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第三人民检验科微生物室作业指导书文件编号:WSW-SOP-07版本/修订号:第一版主题内容葡萄球菌属常规鉴定标准操作程序生效日期:20140701第3页共6页葡萄球菌属的常规鉴定标准操作程序1概述葡萄球菌属是一类触媒试验阳性的革兰阳性球菌,包括金黄色葡萄球菌,表面葡萄球菌、腐生葡萄球菌等32个种。是临床最常见的化脓性球菌,广泛分布于自然界中,在人体表面鼻、咽、肠道也经常存在。2形态与染色革兰阳性球菌,直径0.4~1.2µ m成单、双、短链或不规则状排列。在液体培养基浓汁标本中,往往排列成双或短链状多数有鞭毛。3培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上典型菌落为金黄色,周围有明显的透明(β)溶血环,部分菌落呈橙色,在高盐甘露醇平板上呈橙色菌落。表皮葡萄球菌等其他葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色,不溶血。4生化反应触酶试验阳性,多数能分解葡萄糖、麦蚜糖、蔗糖和甘露醇。不分解棉籽糖和水杨苷,液化明胶,血浆凝固酶和DNA酶实验分阳性。5鉴别要点5.1本菌属特征:触酶实验阳性,革兰阳性球菌,葡萄状排列,菌落中等大小,中等干燥。5.2与微球菌属的鉴别:触酶实验都为阳性,但O∕F试验葡萄球菌属为发酵型,而微球菌为氧化型或无反应,而且菌体较葡萄菌属更大,排列呈四联状为主。5.3与链球菌属的鉴别:葡萄球菌属触酶试验都为阳性,而链球菌为阴性,O∕F试验葡萄球菌属为发酵型而链球菌为氧化型。5.4凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别见下表。 结合型凝游离型凝 鸟氨酸脱菌名 PYP试验DNA试验VP试验 固酶试验固酶试验羧酶实验金黄色葡萄球菌++-++-中间型葡萄球菌-+++--施氏葡萄球菌+-+++-路邓葡萄球菌+-+-++注:“+”为90%以上菌株为阳性,“--”为90%以上菌株为阳性。5.5凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别见下表吡咯烷酮芳基新生霉素耐药多黏菌素B耐菌名凝固因子脲酶甘露醇蔗糖酰胺酶(PYR)(5βg)药300U纸片表面葡萄球菌——+—+-+腐生葡萄球菌——+V++—溶血葡萄球菌+——V+——人型葡萄球菌——+—+——华纳葡萄球菌——+V + ——模仿葡萄球菌+—++ + ——头状葡萄
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