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文档简介

微生物应用技术学习情景一

区别四大类微生物的生长形态特征主要内容1说课内容微生物及其特征的认知;微生物的研究内容微生物实训基础知识病毒的认知1234真核微生物r的认知原核微生物的认知65学习情景一

区别四大类微生物的生长形态特征任务2主要原核微生物的认知

原核微生物的细胞核比较原始简单,发育不全,没有核膜包围,不具核仁和典型的染色体,也没有固定形态,与细胞质无明显界线,称为拟核或核区。原核微生物无细胞器,也不进行有丝分裂。原核微生物主要包括细菌、放线菌、蓝细菌、黏细菌、支原体、螺旋体、立克次氏体和衣原体等。其中细菌是微生物治理技术中应用最多,同时也保持生态平衡作用。任务提出任务2主要原核微生物的认知

通过学习本任务,了解细菌的结构、大小、培养特征、生活环境、繁殖方式的认知;放线菌、蓝细菌、古细菌等形态和菌落特征的认知;学会光学显微镜的使用方法;会进行微生物的简单染色法和革兰染色法操作;初步学会无菌操作方法。会对细菌、放线菌、蓝细菌形态和菌落进行识别。任务分析任务2主要原核微生物的认知原核微生物的特点:核比较原始简单,发育不全,没有核膜包围,不具核仁和典型的染色体,也没有固定形态,核与细胞质无明显界线,称为拟核或核区;无细胞器,也不进行有丝分裂。原核微生物类群:主要包括真细菌、放线菌、蓝细菌、黏细菌、支原体、螺旋体、立克次氏体和衣原体等。但有分散的核糖体,其结构不同于真核细胞的核糖体任务2主要原核微生物的认知任务2主要原核微生物的认知一、细菌

细菌是一类细胞微细、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖的单细胞原核生物。特点:1.在自然界中,细菌分布最广、数量最多,与人类关系极为密切(凡在温暖、潮湿和富含有机物质的地方,都有大量的细菌活动)。2.有的是有害的,有的是有益的。特点:1.种类多,形态多种多样,随生活环境条件改变而改变2.在一定的条件下,其形态基本上是固定的。

正常形态

细菌的形态

特殊形态(一)细菌的形态和大小任务2主要原核微生物的认知1.细菌细胞的形态正常形态:细菌个体的基本外形呈球状、杆状和螺旋状三种。称为球菌、杆菌、螺旋菌。在自然界所存在的细菌中:杆菌最为常见,球菌次之,螺旋状的最少。任务2主要原核微生物的认知(1)球菌细胞呈球形或近球形,分裂繁殖后产生的新细胞保持一定的空间排列方式。根据细胞分裂的方向和分裂后的各菌体间空间排列状态(相互联结的松紧程度和组合状态)不同,球菌分为:单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌。球菌的直径:0.5~2.0微米。任务2主要原核微生物的认知任务2主要原核微生物的认知细胞呈杆状或圆柱形的细菌,种类最多,形态多样.

①根据菌体长短、粗细差别不同,分为:长杆菌、杆菌、短杆菌(长宽差不多)(2)杆菌任务2主要原核微生物的认知②根据菌体两端形态的不同,分为:棒状杆菌;形如棒状梭状杆菌;一端膨大,另一端细小任务2主要原核微生物的认知③根据分裂后是否相连或排列分为:单杆菌、双杆菌、链杆菌任务2主要原核微生物的认知梭状芽孢杆菌④其他形态有的在一端分支,称分支杆菌;有的产生芽孢双歧杆菌任务2主要原核微生物的认知螺旋菌:细胞呈弯曲状的杆菌。

1)大小:长5~50微米

宽0.5~5微米

(3)螺旋菌任务2主要原核微生物的认知2)分类按弯曲程度分:

A.弧菌:菌体呈弧形或逗号状,螺旋不满一圈。例:霍乱弧菌、逗号弧菌,与略弯曲的杆菌较难区分。B.螺菌:螺旋满有2~6周,菌体坚硬,回转如螺旋状,例:鼠疫热小螺菌

C.螺旋体:螺旋周数超过6环,菌体大且柔软,回转如螺旋状。例:梅毒密螺旋体。任务2主要原核微生物的认知螺旋体螺菌弧菌任务2主要原核微生物的认知细菌的特殊形态柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细菌、贝日阿托氏菌(丝状)、具有子实体的粘细菌、三角形、方形等特殊形态的细菌。任务2主要原核微生物的认知2.细菌的大小

(1)观察:光学(或电子)显微镜

(2)测量:显微测微尺

(3)长度单位:微米(μm)、纳米

(4)表示方式:球菌:直径(0.5~1.0)µm

杆菌:宽度

(直径)×长度

(长)螺旋菌:自然弯曲的长度真正长度:螺旋直径和圈数(2~6)任务2主要原核微生物的认知2.细菌的大小球菌:直径:(0.50~1.0)微米杆菌:宽(0.5~1.0)微米×长(1~5)微米螺旋菌:长(0.5~1.0)微米×(1.0~5.0)微米任务2主要原核微生物的认知环境条件的变化物理、化学因子的刺激培养时间过长阻碍细胞正常发育自身代谢产物积累过多营养缺乏细胞衰老异常形态恢复正常环境条件正常形态特殊形态任务2主要原核微生物的认知1.基本结构:

指细菌细胞共有的、生命必需的细胞构造。包括:细胞壁、细胞膜、细胞质、内含物及核区。2.特殊结构:指某些细菌所特有的,具有某些特殊功能的细胞构造.包括:糖被(或荚膜)、芽孢、鞭毛、菌毛和性菌毛任务2主要原核微生物的认知(一)细菌细胞的基本结构1.细胞壁位于细胞最外面的一层厚实、坚韧的外被。厚度因菌种而异,在10~80nm之间。重量占细胞干重的10%~25%。

任务2主要原核微生物的认知(1)细胞壁的功能A:维持细胞外形,保护细胞免受外力(机械性或渗透压)的损伤;B:作为鞭毛运动的支点;C:为细胞的正常分裂增殖所必需;D:具有一定屏障作用,对大分子或有害物质起阻拦作用;E:与细菌的抗原性、致病性及对噬菌体的敏感性密切相关。

任务2主要原核微生物的认知(2)细菌的革兰氏染色法染色:利用细菌与各种不同碱性有机染料具有亲和性的特点而使菌体着色。使菌体与背景形成鲜明的对比,以便在显微镜下观察。

染色方法单染法复染法:革兰氏染色、特殊染色(芽孢染色、鞭毛染色、荚膜染色)常用的染色液:石炭酸复红、草酸铵结晶紫、碱性美蓝、沙黄、蕃红、孔雀绿任务2主要原核微生物的认知G-

细菌G+

细菌3)革兰氏阴性与革兰氏阳性细菌细胞壁比较G+细菌和G-细菌的特征特征革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌内壁层外壁层厚度(nm)20~802~38~10

肽聚糖含量很高30%~90%含量低5%~20%无磷壁酸%<500脂多糖无有蛋白质%一般无含量高脂肪%一般无<%含量较高(20%)任务2主要原核微生物的认知(4)细胞壁结构与革兰氏染色的关系主要与细菌细胞壁的通透性有关。基本步骤:细菌的干涂片固定

初染(草酸铵-结晶紫染)

媒染(碘液染)

脱色(95%乙醇脱)

复染(番红或沙黄)结果:革兰氏阳性菌(G+)

紫色(保持初染色)革兰氏阴性菌(G-)

红色(脱去初染色,被染上复染色)任务2主要原核微生物的认知结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色沙黄复染①革兰氏染色过程:1.初染:用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染。2.媒染:用碘溶液进行,作用是提高染料与细胞间的相互作用,使两者结合的更牢固。3.脱色:用乙醇冲洗,脱色后仍将结晶紫保留在细胞内为G+,而G-的结晶紫被冲掉,细胞呈无色。4.复染:用与结晶紫具有不同颜色的染料进行,如蕃红或沙黄,使无色的G-菌呈红色,而G+仍保持紫色。阳性菌阴性菌②革兰氏染色的结果任务2主要原核微生物的认知③革兰氏染色原理革兰氏阳性菌:1.细胞壁的肽聚糖含量高,层厚,交联紧密。2.细胞间隙较小,经乙醇脱水时,肽聚糖因脱水而孔径变小3.故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内,细胞不能被酒精脱色,仍呈紫色。革兰氏阴性菌:1.细胞壁的肽聚糖层薄,交联程度疏松且富含类脂。2.乙醇脱色后因脂肪溶解,导致壁上的孔隙变大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,酒精将细胞脱色,细胞无色,沙黄复染后呈红色。2.细胞质膜围绕在细胞质外面的一层柔软而具有弹性的半透性薄膜对细菌的呼吸、运动、生物合成、物质交换,能量生成等均有重要作用。厚约7

8nm,约占细胞干重10%。化学组成:蛋白质(占50%

70%)和脂类(占20%

30%,以磷脂为主),还有少量的核酸和糖类。任务2主要原核微生物的认知3.细胞质及其内含物细胞膜内除核质体外的所有半透明、胶体状和颗粒状的细胞物质,其主要化学成分是水(约占80%)、蛋白质、核酸、脂类,少量糖类及无机盐类。由于富含核酸,因而嗜碱性强,易被碱性和中性染料染色。通常情况下,细胞质为无色透明粘液,有时也会形成有形内含物,不同微生物含有的内含物不同,常见内含物有:异染颗粒、聚β-羟基丁酸(PHB)颗粒、肝糖粒和淀粉粒、硫粒任务2主要原核微生物的认知4.细胞核细菌是原核生物,无真正的细胞核,只是在菌体中央有一个由遗传物质(DNA)所在的核区。此核区无核膜、核仁,没有固定的形态,但与细胞质区分明显,故称原核、拟核、核质体。功能:贮存、传递遗传信息的物质基础。

主要成分:DNA(脱氧核糖核酸)和少量RNA(核糖核酸)及蛋白质,没有真核生物含有的组蛋白。任务2主要原核微生物的认知细菌细胞的特殊构造种类:荚膜、鞭毛、芽孢、菌毛和性菌毛作用:鉴别细菌种类的依据。任务2主要原核微生物的认知1.芽孢概念:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、折光性强、含水量低、抗逆性强的休眠结构。因在细胞内形成,又称内生孢子。每一个营养细胞内仅形成一个芽孢,无繁殖功能。任务2主要原核微生物的认知(1)芽孢的特点

芽孢是整个生物界抗逆性最强的生命体,在抗热、抗化学药物、抗辐射和抗静水压等方面尤为突出。

新陈代谢几乎停止,处于休眠状态。①在自然界中可存活几年~几十年不死。②特别耐高温。肉毒梭菌:PH=7.0时,100℃,煮5~9.5h才死亡;121℃灭菌10min才杀死.嗜热脂肪芽孢杆菌:121℃灭菌10min才杀死。热解糖梭菌:营养细胞(50℃,短时)芽孢132℃,4.4min,杀死90%某些细菌在一定生理时期,在细胞内形成的可抗不良环境的休眠体。任务2主要原核微生物的认知细菌芽孢的位置和大小示意图1.中央位2.近端位3.极端位

芽孢的有无、形状、位置和大小因菌种而异,是细菌分类的重要依据。(2)芽孢的类型2.糖被(或称荚膜)

有些细菌在一定营养条件下,可向细胞壁表面分泌一层松散、透明的粘液状或胶质状的多糖类物质。特点:用碳素墨水进行负染色法在光学显微镜下可见。(1)荚膜分类

根据糖被有无固定层次、层次薄厚分为:

荚膜(或大荚膜):较厚(>200nm),有明显的外缘和一定的形态,相对稳定地附着于细胞壁外。与细胞结合力较差,液体振荡培养或离心可得到荚膜物质。微荚膜:粘液状物质较薄,厚度<0.2µm,与细胞表面牢固结合。光学显微镜看不见,易被胰蛋白质酶消化黏液层:粘液物质没有明显的边缘,比荚膜疏松,可扩散到周围环境中,没有固定在细胞壁上。增加培养基粘度

菌胶团:荚膜物质互相融合连为一体,多个菌体包含于共同的糖被中。任务2主要原核微生物的认知(2)糖被的化学组成水(量>90%)、多糖类、多肽类,或者多糖蛋白质复合体,以多糖类居多。肺炎链球菌荚膜:多糖;炭疽杆菌荚膜:多肽;巨大芽孢杆菌荚膜:多肽与多糖的复合物。任务2主要原核微生物的认知(3)糖被的主要功能①保护作用:保护细菌免于干燥;防止化学药物毒害;能保护菌体免受噬菌体的侵害;能抵御吞噬细胞的吞噬。②贮藏养料:当营养缺乏时,可被细菌用作碳源和能源。③堆积某些代谢废物。④致病功能:是有些病原菌的毒力因子,S型肺炎链球菌靠其荚膜致病,而无荚膜的R型为非致病菌;任务2主要原核微生物的认知3.鞭毛

着生于某些细菌体表的细长、波浪形弯曲的丝状蛋白质附属物。数目为1~10根。特点:由特殊的蛋白质(鞭毛蛋白)构成,一端连于细胞膜,一端游离、细长的波形丝状物,其的长度超过菌体很多倍。鞭毛功能:具有运动性,细菌的“运动器官”。观察鞭毛:直接观察用电子电微镜或光学显微镜:经特殊鞭毛染色后,再观察。大小:长15~20微米,直径10~20nm。弧菌、螺菌类普遍长鞭毛,部分杆菌长有鞭毛。大多数球菌(除尿素八叠球菌外)不生鞭毛。鞭毛的着生方式周生任务2主要原核微生物的认知种类按鞭毛着生位置和数量分五种类型偏端单生鞭毛菌、两端单生鞭毛

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