瘤胃微生物体外培养操作规程_第1页
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文档简介

1瘤胃微生物体外培养操作规程GB/T6682分析实验室用水规格4.2试剂配制2准确称量氯化钙13.20g,氯化锰10.00g,氯化钴1.05.3干燥箱:RT+10℃~250℃,控温精度±5℃。5.4ANKOMRFS体外产气测量系统:模块数量18个以上,250mL培养瓶。):5.6pH计:测量范围0~14,精度±0.1。6.2瘤胃缓冲液配制474mL水中,通入CO2至饱和,并保存在39℃水浴恒温培养箱中,最后再加入49.5mL还原剂溶液,加6.3瘤胃液的制备选择健康、体重接近的3只(头)装有永久性瘤胃瘘管的供试动物,单栏饲养。在晨饲前经瘤胃瘘保温容器中。用搅拌器搅拌2min,混合均匀后经4层纱布过滤,同时通入CO26.4培养装置的准备每个培养瓶中加入培养底物约0.5g(准确至0.0001g每种培养底物设3个重复,每次培养设36.5培养每个培养瓶中迅速加入20mL瘤胃液。瘤胃培养液通入CO23min,立即拧上瓶盖,放入39.5℃培养箱内培养,培养箱的震荡频率为15次/分,持续培养4A.1瘤胃微生物体外培养的操作瘤胃微生物体外培养的操作包括6个步骤见图A.1,在瘤胃微生物体外培养过程中进行产气量的记录,培养完成后,可以进行pH值测定、氨氮和挥发性脂肪酸的测定和营养物质消失率的测A.2体外培养参数利用产气测量系统每隔60s记录产气模块内的气体压力变化,最后由样品模块内压力减去空白模块内压力得到,计算出0.5h、1h、2h、3h、4h、5h、6h、8h、10h、12h、16h、18h、24h、28h、32h、36h、40h、4发酵至48h时,打开培养瓶采集培养液样品10mL,立即用pH计测定培养液pH值。pH值的适宜范围取剩余培养残渣烘干后,测定相关营养物质的含量,计算营养物质Y——代表试样中某一营养物质的消

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