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文档简介
巴氏杆菌及相关属
巴氏杆菌病猪表现急性胸膜肺炎巴氏杆菌模式图第一节
巴氏杆菌属(Pasteurella)
本属细菌已报道有20多种,多杀性巴氏杆菌是本属中最重要的畜禽致病菌,其次是溶血性巴氏杆菌,后者新近被划入新建立的曼氏杆菌属,更名为溶血性曼氏杆菌。我国较常见的鸭疫巴氏杆菌现已划出本属,并更名为鸭疫里氏杆菌。多杀性巴氏杆菌(P·multocida)
本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病(亦称出血性败血症)的病原体,主要使动物发生出血性败血病或传染性肺炎。本菌广泛分布于世界各地,正常存在于多种健康动物的口腔和咽部黏膜,当动物处于应激状态,机体抵抗力低下时,细菌侵人体内,大量繁殖并致病,发生内源性传染。形态及染色
为球杆状或短杆状菌,两端钝圆,大小为0.25~0.4um×0.5~2.5um。单个存在,有时成双排列。病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时,可见典型的两极着色,即菌体两端染色深,中间浅,无鞭毛,不形成芽孢,新分离的强毒菌株有荚膜,革兰氏染色阴性。
鸭霍乱心血涂片培养及生化特性
需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格。在普通培养基上生长贫瘩,在麦康凯培养上不生长。在加有血液、血清或微量血红素的培养基中生长良好。最适温度为37℃,pH7.2~7.4。在血清琼脂平板上培养24h,可长成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落。在血琼脂平板上,长成水滴样小菌落,无溶血现象。
血清型
本菌主要以其荚膜抗原和菌体抗原区分血清型,前者有6个型,后者分为16个型。1984年Cater提出本菌血清型的标准定名:以阿拉伯数字表示菌体抗原型,大写英文字母表示荚膜抗原型。我国分离的禽多杀性巴氏杆菌以5:A为多,其次为8:A;猪的以5:A和6:B为主,8:A与2:D其次;羊的以6:B为多;家兔的以7:A为主,其次是5:A。C型菌是犬、猫的正常栖居菌,F型主要发现于火鸡,致病作用均不清楚。抵抗力
本菌抵抗力不强。在无菌蒸馏水和生理盐水中很快死亡。在阳光中暴晒lOmin,或在56℃l5min或60℃10min,可被杀死。厩肥中可存活1个月,埋入地下的病死鸡尸,经4个月仍残存活菌。在空气干燥中2~3d可死亡。3%石炭酸、3%福尔马林,10%石灰乳,2%来苏儿,0·5%~1%氢氧化钠等5min可杀死本菌。
对青霉素、链霉素、四环素、土霉素、磺胺类及许多新的抗菌药物敏感。本菌接种马丁肉汤或其平板,生长后置4℃保存,每半月应移植一次。冻干菌种在低温中可保存长达26年。致病性与免疫性
本菌是多种动物的重要病原菌。对鸡、鸭、鹅、野禽、猪、牛、羊、马、兔等都可致病,急性型呈出血性败血症迅速死亡;亚急性型于黏膜关节等部位,发生出血性炎症等;慢性型则呈现萎缩性鼻炎(猪、羊)、关节炎及局部化脓性炎症等。实验动物中小鼠极易感染,鸽对杀禽亚种的易感性强。症状
急性型是本病主要和常见的病型。除具有败血症的一般症状外,还表现急性胸膜肺炎。
属于D血清型的某些菌株能产生一种耐热的外毒素,分子量约150000,对Vero细胞有毒性,可致豚鼠皮肤坏死及小鼠死亡。用此毒素接种猪可复制典型的猪萎缩性鼻炎(AR),从而修正了波氏杆菌是AR的病原菌的观点。在大多数情况下,AR由产毒素的本菌与波氏杆菌混合感染所致,本菌起主导作用。
带菌健康动物具有一定程度的免疫力。动物患病痊愈后,可获得较强的免疫。国内外已研制出多种灭活、弱毒菌苗以及其荚膜亚单位疫苗。该菌的高免多价血清具有良好的紧急预防和治疗作用。微生物学诊断1·显微镜检查采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等新鲜病料涂片或触片,以碱性美蓝液或瑞氏染色液染色,显微镜检查,如发现典型的两极着色的短杆菌,结合流行病学及剖检,即可作初步诊断。但慢性病例或腐败材料不易发现典型菌体,须进行培养和动物试验。
2·分离培养最好用血琼脂平板和麦康凯琼脂同时进行分离培养,麦康凯培养基上不生长,在血琼脂上生长良好,菌落不溶血,革兰氏染色为阴性球杆菌。将此菌接种在三糖铁培养基上可生长,使底部变黄。必要时可进一步做生化反应作鉴定。
3.动物试验用病料研磨制成悬液,或用分离培养菌,皮下注射小鼠、家兔或鸽,动物多在24~48h内死亡。由于健康动物呼吸道内常可带菌,所以应参照患畜的生前临床症状和剖检变化,结合分离菌株的毒力试验,作出最后诊断。
若要鉴定荚膜抗原和菌体抗原型,则要用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验。检测动物血清中的抗体,可用试管凝集、间接凝集、AGP或ELISA。附:禽霍乱霍乱禽
禽霍乱又称禽巴氏杆菌病,是由多杀性巴氏杆菌引起的多种家禽的急性败血性传染病,以全身出血性变化和肝脏多发性坏死为特征。霍乱禽【流行特点】
霍乱禽
本病呈世界性流行,鸡、鸭、鹅等多种家禽和野禽均可感染发病,鸭、火鸡、鹌鹑和鸡最易感。以3~4月龄育成禽和产蛋禽多见。放牧或野禽比笼养禽更易感染发病。四季均可发病,以潮湿多雨的夏季发病率最高。可经消化道、呼吸道感染,也可经破损的皮肤黏膜感染,带菌禽是主要传染源。应激因素如气候突变、运输、换料、免疫接种、惊吓等是本病发生的诱因。霍乱禽【临床特征】霍乱禽
禽霍乱禽霍乱最急性型常无前驱症状,突然倒地、拍翅、抽搐、挣扎、迅速死亡。通常在夜间死亡,多见于肥大的禽口鼻内有黏液霍乱禽慢性型表现为精神沉郁,消瘦,肉髯肿胀、变厚霍乱禽【大体病变】霍乱禽急性型可见心包积有多量淡黄色或黄红色液体霍乱禽心脏冠状脂肪霍乱禽乃至整个心脏表面有弥漫性出血点霍乱禽
肝脏肿胀,淤血、出血呈深褐色霍乱禽
肠管膨胀,浆膜面充血、出血霍乱禽病鸡腺胃浆膜面及外周脂肪弥漫性出血点霍乱禽
腹部脂肪弥漫性出血点霍乱禽胰腺充血、出血霍乱禽【防治要点】霍乱禽
禽场内不随便引进成禽,同一禽场内不饲养不同种类家禽,加强饲养管理,保持禽场卫生,定期消毒,一旦有应激发生,应适时使用抗应激药物。目前有弱毒疫苗和灭活疫苗可用于预防,但免疫期一般只有3个月,免疫保护率也不理想。对已发病的禽群,可选用增效磺胺、土霉素、氯霉素、氧氟沙星等药物内服,或用链霉素、卡那霉素、庆大霉素等肌肉注射,均有良好疗效。霍乱禽第二节里氏杆菌属
鸭疫里氏杆菌是本属的代表种,原名鸭疫巴氏杆菌。Rossau等(1991)和Segers(1993)先后证实,该菌与巴氏杆菌属的rRNA不同源,是革兰氏阳性需氧菌的rRNA第5超属,与黄杆菌等相近,因此建议建立里氏杆菌新属,菌名亦作相应改变,这一变动目前己被普遍采纳。本属归于哪一科,地位未定。
鸭疫里氏杆菌是雏鸭传染性浆膜炎的病原菌。可引起1~8同龄、尤其2~3周龄雏鸭大批发病、死亡,生长发育严重受阻。形态及染色
菌体呈杆状或椭圆形,大小0.3~0.5um×0.7~6.5um,偶见个别长丝状,长11~24um。多为单个,少数成双或短链排列。可形成荚膜,无芽孢,无鞭毛。瑞氏染色可见两极着色。革兰氏染色阴性。培养及生化特性
本菌营养要求较高,普通培养基和麦康凯培养基上不生长。初次分离培养缸中,37℃培养24~48h,生长的菌落无色素,呈圆形、微突起、表面光滑、奶油状,直径1~2mm。在含血清或胰蛋白胨酵母的肉汤中,37℃48h培养,呈上下一致轻微浑浊,管底有少量沉淀。 生化性状不活泼。血清型
比较复杂,分型体系原先亦较混乱,1991年Sandhu等将其统一归并为19型,以阿拉伯数字定名,1995年又在泰国发现20、21型。各国发现的血清型不尽相同,且因时间变化异。如美国以1、2、5型为主,丹麦1979年仅见1型,1980年则主要为3型。东南亚的血清型较多,且陆续发现新型。国内从京、沪、穗、闽、川等地分离的100多个菌株鉴定结果均属1型,近年报道有2型等存在。不同血清型及同型不同毒株的毒力有差异。
抵抗力
本菌对外界环境抵抗力不强。鲜血琼脂培养物置4℃冰箱保存容易死亡,通常4~5d应继代一次毒力会因此逐渐减弱。对庆大霉素、氯霉素、新霉素、状观霉素、磺胺喹沙琳等敏感。但易形成耐药性。致病性与免疫性本菌主要感染雏鸭,尤其2~3周龄者,引起急性或慢性的败血症和浆膜炎。也从患败血症的鸡、鹅、火鸡、野生水禽分离。兔和小鼠不易感。琢鼠腹腔注射大量细菌可致死。国外和国内已研究成功某些血清型的灭活菌苗和弱毒菌苗,具有良好的免疫效果。
病初患鸭精神沉郁,缩颈,腿发软,不愿意走动鸭疫里氏杆菌病
肝脏微肿,表面有纤维素性渗出物鸭疫里氏杆菌病微生物学诊断
取发病初期病鸭的脑及心血,用巧克力培养基容易分离到本菌。肝、脾分离率低,仅10%左右。分离时应同时接种麦康凯培养基,以便及时区别大肠杆菌。分离的细菌应进行葡萄糖和蔗糖发酵试验,也可接种小鼠,与多杀性巴氏菌相区别。第五节嗜血杆菌属
嗜血杆菌是一群酶系统不完全的革兰氏阴性杆菌,生长需要血液中的生长因子,尤其是X因子和V因子。常见的动物源嗜血杆菌有8种。 嗜血杆菌存在于人和动物的呼吸道黏膜,常分离自人和动物的各种病灶和分泌物。本属细菌引起的畜禽疫病在世界许多国家发现。形态及染色
多为短杆状,也有呈球、杆状或长丝状等多形性。大小为1.5×0.3~0.4um。多单个、也有短链排列。无鞭毛,无芽孢,新分离的致病菌株有荚膜。美蓝染色呈两极,革兰氏染色为阴性。流感嗜血杆菌培养特性
需氧或兼性厌氧,最适生长温度37℃,pH7.6~7.8。初次分离培养时供给5%~10%CO2可促进生长。本属菌生长需供给X因子和V因子。 本属菌在巧克力琼脂上,经37℃24~48h培养,生长的菌落呈圆形、隆起、表面光滑、边缘整齐、灰白色半透明的小菌落。菌落的大小可因菌种和培养基的营养程度不同而异,从针尖大直至绿豆大小。本属菌的生化反应较弱,对糖类发酵多不稳定。抵抗力
本属菌对外界的抵抗力不强。干燥环境中易死亡,60℃5~20min被杀死,4℃中一般只能存活7~l0天,故分离到的嗜血杆菌要及时移植或冻干保存。常用消毒剂都容易杀灭。致病性及免疫性
本属菌可致人和动物多种疾病,其毒力因子包括荚膜,菌毛和内毒素等。耐过嗜血杆菌所致疫病的畜禽具有较强的免疫力,以体液免疫为主。流感嗜血秆菌及副流感嗜血杆菌仅见于人,前者可致各种呼吸道感染及小儿急性脑膜炎等,后者存在正常上呼吸道,可致尿道炎。副猪嗜血杆菌可引起猪的格氏病,表现为多发性浆膜炎,包括心肌炎、腹膜炎、胸膜炎、脑膜炎以及关节炎。本菌也常与猪流感病毒联合引起猪流感。副禽嗜血秆菌可引致鸡鼻炎、打喷嚏及面部水肿、产蛋减少,对雏鸡致病力较强。鹌鹑易感。慢性感染及外观健康禽为带菌者。本菌定殖于禽上呼吸道及窦腔,在环境中很快死亡。眼睑水肿、呼吸困难传染性鼻炎微生物学诊断1·显微镜检查采取脑脊液(离心沉淀物)、血液、分泌液等病料,涂片,美蓝染色,镜检,呈两极
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