实验动物 繁育与遗传监测

ICS65.020.30CCSB44DB11代替DB/T1804-2020Laboratoryanimal—Breedingandgeneti北京市市场监督管理局发布IDB11/T1804—202x前言 12规范性引用文件 13术语和定义 14缩略语 25遗传分类及命名原则 26繁殖方法 47遗传监测 5附录A（规范性）实验动物微卫星DNA标记遗传检测方法 8附录B（规范性）实验斑马鱼SNP遗传标记的检测方法 26附录C（规范性）MHC单倍型实验鸡和实验鸭直接测序检测方法 参考文献 DB11/T1804—202x本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起本文件替代DB11/T1804-2020，主要技术变化如下：增加了“实验树鼩繁育与遗传监测”相关内容（见5、6、7、附录A、附录C）。本文件由北京市科学技术委员会、中关村科技园区管理委员会提出并归口。本文件由北京市科学技术委员会、中关村科技园区管理委员会组织实施。本文件起草单位：首都医科大学、中国食品药品检定研究院、北京市实验动物管理办公室、中国医学科学院医学实验动物研究所、中国人民解放军军事医学研究院、国家卫生健康委员会科学技术研究所、杭州医学院、吉林大学、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、北京市标准化研究院、北京华阜康生物科技股份有限公司、北京康蓝生物技术有限公司、中国科学院水生生物研究所、北京大学、清华大学、中国医学科学院医学生物学研究所、中国科学院昆明动物研究所。本文件主要起草人：陈振文、李根平、贺争鸣、李长龙、刘云波、孙德明、岳秉飞、李奎、杨述林、冯书堂、杜小燕、向志光、王洪、董罡、任文陟、陈洪岩、陈继兰、巩薇、冯育芳、郭红刚、王熙、李吏、王锡乐、刘文菊、谢佳琪、樊子风、萨晓婴、刘先菊、丛日旭、腾永康、肖冲、魏杰、于鹏丽、牟玉莲、公维华、张宁波、徐玲玲、崔宗斌、张博、孙荣泽、韩凌霞、常在、刘苗苗、唐倩倩、代解杰、吕龙宝、王文广、王芸、马玉华。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：——首次发布分别为DB11/T828.3—2011、DB11/T1053.3—2013、DB11/T1461.1—2017、DB11/T1461.2—2017、DB11/T1461.3—2017、DB11/T1461.4—2018、DB11/T1461.5—2018；——2020年发布为DB11/T1804-2020；——本次为第二次修订。1DB11/T1804—202x实验动物繁育与遗传监测本文件规定了实验动物的遗传分类及命名原则、繁殖方法和遗传检测。本文件适用于实验小型猪、实验猪、实验牛、实验羊、实验狨猴、实验长爪沙鼠、实验猫、实验雪貂、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽、实验鱼（斑马鱼和剑尾鱼）、实验树鼩的繁育和遗传监测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T2416东北细毛羊GB/T3157中国荷斯坦牛GB14923实验动物遗传质量控制GB/T19166中国西门塔尔牛GB/T19376波尔山羊种羊GB/T22283长白猪种猪GB/T22284大约克夏猪种猪GB/T22285杜洛克猪种猪GB/T22909小尾寒羊GB/Z34792实验动物引种技术规程NY/T14高产奶牛饲养管理规范NY625迪卡配套系猪种猪NY/T1339肉牛育肥良好管理规范NY/T1446种公牛饲养管理技术规程NY/T1673畜禽微卫星DNA遗传多样性检测技术规程NY/T1901鸡遗传资源保种场保种技术规范NY/T2662标准化养殖场奶牛NY/T2665标准化养殖场肉羊3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1实验动物laboratoryanimal经人工饲育，对其携带的微生物和寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、2DB11/T1804—202x教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。3.2实验种群experimentalpopulation以远交方式进行繁殖生产的实验动物群体。3.3封闭群closedcolony不引进外部动物、在群体内随机选择种动物进行繁殖，以维持有限杂合度的实验动物种群。3.4近交系inbredstrain一个动物群体中,任何个体基因组中98.6%以上的座位为纯合的品系。注:经典近交系经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成。品系内所有个体都可追湖到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。经连续20代以上亲子交配与全同胞兄妹交配有等同效果。近交系的近交系数(inbreedingcoefficient)大于98.6%。3.5单倍型群体haplotypepopulation通过近亲交配繁殖方式培育出的单倍体基因型一致的实验动物群体。3.6杂交群hybrids由两个不同近交系杂交产生的后代群体。4缩略语下列缩略语适用于本文件。PCR：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）SNP:单核苷酸多态性(SingleNucleotidePolymorphism)STR:短串联重复序列（ShortTandemRepeat）5遗传分类及命名原则5.1遗传分类根据不同品种品系动物及个体间遗传差异将实验动物分为实验种群、封闭群、近交系、单倍型群体和杂交群，具体符合表1的要求。表1实验动物遗传分类表3DB11/T1804—202x5.2命名原则5.2.1实验种群在原有的品种品系名称前面加上实验，如实验长白猪。5.2.2封闭群由2～4个大写英文字母命名。种群名称前标明保持者的英文缩写名称，第一个字母大写，后面的字母小写，宜不超过4个字母。保持者与种群名称之间用冒号分开。5.2.3近交系以大写英文字母或大写英文字母加阿拉伯数字命名，符号应简短。5.2.4单倍型群体以单倍体基因型英文名称（或缩写）加英文字母和阿拉伯数字命名，符号应简短。5.2.5杂交群4DB11/T1804—202x以雌性亲代名称在前，雄性亲代名称在后，二者之间以符号“”相连。将以上部分用括号括起，在其后表明杂交代数，以F1……Fn表示。6繁殖方法6.1实验种群6.1.1引种选择双亲健康、无遗传疾病、繁殖性能好、体貌符合品种特征的动物作为种用动物。6.1.2繁育方法实验猪按照NY625的规定进行。实验西门塔尔牛按照NY/T1339和NY/T1446规定执行，实验中国荷斯坦牛按照NY/T14和NY/T2662的规定进行。实验羊应按照GB14923和NY/T2665的规定进行。实验狨猴和雪貂应按GB14923的规定进行。实验猫按照雌雄5:1以上比例进行繁殖。6.2封闭群6.2.1引种作为繁殖用种子的封闭群动物应三代以内无共同亲代并符合GB/Z34792对封闭群种用动物的要求。封闭群实验长爪沙鼠、实验鸽和实验树鼩引种数量不少于25对。封闭群实验小型猪引种数量不少于13对（循环交配方式繁殖）或25对（随机交配方式繁殖）。封闭群实验鱼（斑马鱼和剑尾鱼）引种数目不少于100尾。实验鸡、实验鸭和实验鹅引种规模按照NY/T1901执行。其他封闭群实验动物引种规模按照GB14923规定执行。6.2.2繁育方法封闭群实验小型猪、实验长爪沙鼠、实验鸽和实验树鼩繁殖方法按照GB14923的规定执行。实验鸡、实验鸭、实验鹅应按照NY/T1901的规定进行。6.3近交系6.3.1引种作为繁殖用种子的近交系动物应符合GB/Z34792对近交系种用动物的要求。6.3.2繁育方法近交系实验动物可分为基础群（foundationstock）、血缘扩大群（pedigreeexpansionstock）和生产群（productionstock），当近交系动物生产供应数量不是很大时，可不设血缘扩大群，仅设基础群和生产群。各基础群、血缘扩大群和生产群的繁育方式按照GB14923执行。6.4单倍型群体6.4.1引种5DB11/T1804—202x作为繁殖用种子的单倍型群体动物按照GB/Z34792的规定执行。6.4.2繁育方法以全同胞或半同胞兄妹交配方式进行。6.5杂交群将不同品系实验动物的亲代雌性与亲代雄性杂交，即可得到F1实验动物。7遗传监测7.1遗传要求遗传满足以下要求：——体貌符合品种特征；——谱系记录清楚；——繁殖方法科学；——群体遗传符合品种特征；——遗传质量检测合格。7.2遗传检测7.2.1检测频率每12个月至少进行一次检测。7.2.2抽样7.2.2.1实验种群和封闭群抽样数量从每个种群中随机抽取非同窝成年实验动物的血液或其他组织，雌雄各半。抽样数量按照表2规定执行。表2实验种群和封闭群遗传检测抽样数量7.2.2.2近交系实验动物抽样数量基础群留种动物的双亲均应进行遗传检测；各生产群体采取随机抽取非同窝成年动物雌雄各半，抽样数量按照表3规定执行。表3近交系实验动物遗传检测抽样数量6DB11/T1804—202x7.2.3遗传检测方法采用群体遗传结构评估、微卫星DNA标记、SNP分子标记和直接测序等检测方法，在有检测能力的实验室进行，具体按照表4规定执行。表4遗传检测方法适用实验动物群体7.2.4结果判定7.2.4.1实验种群检测结果判定7.2.4.1.1群体遗传结构评估当实验猪、实验牛、实验羊体貌特征与品种品系特征相符合时，判定合格，否则判定不合格。7.2.4.1.2微卫星DNA标记检测法实验狨猴、实验猫和实验雪貂适用于微卫星DNA标记检测法。7DB11/T1804—202x实验狨猴和实验猫采用群体平衡状态方法进行评价。按照哈代-温伯格（Hardy-Weiberg）定律，根据各位点的等位基因数计算封闭群的基因频率，进行卡方（chi-squaretest）检验。当群体达到平衡状态，该群体判为合格，否则判为不合格。实验雪貂采用群体平均杂合度进行评价，当群体平均杂合度在0.5～0.7时，该群体判为合格，否则判为不合格。7.2.4.2封闭群实验检测结果判定封闭群实验长爪沙鼠、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鹅、实验小型猪、实验鱼（斑马鱼和剑尾鱼）和实验树鼩采用微卫星DNA标记检测法。封闭群采用平均杂合度进行评价，当群体平均杂合度在0.5～0.7时，该群体判为合格，否则判为不合格。7.2.4.3单倍型群体检测结果判定单倍型实验鸡和实验鸭采用聚合酶链式反应（PCR）产物直接测序法。单倍型采用单倍基因型序列进行评价，当测定序列与参考序列一致率为100%时，该群体判为合格，否则判为不合格。7.2.4.4近交系检测结果判定7.2.4.4.1微卫星DNA标记检测法近交系实验小型猪采用微卫星DNA标记检测法。近交系实验小型猪采用微卫星DNA品系特征进行评价，当检测位点符合品系的特征时，该群体判为合格，否则判为不合格。7.2.4.4.2SNP分子标记检测法近交系实验鱼采用SNP分子标记检测法。近交系实验鱼采用SNP分子标记位点特征进行评价，当检测位点符合品系的特征时，该群体判为合格；当一个位点与参考位点不一致时，判为可疑，增加检测位点数量和增加检测方法重新检测；当有两个及以上位点与参考位点不一致时，判为不合格。8DB11/T1804—202x（规范性）实验动物微卫星DNA标记遗传检测方法A.1基因组DNA的提取基因组DNA提取方法按照NY/T1673的规定执行。A.2微卫星位点A.2.1用于检测封闭群和近交系实验小型猪遗传质量的微卫星位点分别为25个和10个，各微卫星位点的名称、染色体位置、引物序列、等位基因数、等位基因范围和退火温度按照表A.1的规定执行。表A.1实验小型猪微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围引物序列(5´~3´)体Mg浓度1TCTACTCCAGGAGATAAGC2AGAAATTAGTGCCTCAAATTAAACCATTAAGTCCCTAGCA23456798AGGGTGGCTAAAAAAGAAAAATCAAATCCTTACCTCTGCA8999DB11/T1804—202xAGTGGTCTCTCTCCCTCTTG8AAGATCATTTAGTCAAGGTCACTCTGATAGGGAACATAGGAXATAGACATTATGTAAGTTGCTGGAACTTTCACATCCCTAAGAGAAATTAGTGCCTCAAATTAAACCATTAAGTCCCTAGCA88GCTATCAAGTATTGTACCA476TCTGGCTCCTACACTCCTTCTGTTTGGGTGGGTGCTGAAAAA8DB11/T1804—202xX8A.2.2用于检测实验狨猴遗传质量的微卫星位点为20个，各微卫星位点的名称、引物序列、等位基因数、等位基因范围和退火温度按照表A.2的规定执行。表A.2实验狨猴微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围引物序列（5´~3´)96656686687786DB11/T1804—202x788A.2.3用于检测实验长爪沙鼠遗传质量的微卫星位点为28个，各微卫星位点的名称、引物序列、等位基因数、等位基因范围和退火温度按照表A.3的规定执行。表A.3实验长爪沙鼠微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围引物序列（5´~3´)9GTTTTTCTCAGAAGAATGCA9DB11/T1804—202x9TAAGATCCAAGAGATGGGTAATCCTTGTTCACTCTATCAAG9ACACTCAGAGACCATGAGTACA9GACATTCCTTAAGAGAGACA.2.4用于检测封闭群实验雪貂遗传质量的微卫星位点为21个，各微卫星位点的名称、引物序列、重复等位基因数按照表A.4的规定执行。表A.4实验雪貂微卫星位点的引物序列、等位基因数及等位基因分布范围引物序列（5´~3´)A4wA10wA121wACTGCCATCAGGTCATCTAGGGGGTAGACACCTGGCTCAA129wAAGTACAGAATGGAAGGATCA212wDB11/T1804—202xA223wA229wA231wAGTCGACAGATGAGTCCACGAAGTGTCACACATGGCAGGATGGGTGGATGGGTGAGTAGGTACCTTCCCACATTCCAGAACAGCAAGTAGTCCAACA.2.5用于检测实验猫遗传质量的微卫星位点为37个，各微卫星位点的名称、染色体位置、引物序列、退火温度按照表A.5的规定执行。表A.5实验猫微卫星位点的扩增条件和染色体分布引物序列(5´~3´)Mg浓度（mM）DB11/T1804—202xGTTTGAAATTATGGCTTCCAGAAAAATGACTACCGACATGGAGGGTGTGCTAGAACTAGCTDB11/T1804—202xAACTGAAGACCAAATTGATGAATTCTGAGAACAAGCTGAGATCCTCTATGGCAGGACTTA.2.6用于检测实验鸡遗传质量的微卫星位点为29个，各微卫星位点的名称、引物序列、等位基因数和等位基因范围按照表A.6的规定执行。表A.6实验鸡微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围引物序列（5´~3´)GTGGACACCCATTTGTACC868DB11/T1804—202x676577AATGTTCTCATAGAGTTCCT6AAGGCAAACTCAGCTGGAA5939713GGCTCCAAAAGCTTGTTCT8956262DB11/T1804—202x6AAAATATTGGCTCTAGGAACTGACCGGAAATGAAGGTAAGACTA952A.2.7用于检测实验鸭遗传质量的微卫星位点为29个，各微卫星位点的名称、引物序列、等位基因数和等位基因范围按照表A.7的规定执行。表A.7实验鸭微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围引物序列（5´~3´)4ATTAGAGCAGGAGTTAGGAG7823ACAATAGATTCCAGATGCTG9324338DB11/T1804—202x6969395899773A.2.8用于检测实验鹅遗传质量的微卫星位点为14个，各微卫星位点的名称、引物序列、等位基因数和等位基因范围按照表A.8的规定执行。表A.8实验鹅微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围引物序列（5´~3´)7DB11/T1804—202xACAAAGACTACTACTGCCA67ACAAAGACTACTACTGCCA6ACAAATAACTGGTTCTAAGCAGAGGACTTCTATTCATAAA4AACAGAATTTGCTTGAAACT3AACTTCTGCACCTAAAAACTGT64GAGGCTTTAGGAGAGATTGAGTGTTTCTTTCATCTCCACAAAGACCACAATCGGACCACATAT4ATGAAAGAAGAGTTAAACGTGTGC73466A.2.9用于检测实验鸽遗传质量的微卫星位点为16个，各微卫星位点的名称、引物序列、等位基因数和等位基因范围按照表A.9的规定执行。表A.9实验鸽微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围DB11/T1804—202x44AGTTACGAAATGATTGCCAG24535476495GTTTGCAGGAGCGTGTAGA644A.2.10用于检测实验斑马鱼和实验剑尾鱼遗传质量的微卫星位点为5个以上，常用实验斑马鱼品系微卫星分子标记的遗传特征按照表A.10的规定执行。表A.10常用实验斑马鱼微卫星分子标记的遗传特征DB11/T1804—202xATATGTGCTGCTCATGATGAACTAAATCGCACTTCAGCAG262，256，AATTCTGGGGGGTAATTCTGAAGGGGGCTAAACCTTCAAC370，260，AGCACAGCGGAGGAAATAAAA.2.11用于检测封闭群实验树鼩遗传质量的微卫星位点为10个，各微卫星位点的名称、引物序列、PCR反应的退火温度、镁离子浓度按照表A.11的规定执行。表A.11实验树鼩微卫星位点的名称、引物序列、PCR反应的退火温度、镁离子浓度引物序列(5´~3´)Mg2+浓度7686DB11/T1804—202x34475A.3PCR扩增A.3.1PCR扩增的体系PCR总反应体积为15μL,其中含10×PCRbuffer:1.5μL，上下游引物(100pmol/μL)各1μL，PCR反应程序为：95℃预变性，4min；94℃变性，30s；退火温度（各位点序列、PCR反应条件见表A.1～A.10），30s；72℃延伸，30s；35个循环；72℃继续延伸7min；扩增产物4℃保存。A.3.2PCR产物的凝胶检测PCR产物经1.5%的琼脂糖凝胶电泳以及凝胶成像系统拍照。A.3.3扩增产物的STR扫描扩增产物经过琼脂糖凝胶电泳检测确保扩增出目的片断后，选择分别以FAM、HEX、TAMRA标记的三个位点的扩增产物，以1：3：5体积比混合，取1μL上样进行STR扫描。A.4STR扫描结果的判读与统计分析扫描结果可出现两种波形：一种为纯合基因型，只有一个主波；另一种为杂合基因型，有两个主波。由群体遗传分析软件读出每个样本在每个微卫星位点的扩增片断大小。每个位点的等位基因根据扩增片断从小到大顺序排列记录为a,b,c,d等。A.4.1数据统计分析将所有样本的每个微卫星位点的基因型以ab,bb等形式运用软件的数据文件，计算样品在各微卫星位点上的基因频率、平均观察等位基因数、平均有效等位基因数（Ne）、香隆指数、平均杂合度（H）等。A.5实验结果DB11/T1804—202xA.5.1实验种群A.5.1.1实验猫和实验狨猴实验狨猴和实验猫采用群体平衡状态方法进行评价。按照哈代-温伯格（Hardy-Weiberg）定律，根据各位点的等位基因数计算封闭群的基因频率，进行卡方（chi-squaretest）检验。当群体达到平衡状态，该群体判为合格，否则判为不合格。A.5.1.2实验雪貂实验雪貂采用群体平均杂合度进行评价，当群体平均杂合度在0.5～0.7时，该群体判为合格，否则判为不合格。A.5.2封闭群封闭群实验长爪沙鼠、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鹅、实验小型猪、实验鱼（斑马鱼和剑尾鱼）和实验树鼩采用平均杂合度进行评价，当群体平均杂合度在0.5～0.7时，该群体判为合格，否则判为不合格。A.5.3近交系A.5.3.1实验小型猪所有样品检测位点的等位基因都符合品系的特征,按照表A.11～A.13的规定执行，没有新的等位基因出现为合格实验小型猪近交系,否则判为不合格。表A.12近交系五指山小型猪近交系培育过程中遗传质量控制的微卫星座位及优势等位基因1表A.13近交系广西巴马小型猪和培育过程中遗传质量控制的微卫星座位及优势等位基因DB11/T1804—202x11表A.14近交系贵州小型猪培育过程中遗传质量控制的微卫星座位及优势等位基因DB11/T1804—202xA.5.3.2实验鱼近交系实验鱼（斑马鱼和剑尾鱼）检测结果判定按照表A.14的规定执行。表A.15近交系实验鱼检测结果判定A.6结果报告根据判定结果对实验动物群体出具遗传质量检测报告。DB11/T1804—202x（规范性）实验斑马鱼SNP遗传标记的检测方法B.1基因组DNA的提取基因组DNA提取方法按照NY/T1673的规定执行。B.2PCR扩增按照附录A中A.3.1的方法进行。B.3SNP标记的检测取10μLPCR产物用25μL的水稀释，并用枪头吹打混匀。然后取1μL为模板，用表B.1中的引物进行PCR扩增和产物测序，最后使用PolyPhred程序软件分析SNP标记的测定结果。B.4SNP分子标记的选择及特征选择位于近交系斑马鱼25对染色体、剑尾鱼24对染色体上的10个以上位点，作为遗传检测的SNP标记。SNP分子标记的名称及常用近交系斑马鱼的SNP分子标记的特征符合表B.1的要求。表B.1常用实验斑马鱼品系SNP分子标记位点引物（5´~3´)TCGCAGTGATGATGGADB11/T1804—202xTCTCTGTTCACTAGGTAAGACTCTTCTCTCTGAATGATGCATTTAATAAAGGAATCACTAGTCAGTTTACTAACCTTGCTTCCATTTAATAAAGGAATCACTAGTCAGTTTACTAACCTTGCTAGCTGAGACAGTATTCATAGDB11/T1804—202xAGAGB.5实验结果B.5.1实验鱼检测结果判定按照表A.14的规定执行。B.6结果报告根据判定结果对实验动物群体出具遗传质量检测报告。DB11/T1804—202x（规范性）MHC单倍型实验鸡和实验鸭直接测序检测方法C.1基因组DNA的提取基因组DNA提取方法按照NY/T1673的规定执行。C.2PCR扩增引物PCR扩增引物序列、片段长度及退火温度按表C.1和表C.2的规定执行。表C.1单倍型实验鸡PCR遗传检测引物序列表表C.2单倍型实验鸭PCR遗传检测引物序列表C.3PCR扩增C.3.1PCR扩增体系PCR总反应体积为15μL,其中含10×PCRbuffer:1.5μL，上下游引物(100pmol/μL)各1(ddH2O):8.5μL。PCR反应程序为：95℃预变性，4min；94℃变性，30s；退火温度（各位点序列、PCR反应条件参见表C.130s；72℃延伸，30s；35个循环；72℃继续延伸7min；扩增产物4℃保存。C.3.2PCR产物的检测PCR反应结束后，经琼脂糖凝胶电泳检测，检测合格的PCR产物进行测序。测序结果与标准序列进行比对分析，计算一致率。C.4单倍型MHC实验动物标准结果判定所有样本序列与参考标准序列比对，一致率达100%，判为合格。DB11/T1804—202xC.5单倍型MHC实验鸡标准序列C.5.1B2单倍型实验鸡标准序列片段（1）CGTGGGATCCTCAGACCCACACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGTCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCTCTACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTACGTGGACGGGGAACTCTTCACGCACTACAACAGCACCGCTCGGAGGGCTGTGCCCCGCACCGAGTGGATAGCGGCCAACACGGACCAGCAGTACTGGGACAGAGAGACGCAGATCGCACAGGGCAATGAGCAGATTGACCGCGAGAACCTGGACATACGGCAGCAGCGCCACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGACTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGCGCAGTGGATGTACGGCTGTGACATCCTCGAGGACGGCACCATCCGGGGGTATCATCAGATGGCCTGCGATGGGAGAGACTTCATTGCCCTCGCTGAAGACATGAAGACGTTCACTGCAGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTTATGCTGAGAGGAAGAAGCAGTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGGGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGCAGGGT--------GGGGGGGGGGC------CGCAGTGTGGGGCTGGACGTGGGCCGGGGGCTCAGTGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCCGCCT-GCAGAGCGGCCTGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.2B5单倍型实验鸡标准序列片段（1）CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGAACAGACGCAGATCGCACAGGGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGCGCAGTGGATGTACGGCTGTGACATCCTCGAGGACGGCACCATCCGGGGGTATCATCAGGAGGCCTACGATGGGAGAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGGCACGATGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGCGGAAGCAGTACCTGGAGGAAACCTGTGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATATGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGTGGAGGGGGGGCCACGGTGTGGGGCTGGACATGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGATCTCAGCCCGGCCCTCACTGCCACCCGCCCGCAGAGCGGCCCGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.3B13单倍型实验鸡标准序列片段（1）CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGCGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGTGGATGTTCGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCGTCAGGTGGCCTACGATGGGAAAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGACATGAAGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAADB11/T1804—202xATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGTGGAAGAGTTACCTGGAGGAAACCTGCGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGTGGGGGGGGGGCCGCGGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCTGCCTGCAGAGCGGCCTGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.4B15单倍型实验鸡标准序列片段（1）CGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGCGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGTGGATGTTCGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCGTCAGGTGGCCTACGATGGGAAAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGACATGAAGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGTGGAAGAGTTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGT--------GGGGGGGGGGC------CGCGGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCTGCCT-GCAGAGCGGCCCGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.5B19单倍型实验鸡标准序列片段（1）CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATTCCCTGCGGTACGTCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCTGCCGTGGTTCGTGGACGTGGGGTACGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAACACGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGGGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCTTGAACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGCTGATGTACGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCATCAGACAGCCTACGATGGGAGAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGGCACGATGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGAGGTGGAAGAGTTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGGGGCTGCGGAGATATGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGCGGGGTCGGGGTGGGGGGGGGGGGG--CGGACGCAGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCATCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCACTGCCGCCCACCC-ACAGAGCGGCCTGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCTGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.6B21单倍型实验鸡标准序列片段（1）CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGCGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）DB11/T1804—202xCTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGTGGATGTTCGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCGTCAGGTGGCCTACGATGGGAAAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGACATGAAGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGTGGAAGAGTTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGTGGGGGGGGGGCCGCGGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCTGCCT-GCAGAGCGGCCCGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.6单倍型MHC实验鸭参考序列C.6.1B1单倍型MHC实验鸭参考序列ATGGAGTTGCTGCCCACCTTGTGCCTGGCCTGTGTCCTGCTCCTGGCTGACCTGGTCGTGCTGGCAGCACTGGCCCGGTTGGCCCCGGCACTGGCCCAGCTGGGTCTAGTGGCCACATGGCTGGAGGCTGGGCTGCGGCTACCAGTGCTGGTGGGAGCTGGGAGGCTGTTGGCCCCCGGAGGACCCCGGGGAGCCCCGGCCCTGGTGAGCCTGGCCCCTGCCACCTTCCTTACCCTGCGGGGCTGCCTGGAGCTGCCTGGGGCTCCACCAGTGCTGCTGGCCATGGCCACACCGTCCTGGCTGGCATTGGCCTATGGGGCAGTCTTGCTGGCCCTGCTCACCTGGACCTCCCTGGCACCTGGGGTGGCCCTGGGGACCAAGGAGGTCAAGTACCAGGCGGCCCTGCACCGGCAGCTGGCCCTGGCCTGGCCTGAGTGGCCCTTCCTCAGCGGAGCCTTCTTCTTCCTCATGCTGGCTGCATTGGGTGAGACCTCCGTGCCCTACTGCACTGGGAAGGCCTTGGATGTCCTCCGTCATGGGGATGGCCCCACTGCCTTTGCTACTGCCATCGGCTTTGTGTGCCTCGCCTCTGCCAGCAGGTAGGGACCCCCAGTTCCTCTCCCAGACCCTGTCCACACCTGGGATGGTGCCTGATGGGTTTCAC.6.2B2单倍型MHC实验鸭参考序列ATGGAGTTGCTGCCCACCTTGCGCCTGGCCTGTGTCCTGCTCCTGGCTGACCTGGTCGTGCTGGCAGCACTGGCCCGGTTGGCCCCGGCACTGGCACAGCTGGGTCTGGTGGCCACATGGCTGGAGGCTGGGCTGCGGCTACCAGTGCTGGTGGGAGCTGGGAGGCTGTTGGCCCCCGGAGGACCCCAGGGAGCCGCAGCCCTGGTGAGCCTGGCCCCTGCCACCTTCCTTACCCTGCGGGGCTGCCTGGAGCTGCCTGGGGCTCCACCAGTGCTGCTGGCCATGGCCACACCGTCCTGGCTGGCATTGGCCTATGGGGCAGTCTTGCTGGCCCTGCTCACCTGGACCTCCCTGGCACCTGGGGTGGCCCTGGGGACCAAGGAGGTCAAGTACCAGGCGGCCCTGCGCCGGCAGCTGGCCCTGGCCTGGCCTGAGTGGCCCTTCCTCAGCGGAGCCTTCTTCTGCCTCGTGCTGGCTGCATTGGGTGAGACCTCCGTGCCCTACTGCACTGGGAAGGCCTTAGATGTCCTCCGCCATGGGGACGGCCCCACTGCCTTTGCCACTGCCATCGGCTTTGTGTGCCTCGCCTCTGCCAGCAGGTAGGGACCCCCAGTTCCTCTCCCAGAGCCTGTCCACACCTGGGATGGTGCCTGATGGGTTTCAC.6.3B3单倍型MHC实验鸭参考序列ATGGAGTTGCTGCCCACCTTGCGCCTGGCCTGTGTCCTGCTCCTGGCTGACCTGGTGGTGCTCGCAGCACTGGCCCGGTTGGCCCCGGCACTGGCCCAGCTGGGTCTAGTGGCCACATGGTTGGAGGCTGGGCTGCGGCTACCAGTGCTGGTGGGAGC