广东省广州市白云区2025届高考仿真卷生物试卷含解析

广东省广州市白云区2025届高考仿真卷生物试卷考生请注意：1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。3．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列叙述正确的是（）A．细胞不能无限长大，所以细胞生长到一定程度就会分裂产生新细胞B．细胞分裂和分化是多细胞生物体正常发育的基础，细胞衰老和凋亡则不是C．细胞癌变细胞的形态结构发生变化，细胞衰老细胞的形态结构也发生变化D．一个细胞的原癌基因和抑癌基因中发生5-6个基因突变，人就会患癌症2．肾上腺皮质产生的醛甾酮是一种小分子、脂溶性激素，它进入肾小管上皮细胞后与细胞内受体结合，结合物进入细胞核，启动相关核基因的表达生成醛甾酮诱导蛋白（AIP），AIP可通过促进细胞呼吸，促进细胞ATP的产生，以促进肾小管上皮细胞对肾小管腔中Na+的重吸收。据此分析正确的是（）A．醛甾酮在肾上腺皮质细胞中的核糖体合成B．醛甾酮的作用过程体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能C．醛甾酮-受体结合物进入细胞核需要载体蛋白协助D．肾小管上皮细胞通过主动运输重吸收Na+3．植物侧芽的生长受生长素（ⅠAA）及其他物质的共同影响。有人以豌豆完整植株（Ⅰ组）为对照进行了以下实验：Ⅱ组去除顶芽，Ⅲ组去顶并在切口涂抹ⅠAA处理后，定时测定侧芽长度，实验结果如图。下列叙述错误的是（）A．本实验中的第Ⅲ组实验可以省去B．Ⅰ组和Ⅱ组对比说明顶芽能抑制侧芽生长C．Ⅰ组侧芽生长长度较短的原因是侧芽生长素浓度较高D．本实验可以说明生长素的生理作用具有两重性的特点4．下列关于基因工程的叙述，正确的是()A．构建表达载体时需要在目的基因前加上起始密码子B．农杆菌转化法可以将目的基因随机插入受体细胞的染色体DNA上C．标记基因中不能有限制酶的识别位点以防止其被破坏而失去作用D．导入人胰岛素基因的大肠杆菌可直接生产出有活性的人胰岛素5．某同学用洋葱做了下列小实验，其实验结果有明显错误的是（）A．用单侧光照射透明培养瓶中的根尖，一段时间后根尖表现出背光生长B．用0.3g/mL的蔗糖溶液浸润鳞片叶内表皮细胞，细胞可发生质壁分离C．用新鲜管状叶作材料提取并分离色素，滤纸条上可以呈现四条色素带D．用根尖制作临时装片，可以观察到一个分生区细胞的有丝分裂全过程6．春小麦是我国西北地区主要粮食作物之一，在水分胁迫下，春小麦光合作用存在气孔限制和非气孔限制两种类型，程度分别用气孔限制值（Ls）和非气孔限制值（Ci/gs，Ci为胞间二氧化碳，gs为气孔导度）表示。下图是黄土高原半干旱地区雨养春小麦旗叶光合作用在2个关键生育期的气孔限制和非气孔限制情况，下列说法错误的是（）A．上述两个时期中小麦光合作用限制的气孔和非气孔因素同时存在B．灌浆期中午存在午休现象，气孔和非气孔因素限制都很显著C．较为幼嫩的抽穗期叶子对不同环境因素的改变响应迟钝D．若采取有效措施消除气孔因素限制，可有效提升该地春小麦产量二、综合题：本大题共4小题7．（9分）微生物的生长繁殖需要不同种类的碳源、氮源、无机盐、生长因子等营养物质，若培养基中的某种营养物质不能被微生物利用，微生物便不能生长。根据这一特性，可将微生物接种在只缺少某种营养物质的基础培养基中，再将所缺的营养物质点植于平板上，该营养物质便逐渐扩散于植点周围。该微生物若需要此种营养物质，便在这种营养物质扩散处生长繁殖，形成肉眼可见的菌落圈，这种测定微生物营养需求的方法称为生长谱法。某兴趣小组尝试用生长谱法测定某种大肠杆菌对糖类（碳源）的需求情况，操作流程如下：Ⅰ．培养基的制备。该小组所用无碳培养基配方如下（加水定容至1L）：成分NaClKH2PO4K2HPO4（NH4）2SO4MgSO4·7H2O琼脂质量（g）11．51．521．221同时配制质量分数为11%的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖溶液各51mL。Ⅱ．将大肠杆菌悬液与溶化并冷却至51℃的固体培养基混匀，倒平板。Ⅲ．将已凝固的平板背面用记号笔划分为四个区，并注明要点植的糖类名称。Ⅳ．通过无菌操作分别加入蘸有不同糖类的无菌滤纸片，待平板吸收干燥后倒置培养24小时。结合所学知识回答相关的问题：（1）无碳培养基配方中加入（NH4）2SO4的目的是___________。对培养基及糖溶液通常采用的灭菌方法是___________。倒平板后用___________法进行接种。（2）该小组发现最终在培养基的四个区内均有菌落圈产生，但大小不同，据此得到的初步结论是___________。（3）如果在此实验中发现某一不被该大肠杆菌利用的碳源的点植区域也长出菌落圈，试分析可能的原因（写出2条即可）______。（4）生长谱法还可用于某些营养缺陷型菌株（失去合成某种生长因子能力的菌株）的筛选和鉴定，例如大肠杆菌经紫外线诱变处理后会产生一些营养缺陷型突变个体，现已纯化并制备出某营养缺陷型的菌悬液，但不清楚是氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸—维生素缺陷型，请简要写出用生长谱法进行鉴定的思路，并预期可能的结果及结论_____。8．（10分）哺乳动物性激素的分泌与光照周期有着密切关系。图1为性激素分泌活动的调节机制示意图，其中a、b、c代表不同激素，X、Y代表不同的器官。图2为性激素作用机理的示意图。请分析回答。（1）图l中能对光照周期进行综合分析的是_________（填字母），激素a的名称是_________，其只能特异性作用于Y中细胞的根本原因是_________。（2）现对三只正常动物分别进行如下三种操作：去除Y器官、去除性腺、注射性激素，则短期内这三只动物血液中的三种激素a、b、c含量随时间的变化曲线分别是_________。（3）图2中，c进入细胞的方式是_________，受体R的化学本质是_________。图2说明性激素可通过影响_________而引起相应的生物学效应，如促进生殖器官的生长发育和生殖细胞的形成和_________。9．（10分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。10．（10分）独脚金内酯是近年来新发现的一种植物激素，其具有抑制侧枝生长等作用。（1）独脚金内酯作为植物激素，是一类具有_________作用的有机物。（2）细胞分裂素能促进侧枝生长，在此功能上其与独脚金内酯是__的关系。（3）为了探究这两种激素在调节侧枝生长上的相互作用机制，研究者用细胞分裂素类似物BA和独脚金内酯类似物GR24等试剂，以及独脚金内酯合成突变体和受体突变体豌豆为实验材料进行了研究，实验结果如图。整个实验在光照和温度可控的温室中进行。①实验处理和测量的材料都是豌豆原本不发育的第三侧芽，选择此侧芽的目的是_______________。②由实验结果可知，BA促进侧芽生长的效果在______中比野生型更明显。③依据实验结果判断___________（填“突变体1”或“突变体2”）是独脚金内酯合成突变体，做出此判断的依据是______________。（4）研究人员推测独角金内酯能促进细胞分裂素降解而抑制侧枝生长，验证此推测还需补充的实验组处理__________。a．野生型豌豆b．豌豆突变体1c．豌豆突变体2d．细胞分裂素合成缺陷型豌豆e．用适量BA处理f．用适量GR24处理g．用适量BA和GR24处理h．检测细胞分裂素含量i．检测侧枝长度11．（15分）红树莓果实柔嫩多汁，含有多种维生素及人体必需的8种氨基酸，尤其富含黄酮类、鞣花酸等活性物质，被称为“生命之果”。（1）高品质红树莓酒的评价标准是色泽鲜艳，澄清透亮，酸甜可口。为此，发酵过程中要添加果胶酶，其主要目的是___________________________，有时添加适量糯米糖化醪（淀粉水解成的甜味混合物），其作用是为发酵所用酵母菌补充___________________________，同时也有___________________________的作用。随着发酵过程的进行果酒颜色逐渐加深，主要原因是___________________________。（2）研究人员为探究发酵温度对红树莓果酒发酵的影响做了相关实验后得到如图所示结果：实验结果表明：发酵的最适温度是______________，理由是___________。（3）酿酒时，发酵进行一段时间后残糖量不再降低，推测原因是__________________________；而酒精度数逐渐下降，原因是__________________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。2、细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程，在成熟的生物体内，细胞的自然更新、被病原体感染的细胞的清除，是通过细胞凋亡完成的。细胞坏死是由外界环境因素引起的，是不正常的细胞死亡，对生物体有害。3、衰老细胞的特征：（1）细胞内水分减少，细胞萎缩，体积变小，但细胞核体积增大，染色质固缩，染色加深；（2）细胞膜通透性功能改变，物质运输功能降低；（3）细胞色素随着细胞衰老逐渐累积；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度减慢，新陈代谢减慢。4、细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变，其中原癌基因负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的过程，抑癌基因主要是阻止细胞不正常的增殖。【详解】A、细胞开始生长，长到一定程度后，除一小部分保持分裂能力，大部分丧失了分裂能力，A错误；B、细胞衰老和凋亡也有利于多细胞生物体正常发育，也是多细胞生物体正常发育的必要条件，B错误；C、癌变细胞的形态结构发生变化，细胞膜上的糖蛋白减少，细胞衰老也会表现为细胞的形态、结构和功能发生改变，C正确；D、癌症的发生并不是单一基因突变的结果，至少在一个细胞中发生5-6个基因突变，才能赋予癌细胞所有的特征，这是一种累积效应，D错误。故选C。2、D【解析】

细胞间信息交流的方式：1、细胞分泌的化学物质（如激素），随血液到达全身各处，与靶细胞的细胞膜表面的受体结合，将信息传递给靶细胞。2、相邻两个细胞的细胞膜直接接触，信息从一个细胞传递给另一个细胞，如精子和卵细胞之间的识别和结合。3、相邻两个细胞间形成通道，携带信息的物质通过通道进入另一个细胞，如高等植物细胞间通过胞间连丝相互连接，也有信息交流的作用。【详解】A、醛甾酮是一种小分子，其化学本质不是蛋白质,不是在肾上腺皮质细胞中的核糖体合成，A错误；B、醛甾酮是一种小分子、脂溶性激素，以自由扩散方式进入细胞，体现了细胞膜的选择透过性，与细胞内受体结合没有体现细胞膜进行细胞间信息交流的功能，B错误；C、醛甾酮-受体结合物是通过核孔进入细胞核，不需要载体蛋白协助，C错误；D、由题意可知，肾小管上皮细胞对肾小管腔中Na+的重吸收需要ATP供能，为主动运输，D正确。故选D。【点睛】本题通过对醛甾酮的分析，考查细胞间信息交流的过程，关键是准确获取题干信息再结合所学知识解题。3、A【解析】

分析题图可知：Ⅰ组保留顶芽，顶芽产生的生长素向下运输积累在侧芽处，使侧芽生长素浓度过大，从而抑制侧芽生长；Ⅱ组去除顶芽，侧芽生长；Ⅲ组在去顶后人工涂抹ⅠAA，结果是侧芽长度小于Ⅱ组侧芽长度，说明顶芽对侧芽的作用与生长素有关，即抑制侧芽生长。【详解】A、Ⅲ组在去顶后人工涂抹ⅠAA，结果是侧芽长度小于Ⅱ组侧芽长度，说明顶芽对侧芽的作用与生长素有关，即抑制侧芽生长，因此实验中Ⅲ组是必需有的，A错误；B、Ⅰ组保留顶芽，因此顶芽产生的生长素向下运输积累在侧芽处，使侧芽生长素浓度过大，从而抑制侧芽生长，B正确；C、Ⅰ组保留顶芽，因此顶芽产生的生长素向下运输积累在侧芽处，使侧芽生长素浓度过大，从而抑制侧芽生长，C正确；D、本实验体现了生长素在较低浓度时促进生长，在较高浓度时抑制生长，说明生长素的生理作用具有两重性的特点，D正确。故选A。【点睛】本题结合柱形图，考查植物激素的相关知识，意在考查考生分析题图获取有效信息的能力；能理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力。4、B【解析】

据题文和选项的描述可知：本题考查学生对基因工程的基本操作程序的相关知识的识记和理解能力。【详解】构建基因表达载体时需要在目的基因前加上启动子，A错误；农杆菌的Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上，依据农杆菌的这一特点，采用农杆菌转化法，将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上，可以将目的基因随机插入受体细胞的染色体DNA上，B正确；标记基因中可以有限制酶的识别位点，为了防止标记基因被破坏而失去作用，在构建基因表达载体时，使用的限制酶应该不具有识别标记基因中的限制酶的识别位点的能力，C错误；导入人胰岛素基因的大肠杆菌，因没有内质网和高尔基体，不能对胰岛素进行加工，所以不能直接生产出有活性的人胰岛素，D错误。5、D【解析】

1、分离绿叶中色素原理：各色素随层析液在滤纸上扩散速度不同，从而分离色素。溶解度大，扩散速度快；溶解度小，扩散速度慢。滤纸条从上到下依次是：胡萝卜素（最窄）、叶黄素、叶绿素a（最宽）、叶绿素b（第2宽），色素带的宽窄与色素含量相关。2、观察细胞有丝分裂实验的步骤：解离（解离液由盐酸和酒精组成，目的是使细胞分散开来）；漂洗（洗去解离液，便于染色）；染色（用龙胆紫、醋酸洋红等碱性染料）；制片（该过程中压片是为了将根尖细胞压成薄层，使之不相互重叠影响观察）和观察（先低倍镜观察，后高倍镜观察）。【详解】A、用单侧光照射，生长素由向光侧往背光侧运输，导致背光侧浓度较高，抑制根的生长，向光侧生长快，背光侧生长慢，根尖表现出背光生长，A正确；B、用0.3g/mL的蔗糖溶液浸润鳞片叶内表皮细胞，外界溶液浓度大于细胞液浓度，细胞失水皱缩，可发生质壁分离现象，B正确；C、新鲜管状叶含有叶绿体，提取并分离色素，滤纸条上可以呈现四条色素带，C正确；D、用根尖制作临时装片时细胞已经死亡，不能观察到一个分生区细胞的有丝分裂全过程，D错误。故选D。6、C【解析】

影响光合作用的因素有光照强度，CO2浓度等，由图可知，两个不同发育时期中气孔限制值在一天中的变化均为先升高后降低，但最大值出现的时间点不同，两个不同发育时期中非气孔限制值开始快速上升的时间点也不同。【详解】A、由图可知，上述两个时期中小麦光合作用限制的气孔和非气孔因素同时存在，A正确；B、灌浆期中午非气孔限制值有一段是升高的，此时气孔限制值也较高，说明灌浆期中午存在午休现象，气孔和非气孔因素限制都很显著，B正确；C、抽穗期在上午时气孔限制值较灌浆期升高的更快，且最大值也高于灌浆期，说明较为幼嫩的抽穗期叶子对水分胁迫的环境因素的改变响应相对灵敏，C错误；D、气孔因素限制可降低胞间二氧化碳浓度，降低光合速率，若采取有效措施消除气孔因素限制，可有效提升该地春小麦产量，D正确。故选C。【点睛】本题考查影响光合作用的因素，意在考查考生能从图中获取信息的能力。二、综合题：本大题共4小题7、提供氮源高压蒸汽灭菌稀释涂布平板大肠杄菌可以利用四种糖类（葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖）作为碳源，但利用的程度不同有杂菌混入；该大肠杆菌发生了突变；该大肠杆菌可能会利用琼脂多糖将菌悬液与溶化并冷却至51℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀，倒平板；将培养基划分成两个相等的区域A、B；A区点植氨基酸、B区点植维生素；在适宜温度下培养，观察菌落产生的区域。若菌落只在A区产生，则为氨基酸缺陷型；若菌落只在B区产生，则为维生素缺陷型；若菌落产生在AB交界处，则为氨基酸—维生素缺陷型【解析】

培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。【详解】（1）培养基中的（NH4）2SO4可以提供氮源。常用高压蒸汽灭菌法对培养基及糖溶液进行灭菌。倒平板后常用稀释涂布平板法进行接种。（2）培养基的四个区中含有不同的糖类，若在培养基的四个区内均有菌落圈产生，说明大肠杆菌可以利用四种糖类，但大小不同，说明大肠杆菌对四种糖类的利用程度不同。（3）如果在此实验中发现某一不被该大肠杆菌利用的碳源的点植区域也长出菌落圈，可能是有杂菌混入或该大肠杆菌发生了突变。（4）要通过生长谱法探究大肠杆菌属于氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸—维生素缺陷型，可以将菌悬液与溶化并冷却至51℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀，倒平板；将培养基划分成两个相等的区域A、B；A区点植氨基酸、B区点植维生素；在适宜温度下培养，观察菌落产生的区域。若菌落只在A区产生，则为氨基酸缺陷型；若菌落只在B区产生，则为维生素缺陷型；若菌落产生在AB交界处，则为氨基酸—维生素缺陷型。【点睛】本题的难点在于通过生长谱法探究大肠杆菌属于氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸—维生素缺陷型，选择的培养基应该不含氨基酸和维生素，在两个区分别点上氨基酸和维生素，观察菌落的产生情况。8、X促性腺激素释放激素控制激素a受体合成的基因只在Y细胞中表达BAD自由扩散蛋白质①或转录激发和维持生物的第二性征【解析】

性激素调节过程：下丘脑分泌促性腺激素释放激素，促使垂体分泌促性腺激素。促性腺激素随血液运输到性腺，促使性腺增加性激素的合成和分泌。血液中性激素含量增加到一定程度时，又反过来抑制下丘脑和垂体分泌相关激素，进而使性激素分泌减少。故X是下丘脑，Y是垂体，a是促性腺激素释放激素，b是促性腺激素。c是性激素。性激素的调节过程：下丘脑→促性腺激素释放激素→垂体→促性腺激素→性腺→性激素，同时性激素还能对下丘脑和垂体进行负反馈调节。【详解】（1）哺乳动物性激素的分泌与光照周期有着密切关系，图l中能对光照周期进行综合分析的是X（下丘脑）；激素a是促性腺激素释放激素；它只能特异性作用于Y，根本原因是控制激素a受体合成的基因只能在Y细胞中表达，只有Y细胞表面有激素a生物受体。（2）去除Y器官（垂体），激素b减少，那么会导致激素c减少，c减少对下丘脑的抑制作用减弱，故激素a增多，短期内动物血液中的三种激素a、b、c含量随时间的变化曲线为B；去除性腺，那么会导致激素c减少，c减少对下丘脑和垂体的抑制作用减弱，故激素a、b增多，短期内动物血液中的三种激素a、b、c含量随时间的变化曲线为A；注射性激素，那么会导致激素c增多，c减少对下丘脑和垂体的抑制作用增强，故激素a、b减少，短期内动物血液中的三种激素a、b、c含量随时间的变化曲线为D。（3）激素c是固醇类激素，进入细胞的方式是自由扩散；作为激素的受体-R的化学本质是蛋白质；由图2可知性激素的作用机制主要是通过影响①转录而引起生物学效应的；性激素的生理效应有：促进生殖器官的生长发育和生殖细胞的形成和激发的维持生物的第二性征。【点睛】本题考查性激素的分级调节和反馈调节，解题的关键是识记性激素的调节过程，能运用所学知识分析图形，识别图中各种激素的名称。9、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新蛋白质A的重组质粒，仅含蛋白A的重组质粒和空白对照（仅含空质粒，以排除空质粒可能产生的影响）。因此，将含有新蛋白A基因的重组质粒和含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用抗原——抗体杂交方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较抑菌圈的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，是因为蛋白A基因的发酵产物对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高。【点睛】本题主要考查基因工程、PCR技术等相关知识，考生需要理解和记忆相关知识，并学会应用所学知识正确答题。10、调节（植物生命活动）拮抗使实验现象更明显，更易观察突变体1和突变体2突变体1加入BA和GR24的组比单独加BA侧枝长度短得比突变体2更明显afh（i）或bfh（i）【解析】

1、植物激素是植物细胞产生的、能从产生部位运输到作用部位、对植物的生长发育具有调节作用的微量有机物。2、由柱形图可知，该实验的自变量是不同激素的处理、植物种类，因变量是侧枝的长度，其他属于无关变量，无关变量应该保持一致且适宜；用BA处理后，与野生型相比，突变体1和突变体2侧枝生长更显著；与单独用BA处理相比，BA+GR24处理后，突变体1和突变体2侧芽长度都缩短，与突变体2相比