临床微生物学检验技术考试题库及答案（二）

临床微生物学检验技术考试题库及答案

2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。

3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒

素）

4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋

白）

5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。结构由聚糖骨架、四肽侧链和五

肽交联桥（G-菌无。是溶菌酶、青霉素作用部位）

6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环

状DNA分子）、转位因子

7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动

器官）、菌毛（普通菌毛一粘附，致病性；性菌毛一接合方式转移遗传物质）

*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标

8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细

菌）。②颗粒型菌落（简称G型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。高渗环

境生长。（环丙沙星）

9、自营菌：以无机物为原料；异营菌（腐生菌：以无生命的有机物质为营养物

质；寄生菌：以宿主体内有机物为原料），所有致病菌都是异营菌。

10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。

11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长

12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单

位）。

13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法；

14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%〜

10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24~48h生长良好。

15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2〜3份检查，

抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。

16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细

菌表面结构及附件的观察。

17、细菌染色的基本程序：涂片（干燥）一固定一初染一染色（媒染）一（脱

色）一（复染，使脱色菌体着色）。

18、胃部细菌喜酸，肠道细菌喜碱

19、SS琼脂有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强，

可影响检出率，所以，使用时最好加一种弱选择平板以配对互补。

20、碱性琼脂或TCBS琼脂用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。

21、痰标本：血平板、中国蓝/麦康凯、巧克力平板作分离。

22、中国蓝/麦康凯用于筛选G-杆菌；

23、含杆菌肽的巧克力平板（含有V和X因子）用于筛选嗜血杆菌

24、连续划线分离法：杂菌不多的标本。

分区划线分离法：杂菌量较多的标本。

25、斜面接种法：该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某

些特性

26、倾注平板法：牛乳、饮水和尿液细菌计数

27、涂布接种法：常用于纸片法药物敏感性测定，也可用于被检标本中的细菌

计数。

28、半固体培养基用于观察细菌的动力（沿穿刺线生长呈模糊或根须状，并使

培养基变混浊为动力阳性）

29、a溶血：菌落周围血培养基变为绿色环状；红细胞外形完整无缺。

B溶血：红细胞的溶解在菌落周围形成一个完全清晰透明的环。

Y溶血：无溶血。

双环：在菌落周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二圆圈。

30、氧化-发酵试验（O/F试验）：有氧参加—氧化型；无氧降解——发酵

型；不分解葡萄糖而分解蛋白陈一产碱型。（肠杆菌科细菌发酵型全+）

31、甲基红试验（与V-P试验相反）：阳性红色，阴性黄色。大肠埃希菌

（+）,产气肠杆菌（-）

32、白喉棒状杆菌：G+,异染颗粒、毒力试验，Elek平板，亚碎酸钾血琼

脂。外毒素（毒血症）只有携带棒状噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒

素。

33、内毒素测定主要用于确诊患者是否发生G-细菌感染。常采用邕试验。本方

法灵敏度高，可检查出0.0005〜0.005|jg/ml内毒素。

外毒素主要用于确诊患者是否感染革兰阳性菌及部分阴性菌。常用体内及体外

毒力试验检测，也可通过ELISA法测定。

34、葡萄球菌属：G+,耐热、耐干燥、耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。

凝固酶阳性葡萄球菌：金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌

凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）：表皮葡萄球菌（新生霉素敏感，医院感染，血

培养污染）、腐生葡萄球菌（新生霉素耐药，凝固酶阴性。尿路感染）

蛋白抗原：葡萄球菌A蛋白（SPA）：完全抗原，有种属特异性，无型特异

性。抗吞噬作用。多糖抗原：半抗原，型特异性。

35、金黄色葡萄球菌：触酶试验、凝固酶试验（最简单）、耐热DNA酶试

验、甘露醇发酵试验均阳性。对新生霉素敏感。透明溶血环。

致病性：感染（化脓性感染，食物中毒，表现为急性胃肠炎），医院内感染，

毒素性疾病。主要致病物质有血浆凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠

毒素、表皮溶解毒素和毒性休克综合征毒素等。

耐药性检测：检耐甲氧西林金葡菌（MRSA）,耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄

球菌（MRSE）,耐万古霉素金葡菌（VRSA）,耐万古霉素表皮葡萄球菌

（VRSE）oNCCLS/CLSI推荐用头抱西丁纸片法检测mecA基因介导对苯嘎

西林耐药的葡萄球菌。

36、链球菌属：G+球菌，触酶阴性。在液体培养基中生长时易形成长链而表现

为沉淀生长。5%CO2环境。抵抗力不强，对各种常用消毒剂敏感，60℃加热

30分钟即可杀灭。

A群链球菌（猩红热）——杆菌肽敏感；B群链球菌（败血症、肺炎、脑膜

炎、咽喉炎）——CAMP试验阳性（与金葡菌，箭头状溶血），水解马尿酸；

D群链球菌——七叶昔试验阳性（40%胆汁培养基，变黑）；

甲型（a）溶血性链球菌：菌落呈灰色针尖状，菌落周围有1〜2mm宽的草绿

色溶血环，故又称草绿色链球菌。本菌为条件致病菌。

乙型（㈤溶血性链球菌：通称溶血性链球菌，菌落较小，灰白色，菌落周围

有2〜4mm宽的透明溶血环。该型细菌致病性最强，常引起人和动物多种疾

病。

丙型（丫）链球菌：呈灰白色细小菌落，在菌落周围无溶血环。一般无致病

性。

致病物质：链球菌溶血素、致热外毒素、透明质酸酶、链激酶、链道酶及M蛋

白等。人类链球菌感染中85%以上由A群链球菌引起，对青霉素G高度敏感

化脓型链球菌：杆菌肽敏感试验阳性。

***肺炎链球菌：混浊生长，有荚膜（荚膜肿胀试验：阳性），大叶性肺炎。

分解菊糖、胆汁溶解试验阳性、Optochin敏感试验阳性——与草绿色链球菌

鉴别。

37、肠球菌属：G+,触酶试验阴性，与同科链球菌的显著区别在于肠球菌能在

高盐（6.5%NaCD、高碱（pH9.6）、40%胆汁培养基上和10〜45c环境下

生长，并对许多抗菌药物表现为固有耐药。重要医院感染病原菌，常引起尿路

感染，其中大部分为医院感染，

38、奈瑟菌属：G-双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛。专性需氧，氧化酶阳

性。

脑膜炎奈瑟菌：流行性脑脊髓膜炎（简称流脑），空气传播，对人致病的主要

是A群。氧化酶、触酶试验阳性；分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气。

39、淋病奈瑟菌：不酵解麦芽糖与蔗糖、30%H202试验阳性（与脑膜炎奈瑟

菌鉴别）、

40、卡他莫拉菌：社区呼吸道感染的主要病原体之一

41、肠杆菌科：均为G-杆菌。均不形成芽胞。多数有周鞭毛（运动），少数菌

属细菌可形成荚膜。发酵葡萄糖产酸、产气，触酶阳性。（鉴别肠道致病菌和非

致病菌常选用葡萄糖发酵试验）

*菌体（0）抗原，鞭毛（H）抗原和表面抗原（如Vi抗原、K抗原）少数菌属

如志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛，无运动能力。

42、大肠埃希菌：俗称大肠杆菌，肠道正常菌群。泌尿系统感染。超广谱由内

酰胺酶（ESBLs）的主要产酶株。

尿素酶试验阴性，口引珠、甲基红、V-P、枸椽酸盐试验（IMViC）++一—，

克氏双糖铁琼脂（KIA）上斜面和底层均产酸产气，H2s阴性，动力、口引躲、

尿素（MIU）++一。硝酸盐还原、动力多数阳性。

**引起肠道感染的大肠埃希菌有下列五个病原群。

（1）肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）：引起霍乱样肠毒素腹泻（水泻）。

（2）肠致病性大肠埃希菌（EPEC）：主要引起婴儿腹泻。

（3）肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）：可侵入结肠黏膜上皮，引起痢疾样腹泻

（黏液脓血便）。

（4）肠出血性大肠埃希菌（EHEC）：又称产志贺样毒素（VT）大肠埃希氏

菌（SLTEC或UTEC）,其中O157:H7（常规检测项目）可引起出血性大肠

炎和溶血性尿毒综合征（HUS）。临床特征为严重的腹痛、痉挛，反复出血性

腹泻，伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。

（5）肠黏附性大肠埃希菌（EAggEC）：腹泻

*与志贺菌相鉴别：醋酸钠和葡萄糖钱利用试验及粘质酸盐产酸三种试验。大肠

埃希菌均为阳性，而志贺菌均为阴性。

43、志贺菌属：痢疾杆菌（细菌性痢疾）。我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌

痢最常见。强选择鉴别培养基一沙门、志贺菌选择培养基（SS）；弱选择培

养基——麦康凯或中国蓝培养基。

分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖（宋内志贺菌可迟缓分解乳糖），MR试

验阳性，只有0抗原而无鞭毛抗原，

伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性

致病因素为侵袭力、内毒素及外毒素

44、沙门菌属：无芽胞，无荚膜的革兰阴性直杆菌。有周身鞭毛（除鸡沙门菌

外），能运动，多数有菌毛。

***伤寒沙门菌：产酸不产气。动力+、胭酶+,氧化酶一，触酶+,硝酸盐还

原+。肥达试验。S〜R变异（光滑变粗糙，生理盐水中自凝）；H〜0变异

（失去鞭毛）；相位变异（双相变单相）；V〜W变异（失去Vi抗原）。

肠热症（伤寒与副伤寒病，慢性发热症状）。第1、2周采血液，第2、3周采

粪便与尿液。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。）

45、变形杆菌属：迁徙生长。具有尿素酶，可以水解尿素，产生氨

普通变形杆菌：靛基质和麦芽糖均阳性，鸟氨酸脱竣酶阴性；奇异变形杆菌相

反。

外-斐反应：普通变形杆菌0X19、0X2、OXk的菌体抗原与某些立克次体有共

同抗原，是用以诊断某些立克次体病的依据。

46、鼠疫耶尔森菌：鼠疫。两极浓染。“钟乳石”状。28~30℃oKIA结果利用

葡萄糖，不利用乳糖，不产H2S,MIU均为阴性反应，丙氨酸脱氨酶试验呈阴

性反应即可初步鉴定。

47、小肠结肠炎耶尔森菌：翻滚旋转状运动。VP试验25c阳性，37℃阴性，

鸟氨酸脱竣酶阳性。JR酶阳性

48、假结核耶尔森菌：两端浓染。25c培养有周鞭毛，有动力，37c培养无动

力。

49、肺炎克雷伯菌：医院感染，有荚膜，G-杆菌。灰白色大而黏的菌落，长丝

状。触酶阳性、胭酶阳性。动力和鸟氨酸脱竣酶阴性是本菌的最大特点。易产

超广谱内酰胺酶。对氨苇西林天然耐药。

50、肠杆菌属（阴沟肠杆菌、产气肠杆菌）有周鞭毛，能运动。IMVC：肠杆

菌属多为----F+；而大肠埃希菌是+H-------o

51、黏质沙雷菌：革兰阴性细小杆菌。沙雷菌具DNA酶和葡萄糖酸盐阳性

（与其他菌属细菌的根本区别）

52、弧菌科:G-杆菌。共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳

性、发酵葡萄糖。

弧菌属极端鞭毛、甘露醇、脂酶、生长需要NaCI、对0129敏感五项为+++

++

*霍乱弧菌（耐碱不耐酸，pH8.4〜9.2时生长最好）——霍乱（米潜水样粪

便）；副溶血性弧菌（无盐不生长，绿色菌落）一食物中毒（海产品）。

*不染色标本穿梭流星状运动（鱼群状）；01群霍乱弧菌诊断血清，如果原运

动活泼的现象停止（为制动试验阳性）

在碱性琼脂平板上一水滴状菌落。在TCBS（强选择）上——黄色菌落。在

含亚硫酸钾（或庆大霉素）琼脂平板上一菌落中心呈灰褐色

氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。能产生靛基质，霍乱红反应（即亚

硝基靛基质试验）阳性（非特异性）。

53、气单胞菌属：在65g/LNaCI中不生长。氧化酶试验阳性可与肠杆菌科细

菌鉴别，发酵葡萄糖可与非发酵菌鉴别；

54、弯曲菌属细菌：革兰阴性菌。空肠弯曲菌、大肠弯曲菌在43c生长，

25℃不生长；胎儿弯曲菌在25c生长，而43℃不生长；简明弯曲菌在25℃和

43c均不生长。空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性，是引起散发性细菌性肠炎最

常见的菌种之一

55、幽门螺杆菌：G-菌，氧化酶、触酶试验、DNA酶均阳性，快速服酶试验

强阳性。在37℃能够生长，在25c和42c均不能生长，有动力。

56、厌氧菌：一类是革兰染色阳性有芽胞的厌氧芽胞梭菌（外毒素），另一类

是无芽胞的革兰阳性及革兰阴性球菌与杆菌（正常菌群，条件致病性的内源性

感染）。气-液相色谱分析

**有芽胞的厌氧菌只有梭菌属

*放线菌感染一硫黄样颗粒

常规血培养阴性的细菌心内膜炎、并发脓毒症血栓性静脉炎、伴有黄疸的菌血

症等，应考虑可能有厌氧菌感染。

七叶昔胆汁平板（BBE,用于脆弱类杆菌），FS培养基（梭杆菌选择培养

基）

57、艰难梭菌——CCFA培养基，菌落黄色。紫外线照射下呈黄绿色荧光。本

菌感染与大量使用抗生素有关。假膜性肠炎，使用有关抗生素一周后突然出

现。

58、脆弱类杆菌引起败血症

59、炭疽芽胞杆菌：人畜共患病，是致病菌中最大的革兰阳性杆菌，竹节状。

倒松树状。（皮毛一皮革厂）。串珠试验。

60、蜡样芽胞杆菌：表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状。干热120C经60分钟才

能杀死。

61、产单核李斯特菌：20C有动力，37C动力缓慢，冷增菌（4℃）o伞状生

长。通过胎盘或产道感染新生儿。本菌常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增

多症。

62、结核分枝杆菌：pH6.5〜6.8。无内外毒素和侵袭性酶。人型结核分枝杆

菌烟酸试验、硝酸盐还原和烟酰胺酶试验均为阳性，借此可与牛型结核分枝杆

菌鉴别。Koch现象。IV型变态反应。罗氏培养基。

*在体内外经青霉素、环丝氨酸或溶菌酶诱导可影响细胞壁中肽聚糖的合成，异

烟肺影响分枝菌酸的合成，巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌后溶菌酶的作用可破坏

肽聚糖，均可导致其变为L型，呈颗粒状或丝状。

*卡介苗：毒力变异（减弱）保留抗原性。被动人工免疫。

63、麻风分枝杆菌：泡沫状，麻风细胞。

64、不发酵菌：不发酵或不分解糖类的G-无芽胞需氧杆菌。

***铜绿假单胞菌：绿脓杆菌。是医院感染的主要病原体之一。灰绿色或蓝绿色

菌落，菌落周围有透明溶血环。对亚胺培南耐药主要原因之一是产生金属酶。

**不动杆菌属：生物学特征为“三阴”，即氧化酶、硝酸盐还原试验、动力阴

性。鲍曼不动杆菌。

*产碱杆菌属：在含有蛋白陈的肉汤中产氨，可使pH上升至8.6。

*军团菌属：人工管道的水源中常存在此菌，如医院空调冷却水中常有此菌，对

常用化学消毒剂敏感。活性炭-酵母浸出液琼脂。肺部感染。

65、流感嗜血杆菌：G-短小杆菌。加热血平板。（与金葡菌）卫星现象。脑膜

炎。荚膜上的多糖抗原被称为M抗原。需要X因子、V因子。

副流感嗜血杆菌：不需要X因子。杜克嗜血杆菌本菌生长需要X因子，不需要

V因子。

66、杜克嗜血杆菌可引起软性下疳。

67、百日咳鲍特菌：鲍-金培养基

68、布鲁菌属：人畜共患病，菌血症，波浪热。首选多西环素。

69、衣原体：是一群体积较小，能通过细菌滤器，细胞内专性寄生，并有独特

发育周期的原核细胞型微生物。鸡胚卵黄囊

原体：为成熟的衣原体。吉姆萨染色呈紫色，Macchiavell。染色呈红色。在细

胞外较为稳定，无繁殖能力，但有高度感染性。

始体（网状体）：吉姆萨染色和Macchiavell。染色均呈蓝色。为衣原体发育

周期中的繁殖型，代谢活泼，不能自胞外存活，无感染性。

*衣原体细胞壁LPS为属特异性补体结合抗原

**沙眼衣原体（2SP培养基。碘液染色阳性）：沙眼，非淋菌性泌尿生殖道感

染（男性常见），性病淋巴肉芽肿。

*鹦鹉热衣原体：典型临床表现为非典型肺炎

70、克次体：是一类严格寄生在细胞内的原核细胞型微生物。菌体内同时含有

DNA和RNA。

*普氏立克次体常以人的体虱为传播媒介，流行性斑疹伤寒（又称虱传斑疹伤

寒）。流行性斑疹伤寒的外斐反应效价在1:160时有诊断意义。

*莫氏立克次体（斑疹伤寒立克次体，外斐反应）的贮存宿主是鼠类，主要传播

媒介是鼠蚤或鼠虱，地方性斑疹伤寒（又称鼠型斑疹伤寒）。

*恙虫病立克次体：通过恙螭幼虫叮咬传给人类，引起恙虫病。贝纳柯克斯体

（又称Q热立克次体）引起Q热。

71、支原体：是一类无细胞壁、呈高度多形态性，能通过除菌滤器，在人工培

养基上能生长繁殖的最小原核型微生物。革兰染色为阴性。无细胞壁仅有细胞

膜是与细菌区别的主要特点。菌落呈“荷包蛋”样。

**肺炎支原体：酒瓶状。是人类原发性非典型性肺炎的主要病原体之一。补体

结合试验Q1:64〜1:128为阳性）（检测IgM抗体）

72、诺卡菌属：外源性感染。库欣综合征、糖尿病

*钩端螺旋体：Fontana镀银染色法染成深褐色。钩体病（人畜共患病及自然

疫源性疾病）。发病1周内血液的阳性率高，1周后尿和脑脊液等的阳性率

高。

**梅毒的临床病程分三期：

第一期为硬性下疳，极易传播感染，也适于涂片镜检。

第二期即梅毒疹期，全身皮肤黏膜出现皮疹，伴有淋巴结肿大，可累及骨、关

节、眼及中枢神经系统。

第一、二期称早期梅毒，传染性强，破坏性较小。部分早期梅毒可进一步发展

到第三期梅毒，即晚期梅毒。病损部位螺旋体少但破坏性大。严重者可出现心

血管和中枢神经系统受损，可危及生命。后天性梅毒表现为反复隐伏发病和再

发的特点。

74、噬菌体是病毒

75、流行性感冒病毒：正黏病毒科。血凝素（HA）、神经氨酸酶（NA）,划

分流感病毒亚型的依据。常用鸡胚接种培养，初次分离接种羊膜腔为最佳，传

代适应后可移种尿囊腔。细胞培养一般用原代猴肾细胞（PMK）或犬肾传代细

胞（MDCK）。不耐热，对干燥、日光、紫外线以及甲醛、乙醇等均敏感。

76、呼吸道合胞病毒：不能在鸡胚中增殖，引起婴幼儿下呼吸道疾病的最常见

的病毒。最常见的传播途径是经飞沫传染，最易引起婴幼儿细支气管炎和细支

气管肺炎

77、麻疹病毒：飞沫直接传播。麻疹疫苗，8月龄接种。

78、肠道病毒：属小RNA病毒科肠道病毒属。由粪-口途径传播。是人类最常

见最重要的病毒。脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒

*轮状病毒：（秋季腹泻）婴幼儿急性腹泻的主要病因

79、流行性乙型脑炎病毒：可通过三带喙库蚊叮咬传播，引起流行性乙型脑

炎，简称乙脑。猪为最重要的宿主和传染源。

80、登革病毒：登革热。埃及伊蚊和白纹伊蚊等传播

81、巨细胞病毒：猫头鹰眼特征

82、甲肝病毒：毛蛆

83、乙型肝炎病毒是DNA病毒，其他肝炎病毒均为RNA病毒。

84、HIV：gp120>gp41

85、狂犬病病毒：嗜酸性包涵体（内基小体）。神经兴奋性增高，恐水病。

87、HPV：只能感染人的皮肤、黏膜的上皮细胞。尖锐湿疣主要由HPV-6引

起

88、肮病毒（亚病毒，还包括类病毒、卫星病毒）就是蛋白质病毒，是只有蛋

白质而没有核酸的病毒。中枢神经系统退化性病变

89、酵母型细胞和菌丝、抱子被染为革兰阳性（深紫色）。

**假丝酵母菌（俗称念珠菌）：出芽繁殖（芽生抱子）。芽管形成试验，假菌

丝。沙保弱培养基。玉米粉培养基形成厚膜抱子。

**新型隐球菌：有荚膜，折光性强。印度墨汁作负染色。尿素酶试验阳性

*鉴定曲霉菌常用察氏琼脂

*卡氏肺泡菌病是AIDS最常见、最严重的机会感染性疾病。

*马尔尼菲青霉可引起马尔尼菲青霉病（感染）

90、扩散法（K-B法）：选择直径6.35mm,吸水量203的专用药敏纸片。

质控菌株采用标准菌株是进行质控的主要措施，应从可靠的菌种保藏中心索

购，金黄色葡萄球菌ATCC25923,大肠埃希菌ATCC25922,铜绿假单胞菌

ATCC27853及粪肠球菌ATCC29212或ATCC33186用于对试验结果进行监

测。

琼脂稀释法是细菌药敏试验的金标准。释法所测得的某抗菌药物抑制待测菌生

长的最低浓度为最低（或最小）抑菌浓度（MIC）,稀释法也可测定最小杀菌

浓度（MBC）o

91、细菌耐药的机制

1.产由内酰胺酶是细菌对内酰胺类药物耐药的主要机制。

2.产生钝化酶如氨基糖昔类钝化酶、氯霉素乙酰转移酶等。

3.青霉素结合蛋白的改变如MRSA的耐药机制。

4.药敏作用靶位的改变如核糖体位点的改变引起大环内酯类、林可霉素耐药。

5.抗菌药物渗透障碍

92、消毒是去除或杀灭大多数微生物的过程。灭菌是去除或杀灭所有微生物的

过程。

碳水化合物的代谢试验

1.糖（醇、昔）类发酵试验：肠杆菌科细菌。

2.氧化-发酵试验（O/F试验）：肠杆菌科细菌（发酵型）与非发酵菌（氧化型

或产碱型）的鉴别。

3.即半乳糖昔酶试验（ONPG试验）：迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。分解乳

糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。

4.七叶昔水解试验：D群链球菌阳性，其他链球菌阴性。

5.甲基红试验：大肠埃希菌阳性；产气肠杆菌阴性。

6.V-P试验：与甲基红试验结果相反。

蛋白质和氧基酸的代谢试验

1.明胶液化试验：肠杆菌科细菌的鉴别，如沙雷菌、普通变形杆菌、奇异变形

杆菌、阴沟杆菌等可液化明胶，而其他细菌很少液化明胶。

2/引躲（靛基质）试验：肠杆菌科细菌的鉴定。

3.硫化氢试验：沙门菌属、爱德华菌属、亚利桑那菌属、枸椽酸杆菌属、变形

杆菌属细菌，绝大多数硫化氢阳性，其他菌属阴性。

4.尿素分解试验：肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。奇异变形杆菌和普通变

形杆菌服酶阳性，另外雷氏普罗威登菌和摩根菌为阳性，而斯氏和产碱普罗威

登菌阴性。

5.苯丙氨酸脱氨酶试验：用于肠杆菌科细菌的鉴定。变形杆菌属、普罗威登斯

菌属和摩根菌属细菌均为阳性，肠杆菌科中其他细菌均为阴性。

6.氨基酸脱竣酶试验：用于肠杆菌科细菌的鉴定。如沙门菌属中除伤寒和鸡沙

门菌外，其余沙门菌的赖氨酸和鸟氨酸脱竣酶均为阳性。志贺菌属除宋内和鲍

氏志贺菌外，其他志贺菌均为阴性。

碳源和氮源利用试验

1.枸椽酸盐利用试验：在肠杆菌科中埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属和耶尔

森菌属均为阴性，沙门菌属、克雷伯菌属通常为阳性。

2.丙二酸盐利用试验：克雷伯菌属为阳性，枸椽酸杆菌属、肠杆菌属和哈夫尼

亚菌属中有些菌种也呈阳性，其他菌属均为阴性。

各种酶类试验

1.氧化酶试验：用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳

性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。

2.过氧化氢酶试验（触酶试验）：革兰阳性球菌中，葡萄球菌和微球菌均产生

过氧化氢酶，而链球菌属为阴性，故此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群。

3.硝酸盐还原试验：肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；铜绿假单胞

菌、嗜麦芽窄食单胞菌等假单胞菌可产生氮气；有些厌氧菌如韦荣球菌等试验

也为阳性。

4.脂酶试验：用于厌氧菌的鉴别。类杆菌属中的中间类杆菌产生脂酶，其他类

杆菌则为阴性；芽胞梭菌属中产芽胞梭菌、肉毒梭菌和诺维梭菌也有此酶，而

其他梭菌为阴性。

5.卵磷脂酶试验：主要用于厌氧菌的鉴定。产气荚膜梭菌、诺维梭菌产生此

酶，其他梭菌为阴性。

6.DNA酶试验：在革兰阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生DNA酶，在肠杆

菌科中沙雷菌和变形杆菌产生此酶，故本试验可用于细菌的鉴别。

7.凝固酶试验：作为鉴定葡萄球菌致病性的重要指标。

8.CAMP试验：在链球菌中，只有B群链球菌CAMP试验阳性，故可作为特

异性鉴定。

9.胆汁溶菌试验：用于肺炎链球菌与甲型链球菌的鉴别，前者为阳性，后者为

阴性。

抑菌试验

1.0/129抑菌试验：用于弧菌科的属间鉴别，弧菌属、邻单胞菌属对0/129敏

感，而气单胞菌属耐药。

2.杆菌肽试验：用于A群链球菌与非A群链球菌的鉴别。

3.奥普托欣（Optochin）试验：用于肺炎链球菌与其他链球菌的鉴别。

血液感染常见病原菌

显微镜的使用操作流程及评分标准

项目内容分值扣分标准扣分

目的掌握显微镜的使用方法及注意事项

用物光学显微镜、载玻片、擦镜纸、香柏油、脱油剂

准备

素质让学生能够熟练使用显微镜

要求

1.安放：把显微镜放在自己前面略偏左的桌面上，这样便于用

左眼观察物像，用右眼看着画图。安放时镜筒向前，镜臂向

后。

2.对光：转动转换器，使低倍物镜正对通光孔，并使物镜前端

与载物台有两厘米左右的距离。然后把反光镜对着光源，但是

反光镜不能直接对着太阳。只要视野的光亮程度合适，光就对

好了。

3.观察：对好光后，把显微镜玻片标本放在载物台上，并使玻

操片上的标本对着通光孔的中心，再用压片夹夹住。然后慢慢地

转动调焦螺旋，直到接近玻片为止。接着，用左眼向目镜内注

视，同时反方向转动调焦螺旋，直到看清物像为止。

作

4.再放大：选好一个放大目标，再把要放大的部分移到视野正

中心，如果物像不清楚，再转动调焦螺旋。如果还观察不清楚，

就必须换用高倍物镜。用高倍物镜观察时，高倍物镜顶端离玻

步片很近，稍不小心，镜头就会压到玻片，所以要特别小心。

5.在显微镜里看到的物像是倒像，因此，要使物像向上移动，

就要向下移动玻片；要使物像向左移动，就要向右移动玻

臊片。

1.先用低倍镜观察，用低倍镜能看清的，就不再用高倍镜。

2.必须保护好镜头。

3.载物台要保持清洁干燥。

意

4.转动调焦螺旋不要用力过猛，以防损伤机件。

事

5.取用显微镜要较拿轻放，要用右手握镜臂，左手托镜座。

项

6.使用完毕，要把显微镜外表擦干净，并把镜筒旋下至最低

处。最后把显微镜放入镜箱，送回原处保存。

细菌的形态学检验操作流程及评分标准

项目内容分值扣分标准扣分

目的掌握革兰染色的基本原理和操作方法

用物革兰染色液、生理盐水、载玻片、接种环、酒精灯、显微

准备镜、香柏油、蜡笔、擦镜纸、脱油剂

素质能够熟练对细菌标本进行染色，观察结果，对细菌进行分类

要求

（1）涂片：取清洁无油迹的载玻片1张，用蜡笔划线将其分

成左右两格。用接种环先挑取生理盐水厂2环于载玻片每格

中央，再分别挑取大肠杆菌和葡萄球菌少许菌落与生理盐水

研匀，涂成直径约1.5cm的菌膜。

（2）干燥：让涂片自然干燥，也可在酒精灯火焰较远处微微

加热烘干，但切勿靠近火焰。

（3）固定：干燥后的标本片在酒精灯火焰上来回通过3次（以

钟摆的速度），冷却后染色。固定的目的在于杀死细菌，并使

菌膜与玻片牢固粘附，避免染色过程中被水冲洗掉，通过固定

操还可凝固细胞质，改变细菌对染料的通透性，使细菌易与染料

结合而着色。

（4）染色：结晶紫--卢戈碘液--95%乙醇——稀释石炭酸

作复红待干、镜检（初染）（媒染）（脱色）

（复染）

步

骤

1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色时间。

2.染色过程中勿使染色液干涸。

意3.选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h,E.coli培养24h。

事

项

基础培养基的制备与灭菌操作流程及评分标准

项目内容分值扣分标准扣分

目的掌握基础基础培养基的配制流程、灭菌的方法及注意事项

用物牛肉膏、蛋白腺、氯化钠、琼脂粉、1mol/LNaOH、1moI/LHCI

准备试管、吸管、平皿、锥形瓶、量筒、吸管、精密PH试

纸、天平、滤纸

素质要求熟练操作培养基的配制和灭菌

要求

一、培养基的配制

1.配制溶液

2.调节pH值

3.过滤

4.分装

二、培养基的灭菌

操1.开盖

2.通电

3.加水

作4.放样

5,设定温度和时间

步

骤

1.调节PH值时，要边滴氢氧化钠边搅拌，不能一次加太多

2.加热时间控制好，否则培养基会煮糊。

3.灭菌是要注意将灭菌锅里的空气排干净。

意4.注意灭菌的时间和温度的控制。

事

项

细菌的接种培养法操作流程及评分标准

项目内容分值扣分标准扣分

目的掌握细菌的接种方法及操作流程

用物温箱、酒精灯、接种环、接种针、L形玻棒、打火机、记号

准备笔

素质能够熟练操作各种接种方法

要求

（一）平板划线接种法（又称分离培养法）

烧灼接种环，杀灭环上残留细菌，待冷，从薄膜处取菌作连

续平行划线，约占平板表面1/5左右，再次烧灼接种环，等

三次平行划线……以同样方法作第四次，第五次划线，将平

板表面划完。划线完毕，盖上平皿盖，底面向上，用标签或

腊笔注明菌名检验号码，接种者信息等，置37℃孵育培养

24小时后观察结果。

（二）斜面培养基接种法

试管口部于火焰上往返通过2~3次灭菌，将灭菌白金环伸入

操有菌试管中，取少量细菌，然后移至准备接种的试管

中。

接种方法是自管底向上连续平划线，若以保存菌为目的时可

作自管底上划一粗直线即可。

取出接种环，将试管上部再经火焰灭菌，塞好棉塞，接种环

灭菌后放回原处。

步（三）半固体培养基穿刺培养法

灭菌穿刺针沾取细菌后，垂直刺入半固体培养基中央直达近

管底处，再沿原穿刺线抽出即可。

臊

1.选择适合其生长需要的培养基

2.防止污染。培养基和一切用具必须彻底灭菌；操作时必

意须靠近火焰；操作完毕后，禁止再让培养基接触外界空

事气。

项3.防止接种器械过热，很容易杀死分离培养的细菌。

细菌的分布操作流程及评分标准

项目内容分值扣分标准扣分

目的熟悉细菌在自然界和人体的分布，了解外界因素对细菌的影

响

用物待测水样、泥土、无菌吸管，平皿，无菌生理盐水

准备

素质让学生熟悉细菌在自然界和人体的分布情况

要求

1.空气中细菌的检查

（1）方法：取普通平板（或血平板）1个，选室内或室外的

一处空间，在离地面1m左右高度的桌面（或台面）上，打开

平板盖，让培养基暴露于空气中，10min之后，迅速盖好盖子，

在底部写上标记，放35℃培养18~24h,观察结果。

（2）结果观察

2.水中细菌检查

（1）方法:

1）用无菌三角烧瓶以无菌的方法采集水样。

操2）用无菌吸管吸取1ml水样以无菌技术加入无菌平皿中。

3）趁热（不烫手为宜），倾注约15nli的普通琼脂，立即在台

面上轻轻转动平皿使其混匀。待琼脂凝固后，将其放入35℃,

作培养18~24ho

（2）结果观察报告。

3.人体咽喉部细菌检查

步

（1）方法:

1）采样

持无菌棉拭1根，待受试者张大嘴巴后，迅速伸入对方悬臃

臊垂后的咽喉部，轻轻揩取咽喉壁上的分泌物。

2）接种

以无菌方法用棉签在琼脂平板的一角（1/4处）来回划线，去掉

棉拭，然后用接种环在原划线上过2~3下，接着往下划线分

离。

3）培养

写上标记，将平板放35℃,18~24h培养。

1.注意无菌操作，防止空气或人体上的细菌污染。

2.倒入的培养基温度大约在45℃左右（热而不烫手为宜），

意太热，太冷都不行。

事

项

细菌对抗药物敏感试验操作流程及评分标准

项目内容分值扣分标准扣分

目的掌握药敏试验的方法、原理、结果判读、临床意义

用物供试菌种、普通琼脂培养基、药敏纸片、培养起、平皿、＜

准备子、试管、酒精灯、涂布棒

素质要求学生熟练操作纸片扩散法

要求

1.配制培养基

2.配制菌悬液

3.涂布于琼脂平板的表面

4.室温下干燥3-5分钟

5.贴药敏纸片

6.35℃培养16-18小时

操7.测量抑菌圈直径，参照相关标准判读结果。

作

步

臊

1.培养基的质量

2.药敏纸片的质量，含药量和保存方式

3.接种菌量正确与否是影响结果的重要因素之一，取决于麦

意

氏比浊标准的配制，正确使用和保存

事

5孵育条件，温度和时间

项

6抑菌圈测量工具的精度

7质控菌种本身的药敏特性是否合格，有无变异。

糖发酵试验操作流程及评分标准

项目内容分值扣分标准扣分

目的熟悉葡萄糖发酵试验的原理和操作方法。

用物大肠杆菌，糖发酵管

准备

素质熟悉大肠杆菌对葡糖糖的发酵情况。

要求

1.取两支HL葡萄糖培养基，置沸水中水浴10分钟。

2.冷却，将待检细菌接种到2支培养基中。

3.取其中一支加灭菌的液体石蜡，使其与空气隔绝，另一

管不加液体石