桔梗的化痰止咳作用

桔梗的化痰止咳作用实验目的1.通过桔梗煎剂对小鼠的作用了解桔梗化痰止咳的药理作用2.掌握这些药物的研究方法，并进一步研究作用机理3.熟悉中药化痰止咳药的研究概况，掌握几种常用的筛选方法。

实验：一、止咳药的实验二、化痰药的实验一、止咳药实验法：①小鼠氨水引咳法：用浓氨水引起小鼠咳嗽，借以观察药物的止咳作用，是止咳药常用筛选方法之一。②二氧化硫致咳法：通过二氧化硫的刺激，观察咳嗽的潜伏期，以筛选药物的镇咳作用。③豚鼠枸椽酸引咳法：用枸椽酸喷雾引起豚鼠咳嗽，以观察药物的镇咳作用，豚鼠受枸椽酸刺激后引起的咳嗽声音较大，易于记录。④刺激猫喉上神经引咳法：通过小鼠氨水、二氧化硫等引咳法筛选出的镇咳药，进一步研究其作用机制是中枢性还是末梢性，可进行本实验。凡能抑制咳嗽中枢的药物均能抑制刺激喉上神经引起的咳嗽。实验原理：

桔梗所含皂苷成分经口服刺激胃黏膜，反射性地增加支气管黏膜分泌，使痰液稀释而被排出。桔梗所含皂苷同时具有镇咳作用。小鼠灌服桔梗煎剂的LD50为24g/kg。小鼠灌胃桔梗皂苷的LD50为420mg/kg,腹腔注射为22.3mg/kg。浓氨水作为化学刺激物，当被动物吸入后，作用于呼吸道感受器，引起咳嗽。故凡能抑制咳嗽中枢或降低呼吸道感受器敏感性的药物均有止咳作用。

实验器材：动物:小鼠10只，雌雄各半（20-22g）器材:小鼠灌胃器，秒表，负压吸引器（萨克星），玻璃钟罩，小鼠固定装置，超声雾化器，电子秤。试剂:浓氨水（分析纯）（28%），稀盐酸（中和氨水）。桔梗煎剂液1g/ml，苦味酸。实验方法（1）10kPa负压，喷雾5s，观察咳嗽潜伏期、2min、3min内的咳嗽次数。记录数据。选取咳嗽反射阳性（3min内咳嗽10次以上者）小鼠10只。（2）将选出的小鼠秤重，编号。给小鼠灌胃桔梗煎剂稀释液，30min后，先让玻璃钟罩内充满雾化的浓氨水，将小鼠装入固定器，放入玻璃钟罩的同时予负压10kPa抽吸雾化的浓氨水，5s后取出小鼠的同时按下秒表。记录咳嗽的潜伏期、2min内小鼠的咳嗽次数、3min内小鼠的咳嗽次数（以听到小鼠响亮的咳嗽声音为标准）。求出潜伏期延长的百分率及咳嗽减少百分率。数据记录与处理：与给药前相比*P<0.05,**P<0.01；组别剂量mg/kg潜伏期（sec）咳嗽频率延长百分率（%）给药前给药后给药前给药后2min3min2min3min2min3min2min3min12345678910桔梗的止咳效果（n=10）注意事项药物称量、配制及给药的准确程度是本实验成功与否的关键。不能将小鼠长时间放入玻璃钟罩内，否则将会导致小鼠死亡影响实验结果。实验时仔细观察小鼠腹部运动，如果在小鼠出现典型快速扬头张口，腹部急速抽动的同时听到清脆的咳嗽声音，立即记为一次咳嗽。二、化痰药的实验：①小鼠酚红气管排出实验法。用小鼠通过酚红从气管的排出量，观察药物对呼吸道分泌的影响。此法简便，但用强碱洗出气管内酚红能损伤气管粘膜。②家兔酚红排出实验法。经小鼠酚红法筛选有效时，再用家兔进行实验。③影响大鼠气管纤毛粘液运行速度的实验方法。用印度墨汁（稀释4～5倍）注入气管1滴，观察药物对大鼠气管纤毛粘液运行速度的影响，作为化痰药的一个实验指标。实验原理

小白鼠腹腔注射酚红后，后者可部分的从气管分泌排出有祛痰作用的药物在使支气管分泌液增加的同时，其由呼吸道粘膜排出的酚也随之增加。因而可从药物对气管内酚红排泌量的影响来观察其祛痰作用。酚红在碱性溶液中呈红色，将从道中洗出的液体用比色法（分光光度计）测出酚红的排泌量。从而得出药物的祛痰作用。实验器材：

动物：小鼠10只，雌雄各半（20-22g）。禁食

12h，不禁水药品：桔梗煎剂液1g/ml，并以蒸馏水稀释成所需要的浓度灌胃给药,小鼠剂量为5.73ml/kg，生理盐水。酚红，用时配制成浓度0.5%;苦味酸,NaOH溶液器材：超声波雾化器；可见紫外分光光度计，鼠笼灌胃器，电子秤，手术器材，剪子，钟罩，镊子实验步骤

药物的稀释浓度同小鼠浓氨水引咳法，将小鼠分为两组，实验组小鼠灌胃桔梗水煎液（0.2ml/10g），对照组小鼠灌胃生理盐水。30min后，腹腔注射酚红溶液0.1ml/10g，注射酚红后30min，断颈处死小鼠，背位固定，分离气管。剥离气管周围组织，剪下假状软骨至气管分枝处一段气管，立即放入盛有2ml生理盐水的试管中，加入0.1ml氢氧化钠溶液，以721型分光光度计，波长546nm测定吸光度。根据酚红标准曲线计算酚红含量。数据记录与处理组别小鼠数(n)剂量(mg/kg)酚红排泌量（ug/ml）12345678910与对照组相比*P<0.05,P<0.01桔梗的化痰作用注意事项药物称量、配制及给药的准确程度是本实验成功与否的关键。给药至处死动物的时间必须准确解剖时，必须将周围的组织去除干净，气管段周围如果粘附有血液应立即用滤纸吸净。呼吸道冲洗时，NaHCO3用量要准确，灌洗时动作要轻，以免穿破气管和肺脏，抽推速度也尽可能相同，并尽可能将洗液抽尽。桔梗有毒性，只能口服，不能注射。给药量必须准确。

谢谢观赏！桔梗桔梗(Platycodongrandiforus)，桔梗科桔梗属植物，多年生草本，叶子卵形或卵状披针形，花暗蓝色或暗紫白色，可作观赏花卉；朝鲜族人用作野菜食用；其根可入药，有止咳祛痰、宣肺、排脓等作用。全国各地均产。主产安徽、河南、湖北、辽宁、吉林、河北、内蒙古等地。桔梗植物学名：Platycodongrandiflorum(Jacq.)A.DC.中药材学名∶

RadixPlatycodonis.英语名称：platycodonroot、Chinesebellflower、Japanesebellflower、commonballoonflower、balloonflower花语：1、永恒不变的爱；真诚、柔顺、悲哀。

2、无望的爱桔梗【性味与归经】味苦、辛，性平。归肺、胃经。

【功效】宣肺，利咽，祛痰排脓。

【临床应用】1、宣肺：用于肺气不宣的咳嗽痰多，胸闷不畅；

2、利咽：用于咽喉肿痛，失音；

3、祛痰排脓：用于肺痈吐脓。

【用法用量】煎服，3～10g。桔梗的药（毒）理学

桔梗煎剂以1g/kg给麻醉狗灌胃，可使呼吸道分泌增加；桔梗皂甙粗品具有镇静、镇痛及解热等中枢抑制作用，并有抗炎及镇咳祛痰、扩张血管、降压、抗溃疡作用；桔梗甲醇提取物及粗皂甙灌服，可增强小鼠碳粒廓清速率．桔梗皮也有祛痰作用．桔梗皂甙有溶血作用．桔梗所含皂甙口服时对咽喉粘膜及胃粘膜造成某种程度的刺激，反射地引起呼吸道粘膜分泌亢进，使痰液稀释，促使其排出，粗制桔梗皂甙有镇咳作用。豚鼠腹腔注射和镇咳半数有效量为6.4mg/kg。小鼠灌胃桔梗煎剂的半数致死量为24g/kg，兔灌胃该品煎剂40g/kg，于24小时内5兔全部死亡，剂量为20g/kg时，则全部存活，桔梗皂甙有很强的溶血作用，其溶血指数与来源产地和生长年限、采集时间、加工方法等而异，从1：100到1：1000不等，韧皮部的溶血作用为本质部的4.4-6.5倍