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文档简介

高中生物动物细胞融合与单克隆抗体练习题

一、选择题(本题共计10小题,每题3分,共计30分,)

1.单克隆抗体注入人体后可以自动跟踪抗原(病原体或癌变细胞)并与之结合,而绝

不攻击任何正常细胞,故称之为“生物导弹”,这是利用()

A.细胞膜具有一定的流动性的特点

B.单克隆抗体的导向作用

C.效应B细胞能直接合成特异性抗体

D.在单克隆抗体上连接的抗癌药物

2.实践表明,普通的单克隆抗体易被人体的免疫系统识别为异源蛋白而被清除。为解

决这一问题,科研工作者对人源性单克隆抗体进行了研究,具体的操作过程如下:先

用人的抗体基因取代小鼠的抗体基因,获得转基因小鼠;然后从接受抗原刺激的转基

因小鼠体内获取B淋巴细胞,使这些B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,经过筛选之后获

得杂交瘤细胞用于单克隆抗体的制备。以下叙述错误的是()

A.获取转基因小鼠时,常用显微注射法将目的基因导入小鼠受精卵

B.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时,可以利用灭活的病毒进行诱导

C.对融合后获得的杂交瘤细胞进行培养即可获得大量的单克隆抗体

D.人源性单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、抗原性低等特点

3.“生物导弹”是指()

A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞

C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单抗上链接抗癌药物

4.制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括()

A.DM4重组技术B.细胞融合C.胚胎移植D.细胞核移植

5.用动物细胞融合方法制备单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是()

A.将抗原注入小鼠体内,产生特定的B淋巴细胞

B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞

C.用聚乙二醇诱导B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞的融合

D.筛选出特定的杂交瘤细胞群,培养后提取单克隆抗体

6.如图是一种“生物导弹”的作用原理示意图,没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段

时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药,可抑制DNA和RNA的合成,对正常细

胞也有一定毒性。下列说法不正确的是()

A.单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的

B.活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程

C.在治疗中,应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹

D.单克隆抗体特异性强,能减轻阿霉素对正常细胞的伤害

7.科研人员将抗癌药物连接在单抗上制成“生物导弹”用于癌症治疗.“生物导弹”由两

部分组成,一是“瞄准装置”,二是“杀伤性弹头”,分析下列有关描述,其中不正确的

是()

A.“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成

B.“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成

C.“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能

D.“生物导弹”的制备应用了细胞工程

8.下列有关单克隆抗体制备的叙述中,正确的是()

A.与骨髓瘤细胞融合的是经过免疫的T淋巴细胞

B.融合前需要用多种蛋白质酶处理淋巴细胞和骨髓瘤细胞

C.制备过程中不需要动物细胞培养技术

D.融合后经过筛选的杂交瘤细胞既能无限增殖又能分泌单一抗体

9.下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是()

A.制备过程中需要细胞整合但不需要动物细胞培养技术

B.杂交瘤细胞能够无限增殖,实质上就是癌变的浆细胞

C.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产

D.单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂,具有准确、快速等优点

10.将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够用于杀死人类某些癌细胞。

其过程如图所示。下列有关叙述错误的是()

抗蝙药物

|储介

免疫后骅斑中的细1町①r杂交加②一小克注I一生物③.

癌细胞

件修构细胞」细胞抗体导弹

A.①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同

B.经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体

C.②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞

D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性

二、填空题(本题共计6小题,每题3分,共计18分,)

试卷第2页,总23页

11.“生物导弹,,是免疫导向药物的形象称呼,由单克隆抗体与药物配合而成。单克隆抗

体能自动导向,在生物体内与特定目标细胞或组织结合,并由其携带的药物产生治疗

作用。单克隆抗体的制备过程如图所示,分析回答下列问题:

体外培养

骨倒府细胞小M体内培养

(1)制备特异性的单克隆抗体,首先要对小鼠注射特定O

(2)与诱导植物原生质体融合相比,诱导小鼠B细胞和骨髓瘤细胞形成杂交瘤细胞的

特有方法是________。若只考虑细胞的两两融合,理论上融合的细胞有种类

型,符合要求细胞的特点是O

(3)在图甲制备单克隆抗体的过程中,应用和两个生物技术手段。

获得细胞杂交瘤细胞以后,还需进行经多次筛选就可获得足够数量的能分

泌所需抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞进行体外培养时,需用CO2培养箱,其中co2

的主要作用是O

(4)体外培养杂交瘤细胞的培养基与用于植物组织培养的培养基在物理性质上的主要

区别是前者要用(固体或液体)培养基,从培养基的成分来看,前者培养基

中由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚,还需要加入。

(5)特异性抗体也可以通过常规方法来制备,与常规方法相比,单克隆抗体具有

________优点。

12.狂犬病是由狂犬病病毒引起的人畜共患的烈性传染病,制备鼠源性抗狂犬病病毒单

克隆抗体是检测狂犬病病毒、治疗狂犬病的有效措施之一。请回答下列问题:

(1)用狂犬病病毒的RRIG蛋白免疫小鼠,一段时间后,若小鼠血清中检出________

的抗体,则说明小鼠产生了免疫反应。再从小鼠脾细胞中获取然后将其一

与骨髓瘤细胞融合。

(2)在细胞融合完成后,筛选出杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是________

(3)得到的单克隆抗体能准确地识别出RRIG蛋白,原因是单克隆抗体具有

的特性。

13.黄曲霉毒素(AFT)是由真菌产生的一组结构类似的代谢产物,具有高毒性和强致

癌性。某实验小组将AFT注入小鼠体内,并通过一系列动物细胞培养技术获得了能检

测抗AFT的单克隆抗体,制备流程如图所示。请回答下列问题:

注入AFT

淋巴

3细胞

/和彼贴初选择培养基操作X培养基

/加促融剂

骨前就

细胞

(1)分析上图可知,注人的AFT在免疫学上相当于.,培养骨髓瘤细胞的原

理是.,图中促进B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的促融剂是

(2)用选择培养基培养的目的是.

(3)图中的操作X是可从中提取单克隆抗体。

(4)抗AFT单克隆抗体的特点是。

14.研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳

腺癌细胞中过量。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,

目前已成为有效的生物治疗手段。

(1)大量扩增HER2/neu需要用到PCR技术,常规PCR技术一般包括变性(加热至

90~95℃)、退火(冷却至55~60℃)、延伸(加热至70~75℃)等步骤,退火的目

的是。

(2)制备抗H蛋白单克隆抗体时,需将H蛋白注射到小鼠体内。这样做的目的是

(3)制备抗H蛋白单克隆抗体的过程中,常用来诱导细胞融合的化学诱导剂是

细胞融合的原理是________O

(4)治疗乳腺癌时,方法之一是单独使用抗H蛋白单克隆抗体,试写出利用抗H蛋

白单克隆抗体治疗乳腺癌的另一种方法O

15.利用细胞工程技术可以生产单克隆抗体和“人鼠嵌合抗体”,在人类征服疾病方面展

现出诱人的前景。回答下列问题:

(1)将小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫过的B细胞融合,形成杂交瘤细胞,动物细胞融

合常用的诱导因素有电激等。对融合的细胞需要进行筛选、克隆

化培养和进而获得可以产生单克隆抗体的细胞群体。

(2)临床发现,利用上述方法产生的抗体具有外源性,会被人体免疫系统清除。科学

家通过分析抗体的结构发现,抗体由“C区”和“V区”构成,引起人体免疫反应的主要是

“C区”。科学家通过“人鼠嵌合抗体”成功解决了这个问题。

试卷第4页,总23页

①制备"人鼠嵌合抗体”时,先从小鼠杂交瘤细胞中提取RNA,在_______酶的作用下

形成DNA,然后扩增并筛选得到编码抗体________区的基因,再与人的基因

通过DNA连接酶连接后,插入适当的表达载体,导入宿主细胞表达。

②与鼠源单克隆抗体相比,“人鼠嵌合抗体”的优点是__________________________O

16.单克隆抗体可采用如图所示的两种方式制备,请回答下列问题:

选溥!次E(甘屏)

城WW次而抗体阚一”

<口的基畏)过收体

力也

任取

巴旭怅小鼠•》小#念胞构建期1DNA

卜人

]选界性培养

熄0酬胤

|第.怅峥沈

*坤基1点《学植株

电胞

2修

I护土

*

H定的单曲也体H定的学克局抗体

(1)小鼠被埃博拉病毒感染后,体内细胞首先摄入并处理后将抗原信息传递

给细胞,后者通过合成分泌并和病毒共同使B淋巴细胞激活。

(2)在诱导细胞融合时不同于诱导植物原生质体融合的诱导因素是_______o经选择

性培养获得的①细胞是由①细胞到获得②细胞还需进行O

(3)采用图乙方式生产单克隆抗体时,为使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达,

应将目的基因插入到Ti质粒的_______上,再采用农杆菌转化法使目的基因插入到烟

草细胞中的_______上。

(4)筛选出目的基因导入成功的烟草细胞接种到诱导培养基中使其形成愈伤

组织,选择生长良好的愈伤组织转接到培养基上培养一段时间就可获得转基

因烟草植株。

三、解答题(本题共计10小题,每题10分,共计100分,)

17.EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒,科学家通过细胞工程制备了抗EV71的

单克隆抗体,回答下列有关问题:

(1)从小鼠脾脏中取得B淋巴细胞之前需先向小鼠注射进行免疫,原因是

(2)得到的B淋巴细胞与细胞经灭活的病毒诱导,可以得到种两两

融合的细胞,之后再从中筛选出既能又能产生特异性抗体的细胞。

(3)制备抗EV71的单克隆抗体用到的动物细胞工程技术有动物细胞融合和

单克隆抗体具有的优点是因此广泛用于疾病的诊断等方面。

(4)为研究抗体的作用效果,将获得的单克隆抗体与等量EV71混合,再加入到培养

有RD细胞(EV71的宿主细胞)的培养液中,测定以分析抗体的作用效果。

(^)

。④

单克隆抗体

18.如图示单克隆抗体的制备过程,请回答相关问题:

(1)图中①表示给小鼠注射,细胞②是.

(2)第④步不仅是细胞培养的过程,也是细胞筛选的过程.若细胞②基因型为44

细胞③基因型为筛选的目标应是基因型为的细胞.

(3)②③融合后的细胞称为细胞,④⑤过程细胞连续增殖,此过程亦可称为

克隆.这些细胞表现出的特点是.

19.新冠疫情爆发以来,世界各国都在积极应对,共同防疫。近期,某国科研团队首次

绘制出2019-nCoV的一个关键抗原蛋白分子(记作H蛋白)的3D结构,这种蛋白为

开发疫苗、制备治疗性抗体提供了依据。某科研小组以该蛋白为抗原制备了单克隆抗

体,具体流程是:请回答:

免疫小鼠-细胞融合-选择性培养一单克隆抗体的制备

(1)根据研究的目的,为使小鼠产生特定的B淋巴细胞,应采取的措施是。

将从免疫的小鼠中获取的B淋巴细胞与细胞按一定比例混合,并加入促融合

剂诱导细胞融合。

(2)细胞融合是随机的过程,因此需要筛选,第一次筛选是在_______培养基中进行

培养,目的是o第二次筛选的目的是。

(3)将筛选后最终得到的细胞在________做大规模培养,或内增殖。

(4)该单克隆抗体可用于制备蛋白质检测试剂盒,以检测是否感染2019-nCoV,其

原理是与血浆抗体相比,其具有的优点是O

试卷第6页,总23页

20.如图为细胞融合的简略过程,请据图回答:

(1)若4B是植物细胞,在细胞融合之前应用处理,除去;A、B

到细胞C的过程中,常用的化学方法是

(2)若力、B是植物细胞,则形成的D细胞还要应用技术把。培养成植株.

(3)若力、B是动物细胞,一般取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,

然后用使其分散开来,力、B到C的过程中,常用的不同于植物细胞的手段是

所形成的D称为.

(4)若该过程仍是制备单克隆抗体,在4B到C的过程中,所形成的C有种,

用来培养的D的细胞应该是,从中选择出它的方法是培养,获得D后,

常用的培养方法是和.

21.下图是高产奶牛克隆过程的流程图,请分析:

供体____细胞供体

出与

体细胞培养一*细胞核供

遗传

、核移重组重组胚胎代孕物

卵巢卵减四十种去核g/,细胞—胚胎移植‘母体体

母细胞丽产母细胞

(1)动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体的原因是什么?

(2)用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明了什么?

(3)选择卵母细胞的原因是什么?

(4)核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不完全相同的原因是什么?

22.(云南师大附中月考六)HCG(人绒毛膜促性腺激素)是由胎盘绒毛膜细胞产生的

一种激素,由a和(3二聚体的糖蛋白组成,其中a-亚基的组成和结构与人垂体分泌的

TSH等激素的亚基一致,[3-亚基则是HCG所特异的,临床上常用血HCG或尿HCG来

诊断早孕。如图表示制备抗HCG单克隆抗体的过程。请回答下列问题:

混合后进行细胞融合,

HAT培养基培养

杂交瘤细胞培养阳性克隆筛选阳性克隆扩大化培养

骨髓瘤细胞

制备单克隆抗体过程中要用到和技术,前者是后者的基础。

用HCG对小鼠进行注射,一段时间后,若小鼠脾脏细胞中抗体检测呈阳性,

说明小鼠的脾细胞中已形成了相应的[①]细胞。

要将细胞①和骨髓瘤细胞融合,常用的诱导因素有(写出两种)和电激等。

HAT培养基选择出的是的杂交瘤细胞。

“阳性克隆扩大化培养”后得到的抗HCG单克隆抗体具有的优点,但有时用健

康男性的血液进行实验也会出现假阳性反应,可能的原因是。

23.如图是单克隆抗体制备流程示意图,请据图回答下列问题.

(不畿在HAT埼

东泉上生长)

丸令外it

行y胞”一

合.表附令*

HAT*#.电死亡逸IT出产生

(产生转异机体)愚上塔恭开南1批体

余文

的物肥

电L长

(1)技术是单克隆抗体技术的基础,注入小鼠的a物质,在免疫学中称为

(2)利用/MT培养基筛选出的杂交瘤细胞,既具有骨髓瘤细胞的特点,也具

有淋巴细胞的特点.

(3)将从/MT培养基筛选得到的杂交瘤细胞,稀释到7〜10个细胞/小。在培养板上

每孔滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是.

(4)单克隆抗体最主要的优点是并可能大量制备.利用单克隆抗体和

结合,在特定的仪器中成像,可以定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病.

24.如图为某单克隆抗体制备过程示意图.请回答下列问题:

(1)经过程①和过程②,细胞全能性的变化情况分别是(填“变大”、“变小”

或“不变”).

试卷第8页,总23页

(2)x细胞和丫细胞融合成z细胞依据的原理是.过程③需要在________性培

养基上培养.通过过程④得到的抗体的主要的优点是

(3)在临床试验中,将抗癌细胞的单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结

合制成“生物导弹”,注入体内,借助单克隆抗体的作用将药物带到癌细胞所

在位置并将其杀死.

(4)图中单克隆抗体的制备和克隆羊“多莉”产生的过程中,都必须用到的动物细胞工

程技术是.在克隆技术伦理方面,我国政府的态度是.

25.科学家们已经陆续从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5NZ亚型禽流感病毒(一种

RM4病毒).现在若生产可以用于预防和治疗禽流感的抗体,请根据下面的单克隆抗

体制备过程示意图回答有关问题:

体内培养

B(O小鼠

筛选

•单克隆

o(O>・抗体

CD细胞培养

体外培养

(1)若2细胞是小鼠骨髓瘤细胞.则B细胞是取自感染病毒的动物或人体内的细胞,d

过程的常用诱导方法是(写出两种方法).细胞融合体现了细胞膜的特点是

(2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成种类型的C细胞,因此需要筛

选出的。细胞用于培养.。细胞的名称是.

(3)在进行细胞培养时一般要满足以下条件:.(写出其中的两

项)

(4)单克隆抗体的特点是:

26.如图是某科学家利用小鼠纤维母细胞等获得单克隆抗体的实验研究过程.请据图回

答:

(1)①过程类似于植物组织培养技术中的过程.②过程的实质是________.

(2)③过程中需用到的生物诱导方法是________.

(3)④处需要筛选,其目的是________.

甲小R的野"楣I肝为团“经国

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再HM僦靴一戟

蜃侬人乙根一丫躺

试卷第10页,总23页

参考答案与试题解析

高中生物动物细胞融合与单克隆抗体练习题

一、选择题(本题共计10小题,每题3分,共计30分)

1.

【答案】

B

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

生物导弹:单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素,借助单克隆抗体的定位

导向作用将药物定向带到癌细胞,在原位杀死癌细胞.疗效高,副作用小,位置准确.

【解答】

解:单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合,

而绝不攻击任何正常细胞,故称为“生物导弹”,这是利用了单克隆抗体的导向作用,

即抗原与抗体之间的高度特异性结合.

故选:B.

2.

【答案】

C

【考点】

单克隆抗体的优点

单克隆抗体的制备过程

【解析】

此题暂无解析

【解答】

此题暂无解答

3.

【答案】

D

【考点】

单克隆抗体的优点

【解析】

单克隆抗体是由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、

特异性强的抗体.

生物导弹:单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素(借助单克隆抗体的定位

导向作用将药物定向带到癌细胞,在原位杀死癌细胞.疗效高,副作用小,位置准

确.)

【解答】

解:生物导弹是指单克隆抗体上连接放射性同位素、化学药物或细胞毒素,能够借助

单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞,在原位杀死癌细胞.

故选:D.

4.

【答案】

B

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

单克隆抗体的制备流程:人工诱导经过免疫的8淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,再经筛选

获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞,通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体,整

个过程不涉及胚胎移植和细胞核移植这两项技术.单克隆抗体主要涉及的细胞工程技

术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术等.

【解答】

解:单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,没

有用到DM4重组技术、胚胎移植、细胞核移植技术,B正确;4CD错误.

故选:B.

5.

【答案】

B

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

在单克隆抗体的制备过程中,首先对小鼠进行免疫,以产生特定的浆细胞;在诱导细

胞融合时常使用的诱导剂有聚乙二醇和灭活的病毒;由于动物细胞融合时,有同种细

胞融合和异种细胞融合,因此需要在选择培养基中选择出特定的杂交瘤细胞,然后将

其在体外培养或注射到小鼠的腹腔中.

【解答】

解:4、在单克隆抗体的制备过程中,首先对小鼠进行免疫,以产生特定的浆细胞,A

正确;

B、在诱导细胞融合时常使用的诱导剂有聚乙二醇和灭活的病毒,B错误;

C、在动物细胞融合时可以使用聚乙二醇作为诱导剂,C正确;

由于动物细胞融合时,有同种细胞融合和异种细胞融合,因此需要在选择培养基

中选择出特定的杂交瘤细胞,然后将其在体外培养或注射到小鼠的腹腔中,。正确.

故选:B.

6.

【答案】

C

【考点】

单克隆抗体的优点

【解析】

血清抗体与单克隆抗体的比较:

名称产生特点

血清抗体由B淋巴一般从血清中分离,产量低、纯度低、特异

性差

单克隆抗由杂交瘤细胞分特异性强,灵敏度高,能大量制备

体泌

【解答】

试卷第12页,总23页

A、单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的,A正确;

B、根据题意可知,“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”,因此活化阿霉素能抑制细

胞中的DNA复制和转录过程,B正确;

C、在治疗中,应将非活化磷酸阿霉素和生物导弹同时注射,C错误;

D、单克隆抗体特异性强,能减轻阿霉素对正常细胞的伤害,D正确。

7.

【答案】

C

【考点】

单克隆抗体的制备过程

单克隆抗体的优点

【解析】

1、单克隆抗体是由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单

一、特异性强的抗体.

2、生物导弹:单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素(借助单克隆抗体的

定位导向作用将药物定向带到癌细胞,在原位杀死癌细胞.疗效高,副作用小,位置

准确).

【解答】

解:人“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成力正确;

8、“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成,B正确;

C、“弹头”中的药物能杀伤肿瘤细胞,也能杀伤正常细胞,没有选择性,C错误;

“生物导弹”的制备应用了细胞工程,包括动物细胞融合技术、动物细胞培养技术,

D正确.

故选:C.

8.

【答案】

D

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

在单克隆抗体的制备过程中,需要用浆细胞与骨髓瘤细胞融合;诱导动物细胞融合时,

使用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂;动物细胞融合后,经过筛选获得的杂交瘤细

胞具有既能无限增殖又能分泌单一抗体的特点.

【解答】

解:a、在单克隆抗体的制备过程中,需要用浆细胞与骨髓瘤细胞融合,a错误;

B、诱导动物细胞融合前,需用用胰蛋白酶处理骨髓瘤细胞,成为单个细胞(淋巴细胞

本身就是单个存在),不能用胃蛋白酶,因为胃蛋白酶的最适PH值呈酸性,和动物细

胞培养液的值相差太远,故融合前需用胰蛋白酶处理骨髓瘤细胞,8错误;

C、制备单克隆抗体涉及的技术有动物细胞融合、动物细胞培养,C错误;

。、动物细胞融合后,经过筛选能获得异种细胞融合的杂交瘤细胞,该细胞的特点是

既能无限增殖又能分泌单一抗体,。正确.

故选:。.

9.

【答案】

D

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

1、单克隆抗体的制备过程是:对小动物注射抗原,从该动物的脾脏中获取效应B细胞,

将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞,克隆化培养杂

交瘤细胞(体内培养和体外培养),最后获取单克隆抗体.

2、两次筛选:筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞);筛选

出能够产生特异性抗体的细胞群.

【解答】

解:人制备单克隆抗体过程中需要动物细胞融合和动物细胞培养技术,4错误;

8、杂交瘤细胞是把骨髓瘤细胞和浆细胞融合成的,不是浆细胞癌变的结果,B错误;

C、经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞还要经过第二次筛选才能用于单克隆抗体的

生产,C错误;

。、单克隆抗体最广泛的用途是用作诊断试剂,具有准确、高效、简易、快速等优点,

。正确.

故选:D.

10.

【答案】

B

【考点】

单克隆抗体的制备过程

单克隆抗体的优点

【解析】

1、单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏

中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导8细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出

杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,

即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体.

2、单克隆抗体的作用:

①作为诊断试剂:(最广泛的用途)具有准确、高效、简易、快速的优点.

②用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症,可制成“生物导弹”.

【解答】

解:4、①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同,都是细胞膜的流动性,A

正确;

B、经①形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体,需要经过抗体阳性检测筛选出能

产生特异性抗体的杂交瘤细胞,B错误;

C、②过程需要采用抗体阳性检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,然后进行克

隆化培养(包括体内培养和体外培养),C正确;

。、抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性,。正确.

故选:B.

二、填空题(本题共计6小题,每题3分,共计18分)

11.

【答案】

抗原

灭活的病毒,3,能产生抗体和无限增殖

动物细胞培养,动物细胞融合,克隆化培养和抗体检测,维持培养液的pH

试卷第14页,总23页

液体,动物血清、血浆

特异性强,灵敏度高,可大量制备

【考点】

单克隆抗体的制备过程

单克隆抗体的优点

【解析】

1、单克隆抗体的制备过程是:对小动物注射抗原,从该动物的脾脏中获取效应B细胞,

将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞,克隆化培养

杂交瘤细胞(体内培养和体外培养),最后获取单克隆抗体。诱导动物细胞融合的方

法有:物理法(离心、振动)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。

2、据图分析,A表示提取B淋巴细胞,B表示动物细胞融合,杂交瘤细胞的特点是既

能大量增殖,又能产生特定的抗体。

【解答】

制备特异性的单克隆抗体,首先要对小鼠注射特定抗原,使其产生已免疫的B细胞。

诱导融合的方法与植物体细胞杂交相比特有的是用灭活的病毒诱导融合;若只考虑细

胞的两两融合,理论上融合的细胞有3种类型,即B-B融合的细胞,骨髓瘤细胞-

骨髓瘤细胞融合的细胞和杂交瘤细胞,符合要求细胞是杂交瘤细胞,其特点是能产生

抗体和无限增殖。

在制备单克隆抗体的过程中,用到的动物细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融

合技术。获得细胞杂交瘤细胞以后,还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选就

可获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞进行体外培养时,需用

CO2培养箱,其中CO?的主要作用是维持培养液的pH。

植物组织培养的培养基在物理性质上是固体培养基,而体外培养杂交瘤细胞的培养基

用液体培养基,从培养基的成分来看,前者培养基中除了添加必要的营养物质外还需

要加入含天然成分的动物血清、血浆。

单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等优点。

12.

【答案】

抗RRIG蛋白,B淋巴细胞

无限增殖且能产生专一性抗体

特异性强,灵敏度高

【考点】

单克隆抗体的制备过程

单克隆抗体的优点

【解析】

制备单克隆抗体的原理:B淋巴细胞能产生抗体,但在体外培养条件下不能无限增殖;

骨髓瘤细胞能无限增殖,但不能产生抗体。B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交

瘤细胞既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体。但细胞融合时,除了产生杂交

瘤细胞,还会产生B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等,因此

需要用特定的选择性培养基来筛选出杂交瘤细胞,并进行克隆化培养和抗体检测。

【解答】

用狂犬病病毒的RRIG蛋白免疫小鼠,一段时间后,若小鼠血清中检出抗RRIG蛋白的

抗体,则说明小鼠产生了免疫反应。再从小鼠脾细胞中获取B淋巴细胞,然后将其一

与骨髓瘤细胞融合。

在细胞融合完成后,筛选出杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是无限增殖且能产生专一

性抗体。

得到的单克隆抗体能准确地识别出RRIG蛋白,原因是单克隆抗体具有特异性强,灵

敏度高的特性。

13.

【答案】

抗原,细胞增殖,聚乙二醇

筛选出杂交瘤细胞

单一抗体检测和克隆化培养,培养液

特异性强、灵敏度高,可大量制备

【考点】

单克隆抗体的制备过程

单克隆抗体的优点

【解析】

单克隆抗体的制备过程是:对小动物注射抗原,从该动物的脾脏中获取效应B细胞,

将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞,克隆化培养

杂交瘤细胞(体内培养和体外培养),最后获取单克隆抗体。

据图分析,图中注入小鼠的AFT为抗原,操作X为单一抗体检测和克隆化培养。

【解答】

根据以上分析已知,图中注入小鼠的AFT为抗原;培养骨髓瘤细胞的原理是细胞增殖;

诱导图中不同的动物细胞融合的促溶剂是PEG(聚乙二醇)。

图中选择培养基的作用是对融合细胞进行选择,筛选出杂交瘤细胞。

根据以上分析已知,图中操作X为单一抗体检测和克隆化培养,可以从培养液中提取

单克隆抗体。

单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高,可大量制备等优点。

14.

【答案】

使弓I物与模板发生碱基互补配对

使小鼠体内产生分泌抗H蛋白的B淋巴细胞

聚乙二醇,细胞膜的流动性

将该单克隆抗体与药物结合构建“生物导弹”,注入体内,杀死癌细胞

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

1、单克隆抗体的制备过程是:对小动物注射抗原,从该动物的脾脏中获取效应B细胞,

将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞,克隆化培养

杂交瘤细胞(体内培养和体外培养),最后获取单克隆抗体。

2、诱导动物细胞融合的方法有:物理法(离心、振动)、化学法(聚乙二醇)、生物

法(灭活的病毒)。细胞融合的原理是细胞膜的流动性。

【解答】

常规PCR技术一般包括变性(加热至0~95℃)、退火(冷却至5~60℃)、延伸

(加热至70~75℃)等步骤,其中退火的目的是使引物与模板发生碱基互补配对。

制备抗H蛋白单克隆抗体时,需将H蛋白注射到小鼠体内,这样做的目的是使小鼠体

内产生分泌抗H蛋白的B淋巴细胞。

试卷第16页,总23页

常用来诱导细胞融合的化学诱导剂是聚乙二醇,细胞融合的原理是细胞膜的流动性。

治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可以将抗H蛋白的单克隆抗体与

药物结合制成“生物导弹”,注入体内,杀死癌细胞。

15.

【答案】

(1)聚乙二醇.灭活的病毒,专一抗体检测

(2)逆转录,V,抗体“C”区,降低人体对鼠源单克隆抗体的免疫排斥反应,提高治疗效果

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

本题考查单克隆抗体的制备的相关知识。

【解答】

解:(1)诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等;将小

鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫过的B细胞融合,形成杂交瘤细胞,对融合的细胞需要进

行筛选、克隆培养和专一抗体检测,从而获得可以产生单克隆抗体的细胞群体。

(2)科学家通过分析抗体的结构发现,抗体由“C区”和“V区”构成,引起人体免疫反

应的主要是“C区”,那么我们可以将鼠源抗体的“C区”换为人的“C区”,操作思路是制

备“人鼠嵌合抗体”时,先从小鼠杂交瘤细胞中提取RNA,在逆转录酶的作用下形成

DNA;扩增筛选得到编码抗体V区的基因;再与人的抗体“C区”基因通过DNA连接

酶连接后,插入适当的表达载体,导入宿主细胞表达。与鼠源单克隆抗体相比,“人鼠

嵌合抗体”的优点是降低人体对鼠源单克隆抗体的免疫排斥反应,提高治疗效果。

16.

【答案】

吞噬,T,淋巴因子

灭活的病毒,杂交瘤细胞,克隆化培养和抗体检测

T-DNA,染色体DNA

脱分化,再分化

【考点】

单克隆抗体的优点

单克隆抗体的制备过程

【解析】

题图分析:图甲表示通过动物获取单克隆抗体过程,其中①表示杂交瘤细胞,②表示

筛选出的能产生专一抗体的杂交瘤细胞;图乙表示通过转基因技术在植物体内获取单

克隆抗体的过程。

【解答】

小鼠被埃博拉病毒感染后,体内吞噬细胞首先摄入并处理后将抗原信息传递给T细胞,

T细胞通过合成分泌淋巴因子并和病毒共同使B淋巴细胞激活。

在诱导细胞融合时不同于诱导植物原生质体融合的诱导因素是灭活的病毒。经选择性

培养获得的①细胞是杂交瘤细胞,由①细胞到获得②细胞还需进行克隆化培养和专一

抗体检测,筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞用于大量培养。

采用图乙方式生产单克隆抗体时,为使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达,应

将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA±,再采用农杆菌转化法使目的基因插入到烟草

细胞中的染色体DNA上。

筛选出目的基因导入成功的烟草细胞接种到诱导培养基中使其脱分化形成愈伤组织,

选择生长良好的愈伤组织转接到再分化培养基上培养一段时间就可获得转基因烟草植

株。

三、解答题(本题共计10小题,每题10分,共计100分)

17.

【答案】

EV71,在EV71的刺激下,小鼠体内才能产生能够分泌抗EV71抗体的B淋巴细胞(或

浆细胞)

骨髓瘤,3,无限增殖

动物细胞培养,特异性强、灵敏度高、可大量制备

RD细胞对EV71的感染率

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中

获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出

杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,

即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【解答】

在EV71的刺激下,小鼠体内才能产生能够分泌抗EV71抗体的B淋巴细胞(或浆细

胞),因此从小鼠脾脏中取得B淋巴细胞之前需先向小鼠注射EV71进行免疫。

得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经灭活的病毒诱导,可以得到3种两两融合的细胞,

分别是B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞,之后

再从中筛选出既能无限增殖,又能产生特异性抗体的细胞。

制备单克隆抗体用到的动物细胞工程技术包括动物细胞融合和动物细胞培养;单克隆

抗体具有的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。

将获得的单克隆抗体与等量EV71混合,再加入到培养有RD细胞(EV71的宿主细胞)

的培养液中,通过测定RD细胞对EV71的感染率,可以分析抗体的作用效果。

18.

【答案】

抗原,效应B淋巴细胞

AABB

杂交瘤,既能无限繁殖,又能产生单一抗体

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

分析图示,表示单克隆抗体的制备过程,其中①表示对小鼠注射特定的抗原蛋白,使

小鼠产生免疫反应;②表示得到相应的B淋巴细胞;③表示将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴

细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;④表示在该培养基上,未融合的亲本细

胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长(这种杂种细

胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体);⑤表示对上述杂交瘤细胞还需

进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞;

⑥表示将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养;⑦表示将杂交瘤细胞注射到小鼠腹

腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体.

【解答】

试卷第18页,总23页

解:(1)图中①表示给小鼠注射(特定的)抗原.细胞②是效应8淋巴(浆)细胞.

(2)第④步在进行第一次筛选时,若细胞②基因型为44,细胞③基因型为BB,筛选

的目标应是基因型为4aBB的细胞.

(3)细胞②是效应B淋巴(浆)细胞;细胞③是骨髓瘤细胞,融合形成的细胞称为杂

交瘤细胞,其特点是既能大量增殖,又能分泌专一性抗体.

19.

【答案】

注射适量的H蛋白,骨髓瘤,聚乙二醇

特定的选择性,获得杂交瘤细胞,获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞

体外条件下,注射到小鼠腹腔内

抗原-抗体的特异性结合,特异性强,灵敏度高,可大量制备

【考点】

单克隆抗体的制备过程

单克隆抗体的优点

【解析】

单克隆抗体的制备过程:首先用特定抗原注射小鼠体内,使其发生免疫,小鼠体内产

生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融

合,单克隆抗体制备过程中的两次筛选:第一次筛选:利用特定选择培养基筛选,获

得杂交瘤细胞,即AB型细胞(A为B淋巴细胞,B为骨髓瘤细胞),不需要A、B、

AA、BB型细胞。第二次筛选:利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选,获得产生特

定抗体的杂交瘤细胞。

【解答】

给小鼠注射适量的H蛋白为,使小鼠产生特定的B淋巴细胞,将从免疫的小鼠中获取

的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇

,诱导细胞融合。

细胞融合是随机的过程,因此需要筛选,第一次筛选是在特定的选择性培养基中进行

培养,目的是获得杂交瘤细胞。第二次筛选是抗体检测,获得能产生特定抗体的杂交

瘤细胞。

杂交瘤细胞可在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内内增殖。

单克隆抗体可用于制备蛋白质检测试剂盒,以检测是否感染2019-nCoV,原理是抗原

-抗体的特异性结合,与血浆抗体相比,其优点是特异性强,灵敏度高,可大量制备。

20.

【答案】

纤维素酶和果胶酶,细胞壁,聚乙二醇(PEG)

植物组织培养

胰蛋白酶,灭活的病毒诱导,杂种细胞

3,杂交瘤细胞,用特定的选择培养基,培养基中培养,小鼠腹腔内增殖

【考点】

植物体细胞杂交

动物细胞融合技术

单克隆抗体的制备过程

【解析】

1、若4、B为植物细胞,则图示为植物体细胞杂交过程,在细胞融合之前应用纤维素

酶、果胶酶去除植物细胞壁,C为正在融合的细胞,诱导原生质体融合时常用化学法

(聚乙二醇),形成杂种细胞后要利用植物的组织培养技术将细胞培养成植株;

2、若4B是动物细胞,则一般取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,

然后使用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞,在进行培养,在进行动物细胞融合时,

诱导方法有化学法、物理法和生物法(灭活病毒),植物体细胞杂交则只能使用化学

法和物理法.

3、单克隆抗体的制备过程是:对小动物注射抗原,从该动物的脾脏中获取效应B细胞,

将效应8细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞,克隆化培养杂

交瘤细胞(体内培养和体外培养),最后获取单克隆抗体.

【解答】

解:(1)若4、B是植物细胞,细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,故在细胞融合之

前应用纤维素酶和果胶酶处理,除去细胞壁;力、B到细胞C的过程为细胞融合过程中,

常用的化学方法是聚乙二醇(PEG).

(2)若4、B是植物细胞,贝切是杂种细胞,将杂种细胞培育成杂种植株还需要采用植

物组织培养技术.

(3)若4、B是动物细胞,一般取自动物胚胎或幼龄动物,因为幼龄动物细胞的分裂

能力旺盛;将动物组织细胞分散成单个细胞需要采用胰蛋白酶处理;诱导动物细胞融

合的方法包括物理法(离心、振动、电击)、化学法(聚乙二醇)和生物法(灭活的

病毒),其中不能用于植物细胞培养的手段是灭活的病毒;动物细胞融合后形成杂交

细胞.

(4)若该过程仍是制备单克隆抗体,在4、B到C的过程中,所形成的C有3种,即效应

B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞、杂交瘤细胞;用来培养的。细胞

应该是杂交瘤细胞,将它选择出的方法是选择性培养基培养.获得。后,常用的培养

方法是培养基中培养和小鼠腹腔内培养.

21.

【答案】

(1)动物体细胞是高度分化的细胞,其全能性受到限制。

(2)动物体细胞的细胞核具有全能性。

(3)卵母细胞中含有使细胞核全能性表达所需要的物质,能刺激融合后的重组细胞进

行分裂分化,形成重组胚胎。

(4)①克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本。

②在发育过程中可能发生基因突变或染色体变异导致性状改变。

③外界环境条件的影响引起的不可遗传变异。

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

此题暂无解析

【解答】

22.

【答案】

动物细胞培养,动物细胞融合

抗HCG,(已免疫的)B淋巴

试卷第20页,总23页

聚乙二醇(或PEG)、灭活的病毒

既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体

高效、简易、快速,抗体和TSH结合

【考点】

单克隆抗体的制备过程

【解析】

此题暂无解析

【解答】

【命题意图】本题考查单克隆抗体的制备的有关内容。

【解题思路】据图可知,制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合

技术,前者是后者的基础。

【命题意图】本题考查单克隆抗体的制备的有关内容。

【解题思路】用HCG对小鼠进行注射,一段时间后,小鼠脾脏细胞中抗HCG抗体检

测呈阳性,说明小鼠的脾细胞中已形成了相应的[①](已免疫的)B淋巴细胞。

【命题意图】本题考查单克隆抗体的制备的有关内容。

【解题思路】要将细胞①(已免疫的)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,常用的诱导因

素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒和电激等。

【命题意图】本题考查单克隆抗体的制备的有关内容。

【解题思路】HAT培养基选择出的是既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体的杂交瘤

细胞。

【命题意图】本题考查单克隆抗体的制备的有关内容。

【解题思路】“阳性克隆扩大化培养后”得到的抗HCG单克隆抗体具有高效、简易、快

速的优点,但有时用健康男性的血液进行实验也会出现假阳性反应,可能的原因是

HCG的a-亚基的组成与垂体分泌的TSH等激素的亚基一致,导致抗体与TSH结合进

而出现假阳性反应。

23.

【答案】

动物细胞培养,抗原

无限

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