肉牛副结核病的流行特征及防控方法

肉牛副结核病是由副结核分枝杆菌引起的发病率较低，但是感染率、致死率很高，是危害肉牛养殖的重要疫病之一。该病潜伏期长、病程时间长、发病率低，并且初期发病不是很明显，诊断不准确、不及时，易误导治疗，导致该病长期潜伏在牛群中。一旦出现外部及内部诱因，促使带菌牛发病，治愈率非常低。因此，在肉牛养殖过程中，应对该病开展流行病学、临床特征、实验室诊断、防控方法的分析研究，以提高该病的防控水平，保障肉牛的健康生长。1流行病学特征1.1流行特点病牛或病原携带牛，其分泌物、排泄物被病原污染的饮水、饲料、牛舍的基础设施等都是传染源。道感染副结核分枝杆菌主要经消化道感染，也可通过子宫感染。犊牛感染主要是通过母体感染，（1）吸吮病母牛的乳汁，（2）胎盘垂直感染。该病好发生于春秋季节，但是无明显的季节性特征，发病肉牛与携带病原病牛可向外部环境排出杆菌，污染生活环境中的物品，导致该病散发，甚至引起地方性流行，对肉牛养殖业造成严重的损害。1.2病原特性肉牛副结核病别名为副结核性肠炎，病原为副结核分枝杆菌，该菌为放线菌，外形短粗，细长并稍有弯曲，形态一般不典型，长约0.5～1.5μm，单个排列或是分枝状排列。此菌无荚膜、无长鞭毛，培养难度大，培养基中无需加入抗酸细菌。该菌对环境适应性强，在土壤中副结核分枝杆菌可生存1年，在干燥环境中能存活长达17个月，可长期在肉牛生存环境中潜伏，具有高的感染概率。1.3易感动物该病的易感动物，是牛、羊、骆驼和鹿。尤以30～60d的犊牛易感，感染后长期潜伏在犊牛身体不发病，当犊牛长至3～5岁时发病。成年牛感染率较低，但此菌生存能力强，长期存在于肉牛的生活环境中，经由成年肉牛消化道感染，病原潜伏几个月后开始发病。母牛感染后，在其妊娠、分娩、哺乳等期间好发病。1.4发病机理副结核分枝杆菌经消化系统进入肉牛肠道，然后入侵小肠粘膜，由于小肠分泌黏液较多，肠液较少且带有一定的酶，肠道环境适合该菌生存。副结核分枝杆菌开始大量繁殖，直接损害小肠，并逐渐扩散至大肠，最终导致小肠及大肠粘膜受损，形成大量的上皮样细胞，致使肉牛肠道组织增生变厚，增厚可达3～20倍，当病情发展至一定程度，会逐渐产生硬且弯曲的褶皱，肠道粘膜受到大量皮样细胞的压迫，正常的消化功能受损，病牛无法吸收到足够的营养而日益消瘦。1.5疾病危害该病潜伏期长，数个月甚至是数年，为慢性传染病，肉牛感染杆菌后先不发病，成为了该菌的携带者，如果不能及时发现隐性感染的带菌病牛，该菌则会持续污染肉牛的生存环境，导致其它健康肉牛感染，传播范围广且危害大。犊牛感染成年后发病概率为4%左右，致死率为100%。由于现阶段对该病还无有效的药物及治疗方法，在发病肉牛群中很难彻底根除。2临床特征2.1疾病类型2.1.1肺结核肉牛在肺结核发病初期，出现典型的肺部病症，在饮水或运动后，病牛有干咳症状，发展至严重程度时，咳嗽症状加重，出现湿咳，咳嗽次数增加，呼吸短促，肺部听诊有摩擦音，体表观察可发现鼻孔流出黏液，触摸牛的体表，会摸到淋巴结肿大，部分病牛有贫血表现，测量体温正常，而有的病牛会体温稍高。2.1.2淋巴结核淋巴结肿大是结核病的典型表现，肉牛在患上淋巴结核后，机体淋巴结所在区域，通常肿大非常明显，病情较重时会出现破溃。如果是纵隔淋巴结病变，位于病牛的纵隔内，其中包括了气管、食道、心脏等，当其肿大明显时会直接压迫食道，可导致病牛慢性膨气。如果是咽喉淋巴结核，淋巴肿大压迫咽喉，会影响吞咽功能。2.1.3乳房结核母牛在患该病后，乳房出现硬结，淋巴结肿大明显，变硬变肿，观察到乳房表面凹凸不平。如果是哺乳期的母牛则分泌母乳变少，乳汁质量较差，稀薄且有少量脓块，病情发展至后期不再分泌母乳。2.2临床表现该病为慢性病，病程0.5～2年，病情发展缓慢，症状时轻时重。在发病的初期，病牛无明显的临床表现，时有腹泻，易误导该病的诊断，养殖户将该病当做普通的腹泻治疗，从而延误治疗时机。如果按照腹泻治疗，在一段时间内对疾病有控制作用，当病牛受到应激时，如母牛妊娠、更换饲料、惊吓等会直接引发该病，而且临床症状变得越发明显，精神沉郁、逐渐消瘦、腹泻严重。病情发展至后期，病牛出现顽固性腹泻，持续性下痢，粪便恶臭、带血，呈黏液状且带有气泡，病牛体重下降速度加快，高度消瘦、食欲废绝，最终因衰竭而死。2.3病理剖检该病主要损害肉牛的消化道，集中在空肠、回肠和结肠前段，肠系膜淋巴结有明显的肿大并呈索状。经对病死牛的剖检发现，肠道病变部位肠黏膜厚度增加明显，存在硬且弯曲的褶皱，并存在充血表现，以及浑浊黏液。尤其是回肠变硬增厚，疾病改变非常明显。肠道中的内容物较少，以液体居多。由于该病为人畜共患病，在病理剖检过程中，需加强个人防护，做好剖检的各项记录，并对病牛活动场所，接触到的事物等，进行全面彻底的消毒，避免疾病传播蔓延。3实验室诊断3.1结核菌素(PPD)诊断PPD变态反应对技术条件要求不高，实际操作较为简单，是肉牛副结核病常用的实验室诊断方法，实际应用中检测率高，缺点是受人工操作水平的影响，容易出现假阳性问题，应注重诊断操作的规范化，精确控制牛副结核菌素的剂量。具体操作流程如下，（1）注射前处理，小于90d的犊牛注射部位是肩胛位置，其它牛注射部位是牛颈侧，在中上1cm位置剪毛；（2）牛型结核分枝杆菌PPD剂量控制，所有肉牛的注射剂量为0.1mL；（3）实际操作方法，注射之前先涂抹5%碘酒，然后再使用75%酒精擦拭，开始皮内注射，需在肉牛的皮肤上出现小泡；（4）注射观察，在完成注射的72h后，观察注射部位有无炎性表现，针对有肿胀、热痛的病牛再次注射，72h后观察炎性反应。3.2抗酸染色法诊断（1）制作病料，从病牛的直肠中取出粪便，放入生理盐水中充分搅拌，然后离心取沉渣作为病料，将病料放在涂片上，静置干燥后，使用酒精灯烘烤，频率为每5s烘烤4次；（2）在涂片上滴入石碳酸复红染液，使用酒精灯再次烘烤，当出现蒸汽后停止，等待染色5min；（3）用清水冲洗涂片，去除涂片上残留的染液，并去除病料上的残留水分；（4）脱色处理，在涂片上滴入脱色剂，使用清水冲洗，反复进行脱色处理，直到病料无红色；（5）使用清水去除涂片上的脱色液，然后去除病料上的水分；（6）使用亚甲蓝复染液再次对病料染色，等待30s后用清水冲洗，去除残留水分，静置涂片完全干燥后，采用显微镜观察，如果观察到抗酸性着色副结核分枝杆菌，证明肉牛感染该病。3.3分离培养法诊断（1）分离培养法选择使用AF-1培养基；（2）为了保证分离培养的质量，分别从病牛解剖的回肠上、粪便中获取样品，获取的样品汇集到一起放入40mL0.75%的HPC液中，在室温下放置48h，使用滴管取上层清液，滴入至AF-1培养基中；（3）将培养基放入37.5℃的恒温箱。经过28d的恒温培养，在培养基中才可出现看得见的菌落，使用抗酸染色法进行疾病的诊断。3.4ELISA试剂盒诊断直接使用副结核分枝杆菌抗体检测诊断试剂盒进行实验室诊断，按照ELISA试剂盒使用说明书操作即可，检测结果肉眼就可判断。副结核分枝杆菌在酶的催化作用下，抗原与抗体发生特异性结合，并放大该反应，在实验室诊断肉牛副结核病中的应用，具有操作简单、诊断速度快，以及检测特异性与敏感性高等优点。4防控方法4.1牛犊期间防控如果妊娠母牛感染或携带副结核分枝杆菌，则在犊牛出生后立即与母牛隔离，严禁该母牛哺乳犊牛。犊牛吸食的母乳需经过巴氏消毒处理，母乳在60℃的条件下，灭菌0.5h，消灭母乳中的杆菌，避免母乳感染副结核病现象。牛犊在6月龄阶段进行2次该病诊断，对感染的牛犊立即淘汰，未感染病菌的牛犊放入牛群混养。犊牛生长至出栏，每年2次该病检测，针对发病或未发病的带菌牛犊隔离饲养，防止该病在不同年龄段牛群之间的传播，进而阻断该病的传播。4.2牛群防控密切关注牛群动态，在饲养管理过程中参照该病临床症状，对肉牛进行观察、触摸等，像是咳嗽、淋巴结情况、粪便形状，以及反复腹泻、逐渐消瘦等，当发现疑似症状后，立即隔离并进行实验室诊断，及时准确判断肉牛是否感染牛副结核病，防止隐性感染牛向养殖环境中排菌，感染到其他健康肉牛。同时上报给动物防疫部门，在第一时间阻断疫情传播，将疫病传播链控制在最小程度，避免地方性流行。4.3加强引进肉牛前后防控（1）引进前的防控，观察肉牛的健康精神状态、被毛是否光泽、采食情况、运动情况等，并进行病菌实验室检测，确定有无感染该病菌，同时做好其他疫病检测，防止引进肉牛携带任何病菌；（2）引进后的防控，对引进的犊牛、后备母牛等进行隔离饲养，经过半年时间3次检测后，确定没有携带该病菌才可放入牛群混养，以避免该病的外部输入。4.4接种疫苗防控目前市场上有专门对该病的疫苗，比如，全菌疫苗在预防该病中有着良好的表现，灭活疫苗可用于发生感染的牛群接种，可起到净化牛群的作用，如牛副结核灭活疫苗，疫苗是将副结核分枝杆菌P18株、P10株等接种在培养基中，经过湿热灭活后接种，可预防肉牛感染该病。在犊牛出生1周后，剪去胸部被毛，消毒后皮下注射1mL。实行严格的肉牛副结核病疫苗接种免疫程序，维持肉牛体内高的抗体水平，降低肉牛感染疫病的概率。4.5饲养管理科学化防控该病以预防为主，通过加强饲养管理，可对该病有预防作用。（1）为肉牛成长提供全价营养，保证饲料品种多样，在肉牛不同生长阶段，针对性的添加维生素、矿物质、微量元素等，以提高肉牛的抗病能力，避免该病的出现；（2）做好牛舍的卫生与消毒工作，每天清洁牛舍，保持牛舍环境的干燥卫生，定期喷洒低毒消毒药剂，比如喷洒来苏尔，消除牛舍环境中隐藏的副结核分枝杆菌，避免肉牛接触感染现象。同时注意每天清洁饮水设施与料槽，并定期进行消毒，不留有任何消毒死角；（3）适当增加肉牛的运动量，专门设立运动场地，每天定时安排肉牛运动，必须保证1h的运动量，尤其是太阳光照较好的情况下，让肉牛到户外运动接受光照，可