第十单元　课时练57　微生物的培养技术与应用

一、选择题1．(2024·重庆高三联考)熔喷布的主要成分是聚丙烯，会对环境造成污染。某科研小组从土壤中分别到一种能分解聚丙烯的细菌。下列说法正确的是()A．配制固体培育基时，需要在无菌的环境中进行B．制备培育基时需要先将培育基的pH调整至中性或弱碱性C．从土壤中分别能分解聚丙烯的细菌，可接受平板划线法进行分别与计数D．纯化培育时，在培育皿皿盖做标记后倒置在恒温培育箱中静置培育2．(2023·淮安高三模拟)如图为试验室中酵母菌纯培育过程的部分操作步骤，下列说法正确的是()A．微生物的纯培育物就是指不含代谢废物的微生物培育物B．步骤①中，用手触摸估量培育基冷却至室温后开头倒平板C．步骤①使用的培育基制备过程是先调pH再灭菌D．③到④过程中，每次划线后都需要灼烧接种环并蘸取菌液3．(2021·山东，14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸取利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸取脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培育。甲菌菌落四周呈现深蓝色，乙菌菌落四周不变色，下列说法错误的是()A．甲菌属于解脂菌B．试验中所用培育基以脂肪为唯一碳源C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的力量4．(2023·山东，15)平板接种常用在微生物培育中。下列说法正确的是()A．不含氮源的平板不能用于微生物培育B．平板涂布时涂布器使用前必需进行消毒C．接种后未长出菌落的培育基可以直接丢弃D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分别出合成脲酶的微生物5．(2024·咸阳高三调研)为加速我国北方冬春季秸秆原位还田的腐化过程，争辩人员以冻牛粪为材料筛选出耐低温(10℃)的纤维素降解菌。下列相关叙述正确的是()A．选用冻牛粪为材料与其富含纤维素及含耐低温微生物有关B．初筛菌种前，要利用固体培育基在37℃条件下扩大培育目标菌种C．用于筛选的培育基是加入刚果红染料的牛肉膏蛋白胨培育基D．应选择菌落直径与四周透亮     圈直径比值大的菌落进行纯化6．(2024·湖北宜荆荆恩四市高三联考)养分缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。如图是科研人员利用影印法(用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培育基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培育基上)初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列相关说法错误的是()A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培育皿不能马上进行倒置培育B．进行②过程的挨次是先将丝绒布“复印”至完全培育基上，再“复印”至基本培育基上C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培育基上没有、完全培育基上对应位置有的菌落中选择D．统计菌落种类和数量时要每隔肯定时间观看统计一次，直到各类菌落数目稳定为止7．(2024·长春高三调研)争辩人员拟从土壤样品中分别出高效降解甲醇的酵母菌并进行大量培育，操作流程如下。下列相关叙述错误的是()A．为保证无菌操作，接种环使用前必需灼烧灭菌B．平板浇注分别法适宜于厌氧型或兼性厌氧型的微生物的分别和计数C．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母菌细胞中甲醇的含量D．为了获得甲醇耐受酵母菌，可通过逐步提高培育基中甲醇的浓度来实现8．(2024·武汉高三检测)空气细菌总数测定主要有自然沉降法和撞击法。自然沉降法是让空气中的细菌自然降至琼脂平板表面，撞击法是将肯定量空气以较高的流速喷射撞击到琼脂平板上，空气中的细菌即留滞在琼脂表面。关于自然沉降法和撞击法，下列分析错误的是()A．用于检测空气中细菌总数时都需对不同方位和高度的空气进行采样B．撞击法对洁净空气中细菌总数的测定比自然沉降法更精确     C．两种方法均可使用无选择性的牛肉膏蛋白胨培育基D．用两种方法取样后在琼脂平板上形成的菌落均为单菌落9．为筛选出可高效抑制番茄枯萎病菌(一类真菌)的土壤芽孢杆菌菌株，科研人员从土壤中采集、分别、筛选芽孢杆菌菌株作为待测菌株，并接受平板对峙培育法观看各待测菌株的抑菌力量。如图为争辩过程示意图，下列叙述错误的是()A．过程①常利用移液器取0.1mL菌液涂布平板B．过程②可依据芽孢杆菌菌落的形态、颜色进行选择C．若甲、乙、丙三个平板的平均菌落数为12个，则10g土样中芽孢杆菌约有1.2×109个D．试验筛选出的菌株仍需进行大田种植试验以检测防治效果二、非选择题10．大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12～38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。争辩人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。请回答下列问题：(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新颖粪便样品稀释液接种至以__________为唯一碳源的固体培育基上进行培育，该培育基从功能上分类属于________培育基。(2)配制的培育基必需进行灭菌处理，目的是_________________________________________________________________________________________________________________。检测固体培育基灭菌效果的常用方法是________________。(3)为高效降解农业秸秆废弃物，争辩人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解试验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株________，理由是______________________________________________________________________________________________________________________________________。菌株秸秆总重(g)秸秆残重(g)秸秆失重(%)纤维素降解率(%)A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.3211.(2024·南京高三调研)生物爱好小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下试验，并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌)。培育基成分如表所示，试验步骤如图所示。请分析回答问题：KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g琼脂15g溶解后蒸馏水定容到1000mL(1)本试验所使用的培育基按功能来分应为______培育基，原理是_______________________________________________________________________________________。(2)用来筛选分解尿素细菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有__________________________________________________________________________________。(3)试验是否需要振荡培育来提高溶氧量：______(填“是”或“否”)，缘由是____________。转为固体培育时，常接受__________________________法接种，获得单菌落后连续筛选。(4)若在稀释倍数为105的三个培育基中，菌落数分别是156、174、183，则每克内容物中尿素分解菌的数目为__________个。(5)为证明分别得到的细菌是否可以分解尿素，可在培育基中加入________指示剂，看指示剂是否______________。(6)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培育皿放置在37℃恒温培育箱中培育24～48h，观看并统计具有红色环带的菌落数，结果见表，其中合理的稀释倍数为________。稀释倍数103104105106107菌落数>500367248361812.菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，也可以用于观看细菌在食品中繁殖的动态，以便对送检样品进行卫生学评估供应证据。下图是某样品培育简化流程图，请分析回答下列问题：(1)该养分琼脂培育基配制过程中，其基本步骤包括依据培育基配方精确     计算、称量、溶化、调整pH、____________________法灭菌等。然后将培育基放入47℃水浴锅保温，选择此温度的理由是______________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)试验过程中须将样品剪碎并使用均质器10000r·min－1处理1min，其目的是__________________________________。从水浴锅取出养分琼脂培育基倒平板适量，稍冷却后移液0.2mL样品于培育皿进行涂布，涂布时可______________，使涂布更均匀。(3)本试验用菌落计数的原理是基于__________________________________，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏________。具体培育结果如下表。选取菌落数30～300的培育皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释浓度的平均菌落数符合此范围，以该培育皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个浓度菌落值在30～300之间，报告结果由二者菌落数比值打算，若比值不大于2，则取平均数，且菌落数大于100取两位有效数字，两位之后的数值四舍五入；若比值大于2，则报告稀释度较低(稀释次数越多，稀释度越高)的培育皿菌落数。请填写例次3中“？”处的菌落总数为________。例次不同稀释度平均菌落数两稀释度菌落数之比菌落总数/[CFU/mL(g)]10－110－210－31136516420—1640022760295461.63800032890271602.2？(4)利用鲜奶进行工业生产酸奶时，不能使用______污染的鲜奶为原料，否则会使乳酸菌生长受到限制；利用________法可以除去