四川茶区引进的茶树特色品种黄金芽金光和郁金香生理生化特性的初步研究_第1页
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文档简介

SichuanSichuanAgriculturalUniversityDISSERTATIoNSubmittedinpartialfulfillmentofrequirementforMASTERDEGREEAPreliminaryStudyonPhysiologicalBiochemicalCharacteristicsoftheIntroducedTeaCultivarsHuangJinya,JinGuangandYuJinxiang。Sichuain 1eaareaByHanNanDirectedbyProf.TangQianYa’an625014,Sichuan,China2014.6万方数据论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:爹争戈莉 沪c尸年/B莎日关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。}凹本论文不保密。 口本论文保密,在一年解密后适用本授权。(请在以上口内划“√”)研究生签名: 辫岁翻 纱t脾么B铲日导师签名: ∥,髟年∥月占日万方数据四川农业大学硕士学位论文摘要四川农业大学硕士学位论文摘要本文以国家级茶树良种福鼎大白茶作为对照(CK),研究了从浙江茶区引进四JJlJtl西茶区的3个特色茶树品种郁金香、黄金芽和金光的生长势、物候期、芽叶性状、主要生化品质成分含量及组分,叶片光合特性和抗性等指标,以了解引进品种的生理生化特性,并为其在四川茶区的推广利用提供参考。研究结果表明:(1)郁金香、黄金芽和金光的生长势均弱于照福鼎大白茶,但郁金香生长势较黄金芽和金光强。物候期观测结果显示,3个引进品种2012、2013年的发芽期比对照福鼎大白茶分别晚8~1ld、4,-,20d;但郁金香早于黄金芽和金光,金光最迟,属晚生型品种,其余2个品种属中生型品种。(2)3个引进品种均具有芽叶柔软,持嫩性强的特性,茸毛较多,育芽能力较强,发芽密度中等。但新梢和嫩叶色泽各品种间存在一定差异,郁金香均呈黄色,黄金芽呈金黄色,金光春季呈黄色、夏秋季节为黄中带紫,对照福鼎大白茶为黄绿色。供试品种的芽叶长度及百芽重均小于对照,表明新梢生长势和生长量均低于对照,芽叶较细弱,适宜制作外形纤细的名优茶。(3)主要生化成分测试结果表明:郁金香春、夏、秋梢的水浸出物含量为36.54%--44.15%,咖啡碱含量3.53%,--4.36%,氨基酸含量3.66%,--6.92%,茶多酚含量为19.52%.-,22.51%;黄金芽水浸出物含量32.48%,.-46.00%,咖啡碱含量为3.0“.45%。氨基酸含量为3.29%--6.22%,,茶多酚含量15.8%,-,21。39%;金光水浸出物含量为41.50%--43.67%,咖啡碱含量为2.70%-3.94%,氨基酸含量为3.24%5.96%,茶多酚含量为20.40%25.51%。除郁金香的春梢和黄金芽秋梢外,供试品种春、夏、秋梢的水浸出含量均高于40%,表明3个引进品种内含物总体较丰富。各品种春、夏、秋三季新梢的氨基酸总量均显著高于对照,其中,春梢氨基酸总量均在6%左右。从氨基酸组分来看,郁金香、金光、黄金芽春梢的19种氨基酸总量比对照高33.46%、8.70%和13.92%。各品种春梢茶多酚含量高低顺序为:福鼎大白茶>金光>郁金香>黄金芽,分别比对照福鼎大白茶低4.63%、8.74%和26.13%;但金光夏、秋梢茶多酚含量分别比对照高4.46%、7.64%,而郁金香、黄金芽则分别比对照低0.05%、8.31%。春、夏季3个引进品种咖啡碱含量均高于对照,秋季表现为郁金香>黄金芽>对照>金光。黄金芽、金光儿茶素总量显著高于对照,郁金香显著低于对照。从组分来看,各万方数据四川农业大学硕士学位论文品种的非酯型儿茶素(EGC+EC)含量低于酯型儿茶素含量(EGCG+ECG)。郁金四川农业大学硕士学位论文品种的非酯型儿茶素(EGC+EC)含量低于酯型儿茶素含量(EGCG+ECG)。郁金香儿茶素品质指数高于对照,其余两个品种均不及对照。3个引进品种春梢酚氨比均在5以下,且氨基酸含量均在6%左右,因此,生产名优绿茶,具有滋味鲜爽的物质基础;夏秋季酚氨比处于5.85~7.87之间,也适宜制作大宗绿茶。(4)从光合特性来看,3个引进品种的净光合速率(P11)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)、胞间C02浓度(Ci)、水分利用率(WUE)之间有较为明显的差异。其中,郁金香与对照福鼎大白茶相当,具有较高的净光合速率和水分利用率,较大的气孔导度、较强的C02累积能力和光响应能力,说明该品种光合能力相对较强。3个引进品种的光饱和点和光补偿点存在较大的差异,郁金香的光合速率较高,其光饱和点也较高。三个引进品种的光合速率日变化均呈单峰型,无明显的光合午休现象,光合日变化的研究结果也表明,郁金香的光合能力略强于黄金芽和金光。(5)从田间观测结果鉴定,供试品种的抗性强弱均呈现出福鼎大白茶>郁金香>金光>黄金芽的趋势。叶片解剖结构指标初步鉴定表明,郁金香的抗性接近对照,黄金芽、金光的抗性都弱于对照。在高温干旱条件下,叶片丙二醛含量的高低顺序为:黄金芽>金光>郁金香>福鼎大白茶;黄金芽、金光脯氨酸含量显著低于对照,而郁金香与对照相当。茶树电导率高低顺序为黄金芽>金光>郁金香、福鼎大白茶。3个引进品种的SOD酶活性、POD酶活性、CAT酶活性为均显著低于对照,活性高低顺序为福鼎大白茶>郁金香>金光>黄金芽的趋势。这些结果表明,在干旱条件下,对照福鼎大白茶、郁金香的抗性较黄金芽、金光强。低温条件下,3个引进品种的SOD酶活性、CAT酶活性与干旱条件下的表现趋势一致,显著低于对照。POD酶活性则表现为福鼎大白茶>黄金芽>金光>郁金香。三个品种的丙二醛、脯氨酸含量与均对照相当,相对电导率为:黄金芽>金光>郁金香>福鼎大白茶。综合干旱和低温环境下各品种的抗性指标的测试结果,郁金香抗寒、旱性比对照福鼎大白茶略弱,但显著高于其余两个品种。(6)对三个引进品种在川西茶区生长势、物候期、主要生化成分含量及配比、光合特性和抗性强弱进行综合评价,郁金香较黄金芽和金光生长势旺,光合效率高,生产潜力较大;从生化成分来看,其内含物较丰富,且氨基酸含量高,酚氨比低,具生产II万方数据四川农业大学硕士学位论文滋味鲜醇、品质优异的名优级绿茶的物质基础:其抗性和适应性也强于黄金芽和金光,四川农业大学硕士学位论文滋味鲜醇、品质优异的名优级绿茶的物质基础:其抗性和适应性也强于黄金芽和金光,综合性状相对较优;加上芽叶黄色具观赏价值,可以作为特色品种和观赏品种适当引入四川茶区,进行搭配种植。黄金芽和金光也具有生产优质、特色茶叶的生化基础,也具观赏价值,但其长势和抗性均较弱,只适宜小面积引进种植,同时,在栽培管理中,应加强水肥管理以及病虫害和自然灾害的防御,以提高产量和种植效益。关键词:茶树品种生化成分抗性光合作用III万方数据四川农业大学硕士学位论文AB四川农业大学硕士学位论文ABSTRACTThisarticletakethenationalimprovedteacultivarFudingdabaichaasthecontrol(CK),theexternalformofteatrees,stagesingermination,charactersofleaves,mainbiochemicalcompositionsoffreshleaves,fluorinecontentsandindirectindexesofresistanceoftheHuangJinya,JinGuangandYuJinxiangwhichwerefirstlyintroducedfromZhejiangProvincetoSichuanteaareawerestudiedtoanalyzethecomprehensiveperformanceofthethreecultivarsinSichuanteaareaandtodeterminetheirplantingsuitability.Theresultsshowedthat:(1)ThegrowthpotentialofthethreeintroducedvarietiesYuJinxiang,HuangJinyaandJinguanginWesternSichuanteaareaaleweakerthanthecontrolofFudingdabalcha,theYuJinxiangisbetterthanHuangJinyaandJinGuang.Phenophaseresultshowsthat:thegermination periodofthese 3 introduced varieties in2012and 2013 are8-1lday’S,4~20day’SlaterthanthecontrolFudingdabaicha;butYuJinxiangisearlierthanHuangJinyaandJinGuang,JinGuangisthelatest,whichisbelongingtothelatematuringvarieties,whiletheothertwovarietiesbelongingthetypeofmedium-birthvarieties.(2)Thecharactersofbudandleafofthesethreeintroducedvarietieswithsoftbudandleaves,elongatingtendernesslastingtimeofthestrongcharacteristics,morehair,strongbud-germinationability,mediumdensity,andcontr01.Bmthecolorofnewshoothavecertaindifferenceineachvarieties,YuJinxiangisyellow,HuangJinyaisyellow,JinGuangisyellowinthespringwhileitisyellowwithpurpleinsummerandautumn,thecontrolFudingdabaichaisolivine.Thelengthandweightofeachvarieties’shootarelessthanthecontrol,showedthatthegrowthpotentialandgrowthrateofnewshootwerelowerthanthecontrol,thebudsandleavesarethin,suitableformakingfamoustea.(3)Theresultsofmainbiochemicalcomponentstestshowedthat:thewaterextractofYuJinxianginspring,summer,autumnare36.54%--44.15%,thecontentofcaffeinecontentofaminoacid3.53%--4.36%,3.66%--6.92%,teapolyphenolcontentof19.52%~22.5l%;ThewaterextractofHuangJinyais32.48%--46.00%,caffeinecontentis3.04--4.45%.Aminoacidcontent,3.29%--6.22%,15.8%21.39%contentofteapolyphenols;ThewaterextractofJinGuang is41.50%--43.67%,caffeinecontentis2.70%-一3.94%,thecontentofaminoⅣ万方数据四川农业大学硕士学位论文acid四川农业大学硕士学位论文acidis3.240/o,-,5.96%,thecontentsofteapolyphenolsis20.40%--25.51%.ExceptspringshootsofYuJinxiangandautumnshootsofHuangJinya,Thewaterextractofspring,sumlner,autumnshootswerehigherthan40%intestedcultivars,showedthatthe3introducedvarietiesalerelativelyrichininclusions.Thetotalaminoacidsofnewshootsofallvarietiesinspring,summer,autumnwerehigherthanthecontrol,amongthem,thetotalaminoacidsofspringshootswereabout6%.Fromtheaminoacidcompositionofview,YuJinxiang,JinGuang,HuangJinyaofspringshootsof19kindsofaminoacidswerehigherthanthecontrolby33.46%,8.70%and13.92%.Allvarietiesofspringshootsofteapolyphenolcontentsequenceis:Fudingdabaicha>JinGuang>YuJinxiang>HuangJiny钆wererespectivelylowerthanFudingdabaichaby4.63%,8.74%and26.13%;ButteapolyphenolcontentofJinGuangwerehigherthanthecontrolby4.46%,7.64%insummer,autumn,whileYuJinxiangandHuangJinyawere0.05%,8.31%lowerthanthecontr01.3introducedvarietiesofcaffeinecontentwashigherthanCKiIlSpringandsummer,YuJinxiang>HuangJinya>CK>JinGuanginautumn.ThetotalcontentofcatechinsofHuangJinya,JinGuangsignificantlyhigherthanthecontrol,theYuJinxiangWassignificantlylowerthanthecontr01.Fromthecomponentsofview,allkindsofnonestercatechin(EGC+EC)contentislowerthantheestertypecatechinscontent(EGCG+ECG).YuJinxiangcatechinqualityindexishigherthanthecontrol,whiletheothertwovarietieswerelessthanthecontrol。Threeintroducedvarietiesofspringshootsarebelow5inphenolammoniaratio,andthecontentofaminoacidaleabout6%,therefore,theproductionoffamousGreenTeahavematerialbasisofrefreshingtaste,insunlmerandautumn,thephenolammoniaratioisbetween5.85-7.87,alsosuitablefortheproductionofbulkGreenTea.(4)Fromthephotosynthesischaracteristicofview,thereissignificantlydifferencebetweenthenetphotosyntheticrateoflight(Pn),transpirationrate(TO,wateruseefficiency(WUE),stomatalconductance(Gs),intercellularC02concentration(Ci)ofthe3characteristicsintroducedteacultivars.Amongthem,theYuJinxiangissimilartothecontrolFudingdabaicha,showedhighernetphotosynthesisandwateruseefficiency,bettertranspirationcapacity,largerstomataconductance,strongC02accumulationabilityandV万方数据四川农业大学硕士学位论文light四川农业大学硕士学位论文lightresponseability,indicatingthatthisvarietyhasrelativelystrongabilityinphotosyntheticcapability.Threeintroducedvarietiesoflightsaturationpointandlightcompensationpointhavebigdifference,thephotosyntheticrateofYuJinxiangishigher,thelightsaturationpointis alsohigher.Changesinthethreeintroducedspeciesofphotosyntheticrateshowedasinglepeaktype,noobviousmiddaydepressionofphotosynthesis,Photosynthetic diurnal variation studies also showed that,thephotosyntheticcapacityofYuJinxiangisslightlybetterthanHuangJinyaandJinGuang.(5)Observationsfromfieldidentification,resistanceofthreeintroducedvarietiesshowedthetrendthat:Fudingdabaicha>YuJinxiang>JinGuang>HuangJinya.Thepreliminaryresultsofleafanatomicalstructureobservationshowedthat,theresistanceofYuJinxiangissimilartothecontrolFudingdabaicha,theresistanceofHuangJinyaandJinGuangisweakerthanthecontr01.Intheconditionofhightemperatureanddrought,fromtheMDAcontentpointofview,thecontentsequenceshowedthat:HuangJinya>JinGuang>YuJinxiang>Fudingdabaicha,TheprolinecontentofHuangJinya,JinGuangwassignificantlylowerthanthecontrol,whileYuJinxiangwassimilartothecontr01.TheelectricalconductivityofteasequenceshowedthatHuangJinya>JinGuang>YuJinxiang,Fudingdabaicha.TheSODenzymeactivity,PODenzymeactivity,CATenzymeactivityof3introducedvarietiesweresignificantlylowerthanthatofthecontrol,TheactivityleveloftheorderisFudingdabaicha>YuJinxiang>JinGuang>.HuangJinya.Theseresultsindicatedthat,underdroughtconditions,theresistanceofcontrolFudingdabaicha,YuJinxianga陀strongerthanHuangJinya,JinGuang.Undertheconditionoflowtemperature,consistentperformancetrendofthethreevarietiesoftheSODenzymeactivity,CATenzymeactivityasdroughtconditions,significantly lowerthan the contr01.POD enzymeactivity showedthattheFudingdabaicha>HuangJinya>JinGuang>YuJinxiang.ThecontentofMDA,prolineofthesethreevarietiesaresimilartothecontrolFudingdabalcha.Therelativeelectricconductivityshowedthat:HuangJinya>JinGuang>YuJinxiang,Fudingdabaicha.VI万方数据四川农业大学硕士学位论文The四川农业大学硕士学位论文Thetestresultsofa11varietiesresistantindexofcomprehensiveindroughtandlowtemperatureenvironmentshowedthat:ThedroughtresistanceandcoldresistanceofYuJinxiangisslightlyweakthanthecontrolFudingdabaicha,butsignificantlyhigherthantheothertwovarieties.(6)ComprehensiveevaluationofthreevarietiesinWesternSichuanteaareagrowth,phenology,themaincontentofbiochemicalcomponentsandratio,photosyntheticcharacteristicsandresistance,allcultivarshaddifferentcharacteristics.Amongthem,theYujinxiangisnuangJinyaandglitteringwithvigorousgrowth,highphotosyntheticefficiency,productionpotentialislarge;fromthebiochemicalcompositionofview,thecontentsisabundant,andthehighcontentofaminoacids,phenolmm'noniaratioislow,thematerialbasisofproductionfreshandpuretaste,excellentqualityofhighGreenTea;itsresistanceandadaptabilityisstronginthenuangJinyaandJinguang,relativelybettercomprehensivetraits;plusbudleafgoldyellowwithornamentalvalue,CanbeusedasthecharacteristicsofcultivarsandvarietiesofornamentalsuitableSichuanteaarea,mixplanting.HuangJinyaandJinguangalsohasthebiochemicalbasisofproductionquality,characteristicsoftea,andomamentalvalue,butitsgrowthandresistancearepoor,onlysuitableforsmallareaplantedatthesametime,intheintroduction,cultivationandmanagement,shouldalsopayattentiontostrengthenmanagementofwaterandfertilizeranddefensivepestandnaturaldisasters,inordertoimprovetheyieldandbenefit.Keywords:TeaculfivarsPhysiologicalandbiochemicalqualitycomponentsResistance PhotosynthesisVII万方数据四川农业大学硕士学位论文目四川农业大学硕士学位论文目 录摘 要 IABSTRACT Ⅳ目蜀匙 i1.文献综述 一11.1研究背景 。11.2国内外研究现状 .31.2.1国内外育种现状及发展趋势 31.2.2四川茶区引进品种适应性研究 61.2.3茶树品种生物学特性研究 81.2.4茶树品种主要生化成分研究 81.2.5茶树品种抗性研究 91.2.6茶树品种光合特性研究 ..101.3研究目标 111.4研究内容 122.材料与方法 132.1试验材料 .132.2主要试剂 132.3主要仪器 132.4试验方法 132.4.1茶树树势和生长势观测 ..132.4.2营养芽萌发期观测 ..132.4.3新梢生长势与芽叶性状观测 ..142.4.4鲜叶主要品质生化成分测定 ..142.4.5光合特性研究 142.4.6抗性的鉴定 152.5数据处理 163.结果与分析 17万方数据四川农业大学硕士学位论文3.1茶树生长势比较四川农业大学硕士学位论文3.1茶树生长势比较 173.2物候期观测 173.3芽叶性状观测 183.4主要品质生化成分与组分分析 203.4.1主要品质生化成分 ..203.4.2氨基酸组分分析 。233.4.3儿茶素组成成分比较 。253.5光合特性研究 253.5.1 3个引进品种主要光合特性的研究 253.5.2 3个引进品种的光响应曲线 283.5.3 3个引进品种净光合速率日变化的研究 293.5.4 光合作用各参数与环境因子的相关性分析 ..303.6抗性研究 323.6.1田问抗性自然鉴定 323.6.2叶片解剖结构观测 ..343.6.3抗性的间接鉴定 ..354结论与讨论 .384.1结论 ..384.2讨论 。41参考文献 .42致谢 。 .46万方数据四川农业大学硕士学位论文1.文献综述四川农业大学硕士学位论文1.文献综述1.1研究背景茶树[Camelliasinensis皿.)0.Kuntze],多年生常绿木本植物,原产自中国的西南山区,是我国重要的经济作物。茶树作为我国南方山区的主要经济作物,在满足人民消费需求的同时亦成为当地农民脱贫、致富、增收以及地方政府增加财政收入和出口创汇的重要支柱产业。四川位于西南茶区,是茶树原产地和我国古老茶区之一,栽植茶树已有3000余年历史,是有文字记载可考的最早人工栽植培育茶树的地方,亦是茶文化的发源地之一。四川在茶叶饮用、生产加工、贸易出121方面均有特殊贡献【l】。四川发展茶叶生产具有优越的自然条件,悠久的栽培历史,丰富的茶树品种资源,深厚的茶文化历史底蕴,较好的产业基础,丰富的劳动力资源,突出的产业竞争优势,近十多年来,四川茶产业得到健康稳定的发展。至2011年,四川茶园总面积为350万亩,比2010年增加了21.65万亩,增长了6.6%。其中,无性系良种茶园面积所占的比例为52.8%;茶叶总产量达到17万吨,总产值75亿元,分别增长O.5%、12.3%;面积、产量、产值分别居全国第3位、第4位和第5位【2】。但四川茶产业的发展还受到了较多不利因素的影响和制约,主要存在以下几个问题。第一,茶树品种改良和繁育推广速度比较慢,良种茶园面积比例小,良种化比例较低(低于55%),低于福建省(95%)和贵州省(82%),也远低于肯尼亚、日本等产茶国,导致名优茶发展后劲不足。第二,茶园老化现象严重,机械化、产业化程度低。四川约有三分之一的茶园是上世纪七、八十年代发展起来的,树龄达到三、四十年,树势衰退、抗病虫害能力弱、导致部分茶园低产劣质,影响了四川的茶树种植效益,使得茶叶产值位于全国第四,低于浙江(产值全国第一)、福建(产值全国第--)等省。第三,主栽品种较单一,突破性、特异性良种稀缺,品种结构不合理。现有的当家品种主要为福鼎大白茶、福选9号、名山白毫三个,制作名优茶过分依赖上述三个品种,产品质量缺乏特色,同质化现象较严重【3】。茶业发展,良种先行。良种是发展茶叶产业最为重要的物质基础。为了丰富四川茶区的茶树种质资源,急需引进或选育一批适宜在四川茶区推广的优质、特异和具有特色的品种,并通过品比试验和筛选,将之作为四川茶区的搭配品种或贮备品种,从万方数据四川农业大学硕士学位论文而使四川的茶树品种资源更加丰富,良种化进程也能得到进一步提高。同时,可提供优质、特色的名优茶原料,开发特色名优茶,以丰富四川名优茶产品,使名优茶生产四川农业大学硕士学位论文而使四川的茶树品种资源更加丰富,良种化进程也能得到进一步提高。同时,可提供优质、特色的名优茶原料,开发特色名优茶,以丰富四川名优茶产品,使名优茶生产得到可持续发展,还可实现茶农增收,增加茶叶产业经济效益,提高四川茶叶的核心竞争力。将省外良种引种到四川茶区,如适宜在四川栽培种植,可以进一步丰富四川茶区的茶树种质资源。浙江是我国的产茶大省,十分重视茶树新品种的选育[41。近年来,中国茶叶研究所、浙江大学茶学系等先后选育了中茶302、黄金芽、金光、郁金香等茶树新品种。黄金芽属珍稀白化茶新品种,由浙江大学茶叶研究所、浙江省余姚市林特总站等单位经近十年时间才选育而成;金光源于当地群体种的自然变异枝,经系统选育而成;郁金香源于当地群体种的自然变异种,是经宁波市科技人员多年努力开发的新品种【5川。这三个品种在当地性状表现较优良,其春、夏、秋茶三季新梢颜色均为黄色,具有很高的观赏价值和经济价值;对各引进品种的生化内含物和制茶品质测定结果表明,3个品种的氨基酸含量较高,叶绿素和茶多酚含量较低,适合制绿茶;以其为原料制出的名优绿茶外形条索紧细,色泽黄绿明亮,冲泡后香气高长鲜爽,汤色鹅黄,清澈明亮,滋味回甘,叶底形似风羽;茶树芽壮叶厚,栽培容易。优良的品质特点使其成为茶中珍品,生产效益显著【5~。2009年10月,四川农业大学茶学系育种团队从浙江茶区引进黄金芽、金光、郁金香三个优质、特色无性系茶树良种,并在四川名山茶树良种场布置了品比试验。由于品种具地域性,四川茶区与浙江茶区的生态与土壤条件有较大差异,因此,三个品种引进四川茶区后,其产量、品质、生物学性状、抗逆性和适应性均需系统的研究和鉴定,才能为三个品种在四川茶区的引进推广和开发利用提供依据。本课题以四川主栽优良品种福鼎大白茶作为对照,主要研究3个引进品种的树势和生长势、新梢性状、光合以及呼吸特性、主要生化品质成份的含量和配比,同时采用田间鉴定与间接鉴定方法鉴定其抗性强弱,以了解其生理生化特性,由此评价和鉴定3个品种在四川茶区的适应性和推广种植前景,同时,可根据三个品种的特性,针对性制定出与各品种特性相匹配的科学栽培措施,为其推广提供依据和技术保证。万方数据四川农业大学硕士学位论文1.2国内外研究现状四川农业大学硕士学位论文1.2国内外研究现状1.2.1国内外育种现状及发展趋势茶树品种由人类培育并选择、创造,其经济性状和农业生物学特性符合生产和消费的要求,是具有一定经济价值的重要农业生产资料。茶树良种具有某些特别优良的经济性状,是经权威机构审定和认可的、能满足人们某种需求的茶树品种。茶树良种具增产、提质和提高抗性的作用,因此茶业发展,良种先行,应加强优良品种的引进筛选、选育和推广应用工作。1.2.1.1国外茶树育种与良种推广工作世界上的主要产茶国,包括:中国、印度、斯里兰卡、肯尼亚、印度尼西亚,五国的茶叶总产量约占世界茶叶总产量的80%左右。近年来,茶树新品种选育与推广已成为以上各主要产茶国研究工作的重点。同时选育性状优良、稳定,产量高,抗性强,具有特色的茶树品种资源,已成为各国主要的育种目标。日本对茶树育种工作十分重视,其育种技术已从早期的常规育种,逐步发展到现在的杂交育种、分子标记辅助育种以及多倍体育种等生物育种技术[g-9l,同时,日本还研究茶与其它山茶科种植物的远缘杂交。目前,日本共保存茶树资源4200余份,选育茶树良种54个。印度总共搜集了约3350多份茶树种质资源,已选育茶树良种29个。早在1996年,印度就已应用生物标记法进行茶树品种选育和鉴定,以缩短茶树的育种年耐10‘11】。印度尼西亚至目前止,共搜集茶树品种资源600多份,包括“外来品种”、“地方品种”、“育成品种";以传统育种为其主要育种途径;在分子标记辅助育种方面还未有报道【12】。土耳其对茶树种质资源的收集以及无性系品种的选育十分看重;目前已选育出有希望的无性系品种64个【13】。韩国的茶树品种由80%的当地群体品种和20%从外国引进的无性系品种组成。至目前为止,韩国的茶树品种由80%的当地品种和20%从外国引进的无性系品种组成,已系统选育了7个无性系茶树新品种【14】;其选种工作较为系统、全面,技术也较为成熟,取得了一些进展。万方数据四川农业大学硕士学位论文1.2.1.2我国茶树育种与良种推广工作进展四川农业大学硕士学位论文1.2.1.2我国茶树育种与良种推广工作进展茶叶竞争是质量竞争,归根到底是品种竞争。用优良的品种实现增产、提质和增效,同时也是优化、调整茶树种植结构、产品结构,是实现茶产业可持续发展的有效途径。自20世纪50年代以来,我国在全国范围内对茶树品种资源进行调查,同时,还进行了新品种的选育与推广。1984年认定了第一批国家级茶树良种30个;1987年、1994年和2001年审定通过了第二、三、四批国家级新育成的茶树良种65个,以后又陆续审(认、鉴)定通过了28个,到目前已培育出国家级良种123个,各产茶省(区)也审(认)定了一批省级地方茶树良种100余个,20世纪90年代茶树育种目标已由高产型向优质型、多抗型转变,育种方法由系统选种转为以杂交育种为主。截止至20世纪80年代中期,在全国各地保存的茶树种质资源达3500多份。1990年,两个国家级茶树种质资源圃分别在浙江杭州和云南勐海建成,共保存茶树种质材料2600余份。目前,我国主要产茶省无性系良种的比例及茶园面积如表1所示【15‘23】:表1我国各地区无性系比例及茶园面积和产值(2012)Table1Proportionofclonesofeachregionandtheteaplantationandproductionvalue(2012)万方数据四川农业大学硕士学位论文从表1可看出,各产茶省良种覆盖率有较大的差异,其中,福建省的良种覆盖率四川农业大学硕士学位论文从表1可看出,各产茶省良种覆盖率有较大的差异,其中,福建省的良种覆盖率最高,达到95%,其次是贵州省,为84%,浙江省和广东省也达到了60%以上。四川省良种覆盖率为55%,低于上述几个产茶省,需进一步加快良种化进程。目前,四川收集、保存的茶树种质资源材料1000多份,且野生大茶树广泛分布于四川各地区,可为新品种选育提供丰富的育种材料。同时,为丰富本地的茶树种质资源,四川陆续从省外引进100余个国家级、省级茶树优良品种。然而,四川仍面临主栽品种较单一,突破性良种稀缺、品种结构不合理等问题,需进一步加强新品种的引进筛选、选育及推广工作。1.2.1.3育种工作的发展趋势茶树已成为我国乃至全世界范围内极具发展潜力的经济作物和饮料作物,从茶树生产发展的趋势来看,选育高产、优质、适应性强、高抗、适应机械化生产要求的优良品种,以此满足人民日益增长的生产和消费需求,已经成为茶树育种的主要目标。目前,对茶树品种进行选育,大多采用的是系统育种和杂交育种这两种常规的育种方法。其原理主要是系统选种选择自然变异,杂交育种则是通过人工杂交把父母本的优良性状基因互补于子代,即根据自然变异和人为地、有目的地创造变异来进行茶树新品种选育。为了提高育种效率,茶叶科技人员加强了育种技术和手段的研究。以现代科技发展为支撑,茶树育种技术已有飞跃发展:分子遗传技术已经渗透到茶树遗传多态性和分子标记领域;形态学、细胞学技术亦开始得到广泛重视;基因克隆、分子育种、抗性育种、辐射育种、激光诱变育种等技术也开始逐步成熟。陈振光等(1983)利用茶树花药培养获得单倍体植株尚属首次[241。张贻礼、杨阳(1972~1996)采用60Co-,、/辐照福鼎大白茶种子,从M1中选育出高产、红绿茶兼制的茶树省级良种福丰(辐福_)【251。杨跃华等(1989)研究证明,用60Co-一、/射线辐射处理能提高茶树的抗寒性、抗旱性并能提高产量和品质【26J。刘宝祥、黄亚辉等(1986--1992)利用茶树茎尖对茶树进行组织培养皿7~28】。分子标记技术在茶树育种上的研究起步较晚,但发展较快。基因工程育种在现阶段虽处于起步阶段,但其在提高茶树品质、增强茶树抗性方面仍有万方数据四川农业大学硕士学位论文很大上升空间。为保障我国茶树资源的丰富性和可持续性,今后,茶树育种主要向优质、特色、高抗和多元化方向发展,应因地制宜地加强对高香、早生、高抗、有特异性等具有某个突出特征的新品种的选育和引进筛选。具体到四川茶区,应根据四川茶区的茶叶生产特点,把品质育种和抗性育种作为未来茶树育种的主要目标;利用传统四川农业大学硕士学位论文很大上升空间。为保障我国茶树资源的丰富性和可持续性,今后,茶树育种主要向优质、特色、高抗和多元化方向发展,应因地制宜地加强对高香、早生、高抗、有特异性等具有某个突出特征的新品种的选育和引进筛选。具体到四川茶区,应根据四川茶区的茶叶生产特点,把品质育种和抗性育种作为未来茶树育种的主要目标;利用传统品种选育方法、手段以及现代生物技术手段,选育出具有突破性的茶树品种,如高氨基酸、高香和高抗等品种,并在生产推广应用。与此同时,为丰富四川的品种资源,还需从国外及省外引进优良、特色品种,经品比试验,可从中筛选适宜四川推广种植的良种,这也是加快四川良种化进程的有效捷径。如我省目前主栽茶树品种福鼎大白茶,上世纪六十年代从福建省引进,由于产量、品质、抗性等综合性状优良,适应性强,在我省各茶区广泛推广种植,一直是我省的主栽品种。1.2.2四川茶区引进品种适应性研究近年来,四川茶区从浙江、福建、贵州等茶区引种了平阳特早、中茶302、中茶108等大量国家级、省级茶树良种。由于品种具地域性,四川茶区与原栽培地的生态与土壤条件有较大差异,因此,茶树品种引进四川茶区后,其产量、品质、生物学性状、抗逆性和适应性均需系统的研究和鉴定。寒葭(1982)[291对黔眉303引种至雅安的变异情况进行了研究。结果表明:受引种后生态环境、气候因素影响,黔眉303叶片增大变薄、栅海比和叶着生角度变小:其内含物质的变化也较为明显,具体表现为:氨基酸含量增加,茶多酚含量减少,酚氨比降低,制得绿茶的品质更优。唐茜等(2006)【3明对平阳特早、乌牛早和元宵茶等11个浙江福建引进I四)ll茶区的茶树良种的主要光合生理指标、光合日变化进行了对比研究,并对各品种的光响应曲线进行了拟合。所得结果显示:不同品种的净光合速率日变化存在明显的差异,主要是单峰型和双峰型两种。平阳特早、元宵茶、乌牛早等5个品种的净光合速率、蒸腾速率和气孔导度较高,光合作用能力以及生产潜力较好,同时这5个品种还具有光补偿点较低、光饱和点较高的特点,对弱光的利用能力也较好,光利用潜能较高。所以从光合特性角度来考虑,这5个品种更适合在四川茶区进行推广。同时,唐茜等(2007)【3l】以福鼎大白茶为对照,对浙江福建引进的乌牛早、平阳特早、龙井长叶等12个茶树良种的叶片解剖结构、SOD酶活性、CAT酶活性和新梢电导率进行了比较6万方数据四川农业大学硕士学位论文和抗性间接鉴定,同时采用田间观测方法对各品种抗性进行田间自然鉴定。对其进行四川农业大学硕士学位论文和抗性间接鉴定,同时采用田间观测方法对各品种抗性进行田间自然鉴定。对其进行田间调查以及间接鉴定各生理指标的结果表明:平阳特早、乌牛早、浙农113、浙农117、劲峰、翠峰、春波绿和龙井43这8个品种在抗性方面表现较为良好,强于对照或与对照相当:迎霜、元宵茶、菊花春、龙井长叶的抗性比对照弱,引进推广时应当慎重考虑。曾建明等(2009)[321对引进西南茶区的茶树新品种进行引种试验。结果表明:中茶102、中茶108、中茶302、龙井长叶等4个品种生化成分含量均表现出适制优质绿茶的特征,但需防治螨类及黑刺粉虱侵害。刘家红等(2010)[331对“龙井长叶”、“龙井43”、“迎霜”、“浙农113”、“浙农117"等5个浙江品种引进四川名山后化学成分的变化进行了研究。结果表明:受川西茶区多云雾、高湿度、多漫射光的气候条件影响,氨基酸合成量增多,水浸出物含量增加,酚氨比减小,制得得名优绿茶品质更好。由此可见,合理引种对扩大优良品种的分布范围,提高茶叶制茶品质都有有利影响。李品武等(2011)阴5】研究和鉴定了从浙江引入川西茶区的5个茶树良种的营养芽物候期、芽叶性状、主要生化成分以及名优茶品质。从所得结果可以看出:乌牛早和劲峰2个品种所制的名优绿茶品质优良,适宜在川西茶区推广种植;浙农117制茶品质良好,可进行适当引进;迎霜和龙井长叶所制名优茶品质优异,但发芽期较迟,可搭配种植,以此调节采摘期。李建华等(2012)[361对四川茶区引进的13个茶树品种进行了比较研究。对其水浸出物、茶多酚、咖啡碱等生化成分进行了研究测定,结果表明:平阳特早、龙井43、福鼎大白茶、菊花春这4个品种更适合制作名优绿茶。其余品种在适应四川茶区气候环境的同时亦形成了自身的生长特点。段小风等(2013)[37】以四川茶区主栽品种福选9号作为对照,对从浙江省引进四川茶区的3个茶树良种:中茶108、中茶102、中茶302的绿茶适制性和制茶品质进行了研究。研究结果显示:以各品种春梢为鲜叶原料所制成的绿茶,其氨基酸含量丰富,且显著高于对照福选9号;茶多酚含量、儿茶素含量以及酚氨比显著低于对照;段小风等同时还对这3个引进品种所制的绿茶成茶进行了感官审评,结果表明:以中茶108、中茶302为原料所制成的绿茶,苦涩味低、滋味鲜爽,这两个品种的制茶品万方数据四川农业大学硕士学位论文质显著高于对照,中茶102则与对照相当。测定其香气成分的结果显示:中茶108、四川农业大学硕士学位论文质显著高于对照,中茶102则与对照相当。测定其香气成分的结果显示:中茶108、中茶302中所含香气成分为37种,中茶102中则有38种。1.2.3茶树品种生物学特性研究茶树是以采摘新梢为原料的经济作物,其芽叶性状会随外界环境条件变化和茶树品种不同而变化,不同品种的芽叶性状、新梢生育期、发芽密度、芽头数、百芽重均有不同。根据茶树的生物学特性、品种、树龄、树势可初步鉴定各品种的生产力和生态适应性,据此来培育高产优质树冠,并制定出科学合理的配套栽培技术措施和采摘制度,提高茶叶产量和质量,以发挥茶树的品种优势。同时,新梢叶色与适制性有关,叶面光泽与否和叶背着生绒毛多少与茶树品质优良相关,芽叶幼嫩程度与茶叶等级和品质相关。因此,茶树品种适制性与生产潜力可根据茶树生物学特性来初步判断,进一步可以此作为高产优质茶树品种选育的参考依据。因气候、品种以及栽培条件和茶园管理技术的差异,茶树每年每季新梢发芽的迟早、生长快慢、发芽密度、芽叶色泽、芽叶大小均有不同。唐茜网等对五个绿茶新品种春稍的生育动态的调查研究显示:茶树品种不同,其发芽密度、芽叶性状、百芽重均有差异;李家贤‘391的研究结果与唐茜一致。茶叶采摘季节性强,需大量人力、物力支撑,生产成本高。茶叶采摘与茶树新梢的生长发育具有密切关系,因此要根据茶树品种特性、发芽密度、发芽期早迟来科学管理,合理采摘,因地、因时、因茶类制宜,依据新梢萌发期、伸育强度、萌发轮次搭配早、中、晚生品种,使茶叶全年产量分布均匀,劳动力合理分配调节,茶农达到增产增收。因此,茶树品种适制性与生产潜力可根据茶树生物学特性来初步判断,进一步可以此作为高产优质茶树品种选育的参考依据。1.2.4茶树品种主要生化成分研究从省外引进的茶树品种,由于引入地区与原产地的生态、气候和土壤等条件有较大差异,其引进品种的代谢强度和方向将发生变化,需进行生化品质成分的研究。茶叶中包括了茶色素、咖啡碱、氨基酸、黄烷醇、黄烷双醇、类黄酮、酚酸、茶多糖和芳香物质等已经过分离鉴定的已知化合物500多种,这些物质的成分含量和组成比例与茶叶品质优劣密切相关。R万方数据四川农业大学硕士学位论文茶叶鲜爽味的主体呈味物质为氨基酸,对茶叶尤其是绿茶的滋味有重要的决定四川农业大学硕士学位论文茶叶鲜爽味的主体呈味物质为氨基酸,对茶叶尤其是绿茶的滋味有重要的决定作用,与茶叶品质关系密切,目前已鉴定出26种。已有研究表明:茶叶中芳香物质可能是由氨基酸脱羧和氧化脱氨转化成相应醛类,或与糖类、儿茶素产生Maillard反应,生成吡嗪、吡咯、呋喃、糠醛类等物质【加J;王云【4lJ等研究表明氨基酸含量的增加可提高名茶香气的鲜爽度和茶汤滋味的鲜醇度。特别地,茶叶中含有一种名为茶氨酸的特征氨基酸,约占游离氨基酸总量的50%以上,在茶树根中由谷氨酸和乙胺合成,于1950年由日本学者分离并命名的。自然界存在的茶氨酸均为L型[421。叶片成熟度与茶氨酸含量呈负相关,同时还随季节变化产生差异。茶氨酸可以缓解苦涩味,改良绿茶品质和风味,国内外研究表明,茶氨酸在神经保护、提高学习能力、抗肿瘤、镇静、降血压等方面具有良好的保健作用。茶多酚是一类酚类化合物,其生物活性较为广泛,主体成分是儿茶素。茶多酚作为一种天然的抗氧化剂,具有高效抗氧化和清除自由基的作用,是茶叶中重要的化学物质。多酚类物质在茶树鲜叶中的含量通常在18%.36%之间,其大量存在于茶树新梢中。倪静[431等研究表明,茶多酚抗衰老是通过清除自由基起作用的;茶多酚破坏肿瘤细胞则是通过合成N.亚硝基化合物。儿茶素多聚集于茶树新梢中,其中,EGCG、ECG为酯型儿茶素,苦涩味强烈、收敛性强。EGC、GC、EC和C为非酯型儿茶素,较酯型儿茶素收敛性弱,苦涩度低,回味甘爽。茶叶中另一种主要呈味物质和生物活性成分为咖啡碱洲。咖啡碱能与氨基酸、茶多酚一起,共同影响茶叶的品质成分,是与茶叶品质密切相关的茶叶特征物质。红茶制作过程中,咖啡碱易与茶多酚结合,使红茶茶汤呈现特有的“冷后浑’’现象,该现象越明显,说明咖啡碱含量越高,与茶多酚的结合度越大。1.2.5茶树品种抗性研究茶树的抗性是其在自然条件下受到胁迫,经过长期的适应过程,对各种不利的外界环境因素产生的一种生理生化特性。研究表明,引进品种叶片的保护性酶活性(超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶)、叶片形态及解剖结构特征、细胞膜相对透性、可溶性糖含量以及束缚水相对含量等各项生理指标,均可作为鉴定茶树抗性的因子,与茶树抗性强弱密切相关。在自然选择过程中,茶树会适应对自身生命活动不利的各种环境因素,这些因素主要包括干旱、冻害、病虫害等,会影响茶树的正常生长发育,严重时甚至导致茶树死亡。9万方数据四川农业大学硕士学位论文茶树的叶片解剖结构能够反映其抗寒、旱性。茶树自身的遗传因子和其长期生长四川农业大学硕士学位论文茶树的叶片解剖结构能够反映其抗寒、旱性。茶树自身的遗传因子和其长期生长的生理生态环境会对其叶片的外部形态和内部结构产生十分重要的影响,二者是共同起作用的。因此,为准确评价茶树的产量、品质、生理活性以及抗性,以达到科学合理的选种育种目的,可以对茶树叶片的内部结构和外部特征进行测定、研究。抗寒性强的茶树表现为:叶肉组织发达,分化程度高【45】;栅栏组织的厚度大、层次多、排列紧密;细胞较小;角质层较厚;栅栏组织厚与海绵组织厚比值以及栅栏组织厚与叶肉厚的比值高。郭见早等[461的研究表明,茶树抗寒性较强的叶片外部特征为单株叶片较小且厚,叶面隆起。脂肪物质与茶树叶表皮细胞角质层的构成有很大关系,是角质层的主要构成物质,茶树细胞受冻与解冻后的缓冲能力与角质层厚度以及角质化程度呈正相关,角质化程度越高,茶树的抗性表现越好,其抗旱保水、抗病虫害的能力也越强。因此,角质层的厚度可以用来评价茶树的抗寒性。王怡147]等指出,发达的角质层、发达的栅栏组织是茶树抗性强的主要特征之一。茶树的原生质膜透性与茶树遭受冻害后受到损伤和破坏的程度呈正相关。抗寒性强的茶树品种,质膜结构稳定,透性小,受低温影响小,反之,膜结构稳定性低的茶树品种容易在冻害中遭到破坏,严重时甚至死亡。通常以对电导率的测量来鉴定茶树抗性。若茶树受害严重,其质膜亦损伤严重,细胞膜透性增大,导致电解质外渗增多,使得电阻减小,电导率加大。抗寒性强的品种膜透性增大程度较小,而抗寒性弱的品种膜透性增加程度较大,与茶树叶片电导率呈负相关。处在逆境环境中的植物体,其细胞内自由基的产生和消除会趋于不平衡,大量积累的自由基会严重危害植物的膜系统,使膜脂过氧化,同时还破坏细胞膜结构和功能。茶树细胞中大量自由基的产生和消除主要通过由POD(过氧化物酶)、SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)、类胡萝卜素、辅酶Q等还原性物质组成的保护酶系统起作用。研究表N[4引,茶树保护性酶类与抗寒、旱性密切相关,抗性强的品系,其SOD、CAT酶的活性能够维持较高的水平,SOD、POD同工酶总活性及谱带数目明显强于和多于抗性弱的品系[49,50]。1.2.6茶树品种光合特性研究不同茶树品种之间由于遗传因子不同,使得其光合能力、光合效率不同。因此,在引种过程中,常以茶树光合生理特性作为评价茶树适应性和生产潜能的重要指标,10万方数据四川农业大学硕士学位论文以此分析比较其光合特性,了解其生产潜力,探讨不同品种光合效率差异的原因,以四川农业大学硕士学位论文以此分析比较其光合特性,了解其生产潜力,探讨不同品种光合效率差异的原因,以期为优良单株的筛选以及制定科学的栽培措旌提供理论和实践依据。目前,对茶树光合作用的研究主要集中在光合生理指标:净光合速率(^)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(岱)和胞间二氧化碳浓度(a)、叶片水分利用效率(WUE)】、光响应曲线[根据拟合曲线计算光饱和点(LSP)、光补偿点(LCP)、暗呼吸速率(麒)、表观量子效率(a)及最大净光合速率卿m一。已有研究结果显示:单峰和双峰为茶树净光合速率日变化的两种主要类型,受自身生理系统调节和外界环境因素的影响,茶树会出现“光合午休"现象。陈贤田【5l】提出,强光下发生的“光抑制"会引起茶树光合“午休’’。许大全等152,531提出,茶树叶片净光合速率在午间降低主要受茶树内部因素调控,分为气孔因素和非气孔因素。部分气孔关闭会引起气孔限制,导致胞间C02浓度降低;非气孔因素主要表现为叶肉细胞自身的活性下降,从而引起了胞间C02的浓度升高。当两种因素共同起作用时,胞间C02浓度的变化趋向于占优势的那个因素。影响茶树光合作用的内在原因是茶树自身受遗传因子控制的品种特性,不同品种(包括嫁接茶树品种)的茶树,因为遗传性不同,光合能力表现不同。娄娜【剐以福鼎大白茶为对照,对名山白毫、名山特早芽213和福选9号三个川西茶区主栽茶树品种的光合生理进行了研究。结果表明:不同茶树品种的各项光合指标存在显著差异,在光合特性和光合潜力上受遗传差异影响较大,在不同年份、不同季节均表现出该差异。不同茶树品种的光合能力存在差异的原因还与茶树本身对光的响应能力有关,具有较高表观量子率、较低光补偿点的茶树品种,其光合能力也较好。综上,通过对各品种的生理生化品质基础、抗性能力、光合特性进行鉴定初步的鉴定,才能为四川茶区引种、育种、选种提供科学的依据。1.3研究目标本课题以从浙江茶区引进四)11)11西茶区的三个特色茶树品种黄金芽、金光、郁金香(春、夏、秋新梢均呈黄色)为研究材料,同时以四川主栽良种福鼎大白茶作为对照,通过品比试验,着重研究3个引进品种的生理生化特性。旨在初步了解3个引进品种的生长势、光合效率及生产潜力,主要生化成分的含量及配比,抗性及适应性,并初步进行综合评价和鉴定,为3个引进品种在四川茶区的推广和利用提供依据。主要进行以下研究:1万方数据四川农业大学硕士学位论文1.3.1观测各茶树品种的生长势和树势指标,了解各品种新梢生长特性和物理特性。四川农业大学硕士学位论文1.3.1观测各茶树品种的生长势和树势指标,了解各品种新梢生长特性和物理特性。1.3.2分析测定各引进品种新梢的主要生化成分的含量和组成,了解其生化特性。1.3.3研究各品种叶片的光合以及呼吸特性,了解其光合效率及生产潜力。1.3.4直接观测或间接鉴定各茶树品种的抗性指标,初步研究各品种的抗性强弱。1.3.5综合鉴定和评价3个引进品种在四)t1)ll西茶区的光合特性及生产潜力、生化特性、抗性以及适应性,为3个引进品种在四川茶区的推广和应用提供依据。1.4研究内容1.4.1茶树树势、生长势指标的观测:观测树高、树幅、主干直径、分枝级数、骨干枝直径和数量、发芽密度、生产枝密度与数量等。1.4.2营养芽春季萌发期调查:观测鱼叶期、一叶期、二叶期。1.4.3新梢生长势与芽叶性状调查:观测春、夏、秋梢独芽、一芽一叶、一芽二叶、一芽三叶的长度和百芽重、茸毛多少、持嫩性强弱、芽叶色泽等。1.4.4主要品质生化成分的测定:测定指标为水浸出物、茶多酚、咖啡碱含量,氨基酸总量、氨基酸组分和儿茶素组分。1.4.5光合特性研究:测定指标为净光合速率、蒸腾速率、胞间C02浓度、气孔导度、光响应曲线、光合日变化。1.4.6抗性研究1.4.6.1采用叶片病虫受害率调查法,对供试品种进行田间抗性强弱的直接鉴定;1.4.6.2测定抗性生理指标:通过测定供试各品种的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,脯氨酸和丙二醛含量,相对电导率来间接鉴定其抗性。;1.4.6.3采用冰冻切片法,观测供试各品种的叶片解剖结构,间接鉴定其抗性。万方数据四川农业大学硕士学位论文2.材料与方法四川农业大学硕士学位论文2.材料与方法2.1试验材料试验材料取自四川省雅安市名山县中锋良种场品比园,供试品种为从浙江省引进的三个特色茶树品种黄金芽、金光、郁金香,以四川主栽国家级绿茶良种福鼎大白茶为对照品种,茶树树龄为4年生。品比园试验小区面积为0.03亩,随机排列,3次重复。种植方式:大行距为150cm,小行距为40cm,株距为20cm,采取双行单株移栽;采用常规栽培技术进行管理,茶树生长势良好。2.2主要试剂酒石酸亚铁、磷酸二氢钾(KH2P04)、磷酸二氢钠(NaI-12P04)、盐酸、硫酸、碱式乙酸铅、茚三酮、酒石酸钾钠、氯化亚锡、乙醇、香荚兰素、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、K2HP04、丙酮、EDTA-Na2、Na2HP04、核黄素、愈创木酚、氮蓝四唑(NBT)、甲硫氨酸(Met)、三氯乙酸(TCA)、冰醋酸、茚三酮、硫代巴比妥酸、磺基水杨酸等。以上试剂均为分析纯。2.3主要仪器数显光照培养箱、鼓风式恒温干燥箱、DSS2II型电导率仪(上海雷池)、UV-2300型紫外.可见分光光度计、UV.1100型可见光分光光度计、冰箱、制冰机、高速冷冻离心机;美国Li_£OR公司生产的Li—6400便携式光合系统等。2.4试验方法2.4。I茶树树势和生长势观测在品比试验园内,各小区随机选择10株茶树,共30株。观测树高、树幅、树型、树姿、主干直径、分枝级数等树势和生长势指标。2.4.2营养芽萌发期观测于2012、2013年2~3月,自越冬芽开始萌动时,在品比试验园内分别随机选择每个品种的15个越冬芽,挂上标牌。每隔3d观察一次,以20%的芽和新梢达到该物候期作为标准,记录各品种的鱼叶期、一芽一叶期、一芽二叶期和一芽三叶期。13万方数据四川农业大学硕士学位论文2.4.3新梢生长势与芽叶性状观测四川农业大学硕士学位论文2.4.3新梢生长势与芽叶性状观测在品比试验园内,分别随机采摘各品种春梢独芽、一芽一叶、一芽二叶与一芽三叶新梢,夏、秋季一芽二叶、一芽三叶新梢,测量其长度与百芽重,同时观测并记录其新梢颜色、茸毛、嫩度等性状。2.4.4鲜叶主要品质生化成分测定于春、夏、秋三季,分别采摘品比园内各品种茶树的标准一芽二叶。采用蒸汽杀青2min,80。C4h烘干法固样,制作生化样品备测。2.4.4.1茶多酚含量的测定:采用GB/T8313.2002《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》[551中的酒石酸铁比色法进行测定。2.4.4.2)L茶素总量的测定:采用DB51/T896.2009《茶叶中儿茶素总量的测定》[561中的香荚兰素比色法进行测定。2.4.4.3氨基酸总量的测定:采用GB/T8314.2002《茶叶游离氨基酸总量测定》刚中的茚三酮比色法进行测定。2.4.4.4咖啡碱含量的测定:采用GB/T8312.2002《茶叶咖啡碱测定》[581中的第二种方法紫外光分光光度法进行测定。2.4.4.5水浸出物含量的测定:采用GB/T8305.2002《茶叶水浸出物测定》[591进行测定。2.4.4.6氨基酸组分测定:采用HPLC法【6川(谷氨酸等16种氨基酸组分测定采用美国sigma公司标样,茶氨酸测定采用日本TCI的标样)。2.4.4.7儿茶素组分测定:采用HPLC法【611。2.4.5光合特性研究试验材料取自四川省雅安市名山县中锋良种场品比园,品种为从浙江省引进的三个特色茶树品种郁金香、黄金芽、金光,茶树树龄为4年生。在天气晴朗的2013年8月2日进行测定。在品比试验园内,每个品种各选取3株长势一致的茶树,同时选取成熟夏梢的第5片叶5片,采用美国Li.COR公司生产的Li.6400便携式光合测定系统,进行光合指标、光合速率日变化和光响应曲线速率的测定。2.4.5.1光合指标测定14万方数据四川农业大学硕士学位论文在夏季少云的晴天,太阳辐射强的天气条件下,在中锋良种场采用美国Li—COR四川农业大学硕士学位论文在夏季少云的晴天,太阳辐射强的天气条件下,在中锋良种场采用美国Li—COR公司生产的Li—一6400便携式光合系统测定各项光合生理指标。每个品种测试5个样叶,每个样叶记录数据3~5次。测定指标包括:净光合速率口n)、蒸腾速率㈤、气孔导度(Gs)、胞间c02浓度(Ci)【62】等。2.4.5.2光合速率日变化的测定光合速率日变化测定时间为9:00~19:00,每隔2h测定1次茶树的净光合速率(Pn),蒸腾速率(Tr),气孔导度(Gs)和胞间二氧化碳浓度(Ci),同时测定光合有效辐射(P舢妯),大气温度(TA)和相对湿度(Im)。测定前先测自然光照强度,然后用设置成与自然光强相同的红蓝光源进行测定,当系统稳定后进行记录,每个样叶记录3次数据,3次重复测定的平均值为光合速率的日变化。2.4.5.3光响应曲线测定光响应曲线测定时间为8:30—11:30,天气晴朗,利用Li.6400自动light.curve曲线测定功能,将红蓝光源设定一系列光合光通量密度,其梯度设定为: 2000, 1600,1200,800,400,200,100,75,50,25,0mot/(m2·s)。由内置C02钢瓶提供实验所需C02。测定前用1000wnoV(ms·s)光强对茶树叶片诱导20min。测定时,叶室温度设为(30-a:1)℃,C02浓度为386-400lunol/mol,空气相对湿度50%~70%。在每一光强,待读数稳定后对数据进行记录。每一试验点重复3次。利用PhotosynAssistant(V1.1,DundeeScientific,UK)软件进行曲线拟合(RothsteinandZak,2001),该软件应用的模型方程是PrioulandChatier(1997)方程。根据拟合出的光响应曲线,计算出各茶树品种的最大净光合速率@nm舣)、表观量子效率(a)、光饱和点(LSP)、光补偿点(LCP)、暗呼吸速率(1H)。通过Excel2007整理所有数据,方差分析、相关分析以及其他统计分析处理均借助于SPSS16.0软件,绘图采用Origin75。2.4.6抗性的鉴定2.4.6.1田间抗性的观测与自然鉴定抗寒性评分以全国茶树区域试验指导小组统一规定的五级评分为主。抗病虫性依据中国农业科学院茶叶研究所起草的《茶树种质资源鉴定评价技术规程》中“茶树抗病性测定方法”测定。抗强光灼伤能力的测定,在强光且干旱时,对引进品种及对照15万方数据四川农业大学硕士学位论文任选6株茶树,观测茶蓬单位面积中总叶、灼伤叶的数量,计算灼伤叶比例【631,并对四川农业大学硕士学位论文任选6株茶树,观测茶蓬单位面积中总叶、灼伤叶的数量,计算灼伤叶比例【631,并对数据进行分析。2.4.6.2叶片解剖结构观测随机选取各品种同一生长部位的的

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