶反应条件温和。
*超声破碎提取适用于坚硬组织、富含脂肪或多糖的材料。
选择性:
*酶辅助提取具有较高的选择性,因为酶催化作用的特异性。
*超声破碎提取的选择性较低,可能造成非靶向化合物的共提取。
能耗:
*酶辅助提取的能耗相对较低,因为酶反应在常温下进行。
*超声破碎提取的能耗较高,因为需要高强度超声波。
后处理:
*酶辅助提取后通常需要进行酶失活和澄清处理。
*超声破碎提取后通常需要进行离心或过滤分离提取液。
结论
酶辅助提取和超声破碎提取都是提高提取效率的有效技术。选择合适的技术取决于目标化合物、原料特性和提取工艺要求。第七部分产品质量影响研究产品质量影响研究
酶辅助提取
*色素提取:酶辅助提取可提高色素提取效率,降低提取温度和时间,从而改善色素稳定性,保留其天然色泽和活性。例如,使用果胶酶辅助提取天然黄色素栀子黄,提取率提高了18.7%。
*多酚提取:酶辅助提取可分解植物细胞壁中的多酚结合物,释放游离多酚。研究发现,葡萄柚果皮用果胶酶和纤维素酶辅助提取,多酚提取率提高了26.8%。
*挥发性化合物提取:酶辅助提取可破坏细胞壁,释放挥发性化合物。例如,用β-葡萄糖苷酶辅助提取蓝莓中的挥发性香气化合物,提取率提高了32.4%。
*抗氧化性:酶辅助提取可以保留植物材料中的抗氧化剂。例如,使用纤维素酶辅助提取蓝莓中的花青素,抗氧化活性提高了15.6%。
超声破碎提取
*颗粒尺寸:超声破碎可将植物细胞破碎成更小的颗粒,增加提取溶剂与植物材料的接触面积,从而提高提取效率。例如,超声破碎后提取大豆异黄酮,提取率提高了21.3%。
*细胞壁破坏:超声波的空化效应可破坏植物细胞壁,释放细胞内成分。研究发现,超声破碎后提取人参皂苷,提取率提高了18.9%。
*提取溶剂渗透:超声波产生的空化气泡可以增强提取溶剂的渗透性,促进溶剂进入植物细胞,提高提取效率。例如,超声破碎后提取枸杞多糖,提取率提高了24.5%。
*热敏性物质提取:超声破碎提取的温度较低,可以有效保护热敏性物质的活性。例如,超声破碎后提取玫瑰精油,精油收率提高了12.6%,且色泽香气未受损伤。
酶辅助与超声破碎提取的比较
*选择性:酶辅助提取具有较高的选择性,可以针对特定成分进行提取。而超声破碎提取的破坏性较大,可能提取出更多的非目标成分。
*反应条件:酶辅助提取需要优化酶的类型、浓度、温度和时间等条件。超声破碎提取则需要控制超声频率、功率和破碎时间等参数。
*成本:酶辅助提取所需的酶成本较高。超声破碎提取的设备投资较大,但使用成本较低。
*规模化:酶辅助提取在工业规模应用中存在成本高和酶失活等问题。超声破碎提取更易于规模化生产,设备可连续运行。
结论
酶辅助提取和超声破碎提取都是提高植物提取产率和质量的有效方法。选择合适的提取工艺需要考虑植物材料的特性、目标成分的性质以及生产规模等因素。酶辅助提取适用于需要高选择性提取特定成分的情况,而超声破碎提取更适用于需要快速高效提取大批量植物材料的情况。第八部分工程化放大应用工程化放大应用
酶辅助或超声破碎技术的工程化放大应用涉及将实验室规模的工艺转移到大规模生产的挑战。该过程需要仔细考虑以下因素:
反应器设计和优化
*选择合适的反应器类型,例如搅拌罐式反应器、管式反应器或连续流反应器。
*优化反应器尺寸、搅拌速率和曝气条件以确保充分的酶-底物接触和控制产物产量。
酶制剂和超声装置的放大
*酶制剂的生产和纯化必须放大以满足生产需求。放大过程中酶活性、稳定性和生产成本至关重要。
*超声装置的尺寸和强度需要根据过程规模进行调整以确保充分的胞壁破碎和萃取效率。
工艺参数优化
*酶浓度、温度、pH值和反应时间等关键工艺参数需要优化以最大化产物产量和效率。
*监测产物浓度、酶活性和其他工艺指标以控制过程并防止产物降解。
分离和纯化
*从反应混合物中分离产物的技术(例如离心、过滤、色谱法)需要放大以处理大批量。
*纯化步骤的优化对于获得高纯度产物至关重要,同时最大限度地减少损失和成本。
集成和过程控制
*酶辅助和超声破碎工艺需要与上游和下游工艺集成,例如原料制备、残渣处理和产品包装。
*实时过程监测和控制系统至关重要,以确保工艺稳定性、产品质量和生产效率。
经济因素
*原材料、酶制剂、超声装置
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