《病毒疫苗研发新趋势及整体解决方案-呼吸道合胞病毒、流感病毒、疱疹病毒等》

新型疫苗技术平台概述及整体解决方案

-呼吸道合胞病毒、流感病毒、疱疹病毒等北京义翘神州科技股份有限公司义翘神州CONTENT新型疫苗技术平台概述1重要病毒疫苗的概述及开发挑战2整体解决方案及相关案例分享3义翘神州新型疫苗技术平台概述01义翘神州新型疫苗定义新型疫苗其有别于传统常规疫苗按制备工艺分类基于蛋白的疫苗基于病毒载体疫苗基于核酸的疫苗Figure-PMC()传统新型义翘神州新型疫苗定义蛋白质亚单位疫苗病毒样颗粒疫苗基于蛋白的疫苗只含有病原体中具有抗原性的部分，也就是可以诱发免疫反应的抗原。义翘神州基于病毒载体的疫苗是一种利用病毒载体将合成抗原的遗传物质传送至人体宿主细胞的疫苗。基于核酸的疫苗将编码某种抗原蛋白的外源基因（DNA或RNA）直接导入动物体细胞内，并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白，以达到预防和治疗疾病的目的。ADVVSVLVsPoxvirusDNARNA新型疫苗技术平台简介——VLP/10.1016/B978-0-323-85662-1.00004-5

义翘神州佐剂稳定性AVisualAidtoViralInfectionandVaccineProduction-LozierInstitute义翘神州新型疫苗技术平台简介——病毒载体疫苗载体类型预先存在的免疫安全性Doi:

10.1016/j.ymthe.2022.02.016义翘神州序列设计递送系统新型疫苗技术平台简介——基于核酸的疫苗生产系统宿主疾病疫苗名称（制造商）监管批准抗原疫苗类型酵母S.cerevisiaeHBVEngerix®-B(GSK)1989年FDAHBsAgVLPS.cerevisiaeHPVGardasil-9®

(Merck&Co.)2014年FDA2015EMAL1VLP昆虫细胞HighFive™HPVCervarix®

(GSK)2007EMA2009FDAL1VLPExpresSF+®流感FlublokQuadrivalent®/Supemtek®

(SanofiPasteur)®®2016年FDA2020年EMAHAquadrivalentSubunit哺乳动物细胞CHOVZVShingrix®

(GSK)2017年FDA2018年EMAgESubunitCHORSVArexvy®

(GSK)2023年FDAPre-FSubunit用于人类的重组蛋白疫苗：义翘神州病毒载体疫苗病毒载体疾病疫苗名称（制造商）监管批准抗原VSV埃博拉Ervebo®(Merck&Co.)2019年FDAZEBOV-GPADV26（第一剂）埃博拉Zabdeno®（JNJ）2020年EMAZEBOV-GP

ModifiedVacciniaAnkaraBavarianNordicVirus（第二剂）埃博拉Mvabea®（JNJ）2020年EMA

ZEBOV-GPChimpanzeeadenovirusSARS-Cov-2Vaxzevria®

（AstraZeneca）2021年

EMAspikeproteinADV5SARS-Cov-2克威莎（CanSinoBiologics）2021年NMPAspikeproteinADV26SARS-Cov-2Ad26.COV2.S（JNJ）2021年FDAspikeprotein义翘神州疾病疫苗名称（制造商）监管批准抗原SARS-Cov-2Comirnaty®(Pfizer/BioNtech)2021年

FDAspikeproteinSARS-Cov-2Spikevax®（Moderna）2022年FDAspikeprotein基于核酸的疫苗义翘神州重要病毒疫苗的概述及开发挑战02义翘神州InfluenzaVirus-病毒抗原简介蛋白在流感病毒生活周期中的作用应用HA(血凝素)宿主细胞膜上的唾液酸受体相结合，协助病毒包膜与宿主细胞膜相互融合；凝血作用

流感疫苗NA(神经氨酸酶)水解唾液酸受体，促进成熟病毒颗粒释放通用流感疫苗NP(核蛋白)与流感遗传物质结合，参与病毒基因复制、转录、翻译；维持病毒基因稳定性

通用流感疫苗M蛋白保护病毒核心，维护病毒空间结构

通用流感疫苗义翘神州InfluenzaVirus-疫苗进展目前，全球批准的流感疫苗主要有三种类型：灭活疫苗、减毒活疫苗和重组蛋白疫苗。每年，WHO会公布下一流感季的疫苗株组成，含有甲型H1N1和甲型H3N2流感病毒以及乙型流感病毒的成分，以“三价”或“四价”制剂生产。Recommendationsannouncedforinfluenzavaccinecompositionforthe2023-2024northernhemisphereinfluenzaseasonRecommended

composition

of

influenza

virus

vaccines

for

use

in

the

2023-2024

northern

hemisphere

influenza

season

()

TheWHOrecommendsthatquadrivalentvaccinesforuseinthe2023-2024northernhemisphereinfluenzaseasoncontainthefollowing:Egg-basedvaccinesanA/Victoria/4897/2022(H1N1)pdm09-likevirus;anA/Darwin/9/2021(H3N2)-likevirus;andaB/Austria/1359417/2021(B/Victorialineage)-likevirus;andaB/Phuket/3073/2013(B/Yamagatalineage)-likevirus.Cellculture-orrecombinant-basedvaccinesanA/Wisconsin/67/2022(H1N1)pdm09-likevirus;anA/Darwin/6/2021(H3N2)-likevirus;aB/Austria/1359417/2021(B/Victorialineage)-likevirus;andaB/Phuket/3073/2013(B/Yamagatalineage)-likevirus.WHORecommendsthattrivalentvaccinesforuseinthe2023-2024influenzaseasoninthenorthernhemispherecontainthefollowing:Egg-basedvaccinesanA/Victoria/4897/2022(H1N1)pdm09-likevirus;anA/Darwin/9/2021(H3N2)-likevirus;andaB/Austria/1359417/2021(B/Victorialineage)-likevirus.Cellculture-orrecombinant-basedvaccinesanA/Wisconsin/67/2022(H1N1)pdm09-likevirus;anA/Darwin/6/2021(H3N2)-likevirus;andaB/Austria/1359417/2021(B/Victorialineage)-likevirus.义翘神州InfluenzaVirus-疫苗进展一些新的技术平台也应用到流感疫苗的开发中，例如病毒载体疫苗、mRNA疫苗等。未来流感疫苗开发的方向是开发通用流感疫苗，可以覆盖不同流感亚型，并可以应对流感的快速进化。义翘神州UNIVERSALINFLUENZAVACCINETECHNOLOGYLANDSCAPE(byIVR)InfluenzaVirus-疫苗进展/10.3390/v14081684/10.3390/v14081684义翘神州InfluenzaVirus-疫苗进展义翘神州VaccineNameDeveloper/LocationPlatformR&DStatusPhaseMultimeric-001(M-001)BiondVaxPharmaceuticals(Israel)RecombinantproteinsInactivePhase3QuadrivalentVLP(QVLP)Medicago(Canada)Virus-likeparticles(VLP)InactivePhase3Nano-Flu(qNIV)Novavax(US),EmergentBioSolutions(US)Non-VLPnanoparticlesActivePhase3ModifiedmRNAvaccinePfizer(US),BioNTech(Germany)Nucleicacid-basedActivePhase3mRNA-1010Moderna(US)Nucleicacid-basedActivePhase3FLU-vConserVBioscience(UK),Imutex(UK)RecombinantproteinsActivePhase2deltaFLUVivaldiBiosciences(US)Influenzavirus-basedActivePhase2M2SRFluGen(US)Influenzavirus-basedActivePhase2MVA-NP+M1(VTP-100)Vaccitech(UK)Virus-vectoredInactivePhase2NasoVAXAltimmune(US)Virus-vectoredInactivePhase2VXA-A1.1oraltabletVaxart(US)Virus-vectoredActivePhase2CICVaccineNovavax(US)Non-VLPnanoparticlesActivePhase2OVX836Osivax(France)Non-VLPnanoparticlesActivePhase2mRNA-1020andmRNA-1030Moderna(US)Nucleicacid-basedActivePhase2UNIVERSALINFLUENZAVACCINETECHNOLOGYLANDSCAPE(byIVR)RSV-病毒抗原简介RSVhastwomajorsubtypes:AandB.TargetsFunctionApplicationFusion(F)glycoproteinFusionandcellentry;HighlyconservativeVaccine,drugs,andimmunodiagnosisGglycoproteinHostcellattachment;HighlyVariableVaccineNucleocapsid(N)EnvelopvirusgenomeVaccine,immunodiagnosis*Thefollowingarethemostfrequentlydevelopedtargetsforvaccine,drug,andimmunodiagnosticdevelopment:义翘神州RSV-疫苗进展义翘神州FDA批准了两款基于蛋白的疫苗GSK的Arexvy®Pfizer的BRYSVO®

适用范围：皆为60岁及以上群体。RSV-疫苗开发面临的挑战融合前表位表位Ø，表位Ⅴ，Quaternary-Dependent融合前后都存在的表位表位Ⅰ，表位Ⅱ，表位Ⅲ，表位Ⅳ抗原设计twocavity-fillingmodifications(S190FandV207L)foldontrimerizationdomaintwomutations(S155CandS290C)thatformadisulfidebond义翘神州

DOI:

10.1126/science.aav9033Herpesviridae

Viruses-病毒概述是一类双链DNA病毒，总共有100多种，可以分为α、β、γ三大类。其中有以下几种会感染人类：名称别名亚科主要感染细胞感染潜伏部位HHV‑1单纯疱疹病毒-1（HSV-1）α黏膜上皮疱疹性口腔炎、生殖器疱疹与其他部位的单纯疱疹神经元HHV-2单纯疱疹病毒-2（HSV-2）α黏膜上皮疱疹性口腔炎、生殖器疱疹与其他部位的单纯疱疹神经元HHV-3水痘-带状疱疹病毒

（VZV）α黏膜上皮水痘与带状疱疹神经元HHV-4EBV病毒、LymphocryptovirusγB细胞与上皮细胞EBV关联淋巴增生性疾病、传染性单核白血球增多症、鼻咽癌等B细胞HHV-5巨细胞病毒

（CMV）β单核球与上皮细胞类似传染性单核白血球增多症的症状、网膜炎单核球等HHV-6A与6B玫瑰疱疹病毒βT细胞等第六症（小儿急疹）T细胞等HHV-7βT细胞等药物超敏反应综合征、脑病变,偏侧惊厥一偏瘫一癫痫综合征、肝炎、玫瑰糠疹、类似传染性单核白血球增多症的症状等T细胞等HHV-8卡波西氏肉瘤疱疹病毒

（KSHV）（属蛛猴病毒属）γ淋巴球等卡波西氏肉瘤、原发性体液淋巴瘤、HHV-8关联淋巴结增生症B细胞义翘神州Herpesviridae

Viruses-病毒抗原简介Structure,Classification-HerpesViruses

|12thMicrobiology:Chapter10:MedicalVirology病毒表面有多种糖蛋白：gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gJ、gK、gL、gM和gNgB、gD是大多数HSV疫苗的靶标，因为它对于病毒进入宿主细胞至关重要义翘神州HSVCandidatenameDeveloperVaccineComponentsandMethodologyDevelopmentalPhaseLive-AttenuatedVaccinesHSV-2ΔNLS(RVX201)SIU-RationalVaccinesLive,attenuatedreplication-competentHSV-2withdeletionofICP0PhaseII-DCNE-HSV-2BlueWillowBiologicsNanoemulsionwithgB2andgD2antigensPre-ClinicalSubunitVaccinesHSV-2trivalentvaccineUniversityofPennsylvaniagC2,gD2,gE2;CpG/alumAdjuvantClinicalGEN-003GenoceagD2(truncated)+ICP4fragment(29.2kD)+MatrixM2AdjuvantCompletedPhaseII(DC)gD2subunitvaccineGlaxoSmithKlinegD2withAS04(dMPL)CompletedPhaseIII(DC)ReplicationDefectiveViralVaccinesCJ2-gD2Non-replicatinggD2dominantnegHSV-2Pre-ClinicalDNAVaccinesCOR-1AdmedusgD2ubiquitintag,codonoptimizedDNAvaccinePhaseIIVCL-HB01/HM01VicalDNAvaccine:gD2+/−UL46/VaxfectinPhaseII(DC)Doi:

10.3389/fmicb.2021.798927*没有批准用于预防HSV感染的疫苗义翘神州Herpesviridae

Viruses-疫苗进展Herpesviridae

Viruses-疫苗开发面临的挑战挑战：减毒活疫苗的主要挑战之一仍然是疫苗安全性。亚单位疫苗的挑战在于产生有效、持久的免疫反应。疱疹病毒会产生潜伏期，这使疫苗开发复杂化，预防潜伏感染是挑战。设计有效的治疗性或预防性疫苗需要对单纯疱疹病毒发病机制和免疫逃避的复杂性的进一步理解。义翘神州整体解决方案及相关案例分享03义翘神州临床前研究疫苗开发整体解决方案产品：重组抗原中和抗体，检测抗体抗原含量检测试剂盒抗体滴度检测试剂盒肽库细胞因子检测试剂盒流式抗体假病毒服务：细胞库检测（CHO,Vero,HEK293等）病毒清除验证实验抗原开发服务抗体开发服务理化及生物效价评估（滴度、中和等）生产质控-疫苗生产工艺的研究；-免疫原性或生物效价；稳定性研究；-免疫原性；-疫苗生物效价；产品：重组抗原中和抗体，检测抗体抗体滴度检测试剂盒肽库细胞因子检测试剂盒流式抗体假病毒服务：生物效价评估人源化抗体服务产品：重组抗原中和抗体，检测抗体抗体滴度检测试剂盒肽库假病毒核酸酶核酸酶残留检测试剂盒服务：生物效价评估人源化抗体服务理化及生物效价评估（SEC-MALS等）-抗原、抗体、生物效力的检测；-杂质、残留检测临床研究义翘神州特色产品及服务——流感RecombinantAntigensfor2015-2024InfluenzaVaccineStrainsRecombinantAntigensforEmergingPandemicStrainsWHO推荐-禽流感疫苗株World’sLargestInfluenzaVirusResearchReagentCenter:PanInfluenzaAandBAntibodyagainstHemagglutininorNucleoprotein在线200+抗体广谱HA、NP抗体应用：WB，ELISA，SandwichELISA，HI，MN20+ELISAKit10AntigensHA(HA0,HA1,HA2,HA),NA,NP,M1,M2,NS1,PB1,PB2,PA630+ProteinsHighActivityCoveringMostofHotResearchStrains200+AntibodiesNeutralizingAntibodiesPanAntibodies(BroadSpectrum)60SubtypesH1-H18,N1-N11,InfluenzaB330StrainsVaccineStrainsHPAIStrainsNewlyIdentifiedStrains1,500+Genes,ELISAKitsAllProducedIn-house义翘神州特色产品及服务——流感更接近天然：流感HA三聚体蛋白Thepurityismorethan95%.TheMWisaround225kDa.SEC-MALSImmobilizedrecombinantHAprotein(Cat:40938-V08H2)

at5μg/mL(100μL/well)canbindRecombinantHumanGalectin-1/LGALS1Protein

(Cat:10290-HNAE),theEC50

is120-350ng/mL.ImmobilizedrecombinantHAProtein(Cat:40938-V08H2)

at1μg/mL(100μL/well)canbindantibodytargetstheHAstemregionofH1N1,theEC50

is4ng/mL-12ng/mL.ActivityInfluenzaAH1N1(A/Victoria/4897/2022)Hemagglutinin/HATrimerProtein(HisTag)(HPLC-verified)义翘神州具有活性验证数据特色产品及服务——流感BioactiveHAAntigensHA:HemagglutinationActivityH1N1,A/swine/Shandong/1207/2016(Cat:40651-V08H)H7N9,A/Anhui/1/2013

(Cat:40103-V08B)HA:BindingActivitytoSialicAcidBLI:KD=18.4nM(Cat:40116-V08B)NA：EnzymaticActivityH1N1,A/Brisbane/02/2018(Cat:40767-V08B)MeasuredNA’sabilitytocleave2'-(4-Methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylneuraminicacid.Thespecificactivityis40296pmoles/min/μg.H1N1,A/Brisbane/02/2018(Cat:40569-V08B)MeasuredNA’sabilitytocleave2'-(4-Methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylneuraminicacid.Thespecificactivityis29781pmoles/min/μg.义翘神州特色产品及服务——流感流感广谱Hemagglutinin/HA抗体H1N1广谱HA抗体：86001-RM01H3N2广谱HA抗体：11056-MM03InfluenzaB广谱HA抗体：11053-R004编号蛋白货号亚型毒株疫苗株年份86001-RM0111056-MM0311053-R004140938-V08HH1N1A/Victoria/4897/20222023-2024+++--240940-V08HA/Wisconsin/67/20222023-2024+++--340787-V08H(A/Wisconsin/588/2019)/(A/Victoria/2570/2019)2022-2023+++--140859-V08BH3N2A/Darwin/9/20212023-2024,2022-2023++++++-240868-V08BA/Darwin/6/20212022-2023++++++-340789-V08HA/Cambodia/e0826360/20202021-2022++++++-140498-V08BInfluenzaBB/PHUKET/3073/20132015-2024--+++240862-V08HB/Austria/1359417/20212023-2024,2022-2023--+++340722-V08HB/Washington/02/20192022-2023,2021-2022,2020-2021--+++广谱流感HA抗体义翘神州特色产品及服务——流感HA试剂盒（经济型+即用型），满足不同检测通量需求NP经济型试剂盒，灵活搭配不同标准品，满足不同毒株定量需求货号抗原种属分子线性范围(pg/ml)灵敏度(pg/ml)KIT11055H1N1HA31.25-200014.71KIT11684H1N1HA62.5-400018.5KIT11056H3N2HA781.25-50000263.49KIT11714H4N6HA62.5-400016KIT11048H5N1HA125-800089.7KIT40103H7N9HA15.6-10004.9KIT40104H7N9HA15.6-10003KIT11229H9N2HA78.13-50006.9KIT11053InfluenzaBHA109.38-700025.54货号抗原种属分子线性范围(pg/ml)灵敏度(pg/ml)SEK001H1N1HA31.25-200031.25SEK11684H1N1HA28.13-400028.13SEK11056H3N2HA390.63-25000390.63SEKA002H5N1HA125-8000125SEK40103H7N9HA62.5-400062.5SEK11229H9N2HA156-10000156SEK11053InfluenzaBHA78.13-500078.13SEK004H1N1NP62.5-400062.5SEK006H3N2NP234.4-15000234.4SEK005InfluenzaBNP39.06-250039.06SEK007InfluenzaBNP156.25-8000156.25即用型经济型义翘神州DOI:3389.2020/fimmu.00431.案例展示：本文中应用义翘神州的多种亚型的重组流感HA蛋白进行了通用疫苗的交叉保护验证实验。流感疫苗研究中的应用——通用疫苗开发义翘神州流感疫苗研究中的应用——抗原含量检测义翘神州的流感NA抗体（Cat：11058-MM07）检测Sf9昆虫细胞表达的NA-VLPs的表达水平。案例展示：Westernblot检测pIZ-NA质粒转染的Sf9细胞的NA蛋白表达DOI:

10.1007/s12033-022-00519-8义翘神州流感疫苗研究中的应用——稳定性研究，HA含量检测采用义翘神州流感HA配对抗体套装（Cat：SEK002，升级后货号Cat：SEKA002）定量检测HA含量。证实凝胶包封有助于改善疫苗热稳定性，降低运输经济成本。案例展示：DOI:

10.1126/sciadv.abo0502义翘神州特色产品及服务——RSVSinoBiologicalhasdevelopedacomprehensivecollectionofRSV-relatedreagentsforviralresearch(18antigens,7antibodies,80+ELISAKits,andcDNAs)thatcoverRSVAandBfromover5strains.Cat#MoleculeTagStrain40830-V08HRSV-GC-HisstrainA240829-V08HRSV-GC-Hisstrain1853740831-V08BRSV-FC-Hisstrainlong40832-V08BRSV-FC-Hisstrain1853740627-V08BRSV-FC-HisRSVA/Homosapiens/USA/LA2_17/201340628-V08BRSV-FC-HisRSVB40037-V08BRSV-FC-HisRSVA,strainRSS-211049-V08BRSV-FC-HisRSVA,strainA2PartialRecombinantRSVAntigenListEffectivemicroneutralizationactivity(Cat:11049-R338)Anti-RSVFNeutralizingAntibodyRSVA-A2strainpseudovirusinfectioninVerocellswasinhibitedbyFproteinantibody.TheIC50

ofantibodyis0.6-2.3μg/mLAnti-RSV-FrabbitmonoclonalantibodyWesternBlotAssayforRSV-Fantigendetection(Cat:11049-R302)Lane1:RSV-FProtein(ECD)(Cat:11049-V08B)Lane2:RSV-FProtein(StrainRSS-2)(Cat:40037-V08B)Lane3:RSV-FProtein(aa1-525)(Cat:40628-V08B)Lane4:RSV-FProtein(aa1-526)(Cat:40627-V08B)Lane5:RSV-FProtein(A,strainLong)(Cat:40831-V08B)Lane6:RSV-F0Protein(B,strain18537)(Cat:40832-V08B)义翘神州特色产品及服务——RSV稳定的重组RSV-preF蛋白Humanrespiratorysyncytialvirus(RSV)(A2)PrefusionglycoproteinF/RSV-preFProtein(Cat:

11049-VNAS)Thepurityismorethan95%.TheMWisaround170kDa.SEC-MALSActivityPre-F抗原表位是否检测表位Ⅱ√表位Ⅴ√表位Ø√Quaternary-Dependent√CanbindantibodywhichtargetsantigenicsiteII,theEC50

is0.5ng/mL-1.7ng/mL.CanbindantibodywhichtargetsantigenicSiteØ,theEC50

is0.45ng/mL-1.35ng/mLCanbindantibodywhichtargetsantigenicSiteV,theEC50

is0.05ng/mL-0.15ng/mL义翘神州RSV疫苗研究中的应用——血清滴度检测Cat：11049-V08BCat：40830-V08HRSV疫苗研究中，将义翘神州的RSV-G重组蛋白用做ELISA检测的包被抗原，检测血清中RSVA2病毒特异性抗体的滴度。doi:10.1016/j.vaccine.2014.08.045.在一项DNA疫苗的研究中，利用义翘神州开发的RSV-F重组蛋白进行疫苗免疫后血清抗体滴度的检测。doi:10.1016/j.vaccine.2017.04.008.案例展示：义翘神州特色产品及服务——疱疹病毒科货号种属分子表达宿主40907-V08HVZVVZV-gEHEK293Cells40958-VNASVZVVZV-gBCHOStableCellsCT125-VNASVZVgH&gLCHOStableCells40935-V08BHSV2gBBaculovirus-InsectCells40936-V08BHSV2gDBaculovirus-InsectCells40936-V08HHSV2gDHEK293Cells40957-V08H1HSV2gCHEK293Cells40937-V08BHSV2gEBaculovirus-InsectCells40373-V08BEBVEBV-gp350Baculovirus-InsectCells40373-V08HEBVEBV-gp350HEK293CellsCT124-V0825HEBVgH&gLHEK293Cells10202-V02H1CMVgBHEK293Cells10202-V02H2CMVgBHEK293Cells10202-V08H1CMVgBHEK293Cells10202-VCCH1CMVgBHEK293Cells质量验证HSV2(strain333)gDProtein(Cat:

40936-V08H)ImmobilizedRecombinantHumanCD111/Nectin-1/PVRL1Protein(FcTag)(Cat:11611-H02H)at2μg/ml(100μl/well)canbindRecombinantHSV2(strain333)gDProtein(ECD,HisTag)(Cat:40936-V08H),theEC50

is30-100ng/mL.VZV(strainOkavaccine)GlycoproteinBProtein(Cat:

40958-VNAS)Thepurityismorethan95%.TheMWisaround276kDa.义翘神州Omicron抗体最快速度