DB22-T3635-2024番茄晚疫病诊断与防治技术规程

ICS65.020.20CCSICS65.020.20CCSB05吉 林 省 地 方 标 准DB22/T3635—2024番茄晚疫病诊断与防治技术规程Technicalcodeofpracticefordiagnosisandintegratedmanagenmentoftomatolateblight2024202442520240601吉林省市场监督管理厅发布DB22/T3635—2024DB22/T3635—2024前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。本文件由吉林省农业农村厅组织实施。本文件起草单位：吉林农业大学。IIDB22/T3635—2024DB22/T3635—2024DB22/T3635—2024DB22/T3635—2024番茄晚疫病诊断与防治技术规程范围本文件适用于番茄晚疫病的病害诊断及其综合防治。（GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则NY/T1276农药安全使用规范总则DB22/T3495—2023露地辣椒疫病诊断与防治技术规程下列术语和定义适用于本文件。下列术语和定义适用于本文件。番茄晚疫病tomatolateblightPhytophthorainfestans（Mont.）deBarypolymerasechainreaction，PCRDNA4诊断与防治流程番茄晚疫病诊断与防治流程见图1。1图1番茄晚疫病诊断与防治流程5病害诊断采集具有典型症状的发病植株，用于症状识别与病原菌鉴定。整个生育期均可发病，主要危害成株期的叶、茎和果实。具体如下：A.1；A.2；2A.3。按以下步骤制作徒手切片：镜检3根～52B.1。（22.5µm～40µm～22.5B.2。75%30s，再用3菌2min～3min35mm2～10mm2取4（PDA）253d～5dPDAB.3。DNA按DB22/T3495—2023中C.1的规定提取病原菌基因组DNA。PCRITS以病菌基因组DNA为模板，采用通用引物ITS4/ITS5（ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’/ITS5：5’-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3’）扩增ITS区域，PCR反应体系和参数按C.1的要求进行。经检测得到ITS序列长度为750bp～760bp。检测结果见图C.1。将PCR产物进行测序，测序结果在GenBank中进行BLAST比对分析，同源性达95%以上，确定为番茄致病疫霉菌，其ITS序列长度为754bp。详细序列见附录C.3。3病害防治应采取“预防为主，综合防治”的原则，在优先选用抗病品种的基础上，加强栽培管理，结合生态防控，科学使用化学农药。选用抗、耐晚疫病且综合性状优良的番茄品种。与非茄科作物进行3年以上轮作。定植前彻底清理前茬作物的残枝烂叶，以及杂草等。对土壤采用生石灰消毒，用量80kg/667m2～100kg/667m2，整地施肥时深翻入土，浇透水，一周后可以定植栽培。偏碱性土壤不宜采用此方法。合理施肥，施足基肥，避免偏施氮肥，增施磷钾肥。番茄坐果后及时去除残留的花瓣；及时疏花疏合理施肥，施足基肥，避免偏施氮肥，增施磷钾肥。番茄坐果后及时去除残留的花瓣；及时疏花疏果、整枝打杈。60%85%以白天温度控制在25℃～28℃，夜间温度保持在13℃～18℃，地温不低于13℃。农药选择和使用应符合GB/T8321（所有部分）和NY/T1276的规定，药剂管理按附录E要求执行。烟雾法设施番茄晚疫病发生前，用12.5%甲霜•百菌清烟剂，用药量340g/667m2～400g/667m2，将其点燃，插挂于大棚内适当位置，熄灭明火发烟，封棚一夜，次日放烟。每季最多用药次数3次。弱苗及小拱棚不宜使用。46.2.4.2.2喷雾法发病前或发病初期，采用喷雾法均匀施药。每7d～10d喷洒1次，喷2次～3次。主要农药制剂种类、使用时期、施药量参见表D.1。2年,做到可追溯。55附录A（资料性）番茄晚疫病典型症状图片番茄晚疫病典型症状见图A.1至图A.3。图A.1叶部症状图A.2茎部症状图A.2茎部症状图A.3果实症状6附录B（资料性）番茄晚疫病病原菌显微形态及菌落形态B.1病原菌显微形态显微形态见图B.1和图B.2。 图A.4病原菌游动孢子囊梗（显微镜倍数40×10）图A.5图A.540×10）B.2病原菌菌落形态在PDA培养基上的菌落形态见图B.3。图A.6PDA培养基上的菌落形态（左：正面右：反面）7附录C（）PCRITS4和TIS5引物各加0.5μL，PCRmix5μL，DNA模板1μL，ddH2O3μL，合计10μL。C.1.2.194℃预变性3min；94℃变性30s，55℃退火50s，72℃延伸1min，共35个循环；72℃延伸10min；4℃保存。PCR产物检测使用1%的琼脂糖凝胶，用0.5×TBE电泳缓冲液，100V电泳30min～40min。50ng/μL。C.2C.2PCR凝胶成像检测PCR扩增产物，经检测得到病原菌ITS序列长度为750bp～760bp。检测结果见图C.1。M样本图B.1ITS序列PCR扩增产物电泳检测对照图8C.3番茄晚疫病原菌ITS全序列将PCR产物纯化后测序，测试结果显示番茄晚疫病疫霉菌ITS序列片段长度为754bp。序列如下：1AACCGTTTCAACCCAATAGTTGGGGGTCTTACTTGGCGGCGGCTGCTGGCTTTATTGCTG61GCGGCTACTGCTGGGCGAGCCCTATCAAAAGGCGAGCGTTTGGACTTCGGTCTGAGCTAG121TAGCTTTTTTATTTTAAACCCTTTACTTAATACTGATTATACTGTGGGGACGAAAGTCTC181TGCTTTTAACTAGATAGCAACTTTCAGCAGTGGATGTCTAGGCTCGCACATCGATGAAGA241ACGCTGCGAACTGCGATACGTAATGCGAATTGCAGGATTCAGTGAGTCATCGAAATTTTG301AACGCATATTGCACTTCCGGGTTAGTCCTGGAAGTATGCCTGTATCAGTGTCCGTACAAC361AAACTTGGCTTTCTTCCTTCCGTGTAGTCGGTGGAGGAGATGCCAGATGTGAAGTGTCTT421GCGGTTGGTTTTCGGACCGACTGCGAGTCCTTTTAAATGTACTAAACTGTACTTCTCTTT481GCTCCAAAAGTGGTGGCATTGCTGGTTGTGGACGCTGCTATTGTAGCGAGTTGGCGACCG541GTTTGTCTGCTGCGGCGTTAATGGAGAAATGCTCGATTCGTGGTATGGTTGGCTTCGGCT601GAACAATGCGCTTATTGGGTGATTTTCCTGCTGTGGCGTGATGGACTGGTGAACCATGGC661TCTTTAGCTTGGCATTTGAATCGGCTTTGCTGTTGCGAAGTAGAGTGGCGGCTTCGGCTG721CCGAGGGTCGATCCATTTGGGAAATGTTGTGTAC99附录D（资料性）防治番茄晚疫病药剂具体药剂及使用方法参见表D.1。表D.1药剂种类及使用方法序号药剂名称及剂型使用时期施药量（亩）150%烯酰吗啉可湿性粉剂发病前或发病初期33g～40g270%丙森锌可湿性粉剂发病前或发病初期180g～270g350%丙森·霜脲氰可湿性粉剂发病前或发病初期170g～230g440%精甲·丙森锌可湿性粉剂发病初期80g～100g570%嘧菌·丙森锌可湿性粉剂发病前或发病初期60g～120g636%霜脲·百菌清可湿性粉剂发病初期100g～117g725%甲霜·霜霉威可湿性粉剂发病初期84g～125g850%烯酰·锰锌可湿性粉剂发病初期162g～186g950%锰锌·氟吗啉可湿性粉剂发病初期67g～100g1060%唑醚·代森联可湿性粉剂发病初期40g～60g1150%氟啶·霜脲氰水分散粒剂发病初期40g～50g1275%代森锰锌水分散粒剂发病前或发病初期175g～200g1368%精甲霜·锰锌水分散粒剂发病前或发病初期100g～1