广东省梅州市蕉岭中学2025届高考生物一模试卷含解析

广东省梅州市蕉岭中学2025届高考生物一模试卷注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．2019年诺贝尔生理学或医学奖颁给了研究细胞对氧气的感应和适应机制的三位科学家。研究表明，HIF是普遍存在于人和哺乳动物细胞内的一种蛋白质．在正常氧气条件下，HIF会迅速分解；当细胞缺氧时．HIF会与促红细胞生成素(EPO)基因的低氧应答元件（非编码蛋白质序列）结合，使EPO基因表达加快．促进EPO的合成。HIF的产生过程及其对EPO基因的调控如图所示，下列分析正确的是（）A．过程①和过程②在低氧环境中才能够进行B．HII-的含量与细胞内的氧气含量呈正相关C．细胞在正常氧气环境中EPO基因不能表达D．EPO含量增加会促进细胞中HIF含量下降2．下列关于生物进化的叙述，正确的是（）A．种群间的双向迁移，会使种群间的遗传差异变大B．只要种群的个体间存在变异，自然选择就发生作用C．生物界在类型上具有多样性，模式上具有统一性D．达尔文在自然选择的基础上发现了人工选择3．如图是某细胞的局部示意图。下列叙述正确的是（）A．结构①③④属于生物膜系统B．结构③中葡萄糖氧化分解释放大量能量C．该细胞一定不含有细胞壁D．该细胞不可能为处于分裂中期的动物细胞4．下列有关植物生长素的叙述，错误的是（）A．在植物体内，生长素只能从形态学上端运输到形态学下端B．发育中的种子能合成生长素促进果实发育C．过高浓度的生长素会抑制发芽D．某浓度的生长素对同一植株不同器官促进生长的作用可以相同5．下列关于酶和ATP的叙述，不正确的是（）A．酶和ATP参与基因表达B．ATP参与酶的合成C．酶参与ATP的合成D．酶发挥作用的最适条件和储存的最适条件相同6．艾滋病(AIDS)是感染人类免疫缺陷病毒(HIV)导致的传染性疾病。下列相关叙述错误的是A．HIV侵入机体后，机体可以产生相应的抗体与之结合B．HIV侵入机体后，B细胞和T细胞均可被激活而增殖分化C．艾滋病可通过血液传播、性传播，也可由母亲遗传给子女D．艾滋病患者免疫系统的防卫功能遭到破坏，监控和清除功能也受到影响7．下列关于有机物的鉴定实验中，易导致实验失败的操作是（）①蛋白质鉴定时，将NaOH溶液和CuSO4溶液混合后再加入样液②还原糖鉴定时，需要进行水浴加热③淀粉鉴定时，直接将碘液滴加到样液中④脂肪鉴定过程中，对装片染色后需用清水漂洗后放在显微镜下镜检A．①④ B．②③ C．①③ D．③④8．（10分）下列有关高尔基体的叙述正确的是（）A．高尔基体在细胞运输“货物”中起重要的交通枢纽作用B．用32P标记高尔基体，被标记的物质可以是DNA和磷脂C．高尔基体膜内连核膜，外连细胞膜，实现了细胞各结构上的紧密联系D．兔睾丸细胞的高尔基体能合成性激索，这与柳树细胞内高尔基体的功能不同二、非选择题9．（10分）已知果蝇的长翅和短翅、红眼和棕眼分别由两对独立遗传的等位基因（A和a、B和b）控制，这两对基因不在Y染色体上。为了确定这两对相对性状的显隐性关系，以及这两对等位基因的位置，研究小组让一只雌性长翅红眼果蝇与一只雄性长翅棕眼果蝇杂交，所得F1的表现型及比例为长翅红眼：长翅棕眼：短翅红眼：短翅棕眼=3:3:1:1。请回答：（1）翅形和眼色这两对基因的遗传遵循________________定律。（2）分析上述结果，可以得出的结论是________________。对性状的显隐性关系以及基因的位置还可作出________________种合理的假设，若理论上分析F1代长翅红眼果蝇中雌性个体所占的比例为0，F1代短翅红眼果蝇中雄性个体所占的比例为1，则所作的假设为________________。（3）用带荧光标记的B、b基因共有的特有序列作探针，与亲代雄果蝇细胞装片中各细胞内染色体上的B、b基因杂交，通过观察荧光点的个数可以判断眼色基因的位置。在一个处于有丝分裂后期的细胞中，若观察到________________个荧光点，则眼色基因位于常染色体上；若观察到________________个荧光点，则眼色基因位于X染色体上。（4）果蝇一种突变体的X染色体上存在ClD区段（用XClD表示）：D基因表现显性棒眼性状，l基因的纯合子在胚胎期死亡（即XClDXClD与XClDY不能存活），正常果蝇的X染色体无ClD区段（用X+表示）。让突变体雌果蝇与正常眼雄果蝇杂交，F1代棒眼果蝇所占的比例为________________，写出遗传图解________________。10．（14分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。11．（14分）科学家通过基因工程，成功利用非转基因棉A植株培育出抗虫转基因棉B植株，其过程如下图所示。回答下列问题：（1）获取抗虫转基因棉B植株的操作程序主要包括四个步骤，其中核心步骤是____。启动子是一段特殊结构的DNA片段，它是____识别和结合的部位。（2）研究人员发明了一种新的基因转化法——农杆菌介导喷花转基因法，即将农杆菌悬浮液用微型喷壶均匀喷洒于棉花柱头和花药等器官上，该方法集合了农杆菌转化法和___两种转化法的优点。结合上图，分析其与农杆菌转化法相比，具有的优势是________。（3）通过对Bt蛋白质三维结构图及氨基酸序列进行分析，发现若将该蛋白质结构中一段由14个氨基酸组成的螺旋结构缺失，结构变化后的Bt蛋白质能使棉铃虫具有更高的致死率。若要根据蛋白质工程的原理设计实验对Bt蛋白进行改造，以提高其致死率，实验设计思路是____。（4）若要确认该改造的Bt基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的____，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的____是否得到提高。12．Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。小鼠体细胞体外培养时，所需气体主要是O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液（基）的______________。（2）步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。体外培养条件下，ES细胞在______________细胞上，能够维持只增殖不分化的状态。（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的__________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有______________酶的酶切位点。（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________，用__________的抗体进行杂交实验。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

基因表达是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程，基因表达产物通常是蛋白质。基因表达包括转录和翻译。转录过程由RNA聚合酶进行，以DNA为模板，产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动，留下新合成的RNA链。翻译过程是以信使RNA（mRNA）为模板，指导合成蛋白质的过程。促红细胞生成素（EPO）又称红细胞刺激因子、促红素，是一种人体内源性糖蛋白激素，可刺激红细胞生成。【详解】A、过程①为转录，过程②为翻译，均不需要在低氧环境中进行，A错误；B、正常氧气条件下，HIF会迅速分解；当细胞缺氧时．HIF会与促红细胞生成素(EPO)基因的低氧应答元件（非编码蛋白质序列）结合，因此HII-的含量与细胞巾的氧气含量呈负相关，B错误；C、EPO为促红细胞生成素细胞，在正常氧气环境中EPO基因表达，在低氧环境下EPO基因表达加快，以适应低氧的环境，C错误；D、EPO含量增加会促进红细胞运输氧气，细胞逐渐提高甚至恢复正常氧气的状态，而在正常氧气条件下，HIF分解，因此EPO含量增加会促进HIF含量下降，D正确。故选D。2、C【解析】

现代生物进化理论认为：生物进化的单位是种群，生物进化的实质是种群基因频率的改变，引起生物进化的因素包括突变、自然选择、迁入和迁出、非随机交配、遗传漂变等；可遗传变异为生物进化提供原材料，可遗传变异包括基因突变、染色体变异、基因重组，基因突变和染色体变异统称为突变；自然选择决定生物进化的方向；隔离导致新物种的形成。【详解】A、种群之间的双向迁移，即种群间互有迁出和迁入，会弓|起种群间遗传差异的减少，种群内变异量增大，A错误；B、只有个体的变异性状影响了个体的存活和繁殖，自然选择才会发生作用，B错误；C、生物界在类型上具有多样性，模式上具有统一性，C正确；D、达尔文的自然选择学说研究的是自然条件对生物的选择，达尔文并没有研究人工选择的作用，D错误。故选C。3、D【解析】

分析题图：图示表示某细胞的局部示意图，其中①为高尔基体，②为中心体，③为线粒体，④为核糖体。【详解】A、结构④为核糖体，无膜结构，不属于生物膜系统，A错误；

B、结构③为线粒体，其能将丙酮酸分解，但不能将葡萄糖分解，B错误；

C、该细胞含中心体，可能是动物细胞，也可能是低等植物细胞，其中低等植物细胞含有细胞壁，C错误；

D、该细胞仍有核膜和核仁，因此不可能为处于分裂中期的动物细胞，D正确。

故选D。【点睛】本题考查细胞结构和功能，要求考生识记细胞中各种细胞器的结构、分布和功能，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。4、A【解析】

1.生长素主要是在植物的顶端分生组织中合成的,然后被运输到植物体的各个部分。生长素在植物体内的运输是单方向的，只能从植物体形态学上端向形态学下端运输,在有单一方向的刺激(单侧光照)时生长素向背光一侧运输，其运输方式为主动运输(需要载体和ATP)。非极性运输在成熟组织中,生长素可以通过韧皮部进行非极性运输。生长素的作用表现为两重性：既能促进生长，也能抑制生长；既能促进发芽，也能抑制发芽；既能防止落花落果，也能疏花疏果。生长素所发挥的作用，因为浓度、植物细胞的成熟情况和器官的种类不同而有较大的差异。不同植物对生长素的敏感程度不同，双子也植物>单子叶植物，同一植物的不同器官对生长素的敏感程度不同，敏感程度表现为根>芽>茎。【详解】A、在植物体内，生长素除了能从形态学上端运输到形态学下端之外，还可以在成熟组织中通过韧皮部发生非极性运输，A错误；B、发育中的种子能合成生长素进而促进果实发育，B正确；C、生长素的生理作用表现出两重性，因此过高浓度的生长素会抑制发芽，C正确；D、某浓度的生长素对同一植株不同器官可能表现促进生长的作用相同的情况，D正确。故选A。5、D【解析】

1、酶的本质是有机物，大多数酶是蛋白质，还有少量的RNA。特性：高效性、专一性、需要温和的条件。高温、强酸、强碱会使蛋白质的空间结构发生改变而使酶失去活性。2、ATP中文名叫三磷酸腺苷，结构式简写A-P~P~P，其中A表示腺嘌呤核苷，T表示三个，P表示磷酸基团。几乎所有生命活动的能量直接来自ATP的水解，由ADP合成，ATP所需能量，动物来自呼吸作用，植物来自光合作用和呼吸作用，ATP可在细胞器线粒体或叶绿体中和在细胞质基质中合成。【详解】A、基因的表达需要酶和ATP参与，A正确；B、酶的本质是蛋白质或RNA，其合成过程需要消耗能量，B正确；C、ATP的合成需要ATP合成酶的催化，C正确；D、酶发挥作用的最适条件一般较温和，酶一般在低温下储存，D错误；故选D。【点睛】联系ATP和酶的功能是解题的关键。6、C【解析】

HIV侵入人体，攻击的主要对象是T淋巴细胞，病毒在寄主细胞内能逆转录形成病毒DNA并整合到染色体的DNA上，并能随寄主细胞染色体的复制而复制，大量的T淋巴细胞的死亡导致患者免疫功能严重缺陷，各种病原体乘虚而入，最终病人大多死于其他病原微生物的感染或恶性肿瘤。【详解】A.HIV侵入机体后，机体可以产生相应的抗体与之结合形成沉淀，经吞噬细胞吞噬，A正确；B.HIV侵入机体后，能引起机体的体液免疫和细胞免疫，故B细胞和T细胞均可被激活而增殖分化，B正确；C.艾滋病主要通过性接触、血液和母婴三种途径传播，属于传染病，可由母亲感染女儿，但不是遗传，C错误；D.HIV主要攻击T细胞，使得体液免疫功能降低，细胞免疫缺失，最终导致免疫能力几乎全部丧失，艾滋病患者免疫系统的防卫功能遭到破坏，监控和清除功能也受到影响，D正确。7、A【解析】

生物组织中化合物的鉴定：（1）斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）．斐林试剂只能检验生物组织中还原糖（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）存在与否，而不能鉴定非还原性糖（如淀粉）。（2）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应。（3）脂肪可用苏丹Ⅲ染液（或苏丹Ⅳ染液）鉴定，呈橘黄色（或红色）。（4）甲基绿能使DNA呈绿色，吡罗红能使RNA呈红色。【详解】①蛋白质鉴定时，先加NaOH溶液，后加CuSO4溶液，①错误；②还原糖鉴定时，需要进行水浴加热，②正确；③淀粉鉴定时，直接将碘液滴加到淀粉样液中，③正确；④脂肪鉴定过程中，对装片染色后需用酒精洗掉浮色后放在显微镜下镜检,④错误。故选A。【点睛】本题考查生物组织中化合物的鉴定，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的使用方法、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。8、A【解析】

高尔基体：单膜囊状结构，动物细胞中与分泌物的形成有关，植物中与有丝分裂中细胞壁形成有关。分泌蛋白的合成与分泌过程：附着在内质网上的核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→内质网“出芽”形成囊泡→高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质→高尔基体“出芽”形成囊泡→细胞膜，整个过程还需要线粒体提供能量，据此答题。【详解】A、高尔基体接受内质网形成的“囊泡”，又形成“囊泡”给细胞膜，在细胞运输“货物”中起重要的交通枢纽作用，A正确；B、高尔基体中无DNA，不能用32P标记到DNA，B错误；C、内质网膜内连核膜，外连细胞膜，实现了细胞各结构上的紧密联系，C错误；D、性激素在滑面内质网中合成，D错误。故选A。二、非选择题9、自由组合长翅对短翅显性6种翅形基因位于常染色体上；眼色基因位于X染色体上，棕眼对红眼显性421/3【解析】

一只雌性长翅红眼果蝇与一只雄性长翅棕眼果蝇杂交，所得F1的表现型及比例为长翅红眼：长翅棕眼：短翅红眼：短翅棕眼=3:3:1:1，F1长翅∶短翅=3∶1，红眼∶棕眼=1∶1，可知长翅和短翅的基因（A和a）位于常染色体上，且长翅为显性，红眼和棕眼的显隐性及基因（B和b）的位置未知，可能有6种情况，亲本的基因型为（关于红眼和棕眼）：①翅形常染色体、眼色X染色体且红眼为显性：长翅红眼雌性（AaXBXb）×长翅棕眼雄性（AaXbY）；②翅形常染色体、眼色X染色体且红眼为隐性：长翅红眼雌性（AaXbXb）×长翅棕眼雄性（AaXBY）；③翅形X染色体、眼色常染色体且红眼为显性：长翅红眼雌性（BbXAXa）×长翅棕眼雄性（bbXAY）；④翅形X染色体、眼色常染色体且红眼为隐性：长翅红眼雌性（bbXAXa）×长翅棕眼雄性（BbXAY）；⑤翅形常染色体、眼色常染色体且红眼为显性：长翅红眼雌性（AaBb）×长翅棕眼雄性（Aabb）；⑥翅形常染色体、眼色常染色体且红眼为隐性：长翅红眼雌性（Aabb）×长翅棕眼雄性（AaBb）。【详解】（1）果蝇的长翅和短翅、红眼和棕眼分别由两对独立遗传的等位基因（A和a、B和b）控制，因此翅形和眼色这两对基因的遗传遵循自由组合定律。（2）亲本均为长翅，F1出现短翅，长翅为显性，短翅为隐性。对性状的显隐性关系以及基因的位置还可作出6种合理的假设。若理论上分析F1代长翅红眼果蝇中雌性个体所占的比例为0，则控制红眼和棕眼的基因位于X染色体上，且棕眼为显性，亲本的基因型为：长翅红眼（AaXbXb）×长翅棕眼（AaXBY），F1代短翅红眼果蝇中雄性个体（aaXbY）所占的比例为1。（3）用带荧光标记的B、b基因共有的特有序列作探针，与亲代雄果蝇细胞装片中各细胞内染色体上的B、b基因杂交，亲代棕眼雄果蝇细胞的基因型为XBY或XbY或Bb或bb，有丝分裂后期细胞中的基因数量是体细胞的两倍，若眼色基因位于常染色体上，则观察到4个荧光点（BBbb或bbbb），则；若眼色基因位于X染色体上，则复制后会观察到2个荧光点。（4）让突变体雌果蝇（XClDX+）与正常眼雄果蝇（X+Y）杂交，F1代果蝇为：XClDX+（棒眼雌性）、XClDY（致死）、X+X+（正常眼雌性）、X+Y（正常眼雄性），棒眼果蝇所占的比例为1/3。遗传图解如下，注意表现型中要有性别，各种符号需正确。【点睛】熟悉显隐性的判断及基因位置的判断，要学会从子代的表现型推测亲本的基因型，还有注意遗传中的致死问题。10、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新蛋白质A的重组质粒，仅含蛋白A的重组质粒和空白对照（仅含空质粒，以排除空质粒可能产生的影响）。因此，将含有新蛋白A基因的重组质粒和含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用抗原——抗体杂交方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较抑菌圈的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，是因为蛋白A基因的发酵产物对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高。【点睛】本题主要考查基因工程、PCR技术等相关知识，考生需要理解和记忆相关知识，并学会应用所学知识正确答题。11、基因表达载体的构建RNA聚合酶花粉管通道法不需要经过植物组织培养，转化成功后可直接获得种子参照密码子表，找到合成该14个氨基酸的碱基对序列所在的某因位置，将这些碱某对序列进行缺失处理表达产物（mRNA和蛋白质）抗虫性【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（