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出口食品过敏原成分检测第15部分：实时荧光PCR方法检测芹菜成分2013-03-01发布2013-09-16实施 工出口食品过敏原成分检测第15部分：GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测致敏原又称过敏原或变态反应原，是指能够使人发生过敏的抗原，芹菜是光敏性蔬菜，过量食用标准中致敏原芹菜成分即指芹菜特异性DNA片段。用10%盐酸调pH至8.0,121℃,高压灭菌20min,备用。25.3蛋白酶K(20mg/μL)。3盒提取模板DNA。取5μLDNA溶液加ddH₂O梯度稀释至1mL,使用核酸蛋白分析仪或紫外分光光度计测260nmc=A₂6o×N×50/1000…………(1)A₂6o——260nm处的吸光值；7.4.1实时荧光PCR反应体系c)如35.0<Ct值<40.0,则重复一次。如再次扩增后Ct值仍为<40.0,则判定被检样品阳性；如再次扩增后Ct值≥40.0,则判定被检样品阴性。致敏原芹菜成分的基因扩增靶标参考序列检测过程中防止交叉污染的措施按照GB/T27403中的规定执行。TTTGATCCACCGACTTACAGTGGTTTGAGATATATATTACATGCCAGTGTTATGTTTGGATTACGGTGTGATGAGTCAGCGTTATCTGT

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