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出口食品过敏原成分检测第18部分：实时荧光PCR方法检测荞麦成分DetectionofallergencomponentsinI 本部分所规定方法的最低检出限(LOD)为0.01%质量分数)。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T27403实验室质量控制和探针进行实时荧光PCR扩增，观察实时荧光PCR的增幅现象，判断样品中是否存在过敏原荞麦工25试剂和材料表1。序列(5'-3’)目的基因内参照5'端引物内参照3'端引物内参照探针AATTTGCGCGCCTGCTGCCTTCFAM-CCGTTTCTCAGGCTCCCTCTCCGGAA真核生物18SrRNA基因ITS和5.8SrRNA用10%盐酸调pH至8.0,121℃,高压灭菌20min,备用。5.4蛋白酶K:20mg/μL。5.1070%乙醇。6.1实时荧光PCR仪。6.4冰箱：2℃~8℃,-20℃。3取适量DNA溶液原液加双蒸水稀释一定倍数后，使用核酸蛋白分析仪或紫外分光光度计测c=A₂6O×N×50…………(1)7.3实时荧光PCR检测7.3.2实时荧光PCR反应参数50℃/2min,95℃/10mi4c)如35.0<Ct值<40.0,则重复一次。如再次扩增后Ct值仍为<40.0,则判定被检样品阳性：如再次扩

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