期末必刷非选择题30道（原卷版）

期末必刷非选择题30道1．研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下有催化活性的α淀粉酶A3，并对其进行了研究。回答下列问题：（1）在以淀粉为底物测定A3酶活性时，既可检测淀粉的减少，检测应采用的试剂是，也可采用斐林试剂检测的增加。（2）在A3的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度，通常会在凝胶中添加SDS，SDS的作用是和。（3）本实验中，研究人员在确定A3的最适pH时使用了三种组分不同的缓冲系统，结果如图所示。某同学据图判断，缓冲系统的组分对酶活性有影响，其判断依据是。（4）在制备A3的固定化酶时，一般不宜采用包埋法，原因是（答出1点即可）。2．种子中储藏着大量淀粉、脂质和蛋白质，不同植物的种子中，这些有机物的含量差异很大。通常根据有机物的含量将种子分为淀粉种子、油料种子和豆类种子。下图是油料种子成熟和萌发过程中营养物质的含量变化示意图。回答下列问题：(1)油料种子成熟与萌发过程中，糖类和脂肪是相互转化的，图中给出的依据是。(2)相同质量时豆类种子在萌发时吸水量比油料种子，理由是。(3)谷类种子和油料种子分别以淀粉和脂肪为主要营养物质，种子萌发时这两种物质都氧化分解为CO2和H2O。现有谷类种子和油料种子各一组，请根据种子在适宜条件下萌发时O2消耗量与CO2释放量的关系，设计实验以确定种子的类型：实验思路：分别检测这两组种子萌发时O2消耗量和CO2释放量的比值（或CO2释放量和O2消耗量的比值），并比较两组比值的大小。预期实验结果及结论：萌发时O2消耗量和CO2释放量的比值的一组为油料种子。请解释：3．为了给科学调控小麦种子萌发提供理论依据，有学者研究了小麦种子萌发过程中还原糖和总糖含量的变化。实验过程：将新鲜的、经过筛选的小麦种子放入培养箱。小麦种子吸水4小时后开始萌芽并进入幼苗生长阶段。研究人员在小麦种子吸水4小时后，每隔4小时对种子各种糖含量进行测定，结果见下图。回答问题：(1)糖类是细胞中主要的。在小麦种子萌发的过程中，除蔗糖外，另一种含量丰富的二糖是。(2)小麦种子萌发12小时后，还原糖的含量。发生这一变化与种子萌发12小时后消耗迅速增加密切相关。(3)种子萌发20小时后，蔗糖含量下降最可能的原因是。(4)某同学查阅资料得知，大豆种子在萌发过程中蛋白质含量会升高，于是设计实验验证该结论。请你完善以下实验思路和预期结果：实验思路：取萌发前、萌发中和萌发后的种子磨成匀浆，分别置于A、B、C三支试管中，用鉴定，观察并比较各试管的颜色及深度。预期结果：，则结论正确。4．脲酶能够将尿素分解成二氧化碳和氨（氨溶于水后形成铵根离子）。某研究人员利用一定浓度的尿溶液进行了铜离子对脲酶活性的影响实验，得到下图所示结果。请回答下列问题：(1)1917年，美国科学家萨姆纳从刀豆种子中提取到脲酶的结晶，并用多种方法证明了脲酶的化学本质是。(2)图示实验的自变量为；实验结果表明，随着铜离子浓度的升高，脲酶的活性。图中显示，脲酶作用的最适温度范围是℃。为了进一步探究脲酶作用的最适温度，请写出实验设计的基本思路：。(3)幽门螺杆菌是导致胃炎的罪魁祸首，该微生物也可以产生脲酶，并分泌到细胞外发挥作用，该微生物合成脲酶的过程中参与的细胞器是。13C呼气试验检测系统是国际上公认的幽门螺杆菌检查的“金标准”，被测者先口服用13C标记的尿素，然后向专用的呼气卡中吹气留取样本，即可以准确地检测出被测者是否被幽门螺杆菌感染。请简要说明呼气试验检测的原理：。5．线粒体是真核细胞的重要细胞器。当线粒体受损时，细胞通过清理受损的线粒体来维持细胞内的稳态。我国科研人员对此开展研究。(1)线粒体中进行的代谢反应会生成大量ATP，这些ATP被用于细胞内多种（选填“吸能”或“放能”）反应。(2)科研人员推测受损线粒体可通过进入迁移体（细胞在迁移中形成的一种囊泡结构）而被释放到细胞外，即“线粒体胞吐”。为此，科研人员利用绿色荧光标记迁移体，红色荧光标记线粒体，用药物C处理细胞使线粒体受损，若观察到，则可初步验证上述推测。(3)为研究受损线粒体进入迁移体的机制，科研人员进一步实验。①真核细胞内的锚定并支撑着细胞器，与细胞器在细胞内的运输有关。②为研究D蛋白和K蛋白在线粒体胞吐中的作用，对红色荧光标记了线粒体的细胞进行相应操作，检测迁移体中的红色荧光，操作及结果如图1和2．图1结果表明，K蛋白。图2结果表明，。(4)研究表明，正常线粒体内膜两侧离子分布不均，形成线粒体膜电位，而受损线粒体的膜电位丧失或降低。科研人员构建了D蛋白基因敲除的细胞系，测定并计算经药物C处理的正常细胞和D蛋白基因敲除细胞系的线粒体膜电位平均值，结果如下表。细胞类型正常细胞D蛋白基因敲除细胞系细胞中全部线粒体膜电位的平均值（荧光强度相对值）4．15．8D蛋白基因敲除细胞系线粒体膜电位的平均值升高的原因是。6．血浆中胆固醇含量过高是导致动脉粥样硬化和冠状动脉疾病的一种重要原因。胆固醇主要在肝细胞中合成，在血液中是通过与磷脂和蛋白质结合形成低密度脂蛋白（LDL）颗粒形式运输到其他组织细胞（靶细胞）中，以满足这些细胞对胆固醇的需要，同时减低血浆中胆固醇含量。(1)下图是LDL通过受体介导的胞吞作用进入细胞的途径。①胆固醇参与人体血液中脂质的运输，还参与构成。②LDL受体的化学本质是蛋白质，其合成后由囊泡运输至细胞膜，据此推测，与LDL受体合成、加工、修饰有关的细胞器有。③胞内体膜上有ATP驱动的质子泵，将H+泵进胞内体腔中，使腔内pH降低，从而引起LDL与受体分离，此过程中H+的运输方式是。(2)人体血液中高水平的LDL会诱发高胆固醇血脂症。PCSK9蛋白是能与LDL受体结合的蛋白质，研究人员发现，当利用PCSK9基因的某种突变体，使PCSK9蛋白活性增强时，会增加LDL受体在溶酶体中的降解，导致细胞表面LDL受体减少，根据这个实验现象，请设计一种治疗高胆固醇血脂症的思路。。(3)他汀类药物是常规的降脂药物，但长期使用他汀类药物，患者血液中LDL含量反而会升高，出现胆固醇逃逸现象。研究人员随机选取了167例心肌梗死患者作为研究对象，比较分析单用他汀类药物处理后，患者体内PSCK9蛋白的含量变化，得到下列结果。处理时间（周）PCSK9蛋白含量（ng/ml)对照组实验组017．136．2117．118．8417．125．1请根据（1）（2）推测，长时间使用他汀类药物导致胆固醇逃逸的原因。。7．人工光合作用系统可利用太阳能合成糖类，相关装置及过程如下图所示，其中甲、乙表示物质，模块3中的反应过程与叶绿体基质内糖类的合成过程相同。（1）该系统中执行相当于叶绿体中光反应功能的模块是，模块3中的甲可与CO2结合，甲为。（2）若正常运转过程中气泵突然停转，则短时间内乙的含量将（填：增加或减少）。若气泵停转时间较长，模块2中的能量转换效率也会发生改变，原因是。（3）在与植物光合作用固定的CO2量相等的情况下，该系统糖类的积累量（填：高于、低于或等于）植物，原因是。（4）干旱条件下，很多植物光合作用速率降低，主要原因是。人工光合作用系统由于对环境中水的依赖程度较低，在沙漠等缺水地区有广阔的应用前景。8．早期地球大气中的O2浓度很低，到了大约3．5亿年前，大气中O2浓度显著增加，CO2浓度明显下降。现在大气中的CO2浓度约390μmol·mol1，是限制植物光合作用速率的重要因素。核酮糖二磷酸羧化酶/加氧酶（Rubisco）是一种催化CO2固定的酶，在低浓度CO2条件下，催化效率低。有些植物在进化过程中形成了CO2浓缩机制，极大地提高了Rubisco所在局部空间位置的CO2浓度，促进了CO2的固定。回答下列问题：(1)真核细胞叶绿体中，在Rubisco的催化下，CO2被固定形成，进而被还原生成糖类，此过程发生在中。(2)海水中的无机碳主要以CO2和HCO3两种形式存在，水体中CO2浓度低、扩散速度慢，有些藻类具有图1所示的无机碳浓缩过程，图中HCO3浓度最高的场所是（填“细胞外”或“细胞质基质”或“叶绿体”），可为图示过程提供ATP的生理过程有。(3)某些植物还有另一种CO2浓缩机制，部分过程见图2。在叶肉细胞中，磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）可将HCO3转化为有机物，该有机物经过一系列的变化，最终进入相邻的维管束鞘细胞释放CO2，提高了Rubisco附近的CO2浓度。①由这种CO2浓缩机制可以推测，PEPC与无机碳的亲和力（填“高于”或“低于”或“等于”）Rubisco。②图2所示的物质中，可由光合作用光反应提供的是。图中由Pyr转变为PEP的过程属于（填“吸能反应”或“放能反应”）。③若要通过实验验证某植物在上述CO2浓缩机制中碳的转变过程及相应场所，可以使用技术。(4)通过转基因技术或蛋白质工程技术，可能进一步提高植物光合作用的效率，以下研究思路合理的有。A．改造植物的HCO3转运蛋白基因，增强HCO3的运输能力B．改造植物的PEPC基因，抑制OAA的合成C．改造植物的Rubisco基因，增强CO2固定能力D．将CO2浓缩机制相关基因转入不具备此机制的植物9．下列图示中，图甲表示Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种植物光合作用强度与光照强度之间的关系；图乙表示某绿色植物某些代谢过程中物质的变化，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别表示不同的代谢过程；图丙表示在种植植物的密闭玻璃温室中，CO2浓度随光照强度变化而变化的情况；图丁表示在最适温度下，麦芽糖酶的催化速率与麦芽糖浓度之间的关系。请据图回答：(1)图甲三种植物中最适合间作的两种是；叶肉细胞在a、b点时都可以产生ATP的细胞器是。(2)图乙中Ⅰ中产生的O2参与Ⅲ的第阶段；Ⅱ进行的场所是。(3)从图丙曲线变化分析，图中代表光合速率与呼吸速率相等的点为。(4)图丁中，如果温度上升5℃，b点将向(填“左上”“右下”“左下”或“右上”)方移动。(5)植物光合作用光饱和点可通过测定不同下的光合速率来确定。在一定条件下，某植物在温度由25℃降为5℃的过程中光饱和点逐渐减小，推测该植物在光照充足时的光合作用最适温度(选填：＜、≤、＝、≥、＞)25℃。(6)请用化学反应式来概括光合作用的过程：。10．图1所示为光合作用过程中部分物质的代谢关系（①～⑦表示代谢途径）。Rubisco是光合作用的关键酶之一，CO2和O2竞争与其结合，分别催化C5的羧化与氧化。C5羧化固定CO2合成糖；C5氧化则产生乙醇酸（C2），C2在过氧化物酶体和线粒体协同下，完成光呼吸碳氧化循环。请都图回各下列问题：(1)图1中，类囊体膜直接参与的代谢途径有（从①～⑦中选填），在红光照射条件下，参与这些途径的主要色素是。(2)在C2循环途径中，乙醇酸进入过氧化物酶体被继续氧化，同时生成的在过氧化氢酶催化下迅速分解为O2和H2O。(3)将叶片置于一个密闭小室内，分别在CO2浓度为0和0.03%的条件下测定小室内CO2浓度的变化，获得曲线a、b（图Ⅱ）。①曲线a，0～t1时（没有光照，只进行呼吸作用）段释放的CO2源于呼吸作用；t1～t2时段，CO2的释放速度有所增加，此阶段的CO2源于。②曲线b，当时间到达t2点后，室内CO2浓度不再改变，其原因是。(4)光呼吸可使光合效率下降20%50%，科学家在烟草叶绿体中组装表达了衣藻的乙醇酸脱氢酶和南瓜的苹果酸合酶，形成了图Ⅲ代谢途径，通过降低了光呼吸，提高了植株生物量。上述工作体现了遗传多样性的价值。11．研究人员发现，在鱼饲料中添加一定浓度的肉碱，肉碱进入鱼体后可提高鱼类对脂肪的利用率，有效减少养殖鱼类的脂肪过度沉积，使鱼类健康生长。回答下列问题。(1)脂肪的水解产物如甘油、长链脂肪酸等都能作为细胞呼吸的底物。下图为相关的代谢过程。①有氧呼吸的过程中，丙酮酸和长链脂酰CoA转化为乙酰CoA，再进入柠檬酸循环。柠檬酸循环发生的场所是。过多的柠檬酸被运到其他场所后可用于合成脂质或氨基酸等，这说明细胞呼吸除能为鱼体提供能量外，还是的枢纽。②图示过程中，长链脂酰CoA需通过肉碱实现转运，该过程主要受酶1活性的制约。胰高血糖素能激活某种蛋白激酶而提高酶1的活性。据此分析，当鱼体内的血糖浓度下降时，会因为，使体内的长链脂肪酸的利用率有所（填“提高”或“下降”）。(2)为探究外源性肉碱浓度与酶1活性的相关性，研究人员利用幼鱼进行实验。完成下表并回答问题。简要操作过程操作目的分组前使用高脂肪饲料喂养幼鱼7天提高幼鱼体内的脂肪含量①设置多个实验组注射等量的溶剂到对照组的幼鱼体内设置对照组将各组置于相同且适宜条件下饲养②检测肌肉和肝脏等组织细胞中酶1的活性③若实验结果显示，则说明外源性肉碱浓度与酶1的活性呈正相关。12．物质M能降低高温等环境因素对类囊体膜造成的伤害。下图是叶肉细胞中合成物质M的有关过程，其中A、B代表相关细胞器。请回答下列问题：(1)A、B代表的细胞器分别是，A中合成NADPH的场所是，B中[H]代表的物质主要是。光合作用为物质M的合成提供（填物质）。(2)高温下叶肉细胞中B内的反应受抑制，物质M的合成量增加，据图分析主要原因是高温下B内的反应受抑制，使（填物质）向叶绿体输送的数量增加，从而增加了物质M的合成。(3)为验证高温使B内的反应受抑制，导致物质M合成增多，科研人员用B内反应抑制剂进行了如下实验，完成下表（在答题纸上①~④处填写）。实验步骤实验步骤要点配制溶液配制缓冲液，均分为3组，第1组加适量B内反应抑制剂，第2、3组不加。材料选择切取生长状况一致的叶片，分为3组。进行实验处理将叶片的叶柄浸入相应的缓冲液中，第1组置于①下，第2组置于②下，第3组置于常温下。测定数值一段时间后，测定3组叶片的③。预期实验结果：④。13．学习以下材料，回答（1）~（4）题。S6蛋白参与调控细胞周期S6蛋白可以调控蛋白的乙酰化水平。在肝癌、乳腺癌等癌症中S6的表达量明显升高。为研究S6过表达的影响，将S6GFP融合基因（GFP为绿色荧光蛋白基因）转入HeLa细胞系，挑选单个细胞培养两周，筛选出S6过表达细胞系。观察发现，部分S6过表达细胞的染色体数目发生了变化。在过表达S6的细胞中，检测到CDH1水平明显降低。为研究S6的作用机制，将野生型HeLa细胞破碎，加入结合了抗S6抗体（对照组为无关抗体）的凝胶珠一起孵育，获得吸附在凝胶珠上的蛋白，电泳检测，结果如图1。在S6基因敲除细胞中，CDH1第135位赖氨酸乙酰化水平升高。构建CDH1第135位赖氨酸突变为谷氨酰胺的细胞株（K135Q），向K135Q细胞和野生型细胞转入S6过表达载体，检测外源性S6（外源S6表达产物）和CDH1蛋白含量，结果如图2。CDH1是APC/C的一个亚基。APC/C是调控细胞周期的重要因子之一、APC/C是一种泛素连接酶，能够将泛素连接到底物上，从而使底物被识别并降解。在S6过表达细胞中，五种APC/C重要底物的水平均明显上调。这五种底物都是对细胞有丝分裂的调控起关键作用的蛋白，其中某些蛋白水平上升，会引起细胞中心体复制异常，细胞的染色体稳定性遭到破坏。染色体数目异常是很多癌症的诱因，这为S6在多种癌症中表达量升高提供了一种解释，可能正是S6的表达量升高导致了某些种类癌症的发生和发展。(1)人体细胞分裂时，中心粒在间期倍增。进入分裂期后，两组中心粒之间的星射线形成了。(2)在构建S6过表达细胞系时，可根据来挑选细胞进行培养。(3)根据图1、图2，推测S6使CDH1蛋白含量下降的机制。(4)根据文中信息，推测S6过表达导致细胞中染色体数目变异的机制。14．关于细胞衰老机制，科学家提出了许多假说，目前大家普遍接受的是自由基学说和端粒学说。(1)老年人的皮肤出现“老年斑”的原因是。(2)细胞代谢产生的活性氧（ROS）基团或分子会通过多条途径对线粒体造成损伤（如图），从而引发细胞衰老甚至死亡。据图可知，ROS对细胞造成的影响有（答出两点即可），从而引发线粒体功能失常、细胞凋亡或坏死等。结合所学知识，提出解决细胞内衰老、损伤细胞损伤的线粒体的途径：（答出一点即可）。(3)动物细胞随着培养代数增多，端粒平均长度mtDNA/ROS:燃、缩短，更多细胞趋向于衰老和死亡。为了探究端粒产生的机制，科学家把加入四膜虫端粒的一条人工突变和毛失染色体转入酵母菌中，通过实验发现复制后的染色体上带有的是酵母菌的端粒。这说明端粒的化学本质是，据此推测，在端粒形成过程中发挥催化作用的物质有（答出两点即可）等。(4)研究还发现，端粒酶能以自身成分为模板合成端粒DNA使端粒延长，从而延缓细胞衰老，不同细胞的端粒酶活性是不同的，据此分析引起细胞衰老的原因可能是。15．某种植物根尖分生区细胞（简称g细胞）的细胞周期中，G1、S、G2、M经历时间依次为8h、6h、5h、1h。HU（羟基脲）是一种可逆的DNA合成抑制剂，对S期以外的细胞无影响，但可以阻止细胞进入S期而停留在G1/S交界（看作G1期细胞）。某科学小组为实现细胞周期同步化，设计了如下的实验步骤，每组设置多个重复样品。步骤一：A组：培养液＋g细胞＋HU

B组：培养液＋g细胞步骤二：培养14h后，检测A、B两组各时期细胞数所占百分比。步骤三：将A组中的HU全部洗脱，A、B均更换新鲜培养液培养10h。步骤四：向A组中加入HU，继续培养14h后，检测A、B两组各时期细胞数所占百分比。(1)本实验中设置B组的作用是，实验中每组设置多个重复样品的作用是。(2)在显微镜下观察前，使用解离液处理根尖细胞的作用是，在动物细胞培养时，与本实验中解离液起相似作用的物质是。在显微镜下观察时，根尖分生区细胞的形态特点是。(3)本实验中洗脱HU后培养10h的目的是。将本实验的预期实验结果填入下表中。A组B组G1期S期G2期M期G1期S期G2期M期第一次检测0％0％25％5％第二次检测100％0％0％0％16．I．植物的CO2补偿点是指由于CO2的限制，光合速率与呼吸速率相等时环境中的CO2浓度，已知甲种植物的CO2补偿点大于乙种植物的。（1）将正常生长的甲、乙两种植物放置在同一密闭小室中，适宜条件下照光培养，培养后发现两种植物的光合速率都降低，原因是，甲种植物净光合速率为0时，乙种植物净光合速率（大于0/等于0/小于0）。II．图是某湖泊营养化程度以及部分藻类生长状况（鱼鳞藻、脆杆藻为鱼的饵料，微囊藻会产生有毒物质污染水体）的曲线图。（2）民间有“养鱼先养水”的说法，由上图分析可知，当水体营养化程度处于时，更有利于能量流向对人类最有益的部分。（3）适宜条件下培养微囊藻（一种蓝藻），数量可呈指数增长，若在培养液中加入粉绿狐尾藻（一种高等水生植物），微囊藻的生长会受到明显抑制，其主要原因是这两种生物在利用（答两点）等资源时存在显著竞争的关系。现代生物工程可以利用蓝藻来制作生物柴油，由此推测蓝藻体内含有较多的哪一类有机物？。（4）现要对这一富营养化水体进行生态修复，根据以上内容，采取的措施可以包括等。17．生物膜系统在细胞的生命活动中发挥着极其重要的作用，如图表示3种生物膜结构及其所发生的部分生理过程的示意图。请回答下列问题：（1）构成生物膜的基本支架是，图中生物膜的功能不同，从生物膜的组成成分分析，其主要原因是。（2）图1表示的生理过程是，图3表示的生理过程是，请用化学反应式写出该图所在的细胞器上完成的生理过程。（3）若图2为哺乳动物成熟红细胞的细胞膜，图中葡萄糖和乳酸跨膜运输的共同点是都需要，其中葡萄糖的运输特点是。（4）图1图3说明生物膜具有的功能有。（至少答出两点）18．生物体内每一个细胞都是一个生产和输出分子（如胰岛素、抗体、酶等）的工厂。这些分子在细胞内都是以“细胞囊泡”的形式传递的。James•E•Rothman，Randy•W•SchekmanThomas•C•Südhof等三位科学家因发现了这些“细胞囊泡”是如何被在正确的时间输运至正确地点的分子机制之谜而获得2013年诺贝尔生理学或医学奖。依据下图及相关信息回答问题：(1)图甲中应通过才能观察，构成②的基本骨架是；②功能的复杂程度与其上的有关。(2)图甲属于模型，在参与分泌蛋白形成过程的细胞器中，含核酸的细胞器（写细胞器名称）。(3)下面列举了图甲和图乙中部分结构和其对应的主要成分，对应有误的是（）A．结构②：脂质、蛋白质、糖类 B．结构⑧：脱氧核糖核酸、蛋白质C．结构a：核糖核酸、蛋白质 D．结构c：双层膜结构(4)JamesE。Rothman发现了让囊泡实现与其目标细胞膜的对接和融合的蛋白质机制：只有当囊泡上的蛋白质（图丙中黑色部分）和细胞膜上的蛋白质配对合适时才会发生融合，随后结合部位打开并释放出相关分子。Thomas•C•Südhof则发现这一过程与钙离子对相关蛋白质的影响有关（如图丙所示）。该融合过程体现了细胞膜的的功能。图中所示物质出细胞的方式为。如果分泌物为神经递质，则会引起突触后神经元的19．图1表示人体造血干细胞有丝分裂过程的部分图像，图2表示该细胞有丝分裂不同时期染色体数与核DNA数比例的变化关系，回答下列问题。(1)造血干细胞形成各种血细胞，各类血细胞的功能各不相同，根本原因是。成熟红细胞失去全能性的原因是。(2)图1中①〜④在一个细胞周期中的正确排序为（填序号），染色单体数和核DNA数目相等的细胞是中的（填序号），植物细胞有丝分裂过程中处在细胞①所示时期时与细胞①的不同是。细胞④含有条染色体（已知人体细胞有23对染色体）。(3)图2中BC段形成的原因是，EF段形成的原因是。(4)研究发现，细胞能严格有序的增殖与细胞周期中存在保证核DNA复制和染色体分配质量的多个检验点有关。只有相应的过程检验合格，细胞才能顺利进入下一个时期。图2表示细胞周期简图及相应检验点位置，细胞中存在一种有丝分裂促进因子（MPF），可使A时期细胞顺利通过检验点4进入B时期，MPF在细胞周期中的活性变化是：在B时期先增大后减小，在A、C、D时期无活性。请推测若将A期细胞与去除核物质的B时期细胞融合，可引起的结果是。20．某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题：（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是。甲、乙培养基均属于培养基。（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释倍。（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是（答出1点即可）。（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤。（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即。21．物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是。（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择菌落进一步纯化，选择的依据是。（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即。（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加，三处滴加量相同。②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明。22．酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，及时对培养基进行分装，并进行灭菌。(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入在培养皿的上做好标记的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约为的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后培养。(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。操作时，在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是。下列关于相关操作叙述合理的有。a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落c.挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株供应。(4)步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞的计数板计数5个中格中的细胞数，理论上色细胞的个数应不少于才能达到每毫升5×109个活细胞的预期密度。23．研究者拟构建高效筛选系统，将改进的苯丙氨酸合成关键酶基因P1导入谷氨酸棒杆菌，以提高苯丙氨酸产量。(1)如图是该高效筛选系统载体的构建过程。载体1中含有KanR（卡那霉素抗性基因）和SacB两个标记基因，为去除筛选效率较低的SacB，应选择引物和，并在引物的（5＇∕3＇）端引入XhoⅠ酶识别序列，进行PCR扩增，产物经酶切、连接后环化成载体2。(2)PCR扩增载体3中筛选效率较高的标记基因RpsL（链霉素敏感基因）时，引物应包含（EcoRⅠ∕HindⅢ∕XhoⅠ）酶识别序列，产物经单酶切后连接到载体2构建高效筛选载体4。(3)将改进的P1基因整合到载体4构建载体5。将载体5导入链霉素不敏感（由RpsL突变造成）、卡那霉素敏感的受体菌。为获得成功导入载体5的菌株，应采用含有的平板进行初步筛选。(4)用一定的方法筛选出如下菌株：P1基因脱离载体5并整合到受体菌拟核DNA，且载体5上其他DNA片段全部丢失。该菌的表型为__________。A．卡那霉素不敏感、链霉素敏感B．卡那霉素敏感、链霉素不敏感C．卡那霉素和链霉素都敏感D．卡那霉素和链霉素都不敏感(5)可采用技术鉴定成功整合P1基因的菌株。之后以发酵法检测苯丙氨酸产量。24．为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对甘蓝型油菜油脂的积累机制，科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因（Luc）构建成基因表达载体甲，基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙，相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。(1)利用PCR扩增LEA基因时，需要在引物的（填“3’端”或“5’端”）添加限制酶识别序列，添加序列对应的限制酶是，选择上述酶的依据是。(2)为了构建基因表达载体甲，依据图中已知碱基序列，在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为，扩增代后会得到等长的8条DNA片段。(3)乙酰CoA羧化酶基因（AC）是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶基因（ATGL）是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B，在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平，结果如下图。①在分子水平上，用方法检测AC酶和ATGL酶的含量可得到上述结果。②基于以上研究，干旱胁迫基因LEA和VOC在甘蓝型油菜油脂积累中的机制是。25．双特异性抗体（BsAb）是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，双特异性抗体在自然状态下并不存在，可以通过重组DNA或细胞融合技术人工制备实现。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图示。回答下列问题。(1)图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是。过程③所用的HAT培养基从用途上看属于选择培养基，在该培养基上，细胞不能生长。(2)过程④中将杂交瘤细胞进行多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，然后利用原理检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体的优点有。(3)图1注射长春碱后，要获取单克隆杂交—杂交瘤细胞，方框内至少需要经过次筛选。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞因为（答2点）等因素而分裂受阻，需进行传代培养。(4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是。26．红景天中的HMA3基因能编码Cd转运蛋白，科研人员将红景天中的HMA3基因转入栾树，以实现栾树的定向改良，使其增强对Cd的富集能力，从而更有效治理Cd污染。实验的主要流程如下，其中Hygr为潮霉素抗性基因，Kanr为卡拉霉素抗性基因，请回答：(1)重组质粒的构建、扩增、保存①从红景天细胞中提取总RNA为模板，进行RTPCR。其中PCR的反应条件：98℃10s，55℃30s，72℃1min，35个循环，其中55℃30s过程称为。若模板双链cDNA的数量为a个，经过35个循环需要消耗引物的数量是。②为构建Cd转运蛋白与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白，需确保目的基因与质粒正确连接。构建重组质粒时用酶切PCR纯化产物(已添加相应酶切位点)及Ti质粒，然后通过DNA连接酶进行连接制备重组质粒，并依次转入大肠杆菌和农杆菌。(2)栾树愈伤组织的诱导：切割无菌苗将其茎段插入愈伤组织培养基，培养基应添加(填植物激素的名称)，放入培养箱，经过21d的黑暗诱导，茎段经形成愈伤组织。(3)农杆菌介导转化体系的建立：将农杆菌单克隆菌株对栾树愈伤组织进行侵染转化，并用添加的培养基筛选出转化成功的愈伤组织，将愈伤组织继续培养成完整植株。待幼苗长出较为发达的根系后进行移栽炼苗，炼苗的目的是。(4)原生质体制备及目的基因的检测和鉴定①取4g筛选后愈伤组织，用镊子轻轻捣碎，冲洗。用滤网过滤溶液，将愈伤组织转移至含的酶解液中处理一段时间获得原生质体。②在激光共聚焦下观测到细胞膜发出绿色荧光。在本研究中选择GFP与Cd转运蛋白构建融合蛋白的目的是。若要从个体生物学水平上进行目的基因的检测与鉴定，则可以检测比较转基因栾树与野生型栾树。27．猕猴桃因貌似猕猴而得名，是一种品质鲜嫩、营养丰富的美味水果。我国研究人员利用“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”两个不同种培育出了更加优良的品种，其过程如下图所示。请分析并回答下列问题：(1)因“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”之间存在，所以用有性杂交方法很难得到可育后代，上述①～⑥培育优良品种H的过程所应用的技术是技术。(2)图中B、D是；G是；②过程需使用酶进行处理，该过程受处理时间、、等条件的影响。(3)过程③使用的化学法包括：聚乙二醇（PEG）融合法和等。(4)过程③得到的两两融合的细胞有种，因此需要进行筛选。已知用X射线处理会使染色体受影响而导致细胞失去分裂能力；用碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长。为了能筛选到杂种细胞F，若在①过程对“中华猕猴桃”用X射线处理，需对“美味猕猴桃”用处理，以便最终能获得优良杂种植株H。28．人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，现可以用基因工程技术获取重组HSA（rHSA）。下图甲为获取的含有目的基因（HSA基因）的DNA片段，Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图乙是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图丙是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。请回答下列问题：(1)三种限制酶中能产生相同