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文档简介
选修1《生物技术实践》知识归纳图解.
联春:
I①要先清洗后除枝粳lls:主妻菌制是薛瓦菌:
(避免除去枝梗时引联意:酵母菌是异养兼性I
起葡萄破损,增加被6榨汁机要清洗干净,厌氧微生物
GH12O6TC2H5OH+CO2:|原理:主要菌种是醋酸杆菌(异养需氧型)
杂菌污染的机会,同:并晾干(防杂菌污染)
I温度:20℃左右最适合酵I|①当氧气糖源均充足时,糖T醋酸
时,防止葡萄汁流失)I②避免将果核压破(因
母菌繁殖,一般控制||②当氧气充足、缺少糖源时,乙醇T乙醛T醋酸
在意;i@不能反复冲洗(避免i果核含有多种有害葡
”度:30℃~35℃o
选择新鲜的葡萄卜菌种流失)i萄酒风味的物质)在18℃~25℃„
果
挑选葡萄|------>冲洗——
酒榨汁-----------/酒精发酵醋酸发酵
和
果
-T果酒
醋:-X果醋I
▼
的।注意:I汪宣;一籥至前插天豆鼻】
制I①发酵装置要清洗干净,并用体积分数为70%的酒精消毒I
作I②发酵瓶装入葡萄汁后留有I/3的空间(目的是先让酵母菌I
I进行有氧呼吸快速繁殖,耗尽氧气后再进行酒精发酵;其I
;次,防止发酵过程中产生的C02造成发酵液的溢出)
I③如用带盖的瓶子制葡萄酒,每隔12h左右将瓶盖拧松一次1
(注意不是打开瓶盖,防杂菌污染),之后再将瓶盖拧紧(目|篇著誉菽
的:排出多余的气体放炸裂)I①由于醋酸菌和乳酸菌属于原
1④装入葡萄汁封闭充气口(无氧环境和放杂菌污染)核生物,所以在利用者两类
1⑤发酵过程中,随着酒精度数的提高,葡萄酒呈现深红色(因|I微生物时,其环境中一定不
红葡萄皮的色素也进入发酵液)能加入抗生素。
I②酵母菌在营养和氧气充足时
1⑥酒精的鉴定:与酸性重铭■酸钾T呈灰绿色
I进行出芽生殖
;对照组T2mL白酒T^SniL/L的H2SO43滴T混勺T
实验组T2mL发酵液厂"重格酸钾3滴T观察
图米酒和枭带的发醉装置:
l-4b试管甲T2mL发酵前液43mL/L的&S0"3滴T混匀T
示意图;试管乙T2mL发酵后液J重铭"酸钾3滴T观察
微生物的实验室培养
(-)培养基的基本知识
1.培养基的营养成分
营养物
定义作用主要来源及所涉及的微生物
质
无机化合物:CO2、NaHCCh等(自养
凡是能提供微生构成生物细胞、生物体及
生物)
碳源物所需碳元素的细胞代谢产物,有些能为
有机化合物:糖类、脂质、花生粉
物质异养生物提供能源
饼、石油等(异养生物)
凡是能提供微生合成蛋白质、核酸及含氮无机化合物:色、NH3>镂盐、硝酸
氮源物所需氮元素的的代谢产物,也可为异养盐,自养生物有机化合物:尿素、
物质微生物提供能源牛肉膏、蛋白腺等,异养生物
生物体内含量最良好的溶剂、细胞生活及
水分培养基、大气、代谢产物
高的组成成分,分生化反应的介质、参与物
为结合水和自由质运输及参与生化反应的
水反应物
为微生物提供大细胞组成成分,生命调节
无机盐量除C、H、0以外物质,自养菌的能源或其培养基、大气等环境
的各种元素他营养来源,酶的激活剂
微生物正常生长
生长因可作为酶与核酸等的组成
繁殖,必不可少的维生素、氨基酸、碱基等
子成分
微量有机物
自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同
(1)自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物,而异养微生物需要
高考警的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物,因此可根据培养基中营养物质判断
示钟微生物的代谢类型。
(2)含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源,也能作为能源物质,提供能量,
如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。
2.培养基的配制原则
(1)目的明确。要根据微生物的种类、培养目的等选择原料、配制培养基。
(2)营养要协调。各种营养物质要保证适当的浓度和比例。营养物质比例过低,不能满足微生物生长;
浓度过高则会抑制微生物的正常生长。营养物质的浓度比(如C/N)还会直接影响某些微
生物的代谢产物,如谷氨酸生产,C/N=4:1时,菌体大量繁殖,谷氨酸产量少;而C/N=3:
1时,菌体繁殖受抑制,但谷氨酸合成量大。
(3)pH要适当。不同微生物生长所需pH不同。如细菌pH保持在6.5〜7.5之间;放线菌保持在7.5〜
8.5之间;真菌应保持在5.0〜6.0之间。
3.培养基的分类及作用:培养基种类很多,作用也不同。根据不同的分类标准,可将培养基分为不同
种类。
划分培养基种
特点用途及实例
标准类
物理液体培养
不加凝固剂工业生产
性质基
半固体培观察微生物的运动、分类鉴定、
关苴
加圣保臧菌种
加凝固剂,如:琼脂
固.体培养
微生物分离、鉴定、活菌计数、
基
天然培养
含化学成分不明确的天然物质工业生产
化学基
成分合成培养培养基成分明确(用化学成分已
分类、鉴定
基知的化学物质配成)
培养、分离出特定微生物(如:
培养基中加入某种化学物质,以培养酵母茵或霉菌,可在培养
选择培养
抑制不需要的微生物的生长,促基中加入青霉素;培养金黄色
用途基
进所需要的微生物的生长葡萄球菌,引在培养基中加入
高浓度食盐)
鉴别培养根据微生物的代谢特点,在培养鉴别不同种类的微生物,如可
基基中加入某种指示剂或化学药用伊红一美蓝培养基鉴别饮用
品水或乳制品中是否启大肠杆菌
(若有,茵落呈深紫色,并带有
金属光泽)
说明:①病.毒为非细胞结构的生物体,专营活细胞寄生,目前不能利用人工培养基来培养,需接种在动
植物组织中才能增殖。常用于培养病毒的是活鸡胚。
②加入培养基中的凝固剂(如琼脂),一般不能被微生物利用,只起到凝固作用。
③选择培养基一般只生长具有特定的微生物,鉴别培养基可以存在其他微生物,而且能鉴别特定的
微生物。
注意:选择培养基的选择方法
(1)在培养基中加入某种化学物质。例如,加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌;加入高浓度的食盐
可以得到金黄色葡萄球菌这里的加入是在主要营养成分完整的基础上加入。
(2)改变培养基中的营养成分。例如缺乏氮源时可以分离出固氮微生物;石油作为惟一碳源时,可
以分离出消除石油污染的微生物。
(3)改变微生物的培养条件。例如,将培养基放在高温环境下培养,可以得到耐高温的微生物。
(-)灭菌技术
1.无菌技术的概念
在微生物培养中,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵,其主要技术是无菌操作。无菌技术
是指通过一定物理、化学的手段,防止实验室培养物被外来微生物污染。无菌技术主要围绕如何避免杂
菌污染展开的。
2.消毒、灭菌的方法
项
概念常用方法应用范围
目
使用较为温和的物理或巴氏消毒法:70〜75℃水中煮30min一些小耐图温的物体如
化学方法,仅杀死物体表或在80℃水中煮15min牛奶
消
面或内部一部分对人体煮沸消毒法:在100。。水浴中煮沸
毒一般物品
等有害的微生物(不包括5〜6min
抱子和芽抱)化学药药」消毒法:用乙醇、氯气、可用来对环境、双手和衣
漂白粉、KMnCh等药剂来杀死或抑制物等消毒
细菌生长或繁殖
紫外线消毒法:30W紫外灯照射
接种室
30.min
接种工具如接种环、.接种
灼烧火菌法:酒精灯火焰
针等
使用强烈的理化因素杀十热火菌法:在16U〜17。℃加热如玻璃器皿(吸管、培养
灭
死物体内外所有的微生1〜2h皿)和金属用具
菌
物,包括芽抱和抱子局压蒸汽灭菌:压力为100kPa,
温度为121C的条件下,维持15〜培养基及容器的火菌
30min
注意:
①无菌操作是微生物培养过程中,防止杂茵污染的关键步骤。
②消毒只能消灭或抑制营养体的活动,而不能达到彻底灭菌。酒精消毒用体积分数为70%的酒精效果最
好,因浓度过高,会使菌体表面蛋白凝固成一层保护膜,乙醇分子不能进入其中;浓度过低,杀菌力
减弱。而灭菌除杀死营养体外,,还必须杀死芽抱和抱子。
③灭菌消毒的原理,就是通过一定理化手段,使病原茵蛋白质变性,失去生命活性。
(三)微生物的纯化培养技术
1.常用细菌培养基一一蛋白陈培养基配制流程:
注意:注意:
①溶化琼脂时要控制火力的大小并不①可用高压蒸汽灭菌法
注意:分装至试管时
断搅拌,以免培养基溢出或烧焦;I②用干热灭菌法时温度160〜170℃
培养基的高度I
I注意:舞配方并真叫②加热过程中部分水分蒸发,待琼脂(不能超过180℃,否则易引起报纸等燃烧)I
不要超过试管I③一般是培养基先灭菌再倒平板,也可先倒|
制一定体积培养基I完全溶化后应补加蒸储水,以保持
高度的1/5;平板,再灭菌!
I时各成分的用量溶液的浓度।_________।
一厂k
计「--
I注意:I注意:I注意:
:①牛肉膏较粘稠,应玻棒挑取,在称油于不同微生物适宜I①倒平板时,烧杯口要通过酒精灯火焰灭菌。
;量纸上称量的pH不同,因此在熔②平板冷凝后要将平板倒置,以确保拿放方便,同时避免水分蒸发
修)牛肉膏蛋白陈易吸潮,动作要迅速|化后,必须用NaOH或以利微生物生长,也可防止皿盖上凝结的水滴滴入培养基,影响I
;HCI来调节pHpH;其次防止细菌透过皿底、皿盖的缝隙,落在培养基上。
।_____________________|③倒平板时,不能将培养基溅在皿底与皿盖之间,以防止杂菌滋生」
[污染培养基J
2.纯化大肠杆菌
I.原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌
菌落。
II.微生物接种方法:
3'
⑴平板划线法:平板划线法中细
几种划线方法示意图
胞的分离和稀释
过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中。在线的开始部分,微生物
往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成纯种的单个菌落。
(如图)
(2)稀释涂布平板法:10倍系列稀释操作
划线操作时注意:
(1)用接种环取菌种之前、每次划线之前和划线结束都要进行灼烧灭菌,灼烧后要在酒精灯附近冷却
后再操作;(第一次操作:杀死接种环上原有的微生物。每次划线之前:杀死上次划线后接种环上
残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。划线结束后:杀死接种环上残存的
菌种,避免细菌污染环境和感染操作者)
(2)划线时不要划破培养基,如果采用分段划线法操作从第二次操作应总在上一次划线末端开始,首
尾区不能相连;
(3)操作必须始终在酒精灯火焰旁进行。
涂布操作时注意:
(1)配制系列梯度稀释液时,所用的试管和移液管均需灭菌,必须用无菌水配制;
(2)涂布器用70%的酒精消毒,多余酒精在烧杯中滴尽,沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰引燃。不
要将过热的涂布器放入盛有酒精的烧杯中,一面引燃其中的酒精;
(3)配制系列梯度稀释液和转移菌液以及涂布过程等必须都在酒精灯火焰旁进行,移液管头不能接触
任何物体。
3.菌种的保存
①对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。②对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管
藏的方法。
注意:①菌种保藏的原理是:低温、干燥和隔绝空气,使微生物代谢能力和繁殖能力降低。
②不同菌种的保藏方法因不同菌种而异。需氧型,必须低温有氧,而厌氧型必须低温无氧;腐生微
生物可提供牛肉膏蛋白月东培养基,而寄生微生物需提供活体组织.等非人工培养基,如病毒需提供
活鸡胚。
(三)微生物的筛选与计数(以“土壤中分解尿素的细菌”为例)
筛选菌株--------------------------------------»菌落计数-----------------------------------I菌种的鉴定|
II
原则:天%提画而前宇回I刘煦一丽接前的南葬篡亶手和响遍度但薪静说两:症实静篁臭吞和亲南为意i
万苏一枪赫养釐「
I统计茵落数目的方法:IPH
的菌生长的条件,I的变化判断:
同时抑制或阻止苴1(1)显微镜直接计数法
原理:在细菌分解尿素1
i①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积样品中微生物数量
他微生物的生长i时,分泌的胭酶|
培养基的成分:尿素作知②方法:用计数板计数。③缺点:不能区分死菌与活菌。将尿素分解为|
1(2)间接计数法(活菌计数法)
惟一的氮源(选择墙氨,氨使培养基,
①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过
养基、固体培养基)i碱性增高,pHl
统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。升高
②计算公式:每克样品中的菌株数=(C+V)XM,其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V|
代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
I③操作:设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落数在30-300;
的平板进行计数。
菊花的组织培养
温度:18~22℃
光照:在初期菊花的组织培养需光照,月季的花药培养不需光照(有利愈伤组织
形成),二者后期均需要光照(有利叶绿素形成和光合作用)
注意:生长素和细胞分裂素的使用
使用顺序不同T结果不同
(先生长素,后细胞分裂素:有利于细胞分裂,但不分化
先细胞分裂素,后生长素:细胞既分裂也分化
材料:植物的种类、年龄、保存时间
同时使用:分化频率提高)
消毒原因:大部分来自田间,带有大量病毒、
用量比例不同T发育方向不同
细菌
(高:利用根的分化,抑制芽的形成
菊花茎段消毒:所用消毒剂为体积分数为
低:利用芽的分化,抑制根的形成注意:培养一株完整的试管苗,必须
70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化
适中:促进愈伤--组--织---的生长)先进行生芽培养,然后进行生根培
汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。A养,如果顺序颠倒,先诱导生根,
注意:不同植株或同一植株的不同部位,所
果胶酶在果汁生产中的作用
一、果胶酶的组成和作用:包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等。果胶酶能分解果胶,瓦
解植物的细胞壁及胞间层。其实质是果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。
注意:①果胶酶是分解果胶的一类酶的总称,不是一种酶。②植物、霉菌、酵母菌等细胞均能产
生果胶酶,但通常动物细胞不产生果胶酶。
③在植物细胞工程中,应用纤维素酶和果胶酶来破坏细胞壁,获得原生质体。
二、探究温度对果胶酶活性的影响
(1)实验原理:果胶酶活性受温度影响,处于最适温度时,活性最高;低于或高于最适温度,酶活性受
到抑制。即果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比。
(2)设计思路:设置一系列梯度温度,从中选出酶活性最高的温度,然后再以该温度为中心,缩小温度
梯度向两个方面各设置梯度温度,以进一步确定最适温度范围。所选择的温度只能接近
最适温度,但不一定就是最适温度。
(3)实验操作流程及注意事项
确定温度梯度一探讨控制温度的方法和措施
设计实验方案ri
LL确定水果的种类一确定制备果汁的方法一确定实验用的水果量一确定果胶酶的量一探讨测定果胶酶活性的方法:
I制备水果泥I-------4匪S7母巢「爵丽葡葡尊永窠部可以作为反的厂永巢示甬泰「茹甬军巢为原福厂二酸时按每不用辱天人
「1的苹果加水100〜200mL的比例进行搅拌,获得稀的苹果泥
I制备臬胶酶|
I水果近、果胶酶分别水浴保温卜-A原因:将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理,可以保证底物和酶在混合时的温度是相同的,
避免了果泥和果胶酶混合时影响混合物的温度,从而影响果胶酶活性的问题
水果泥、果胶酶混合水浴保温--A原餐髓而巢肢演羌芬缸反应曲面]
।过滤;出果汁T蕾蓝蠹堞漏
y通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高低原因:
I记录窠汁量4果胶酶将果胶分解为小分子物质,小分子物质可以通过滤纸,因此苹果汁的体积大小反应了果I
胶酶的催化分解果胶的能力。在不同的温度和pH下,果胶酶的活性越大,苹果汁的体积就越大|
改变不同温度后重复上面实验(也可同时进行不同温度的实验)I--A
1自变量:温度(应控制为唯一)对照:相互对照
[无关变量:果泥量、果胶酶的浓度和用量、水浴时间和混合物的
,记录表格设计温度/℃102030405060pH等所有其他条件(应控制为相同)
果汁量/mL
注意:①每个探究实验的设计,都要遵循实验设计的一般原则,特别是单因子变量控制原则。
②每个探究实验的设计思路希是大梯度差值寻找最适范围,再小梯度差值选出最适温度、pH或酶用量。
③如果随酶浓度增加,果汁体积也增大,说明酶用量不足;当酶用量达一定值时,再增加酶用量,果汁
体积不变,则说明这个值就是酶的最适用量。
④如果变量(温度、pH、酶浓度)梯度无法满足实验,即出现过高、过低等现象,则应及时调整实验。
血红蛋白的提取和分离
一、实验原理:蛋白质的物化理性质:形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千
差万别,由此提取和分离各种蛋白质。
1.凝胶色谱法(分配色谱法):
(1)原理:分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多
孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。
(2)凝胶材料:多孔性,多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖。铲/0/8
(3)分离过程:混合物上柱一洗脱一大分子流动快、小分子流动慢一收集大分子一收集小分子洗脱:
从色谱柱上端不断注入缓冲液,促使蛋白质分子的差速流动。
(4)作用:分离蛋白质,测定生物大分子分子量,蛋白质的脱盐等。
2.缓冲溶液
(1)原理:由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成(如H2c。3—NaHCCh,NaH2PCU/NazHPCU等),调节酸和
盐的用量,可配制不同pH的缓冲液。
(2)缓冲液作用:抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。
3.凝胶电泳法:
(1)原理:不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同,在电场中受到的作用力大小、方向、
阻力不同,导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。
(2)分离方法:琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
(3)分离过程:在一定pH下,使蛋白质基团带上正电或负电;加入带负电荷多的SDS,形成“蛋白
质一SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。
二、实验步骤及注意事项
应程「靛藕落痂杼檬酸辆防正血襁胡二靛逮短肝两面前正百细丽沅颉二獭血五象二④1踵直永薇[防红
红细胞___」细胞破裂)一缓慢搅拌(防止红细胞破裂释)⑤低速短时离心一⑥重复洗涤三次一⑦上清液中无黄色,表明红细胞已
洗涤干净。
的洗涤[目的:除去杂蛋白
1.样品处理
血红蛋白|过程:加蒸储水一加40%体积的甲苯一磁力搅拌器搅拌
目的:红细胞破裂,释放出血红蛋白
的释放.|注意:加入蒸储水后红细胞液体积与原血液体积要相同。加入甲苯的目的是溶解细胞膜,有利于血红蛋白的释放和分离:
1过福:离心(2000r/min)
分离血红|目的:分离血红蛋白和其他杂质
第层(最上层):甲苯层(无色透明)第层(中上层):脂溶性物质的沉淀层(白色薄层固体)
蛋白溶液结果12
第3层(中下层):血红蛋白的水溶液层(红色透明液体)第4层(最下层):杂质的沉淀层(暗红色)
2.粗分离
源理:透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内
透析--[过程:血红蛋白溶液装入透析袋一将透析袋放入磷酸缓冲液中一透析12h।
怛的:除去样品中分子量较小的杂质或用于更换样品的缓冲液|
修竦「面正馆谱桂系直面比在芟弼二曩埴幅漏胫翻液二测I曩域T二族潘语皈一便海胶颂曝药
要求:紧密、均匀(否则,会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的
凝胶色谱柱流动次序,影响分离的效果)
装填装填成功检测:①凝胶是一种半透明的介质,可在凝胶柱旁放一支与凝胶柱垂直的日光灯,检查凝胶是否装填得均匀。
②加入大分子的有色物质,观察色带移动是否均匀、狭窄、平整。如纹路或是气泡,轻轻敲打柱体以消除气泡,否则重
新装柱。
调节缓冲液面卜-»肝并街i桂下襦的流曲ET便桂丙源胶而王的凌沛液夔廛下晦到耳硬胶而乖弄「奚丽田五
而破葡透析后丽前曾靡环缀稼丽画1廨丽麻厂加S后7币并下端由瓦一便痒鬲丽麻凝丙;等询免至函
加入蛋白质样品卜一:入藩胶层后,关闭出口
调节缓冲液面I------H加入20mmol/L的磷酸缓冲液到适当高度1
胡萝卜素的提取
一、胡萝卜素基础知识
1.原理:根据胡萝卜素易溶于有机溶剂的特点,可采取有机溶剂萃取的方法来提取胡萝卜素。即将粉
碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡,使胡萝卜素溶解在有机溶剂中,再蒸发出有机溶剂可
获得。
2.萃取剂的选择
(1)有机溶剂的分类:分为水溶性(如乙醇和丙酮)和水不溶性(如石油醴、乙酸乙酯、乙酸、苯、
四氯化碳)两类。多数对人体有一定毒性。
(2)选取萃取胡萝卜素的有机溶剂的原则
①具有较高的熔点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶;②萃取效率高;③对人无毒、不易
燃、易与产品分离、不影响产品质量
萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素且不与水混溶。另外,还要
考虑对人体是否有毒性等安全问题。因乙醛的沸点较低,苯和四氯化碳对人体有毒性,所以本实验选用
石油醴或乙酸乙酯作为萃取剂。
注意:
二、操作流程及注意:价选择干燥的滤纸,为防止操作时滤纸的污染,应尽量避免用手直接接
触滤纸,可以戴手套进行操作
您点样时应注意点样斑点不能太大(直径应小于0.5cm),如果用吹风机
|目禹:除王看抗溶剂蓑宣:塞同装亶吹干,温度不宜太高,否则斑点会变黄
目的:除去水分
卜主意:①不能明火加热⑶卷纸时注意滤纸两边不能互相接触,以免因毛细现象导致溶剂沿滤纸
注意:控制温度、
②收集瓶口可用锡箔或牛皮纸遮盖1两边的移动加性,溶剂前沿不齐,影响效果________________________
时间
胡萝卜粉碎干燥萃取过滤浓缩胡萝卜素胡萝卜素粗品的鉴定
I--1-
|目的:便于胡萝卜素i归的:使胡萝卜素充分溶解11目的:i方法:纸层析法,
能充分溶解;1注意:①不能明火加热馋去颗粒]除理:混合物各组分在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上的扩散速度不同,溶解度大的
j注意:颗粒要小②冷凝回流,防萃取1匿罡曳」随层析液在滤纸上的扩散速度快,反之则慢,这样,同一种物质在滤纸上的扩散速度相同,
最终位置也相同。
影响因素:主要是萃取剂的流程:量作基线:下端距底边2cm处划基线,在基线上取A、B、C、D四个点
性质和量;其次是原料对照点样:在A、D点点标准样品,B、C点点提取样品
颗粒的大小、紧密程度、干燥层析:吹干滤纸溶剂,放入层析容器中层析
含水量、萃取的温度、对比观察:对比观察样品色素点与标准色素点的异同。
萃取时间的长短等结果分析:如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带,说明提取胡萝卜素的实验成功。由
于提取物中含有杂质,萃取样品的颜色可能比标准样品的颜色浅,我们也可以通过颜
色的比较,初步确定提取的胡萝卜素的量。
2022年1月January
•二三四五六日
12345
元旦腊八节初九初十H*
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