浙江省慈溪市三山高级中学2025届高考考前提分生物仿真卷含解析

浙江省慈溪市三山高级中学2025届高考考前提分生物仿真卷请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．下列相关说法中，正确的有几项是（）①有丝分裂和减数分裂皆有细胞周期②豌豆虽然有X、Y染色体，但是自然情况下一般是自花传粉，闭花授粉③雄性蜜蜂能够正常进行减数分裂，产生的精子染色体数目比初级精母细胞减少一半④胰岛素和胰高血糖素的功能相互拮抗，所以一方出现必然抑制另一方⑤人体体温调节时，只有冬天存在神经调节和体液调节⑥感受器一定是传入神经末梢和它所支配的附属结构共同构成A．零项 B．一项 C．二项 D．三项2．抑素是细胞释放的能抑制细胞分裂的物质，主要作用于细胞周期的G2期；M期细胞的细胞质中含有一种促进染色质凝集为染色体的物质。下列叙述正确的是（）A．S期时间较长的细胞更适合做“观察细胞有丝分裂”实验的材料B．如果缺少氨基酸的供应，动物细胞一般会停留在细胞周期的G1期C．抑素抑制DNA复制所需蛋白质的合成，阻断细胞分裂D．M期细胞与G1期细胞融合，有利于G1期细胞中DNA的转录3．下列有关人体内环境和稳态的叙述，正确的是（）A．激素和酶都具有高效性，在非细胞条件下也能发挥作用B．激素和抗体都具有特异性，只能作用于特定的靶细胞C．血液中激素浓度受内外环境因素影响，不能反映激素的分泌量D．维持内环境中Na+、K+浓度的相对稳定有利于维持神经细胞的正常兴奋性4．基因转录出的初始RNA，经不同方式的剪切可被加工成翻译不同蛋白质的mRNA。某些初始RNA的剪切过程不需要蛋白质性质的酶参与。大多数真核细胞mRNA只在个体发育的某一阶段合成，不同的mRNA合成后以不同的速度被降解。下列叙述不正确的是A．某些初始RNA的剪切、加工可由RNA催化完成B．一个基因可能参与控制生物体的多个性状C．mRNA的合成与降解与个体发育阶段有关D．初始RNA的剪切、加工在核糖体内完成5．研究发现，当果蝇的一条常染色体上的隐性基因t纯合时，雌蝇即转化为不育的雄蝇。现将基因t位点杂合的雌蝇与纯合隐性雄蝇作为亲本杂交，则理论上性别比例（♂∶♀）是（）A．9∶7 B．3∶1 C．13∶3 D．11∶56．如图是为理解某些生物学问题所建立的一个数学模型（此图仅表示变化趋势），以下对此数学模型应用不科学的是（）A．若x表示外界温度，y表示耗氧量，则a为变温动物，b为恒温动物B．若x表示外界O2浓度，y表示CO2释放量，则a为有氧呼吸强度，b为无氧呼吸强度C．若x表示进食后血糖浓度，y表示激素含量，则a为胰岛素，b为胰高血糖素D．若x表示生长素浓度，y表示生理作用，则a为对根的促进作用，b为对茎的促进作用7．下列有关细胞内物质合成的叙述，正确的是（）A．在幼嫩的芽、叶和发育中的种子等部位，丙氨酸经过一系列反应转变为生长素B．抗体、淋巴因子、溶菌酶等免疫活性物质只能在免疫细胞中合成C．生长素、促甲状腺激素、胰岛素的合成都发生在附着于内质网的核糖体上D．真核细胞的rRNA主要是在细胞核内通过转录形成的，与核仁有关8．（10分）下图方框内为人体内某组织或器官的结构示意图，A、B、C分别表示不同的体液，据图判断，下列叙述错误的是（）A．B中渗透压大小主要与无机盐和蛋白质的含量有关B．A渗回B和渗入C的量相差不大C．若图示方框为肝脏，则饱饭后B中Ⅱ端比Ⅰ端葡萄糖含量低D．若图示方框为胰岛组织，则饱饭后B中Ⅱ端比Ⅰ端胰岛素含量高二、非选择题9．（10分）1999年，《科学》杂志将干细胞的研究推举为21世纪最重要的研究领域之一，经过近20年的努力，科学家从分子水平发现干细胞中c-Myc（原癌基因）、Klf4（抑癌基因）、Sox2和Oct-3/4等基因处于活跃表达状态，其中Oct-3/4的精确表达对于维持干细胞的正常自我更新是至关重要的。科学家利用逆转录病毒，将Oct-3/4、Sox2、c-Mye和KIf4四个关键基因转入高度分化的体细胞内，让其重新变成一个多能干细胞（iPS细胞）。转化过程如下图所示，请据图回答问题：（1）健康人体的高度分化细胞中Oct-3/4基因处于______状态。（2）依据上图所示的原理，细胞凋亡是c-Myc、Kl4、Fas等基因控制下的细胞_____的过程。体细胞癌变是______等基因异常后表达的结果。（3）经过诱导高度分化的体细胞重新变成多能干细胞（iPS细胞），若在体外培养这一批多能干细胞，需要利用一定方法使细胞群体处于细胞周期的同一阶段，这样的过程称为细胞周期同步化。①如果采用DNA合成阻断法实现细胞周期同步化，则需要在细胞处于对数生长期的培养液中添加适量的DNA合成可逆抑制剂，处于__________期的细胞不受影响而继续细胞周期的运转，最终细胞会停滞在细胞周期的__________期，以达到细胞周期同步化的目的。②如果采用秋水仙素阻断法实现细胞周期同步化，则需要在细胞处于对数生长期的培养液中添加适量的秋水仙素，秋水仙素能够抑制________，使细胞周期被阻断，即可实现细胞周期同步化。（4）不同诱导因素使iPS细胞可以在体外分裂、分化成多种组织细胞，如图所示。下列叙述错误的是（不定项选择）________A．各种组织细胞中的DNA和RNA与iPS细胞中的相同B．iPS细胞不断增殖分化，所以比组织细胞更易衰老C．iPS细胞中的基因都不能表达时，该细胞开始凋亡D．改变诱导因素能使iPS细胞分化形成更多类型的细胞10．（14分）科研小组欲将拟南芥的某种抗病基因导入番茄细胞而获得抗病植株。请回答：（1）利用PCR技术大量扩增拟南芥抗病基因的原理是_____________，扩增该抗病基因的前提是_____________。（2）将抗病基因插入到Ti质粒的_____________上，通过_____________的转化作用使抗病基因进入番茄细胞。（3）将含抗病基因的番茄细胞培育为抗病植株的原理是_____________。（4）将含目的基因的DNA探针与转基因番茄提取出来的mRNA进行杂交，显示出杂交带，并不能说明转基因番茄具有抗病特性，理由是_____________。（5）为避免抗病基因通过花粉进入其他植物而导致“基因污染”，应将抗病基因导入到_____________（填“细胞核”或“细胞质”）。11．（14分）癌细胞表面蛋白“PDL-1”与T细胞表面蛋白“PD-1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD-1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：α链：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β链：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'图1（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成____________________作为模板；设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过____________________技术扩增目的基因。（2）选用图1中的两种名称分别为____________________的限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必须具有____________________等。（3）而后一定温度下，与经过处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____________培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。（4）将扩增后的“pIRES2-EGFP载体/PD-1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有____________________。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与____________________发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_________________________。12．某种蛾类的茧有白色与黄色两种，控制它们的两对等位基因自由组合。茧色和基因型的对应关系如下表（仅从N、n这对等位基因分析，ZNW、ZnW视为纯种），请回答下列问题：表现型黄茧白茧基因型mmZNZˉ、mmZNWmmZnZn、mmZnW、M_（1）杂种结白茧蛾的基因型共有_______种。（2）选取基因型为MmZNW与MmZnZn的两只蛾进行杂交得到数量足够多的子一代，选取子一代的所有结黄茧的蛾，让其与子一代所有杂种结白茧蛾自由交配。子二代出现结黄茧蛾的概率为______；子二代结白茧雄蛾中纯合子所占的比例为______。（3）如图是某蛾的一对同源染色体（α与β）的配对情况。若α异常，α发生的改变可能是_____________。（4）某蛾种群中MM个体占36%，mm个体占14%，若干代后，M的基因频率为0.5，依据现代生物进化观点，该蛾种群是否发生了进化？请回答并简述理由：_____________________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、A【解析】

只有连续分裂的细胞才有细胞周期。含有性染色体的生物一般为雌雄异体的生物。雄蜂属于单倍体，产生精子的过程与有丝分裂类似。寒冷环境下的体温调节主要是神经-体液调节，炎热环境下的体温调节主要是神经调节。【详解】①减数分裂没有细胞周期，①错误；②豌豆为两性植株，在自然情况下一般是自花传粉、闭花授粉，没有X、Y染色体，②错误；③雄性蜜蜂是由未受精的卵细胞直接发育形成的，为单倍体，不能够正常进行减数分裂，其产生精子的过程类似有丝分裂，产生的精子中染色体数目与初级精母细胞相等，③错误；④胰岛素的分泌可抑制胰高血糖素的分泌，而胰高血糖素的分泌可促进胰岛素的分泌，④错误；⑤无论哪个季节，人体的体温调节都既存在神经调节又存在体液调节，⑤错误；⑥感受器是感觉神经（传入神经）末梢的部分，大多数具有附属结构，⑥错误。综上分析，A正确，BCD错误。故选A。【点睛】本题易错点是雄蜂产生配子的过程，要注意雄蜂是单倍体，细胞中只含有受精卵中一半的染色体。2、B【解析】

细胞周期包括分裂间期和分裂期（M期），分裂间期包括G1期、S期、G2期，分裂期包括前期、中期、后期和末期。由题干信息可知，抑素主要作用于细胞周期的G2期，导致细胞停留在该时期而不能进入分裂期；M期细胞的细胞质中含有一种促进染色质凝集为染色体的物质。【详解】A、M期（分裂期）时间较长的细胞更适合做“观察细胞有丝分裂”实验的材料，A错误；B、G1期主要进行RNA和蛋白质的合成，而氨基酸是蛋白质的基本单位，因此如果缺少氨基酸的供应，动物细胞一般会停留在细胞周期的G1期，B正确；C、DNA复制发生在S期，其所需的蛋白质应该是G1期合成的，而抑素主要作用于细胞周期的G2期，C错误；D、M期细胞的细胞质中含有一种促进染色质凝集为染色体的物质，若将M期细胞与G1期细胞融合，会导致G1期细胞染色质凝集，不利于G1期细胞中DNA的转录，D错误。故选B。3、D【解析】

1.静息时，神经细胞膜对钾离子的通透性大，钾离子大量外流，形成内负外正的静息电位；受到刺激后，神经细胞膜的通透性发生改变，对钠离子的通透性增大，钠离子内流，形成内正外负的动作电位．

2.兴奋以电流的形式传导到轴突末梢时，突触小泡释放递质（化学信号），递质作用于突触后膜，引起突触后膜产生膜电位（电信号），从而将兴奋传递到下一个神经元。【详解】A、激素和酶都具有高效性，酶在非细胞条件下也能发挥作用，而激素不行，A错误；B、激素和抗体都具有特异性，激素作用于特定的靶细胞，而抗体作用于相应的抗原，B错误；C、血液中激素浓度受内、外环境因素的综合影响，进而反映激素分泌量的多少，C错误；D、因为兴奋的产生与维持与Na+、K+浓度有关，因此维持内环境中Na+、K+浓度的相对稳定有利于维持神经细胞的正常兴奋性，D正确。故选D。4、D【解析】

酶大多数是蛋白质，少数是RNA。由题目信息，RNA的剪切过程不需要蛋白质性质的酶参与，可知，该过程的酶应该是RNA。【详解】由“RNA的剪切过程不需要蛋白质性质的酶参与”可知，催化该过程的酶是RNA，A正确；一个基因可以控制一个或多个性状，B正确；由“大多数真核细胞mRNA只在个体发育的某一阶段合成”可知，mRNA的合成与降解与个体发育阶段有关，C正确；RNA的合成场所主要是细胞核，故加工场所主要是细胞核，D错误。故选D。5、D【解析】

分离规律的实质是：杂合体内，等位基因在减数分裂生成配子时随同源染色体的分开而分离，进入两个不同的配子，独立的随配子遗传给后代。【详解】根据题意用“/”把同源染色体或其上的等位基因分开，用“，”把非等位基因对分开。

亲本用t位点杂合的雌蝇与纯合隐性雄蝇杂交，F1中：3/4雄：1/4雌=3：1；F2：由于F1中的“转化”，导致雄蝇没有生育能力，所以共有二种交配类型，每一种交配频率为1/2；第一种：X/X，+/t

雌×X/Y，+/t

雄；这一类交配类型中F2的性比为3/8雌：5/8

雄，由于这种类型的交配频率仅为所有可能交配类型的1/2，所以它们分别占整个F2后代中的性比为1/2×3/8=3/16雌：1/2×5/8=5/16雄；第二种：X/X，+/t雌×X/Y，t/t

雄；这个交配类型与亲本的交配类型一样，后代中有3/4雄、1/4雌，又由于这种交配的频率为1/2，所以它们分别占整个F2后代中的性比为（1/2×3/4）=3/8雄：（1/2×1/4）=1/8雌；最后将两种交配类型所产生的雌雄后代分别相加得：雄=5/16+3/8=11/16，雌=3/16+1/8=5/16，因此，F2的期望性比♂：♀为11：5。故选D。6、D【解析】

分析曲线图：曲线a表示在一定范围内，随着x的增大，y逐渐增大，后趋于平衡；曲线b表示在一定范围内，随着x的增大，y逐渐减小，后趋于平衡；两者呈负相关。【详解】A、对于恒温动物来说，在低温时，为了维持体温的稳定，耗氧量逐渐增加，而温度增加后，耗氧量就会下降，与曲线b符合，而对于变温动物来说，体内温度与外界温度一致，所以体内酶的活性也是随外界温度的变化而变化的，外界温度升高，变温动物体内温度也会升高，新陈代谢加强，耗氧量增加，与曲线a相符，A正确；B、若表示O2浓度与呼吸作用CO2释放量的关系，则在O2浓度较低时，生物体主要进行无氧呼吸产生CO2，随着O2浓度的增加，无氧呼吸受抑制，产生的CO2量逐渐减少，而有氧呼吸逐渐增强，产生的CO2也逐渐增加，有氧呼吸强度还要受到其它因素的影响，所以有氧呼吸产生的CO2量最终趋于平稳，因此a表示有氧呼吸强度，b表示无氧呼吸强度，B正确；C、机体进食后，体内血糖浓度较高，需要胰岛B细胞分泌胰岛素降低血糖浓度，当血糖恢复正常后，胰岛素的分泌量就不再增加，胰高血糖素和胰岛素是拮抗作用，所以两者曲线变化相反，C正确；D、植物不同的器官对生长素的敏感性不同，根对生长素比较敏感，所以随着生长素浓度的增加，根的生长将会受到抑制，与曲线b相符，而茎则表现出促进生长，与曲线a相符，D错误。故选D。7、D【解析】

1、分泌蛋白的合成与分泌过程：附着在内质网上的核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→内质网“出芽”形成囊泡→高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质→高尔基体“出芽”形成囊泡→细胞膜，整个过程还需要线粒体提供能量。

2、免疫系统包括免疫器官（骨髓、胸腺、脾、淋巴结、扁桃体等）、免疫细胞（吞噬细胞和淋巴细胞）和免疫活性物质（抗体、淋巴因子和溶菌酶等）。【详解】A、生长素是由色氨酸经过一系列反应转变而来的，A错误；

B、免疫活性物质由免疫细胞或其他细胞（如唾液腺细胞）合成、分泌，B错误；C、生长素的化学本质是吲哚乙酸，附着于内质网的核糖体上合成分泌蛋白，C错误；D、真核细胞的rRNA是在细胞核内通过转录形成的，而核仁与核糖体RNA形成有关，D正确。

故选D。【点睛】本题考查细胞核的功能、核糖体的功能、免疫细胞和生长素的合成过程，意在考查学生理解细胞核的结构和功能，了解生长素的化学本质，识记免疫系统的组成，理解生长素的合成，难度不大。8、B【解析】

图中A为组织液、B为血浆、C为淋巴，它们都属于细胞外液，共同组成人体内细胞的生活环境，称为内环境。I端为毛细血管动脉端，Ⅱ端为毛细血管静脉端。【详解】A、血浆渗透压主要与其中的无机盐和蛋白质有关，A正确；B、组织液A中大部分通过毛细血管静脉端回流到血浆B，少部分透过毛细淋巴管壁形成淋巴C，B错误；C、若图示方框为肝脏，则饱饭后经消化吸收的血糖经I端到组织液并进入肝细胞内合成肝糖原，所以Ⅱ端葡萄糖含量变低，C正确；D、若图示方框为胰岛组织，则饱饭后经消化吸收的大量血糖经I端进入A，刺激胰岛B细胞分泌胰岛素，胰岛素经图中Ⅱ端到血浆，所以Ⅱ端比I端胰岛素含量高，D正确。故选B。二、非选择题9、沉默（未表达）程序性死亡c­Myc(原癌基因)、Klf4(抑癌基因)分裂间（或答S）纺锤体形成ABC【解析】

干细胞中c-Myc（原癌基因）、KIf4（抑癌基因）、Sox2和Oct-3/4等基因处于活跃表达状态，高度分化的细胞Sox2和Oct-3/4不表达。c-Myc（原癌基因）、KIf4（抑癌基因）突变导致细胞癌变。由图可知，细胞凋亡应是Fas等一系列基因控制下的细胞的程序性死亡（编程性死亡）过程。【详解】（1）Oct-3/4的精确表达对于维持干细胞的正常自我更新是至关重要的，而高度分化的细胞已经不再进行分裂，所以此基因不表达，处于沉默（关闭）状态。（2）由图可知，细胞凋亡是在c-Myc、KIf4、Fas等基因控制下的细胞的程序性死亡（编程性死亡）过程。癌变是原癌基因和抑癌基因发生突变后形成的，即c-Myc（原癌基因）、KIf4（抑癌基因）等基因异常后表达的结果。（3）①DNA合成抑制剂可抑制间期DNA复制过程，由于分裂期的细胞已经完成了DNA复制，所以加入的DNA合成可逆抑制剂对处于分裂期的细胞没有影响，由于DNA复制被阻断，所以一段时间后所有细胞停留在细胞周期的间期。②秋水仙素作用于有丝分裂的前期，抑制纺锤体的形成，使后期分开的姐妹染色体不能移向两极，从而得到染色体数目加倍的细胞。（4）A、细胞分化的实质是基因选择性表达，所以分化后形成的各种组织细胞中与iPS细胞中DNA相同，但RNA不同，A错误；B、iPS细胞不断增殖分化，说明分化程度低，不易衰老，B错误；C、细胞凋亡是受基因控制的程序性死亡，细胞内也存在基因表达，C错误；D、在iPS细胞的培养液中加入不同分化诱导因子，就可以诱导iPS细胞向不同类型的组织细胞分化，有利于提高细胞生理功能的效率，D正确。故选ABC。【点睛】本题结合图解，考查细胞分裂、分化、细胞凋亡和细胞衰老等知识，要求考生识记细胞分化的概念，掌握细胞分化的实质；识记衰老细胞的主要特征及细胞凋亡的实质，能结合图中信息准确判断相关问题。10、DNA（双链）复制要有一段已知目的基因的核苷酸序列（以便根据这一序列合成引物）（“制备相应引物”）T-DNA农杆菌（植物）细胞全能性需进行个体生物学水平鉴定才能确定转基因番茄是否具有抗病特性（或DNA探针与mRNA显示出杂交带只能说明抗病基因转录出对应的mRNA，无法说明转基因番茄具有抗病特性，或实验结果不能说明目的基因是否翻译出相应蛋白质，因此不能说明该植株是否有抗性）细胞质【解析】

获取目的基因的方法之一是PCR扩增，原理为DNA的复制，需要条件有模板DNA、引物、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶。将目的基因导入到受体细胞时常常使用农杆菌转化法，其过程为将目的基因插入到Ti质粒的T­DNA上，后转入农杆菌导入植物细胞，使其整合到受体细胞的染色体DNA上，最后表达。【详解】（1）PCR技术大量扩增目的基因的原理是DNA复制；使用PCR技术扩增的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列；（2）使用农杆菌转化法时，一般将抗病基因插入到Ti质粒的T­DNA上；后转入农杆菌，通过其转化作用让抗病基因导入植物细胞；（3）将一个已经分化的细胞培育成一个植株，利用的原理是植物细胞具有全能性；（4）目的基因的检测中，一般需要检测目的基因的表达产物，将含目的基因的DNA探针与转基因番茄提取出来的mRNA进行杂交，若出现杂交带，只能证明抗病基因转录出对应的mRNA，无法说明转基因番茄具有抗病特性，或实验结果不能说明目的基因是否翻译出相应蛋白质；（5）花粉细胞主要是植物的精子，精子中细胞质非常少，一般精子与其它细胞融合时提供的细胞质很少，所以为避免抗病基因通过花粉进入其他植物而导致“基因污染”，可以将其导入到细胞质中。【点睛】该题重点考察了基因工程的相关操作，其中目的基因的检测一般有四个层面，主要为：11、cDNAPCRXhoIEoRI启动子、终止子、复制原点卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗体作为对照【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因采用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA采用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质采用抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库（cDNA）。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，可以mRNA为模板反转录形成cDNA；由于PCR技术利用的是DNA分子复制的原理，所以用该cDNA进行PCR技术扩增短时间内可以获得大量的目的基因。（2）分析图1中碱基序列，α链上有“—CTCGAC—”识别序列，β链上有“—GAATTC—”碱基识别序列，与图2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的识别序列相同。故选用XhoI限制酶和EoRI限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建基因表达载体。基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等。（3）根据第（2）题可知，基因表达载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此一定温度下，与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有卡那霉素的培养