微生物的选择培养与计数同步练习 高二下学期生物人教版选择性必修3

1.2.2微生物的选择培养和计数

一、单选题1．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A.①③⑤② B.①④⑤⑧ C.①③⑤⑧ D.①③⑥⑦2．寻找纤维素分解菌应到()A.湿润的环境中 B.腐殖质丰富的环境中C.富含无机盐的环境中 D.养鱼的池塘中3．微生物需要从外界吸收营养物质来维持正常的生长和繁殖。下列关于微生物营养的叙述，正确的是()A.尿素分解菌和纤维素分解菌的培养基中可能含有相同的无机盐B.筛选硝化细菌（自养型）的培养基中需加入适宜浓度的有机碳源C.只含有水和无机盐两类成分的培养基中不可能形成生物群落D.乳酸菌需要的特殊营养物质是指其自身不能合成的某些无机物4．下列是关于“检测土壤中细菌总数”的实验操作叙述中错误的是()A.常用稀释涂布平板法计数B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上C.将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数5．下表为某培养基的配方，下列有关叙述错误的是()葡萄糖10.0gK2SO40.2gK2HPO402gCaCO35.0gMgSO4·7H2O0.2g琼脂20.0gNaCI0.2g——将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mLA.培养基中添加了一定的琼脂，可以用来观察菌落与测定菌落直径B.该培养基生长的菌落都具有固氮能力，且都是异养微生物C.为验证该培养基是否有选择功能需要用牛肉膏蛋白胨培养基进行对照实验D.该培养基里不含氮源，故从功能上看，该培养基属于选择培养基6．木材腐朽菌分为白腐菌和褐腐菌两种，其中白腐菌可以利用木材中的木质素（褐色）和纤维素，褐腐菌只能利用木材中的纤维素。研究人员用含有酪蛋白水解产物和锯末的培养基X培养木腐菌、发现白腐菌的菌落呈白色，褐腐菌的菌落呈褐色。下列说法错误的是()A.培养基X上只有白腐菌或褐腐菌的菌落B.培养基X中需要加入适量的凝固剂C.培养基中的酪蛋白水解产物能为微生物提供氮源D.若在培养基中加入纤维素酶，则褐腐菌可能不能存活7．某种难以降解的物质S，会对环境造成污染，研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。甲、乙是两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和物质X。下列叙述不正确的是()A.通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基和锥形瓶进行灭菌B.甲、乙均为选择培养基，物质X可能是琼脂C.步骤③将M中的菌液接种到乙上所用的方法是平板划线法D.步骤④要挑取单个菌落接种，经⑤筛选出高效降解S的菌株8．21题图表示从某池塘淤泥样品中筛选高效沉降污水中微小颗粒的微生物操作步骤。有关说法错误的是()A.步骤Ⅱ和Ⅲ所用的接种方法不同B.步骤Ⅲ是为了获得纯培养物C.平板培养皿1和平板培养皿2均属于固体培养基和选择培养基D.对试管2中微生物进行计数，若菌体较大可用血细胞计数板9．将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。M培养基可用于真菌a的筛选，某同学将获得的真菌a利用如图的方式进行稀释，统计甲、乙，丙三个平板中的菌落数分别是110、140和149。下列分析正确的是()A.若真菌a为酵母菌，通常采用血细胞计数板对活菌进行计数B.若在培养真菌a的培养基中添加一定量的青霉素，可抑制细菌的繁殖C.选取甲、乙、丙三个培养基的目的是排除无关变量对实验的干扰D.根据三个平板中的菌落数可推算培养液中真菌a的密度为1.33×107个/mL10．野生型菌株X能在基本培养基上生长，亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法（一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落）纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程图，1~5为菌落。下列叙述不正确的是()A.培养基A是基本培养基，培养基B是完全培养基B.在基本培养基中添加亮氨酸可制成完全培养基C.可从培养基A中挑取菌落3、5进行纯化培养D.若要影印多个平板，要注意“盖章”的方向不能改变二、多选题11．人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述有关叙述正确的是()A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌B.使用无菌棉拭子从皮肤表面取样C.采用平板划线法对获得的菌株进行计数D.观察菌落的形态和颜色等进行初步判断12．下表为某培养基的配方，有关叙述错误的是()成分牛肉膏葡萄糖KH2PO4琼脂蒸馏水含量10g10g2g适量定容至1000mlA.从物理性质看，该培养基属于液体培养基B.该培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖提供氮源的物质是牛肉膏C.能在此培养基上生长的只有大肠杆菌D.该培养基调节合适的PH后就可以接种使用三、读图填空题13．③号试管稀释倍数为______。14．自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用_______________________的培养基进行分离。（2）若取土样6g，应加入_______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液。将103～107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计菌落数，结果如下表，其中_______倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为__________。稀释倍数103104105106107菌落数（个）1号平板4783672702652号平板4963542642083号平板509332252293（3）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_______________________。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为50，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度为________个/mL。

参考答案1．答案：C解析：①②要分离分解尿素的细菌，应配置以尿素为唯一氮源的培养基，①正确、②错误；③④分离土壤中分解尿素的细菌时，制备固体培养基需加入琼脂糖，③正确，④错误；⑤⑥培养基中需要加碳源即葡萄糖，⑤正确，⑥错误；⑦⑧要分离分解尿素的细菌，应以尿素为唯一氮源，故不加硝酸盐，⑦错误，⑧正确；故正确的有①③⑤⑧，D正确。故选D。2．答案：B解析：生物与环境之间存在相互依存的关系,在富含纤维素的环境中,更容易寻找到纤维素分解菌,故纤维素分解菌主要分布在腐殖质丰富的环境中;故选B。3．答案：A解析：A、尿素分解菌的培养基中含有的无机盐是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4，纤维素分解菌的培养基中含有的无机盐是NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、KCl。A正确；B、硝化细菌是自养生物，可以用空气中CO2作为碳源，用缺乏有机碳源的培养基可以筛选硝化细菌。B错误；C、只含有水和无机盐两类成分的培养基，可以培养既能固氮又能以CO2作为碳源的微生物（如固氮蓝藻）。C错误；D、乳酸菌需要的特殊营养物质是维生素，是有机物。D错误。故选A。4．答案：D解析：A、“检测土壤中细菌总数常用稀释涂布平板法计数，A正确;B、取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，B正确;C、将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24~48小时，C正确;D、确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数，D错误.故选:D.5．答案：B解析：A、培养基中添加了一定的琼脂，说明该培养基为固体培养基，可以用来观察菌落与测定菌落直径，A正确；B、培养基没有加入氮源，该培养基生长的菌落都具有固氮能力，虽然培养基加了葡萄糖，异养型微生物能生长，但自养型微生物也能生长，故不能判断是否都是异养微生物，B错误；C、为验证该培养基是否有选择功能需要用牛肉膏蛋白胨培养基进行对照实验，若该培养基中微生物数量明显少于牛肉膏蛋白胨培养基，说明其具有选择功能，C正确；D、该培养基里不含氮源，故从功能上看，该培养基属于选择培养基，可用于筛选固氮菌，D正确。故选B。6．答案：A解析：其他能利用木质素和纤维素的微生物也可能在培养基X上形成菌落,A项错误。7．答案：C解析：A、对培养基和锥形瓶灭菌一般采用高压蒸汽灭菌法，A正确；B、甲和乙培养基可以用于筛选能降解S的菌株，故均属于选择培养基，乙为固体培养基，因此物质X可能是琼脂，B正确；C、图中将M中的菌液接种到乙上所用的方法是稀释涂布平板法，C错误；D、因为甲、乙均为选择培养基，经过不断分离纯化，最终筛选出高效降解S的菌株，D正确。故选C。8．答案：C解析：A、步骤工是将样品配置成菌液;步骤工是稀释涂布平板法、步骤皿是平板划线法，A正确;B、步骤皿是从涂布平板的培养基上挑取单菌落，进一步通过平板划线法进行分离、纯化，以获得单一菌落，B正确;C、从物理性质看，平板培养皿1和2都要使用固体培养基，固体培养基上才能形成单菌落;从功能看，培养皿1和2使用通用培养基即可，此时还不需要使用选择培养基，C错误;D、血细胞计数板比细菌计数板厚，常用于菌体较大微生物的计数，D正确。故选C.9．答案：B解析：A、酵母菌相对较大，可采用血细胞计数板进行计数，但该方法统计的是活菌数和死菌数的总和，A错误；B、青霉素可抑制细菌的繁殖，避免细菌对真菌a的干扰，B正确；C、选取甲、乙、丙三个培养基的目的是减小实验误差，C错误；D、根据三个平板中的菌落数可推算培养液中真菌a的密度为（110+140+149）÷3÷0.1×105=1.33×108个/mL，D错误。故选B。10．答案：A解析：由题干可知，亮氨酸缺陷型突变株无法在基本培养基上生长，但是可以在完全培养基上生长，与A相比，B中缺少了3、5两个菌落，说明3、5菌落是亮氨酸缺陷型突变株繁殖而来的，故A为完全培养基，B为基本培养基，A错误，C正确；在基本培养基中添加亮氨酸，则亮氨酸缺陷型突变株可以生长繁殖形成菌落，即制成了有利于其生长的完全培养基，B正确；若要影印多个平板，要注意“盖章”的方向不能改变，防止菌落位置不一致，无法进行比较，D正确。11．答案：ABD解析：A、培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，A正确；B、使用无菌棉拭子从皮肤表面取样，可以防止杂菌污染，B正确；C、平板划线法无法对获得的菌株进行计数，应该采用稀释涂布法对获得的菌株进行计数，C错误；D、菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等，每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征，故可通过观察菌落的形态和颜色等进行初步判断，D正确。故选ABD。12．答案：ACD解析：A、该培养基含有琼脂，从物理性质看，该培养基属于固体培养基，A错误；B、该培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖，提供氮源的物质是牛肉膏，B正确；C、很多微生物都能利用葡萄糖，此培养基中能生长多种微生物，不是只有大肠杆菌，C错误；D、该培养基调节合适的pH后要进行高压蒸汽灭菌操作，D错误。故选ACD。13．答案：104解析：略14．答案：（1）尿素作为唯一的氮源（2）54；105；1.31×108（3）将聚集的菌体逐步稀释以便获得（不连续）单个菌落；2.5×108解析：（1）要分离出分解尿素的细菌,应该用以尿素作为唯一氮源的培养基,属于选择培养基,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,会使培养基的碱性增强,pH升高,培养基中加入的酚红指示剂将变红,可以鉴定该类微生物。（2）6g土样配制成稀释10倍土壤溶液,总体积应为60mL,因此应加入54mL的无菌水。稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。一般选择菌落数在30〜300的平板进行计数。稀释105倍的三个平板中平均菌落数为(277+261+254)+3=26