向日葵抗黑茎病水平室内鉴定技术规程_第1页
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文档简介

1向日葵抗黑茎病水平室内鉴定技术规程本文件规定了室内向日葵黑茎病抗性鉴定方法和抗病性评价标准。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义3.1向日葵黑茎病Blackstemofsunflower由黑茎病菌LeptosphaerialindquistiiFrezzi引起的向日葵真菌病害。4向日葵黑茎病菌的培养4.1接种菌株的选择接种菌株选用内蒙古向日葵主栽区发病株上分离到的优势病原菌（Phomamacdonaldii）菌株。4.2培养基的配制PDA培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉13g、用蒸馏水定容至1000mL。4.3病原菌的培养病原菌的培养方法参照DB34/T2784-2016，将保存在甘油中的黑茎病菌菌丝体接种在PDA平板上，置于20℃培养箱中培养。待菌落形成后，在菌落边缘打取直径为4mm菌丝块，接于新的PDA培养基中央进行活化培养。待菌落长到培养皿直径的80%时，打取菌落边缘的菌丝块用于接种。5向日葵黑茎病抗性鉴定5.1对照品种以向日葵黑茎病抗性品种A132088和种A131023作为对照品种。5.2向日葵的种植2将向日葵种子播种在装有无菌土的营养钵（直径15cm）中，每个品种播种5钵，每钵播种5粒，25±2℃,16h光照/8h黑暗条件下培养，待向日葵有4片真叶时开始进行茎杆接种。5.3向日葵抗黑茎病水平鉴定接种法参照DB34/T2784-2016，幼苗4片真叶时，在幼茎离地5cm处，用牙签划一伤口，取黑茎病菌菌落边缘菌块（约0.5cm）覆盖于伤口，用保鲜膜保湿，每个品种接种20株，以接种PDA培养基的作为对照。接种15d后测量茎秆上病斑长度。5.4向日葵品种对黑茎病抗性的鉴定标准根据被鉴定品种病斑长度评定品种的抗性级别，抗性级别的划分

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