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文档简介
67.050B
20备案号:
DB12天 津 市 地方 标 准DB12/T
650—2016转基因植物及其产品成分筛查Cry1Ab/Cry1Ac
试纸条法Screening
plantCry1Ab/Cry1Ac
strip2016-09-27
发布 2016-11-01
实施天津市市场和质量监督管理委员会发布DB12/T
650—2016 本标准按照
GB/T
—
给出的规则起草。本标准由天津市农村工作委员会提出。本标准起草单位:天津市农业质量标准与检测技术研究所、中国农业科学院生物技术研究所、天津市东丽区产品质量监督检验所。本标准主要起草人:兰青阔、李亮、黄凤军、刘雪岩、赵新、宛煜嵩、易萌、陈锐、徐石勇。本标准
2016
年
9
月首次发布。DB12/T
650—2016
1 范围本标准规定了转基因植物及其产品成分Cry1Ab/Cry1Ac断。本标准适用于表达Cry1Ab/Cry1Ac蛋白的转基因大豆MON87701,转基因玉米MON810、Bt11、Bt176,转基因水稻、克螟稻、科丰六号,转基因棉花、MON15985等主要植物及其初级加工产品中Cry1Ab/Cry1Ac蛋白的试纸条筛查。2 规范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T
6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理特异性单克隆抗体1-NC膜检测线上特异性单克隆抗体2结合形成双抗体夹心复合物,并显色。如果样本中转基因作物含量大于5%,控制线(Control
称C)和检测线(Test
,简称T)显色,结果为阳性;反之,控制线(C)显色,检测线(T)不显色,结果为阴性。4 仪器设备及试剂4.1 仪器设备匀浆器;天平;移液枪;振荡器;离心管等。4.2 试剂提取缓冲液;实验用水为重蒸馏水或符合GB/T
6682规定的一级水等。5 方法步骤5.1 样品的采集和预处理3
幼嫩组织
,置于2
离心管中。作物籽粒可使用铁钳夹碎,取较碎部分置于2
离心管中。5.2 样品研磨加1
mL纯水或提取缓冲液于离心管中,使用一次性研磨杵手工研磨或电钻研磨,确保上层液体体积应至少占总体积三分之一。DB12/T
650—2016对于混合样品,应称重后使用大容量研磨仪器研磨至100目大小粉末,然后加入水或提取缓冲液。5.3 涡旋震荡在振荡器上用力震荡30
,确保样品充分混匀。5.4 试纸条检测震荡后,静置1
待固体物质沉淀分层,尽快从包装中取出试纸条,按照箭头方向插入离心管,开始计时。5.5 读取结果
底色褪去后,将试纸条水平放置于观察者正面读取结果。5.6 结果判断测试结果分为阴性、阳性和无效三种。阴性(—):控制线C
显色,检测线T不显色;阳性(+):控制线C
显色,检测线T显色肉眼可见;无效:C
线未出现,可能操作不当或试纸失效。表明
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