第9章 球菌课件

第9章球菌主讲人北华大学临床微生物学教授海南医学院特聘教授李影林2010.10第一节葡萄球菌属（Staphylococcus）

第二节链球菌属(Streptococcus)第三节肠球菌属（E.enterococcus）第四节奈瑟菌属(Neisseria)

第9章球菌_1一、掌握1.葡萄球菌的主要生物学性状、分类、葡萄球菌的致病性。2.链球菌的分类及主要生物学性状、致病物质及所致疾病，ASO试验。3.肺炎链球菌的生物学特性。4.脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的生物学特性；淋病奈瑟菌的致病性和防治原则。二、熟悉1.葡萄球菌的分布、微生物学检查法、免疫性；葡萄球菌感染的防治原则；2.肺炎链球菌的致病性。3.链球菌的免疫性。三、了解1.球菌的分类。2.凝固酶阴性葡萄球菌致病性。3.肺炎链球菌微生物学检查法及防治原则。4.其他链球菌的致病性；微生物学检查法。5.脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的免疫性。目的要求第9章球菌_1

第一节葡萄球菌属

（Staphylococcus）

一、生物学性状（一）形态与染色1.G+球菌

2.固体培养基呈典型的葡萄状。

3.无芽胞、无鞭毛，不能运动，80%幼龄致病菌可形成微荚膜。

第9章球菌_1（二）培养特点

1.对营养要求不高。2.致病性菌株耐盐性较强3.普通琼脂平板37℃24～48h可形成光滑、湿润、隆起、不透明、边缘整齐菌落。固体培养基上形成脂溶性色素。4.血平板－绝大多数菌出现溶血环。第9章球菌_1（三）生化反应－不如肠道菌活泼

1.多数菌株能分解某些糖类（如葡、麦蔗）产酸不产气。2.80%以上的致病菌株分解甘露醇。3.致病性葡萄球菌血浆凝固酶试验多阳性。4.所有金黄色葡萄球菌可形成大量核酸酶，故核酸酶试验阳性。5.触酶阳性第9章球菌_1（四）抗原构造

1.蛋白质抗原，其特点：

（1）是完全性Ag，本属细菌都有，具有属特异性，而无型特异性。（2）电镜下观察主要是细胞壁表面的蛋白质成分，即蛋白质Ag，称为葡萄球菌A蛋白（StaphylococcalProteinA，SPA)。第9章球菌_1

脓液标本直接涂片（革兰染色）第9章球菌_1（3）SPA的作用①A蛋白可与正常人或多种动物的IgG（IgG1、IgG2、IgG4）的Fc段发生非特异性结合。②在动物体中SPA和γ-球蛋白在细菌生长过程中可释放到介质中。与吞噬细胞争夺调理素的Fc段产生抗吞噬作用。③可与IgGFc段结合，其复合物可固定补体。④SPA是良好的分裂源，可促进淋巴细胞分裂，向淋巴母细胞转化。⑤对金葡菌噬菌体的吸附有影响，呈负相关。第9章球菌_12.荚膜多糖抗原3.多糖Ag：存在于细胞壁，具有群特异性A群多糖抗原－为磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺核糖醇的残基（可从S.aureus中提出）。B群多糖抗原－为磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺甘油残基（可从S.epidermidis提出）。第9章球菌_1（五）分类

1.根据Bergey’s鉴定细菌学手册（第9版）记载葡萄球菌分为32个种、15个亚种。

2.古典分类法

3.分型（1）血清学分型（2）噬菌体分型（3）凝固酶分型第9章球菌_1（六）抵抗力

较强

1.耐干燥

2.对热的抵抗力在无芽胞菌株中，它最强。3.对一般消毒剂较敏感。4.对苯胺类染料敏感。第9章球菌_1（七）耐药性变异90%的菌株耐青霉素。尤其耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantS.aureus,MRSA)已成为医院内感染最常见的细菌机理:它是携带mecA基因、编码低亲和力青霉素结合蛋白导致耐甲氧西林。注意:卫生部规定在临床上,若药敏试验是甲氧西林耐药菌株,则报告该菌株耐所有青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类、β-内酰胺药、β-内酰胺酶抑制剂。同时对氨基糖苷类、大环内酯类和四环素类也耐药!!!第9章球菌_1二、致病性(一)致病物质侵袭性酶类1.凝固酶:包括游离血浆凝固酶和结合性血浆凝固酶两种.游离血浆凝固酶:类似凝血酶原凝血酶原样物质纤维蛋白原纤维蛋白

凝聚因子:纤维蛋白原纤维蛋白

由致病性葡萄球菌产生，可使液态纤维蛋白原转变成固态纤维蛋白，沉积在菌体表面和病灶周围。使细菌不易被吞噬细胞吞噬，阻止抗菌物质的杀伤和抑制细菌的作用，有利于细菌在局部增殖。激活第9章球菌_12.其他酶类纤维蛋白溶酶耐热核酸酶透明质酸酶酯酶第9章球菌_11.葡萄球菌溶素主要为α毒素(外毒素)(1)对多种哺乳动物红细胞有溶血作用(2)对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞均有损伤作用2.杀白细胞毒素只攻击中性粒细胞和巨噬细胞作用部位主要主要在白细胞膜。首先细胞膜中三磷酸肌醇发生构型改变膜穿孔后膜通透性K+丢失白细胞运动能力丧失细胞质内的颗粒排出细胞死亡3.肠毒素作用机制刺激呕吐中枢引起呕吐4.皮肤剥脱毒素引起烫伤样皮肤综合征5.毒素休克综合征毒素-1引起发热、休克及脱屑性皮疹、增加对内毒素的敏感性。引起多个器官系统的功能紊乱或毒素休克综合征毒素第9章球菌_1(二)所致疾病性第9章球菌_1ïïîïïíì----®®蜂窝组织通过淋巴感染皮下组织痈多个口疖一个口毛囊炎局部化脓性炎症局部感染1.皮肤创伤2.全身感染3.葡萄球菌性食物中毒4.伪膜性肠炎

5.烫伤样皮肤综合征6.毒性休克综合征入血菌血症、败血症脓毒血症、骨髓炎第9章球菌_1

痈第9章球菌_1

蜂窝组织炎第9章球菌_1

烫伤样皮肤综合征第9章球菌_1

骨髓炎第9章球菌_1

毒性休克综合征第9章球菌_1

疖第9章球菌_1三、微生物学检查法

（一）标本的采集化脓病灶——脓汁脓毒血症、败血症——血液食物中毒——食物、呕吐物伪膜性肠炎——粪便粪便检查做复合用，看噬菌体型是否一致。第9章球菌_1标本采集第9章球菌_1（二）检验程序脓汁、渗出物咽拭、脑脊液血液增菌分离培养（血平板）可疑菌落纯培养鉴定试验（涂片、血浆凝、甘露醇等）E报告直接涂片染色初报粪便、呕吐物高盐甘露醇平板（分离培养）第9章球菌_1第二节链球菌属（Streptococcus）2.根据群特异性Ag（“C”Ag）分为20个群。对人致病菌株90%为A群。A群又根据表面Ag（M、S、T、R），主要是M抗原。根据M抗原不同可分为100个型。3.生化反应分类4.根据对氧的需要5.噬菌体分型法及细菌素分型法。传统分类法1.根据溶血性分类①甲（α）型溶血性链球菌；②乙（β）型溶血性链球菌③丙（γ）型链球菌当代分类法伯杰分类细菌学手册（Bergey’sManualofsystematicBacteriology，SecodEditionRelease5.0，May2004

）收集4000余种模式菌株的16SrRNA序列力求细菌分类学模式和种系发育模式的一致性。第9章球菌_1（一）生物学性状

1.形态与染色

（1）G+球菌（球形或卵圆形）呈链状排列

（2）在液体培养基中呈典型的长链（与葡萄球菌区别）。

（3）无芽胞、无鞭毛，大多数幼龄菌有荚膜，菌细胞壁外有菌毛，但被荚膜所包裹

一、A群链球菌第9章球菌_1链球菌扫描电镜图第9章球菌_1化脓性链球菌革兰染色第9章球菌_12.培养特点

(1)对营养要求较高

(2)需O2或兼性厌O2，少数为专性厌O2(3)在液体培养基（如血清肉汤）中，管底是絮状或颗粒状沉淀，上层液体澄清。(4)在血平板上，形成灰白色半透明或不透明，表面光滑、湿润，有乳光凸起的菌落。有的菌落周围是不完全溶血，有的呈完全性溶血，有的不溶血。

第9章球菌_1

化脓性链球菌菌落特征（β溶血）第9章球菌_1

草绿色链球菌菌落特征（α溶血）第9章球菌_1γ链球菌菌落特征（γ溶血）第9章球菌_1

链球菌的抗原结构第9章球菌_13.生化反应

(1)葡萄糖+（产生的酸为乳酸和少量的甲酸、乙酸与乙醇）。(2)除某些草绿色菌株外（如乳房链球菌）一般均不分解菊糖。(3)除肠球菌、牛链球菌、马肠链球菌等外，一般多不被胆汁或100g/L胆盐所溶解。(4)α-溶血性链球菌对optochin敏感。(5)A群链球菌对杆菌肽敏感。

(6)B群链球菌CAMP试验阳性。(7)七叶苷试验用于鉴定D群链球菌。不同的链球菌对糖的发酵作用不同，其共同点：与肺炎链球菌相区别第9章球菌_14.Ag构造

(1)核Pr抗原（简称“P”Ag），因此无特异性，不能用于分类。(2)群特异性（简称“C”Ag）。（3）型特异性Ag（4）G蛋白据1973年Kornvall报告A、C、G群链球菌的很多菌株的细胞壁及培养上清液中含有能与IgGFc段相结合的蛋白，称为链球菌G蛋白。

SPG与葡萄球菌A蛋白（SPA）相比有显著不同。①它能与人及几乎所有其他哺乳动物的单克隆或多克隆IgG的Fc段相结合，而且亲和力远比SPA强

②SPG对IgM、IgA、IgE、IgD无亲和力，而SPA也能结合其他Ig。

第9章球菌_1(三)致病性致病物质1.细胞壁成分2.外毒素3.侵袭性酶类4.超抗原5.抵抗力——不强

第9章球菌_1细胞壁成分1.脂磷壁酸围绕在M蛋白外层,与M蛋白一起组成菌毛结构2.M蛋白细胞壁中的表面蛋白质组分.(1)抗吞噬(2)抵抗吞噬细胞内的杀菌作用(3)与心肌肾小球基底膜有共同抗原3.肽聚糖有致热,溶解血小板,提高血管通透性4.细胞壁受体胞壁上有很多蛋白质和纤维素受体,可与纤维素蛋白质、IgG、IgA等结合,有利于细菌黏附于宿主细胞5.F蛋白具有纤维粘连蛋白的受体,能与上皮细胞表面的纤维粘连蛋白结合,使链球菌黏附到上皮细胞表面第9章球菌_1外毒素类-îíì-毒素猩红热毒素又叫即由此毒素引起猩红热患者出现的皮疹损害可引起组织选择性特殊毒性强群产生的外毒素红疹毒素溶血毒素毒害心脏杀害白重点溶解红溶血毒素溶血毒素、Dick，，，，ASC，C，O第9章球菌_1ïïïïîïïïïíì®®----降低大为使脓性渗出液的粘筒性多核苷酸核中的DNA分解C链道酶血块等治疗提纯后用于溶解血栓于细菌在组织内扩散有助溶解血块阻止血浆凝固酶元变成血浆Pr酶使血浆Pr链激酶又叫扩散因子使细菌易在组织中扩散的渗透性增进组织使其水解皮下组织间的透明质酸溶解皮肤透明质酸酶、。，，，，，，，

侵袭性酶类第9章球菌_1

所致疾病1.2.ïïïïîïïïïíìïîïíì-)(，12舞蹈症风湿热脑病关节炎心脏病风湿热肾炎型链球菌人们公认为型要特别引起注意其中急性肾小球肾炎变态反应性疾病第9章球菌_1痈第9章球菌_1蜂窝织炎第9章球菌_1脓疱疮第9章球菌_1淋巴管炎（丹毒）第9章球菌_1猩红热第9章球菌_1大叶性肺炎大叶性肺炎（左肺）治疗痊愈第9章球菌_1扁桃体炎第9章球菌_1肺脓肿第9章球菌_1化脓性脑膜炎（白色脓液）第9章球菌_1乳突炎第9章球菌_1（二）微生物学检查法

1.标本的采集

根据临床疾病类型不同，采集适当标本（1）通常采集的标本（2）疑败血症或心内膜炎——血液。（3）风湿症患者——取血做抗链球菌溶血素“O”试验。

第9章球菌_12.检验程序第9章球菌_13.检验方法（1）脓汁、咽拭或炎性分泌物①标本→直接涂片→Gram染色②分离培养第9章球菌_1a.甲链－菌落似针尖状，周围有狭窄的草绿色溶血环b.乙链－灰白色小菌落，周围溶血环宽而又透明c.丙链－灰白色干燥周围无溶血环d.粪链－灰白色较大菌落，较湿润，甲、乙、丙三型溶血均有e.厌链－灰白色小菌落呈绿色溶血环或不溶血③生化反应－鉴别意义不大，可供参考④鉴定试验菌落鉴别要点：第9章球菌_1鉴定试验a.链激酶试验－A群+（致病性）b.马尿酸水解试验－B群有马尿酸水解酶，使马尿酸水解为苯甲酸及乙氨酸苯甲酸+FeCl3→三苯甲酸铁↓（有色）c.牛乳美蓝试验牛乳美蓝试验对溶血性链球菌有抑制作用，对粪链、乳链无抑制作用d.耐盐试验肠球菌、牛链、B群（80%）耐盐e.杆菌肽敏感试验－A群敏感f.七叶苷分解试验－D群可分解g.甲链肺炎链菊糖胆汁－－＋＋第9章球菌_1（2）抗链“O”试验测定抗链球菌溶血素“O”效价，可辅助诊断活动性风湿、急性肾小球肾炎、风湿性关节炎效价＜1:200阴性＞1:400阳性效价在1:500以上或逐步升高，即有诊断参考价值。（3）荧光抗体快速鉴定链球菌第9章球菌_1二、肺炎链球菌（S.pneumonia）

（一）生物学性状1.形态与染色

（1）G+球菌：成双排列，如矛头状

.（2）痰、脓汁、肺脏病变：单个、成双或短链状。（3）液体培养基中，短链多见，故易与链球菌相混。（4）无芽胞，无鞭毛，在人或动物体内形成荚膜。（5）本菌有自溶酶，在此酶作用下菌体自溶。第9章球菌_1肺炎链球菌革兰染色第9章球菌_1肺炎链球菌荚膜染色第9章球菌_12.培养特点

（1）兼性厌O2菌10%CO2环境中生长更好，最适温度37.5℃（25~41℃），最适pH7.6~8.0，较酸性的环境迅速死亡。

（2）营养要求较高

（3）在各种培养基上生长情况。①液体培养基－先混浊后澄清

原因：a.有自溶酶

b.酸性自凝。②血平板a.通常形成0.5~1mm圆形、细小、扁平有光泽灰白半透明菌落，菌落周围有草绿色溶血环与甲链相似。

培养2~3d菌落中心凹陷，边缘隆起，呈脐窝状。b.Ⅲ型肺炎链球菌因产生较厚的荚膜而形成直径2~3mm的粘液样菌落。

第9章球菌_1肺炎链球菌菌落特征第9章球菌_13.生化反应

能分解多种糖类，其中有鉴别意义的:

肺炎

甲链

（1）菊糖

+（有的-）-（2）胆汗溶解T+-（3）optochin（对乙基氢化羟基奎宁）

+-（4）对小白鼠毒性

+-第9章球菌_14.Ag构造与分型

（1）特异性Ag①菌体种属特异性Aga.构造－菌体多糖b.有种属特异性c.该Ag又叫肺炎链球菌“C”物资，可与正常血清中所含的一种蛋白质－“C”反应蛋白，出现沉淀反应，（C-reactiveprotein，CRP），它不是Ab，在炎症活动期，如风湿热患者，CRP的数量↑。第9章球菌_1②型特异性Aga.构造－荚膜多糖多聚体b.有型特异性用凝集、沉淀、荚膜肿胀T可将其分为85个血清型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ……c.可溶于水，故又称为特异性可溶物质，简称SSSd.不同型致病力不同e.有些同型菌株，荚膜多糖的组成也不同，故Ag也不同，第9章球菌_1（2）非特异性Ag菌体核蛋白Ag5.抵抗力

较弱

第9章球菌_16.变异性

（1）荚膜变异有荚膜的光滑型无荚膜的粗糙型(2)（3）型的转化变异肺炎链球菌的型别可以互相变异转化（4）耐药性变异－某些菌株大多数对P－C敏感

第9章球菌_1（二）微生物学检查法

1.标本的采集

2.检验程序

3.检验方法（1）直接涂片检查

第9章球菌_1肺炎链球菌脑脊液涂片（革兰染色）第9章球菌_1（2）荚膜肿胀T（3）培养检查

①增菌培养（血液、脑脊液）

第9章球菌_1②分离培养－血平板观察菌落特点、溶血情况等（4）鉴定试验①荚膜肿胀试验②胆汁溶菌试验第9章球菌_1三、其他医学相关链球菌（一）B群链球菌（学名无乳链球菌）早期新生儿暴发性败血症；晚期化脓性脑膜炎。（二）D群链球菌多见老年人、中青年女性、衰弱或肿瘤病人。（三）甲型溶血型链球菌感染性亚急性心内膜炎。（四）变异链球菌常与龋齿有关。第9章球菌_1第三节

肠球菌属（Enterococus）

一、生物学性状（一）形态与染色

1.G+球菌呈链状排列；2.无芽胞、无鞭毛、无荚膜

粪肠球菌革兰染色第9章球菌_1

（二）培养特点

1.需O2/兼性厌O22.对营养要求较高——含血清培养基生长好3.血平板灰白，不透明，表面光滑，直径0.5~1mm，圆形小菌落，不同菌株表现不同溶血现象。选择性琼脂叠氮胆汁七叶苷琼脂(分离培养）→抑制G-杆菌生长肠球菌为黑色菌落

第9章球菌_1

粪肠球菌菌落特征第9章球菌_1

（三）生化反应耐高盐和胆汁

对多种抗菌药物表现为固有耐药胆汁七叶苷试验1.生长温度:10℃、45℃均能生长2.65g/LNaCl生长试验(+)3.胆汁七叶苷试验(+)PYR(吡咯烷酮β-萘基酰胺)试验(+)第9章球菌_1（四）分类肠球菌科（Enterococcaceae）肠球菌属（Enterococcus）粪肠球菌（E.faecalis）屎肠球菌（E.faecium）坚忍肠球菌（E.durans）第9章球菌_1二、致病性

（一）致病物质1.碳水化合物黏附素可吸附在肠道、尿路上皮细胞及心脏细胞。2.聚合物因子能聚集供体与受体菌，以利质粒转移。3.细胞溶素肠球菌质粒编码，可加重感染程度。4.多形核白细胞趋化因子粪肠球菌产生，可介导炎症反应。5.肠球菌能诱发血小板聚集及细胞因子依赖纤维蛋白的产生与肠球菌心内膜炎发病机制有关。耐药性肠球菌已是医院感染的重要致病菌！第9章球菌_1（二）肠球菌的耐药性肠球菌细胞壁坚厚对多种抗生素表现为固有耐药携带万古霉素耐药基因质粒的传播可引起难治性感染！！1.对青霉素耐药机制肠球菌青霉素结合蛋白（PBP）对青霉素敏感产生当与青霉素的亲和力耐药少数情况产生大量青霉素酶引起耐药2.对氨基糖苷类的耐药性（1）肠球菌细胞壁坚厚所致渗透障碍可导致中等耐药。（2）质粒介导的氨基糖苷类钝化酶可导致高度耐药。3.对万古霉素的耐药性肠球菌含有抗万古霉素的基因，分别为：VanA、VanB、VanC、VanD、VanE5个型。其中VanA基因位于转座子上，其它抗药基因位于染色体上。第9章球菌_11.尿路感染最常见，其中大部分为医院感染2.腹部盆腔的创伤和外科感染3.败血症

常合并心内膜炎

4.脑膜炎

罕见，主要为新生儿5.呼吸道感染

(三)所致疾病第9章球菌_1三、防治原则病人防御机制正常时，经治疗可获痊愈。1.尿路感染的病原菌可单独用青霉素、氨苄西林、万古霉素。大部分肠球菌对呋喃妥因敏感！2.心内膜炎、脑膜炎的治疗，常用青霉素或氨苄西林与氨基糖苷类药物联合用药。3.对耐万古霉素的肠球菌感染的散布要实施严格的隔离及合理、谨慎使用万古霉素！第9章球菌_1第四节

奈瑟菌属根据Bergey’s鉴定细菌学手册（第9版）记载，奈瑟菌科归于群4。

ïïïïïîïïïïïíì--îíì-不动杆菌属金氏菌属莫拉菌属卡他布兰汉菌主要致病菌布兰汉菌属脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌主要致病菌奈瑟菌属奈瑟菌科第9章球菌_1一、脑膜炎奈瑟球菌（Neisseriamenigititds）

（一）生物学性状1.形态与染色（1）G-双球菌，如肾形、蚕豆形、凹面相对。（2）无芽胞，无鞭毛，但有菌毛（pili），从病人新分离出的菌株有荚膜。第9章球菌_1脑脊液标本直接涂片（革兰染色）第9章球菌_1脑膜炎奈瑟菌革兰染色第9章球菌_1脑膜炎奈瑟菌透射电镜图第9章球菌_1（3）人工培养后形态不规则24h培养物涂片常见一些不规则形态，首色不均匀。（4）病人脑脊液中，常见于嗜中性粒C胞浆内，呈肾形、豆形，G-菌成双排列，凹面相对——立即诊断。但就形态而言，不易与其他奈瑟菌区别。（5）本菌有自溶酶，故取陈旧培养物涂片可见膨胀或破碎的菌体。

第9章球菌_12.培养特性

（1）专性需O2，初次分离需10%CO2

（2）温度要求严格<30>40℃均不长，最适温度35~36℃，最适pH7.4~7.6。（3）营养要求高，一般培养基及室温均不长，必须在含有血液、血清、葡萄糖、肝浸液、腹水或卵黄培养基上才能发育，常用巧克力色琼脂平板和血平板。（4）在培养基上的生长情况

①巧克力色琼脂平板

第9章球菌_1

形成直径为1~2mm蓝灰色半透明光滑湿润又扁平，银灰闪光边缘整，露滴状菌落。②血平板不溶血，无色素，比较柔软，易乳化，延长培养时间，由于自溶酶作用菌落可变成酪样或胶样。③MH琼脂形成半透明，色泽似彩虹的菌落。④卵黄双抗琼脂（EPV）菌落较大，扁平，无色，光滑湿润边缘整齐。⑤血清肉汤中度混浊，微沉淀

第9章球菌_13.生化反应

能力弱

4.Ag构造及分型（1）荚膜多糖特异性Ag：根据荚膜多糖Ag不同，13个血清群。致病菌主要为A、B、C、Y群。流行菌株-目前我国仍以A群以为。（2）外膜蛋白型特异性Ag本质是高分子量的脂蛋白-脂多糖复合物5.抵抗力

很弱

第9章球菌_1（二）致病性1.致病物质（1）荚膜抗吞噬（2）菌毛黏附咽喉黏膜表面。（3）LOS菌体死亡或自溶而释放出。作用于小血管和毛细血管，引起坏死、出血、导致皮肤瘀斑和微循环障碍。严重败血症时引起肾上腺出血，并因大量LOS释放，可造成DIC及中毒性休克。第9章球菌_12.所致疾病人是唯一的自然突主，主要引起流脑。临床上分3型：普通型、暴发型、慢性败血症型。

流行性脑脊髓膜炎

第9章球菌_1（三）免疫性以体液免疫为主。血清中的群特异多糖抗体和型特异外膜蛋白抗体在补体存在下，能杀伤脑膜炎奈瑟菌。6个月婴儿可通过母体获得抗体。第9章球菌_1（四）微生物学检查法

1.标本的采集根据临床病程不同，采集的标本也有所不同。（1）菌血症-采血液3～5ml（2）出血点、瘀斑-取瘀斑渗出液（3）有脑膜刺激症状者-抽取脑脊液3ml（4）上呼吸道感染期的疑似病人和带菌者-鼻咽腔分泌物要求：（1）采集标本应特别注意保暖，防止干燥和日光照射，接种于预温的培养基上。（2）立即送检。（3）分离培养最好在床边进行。（4）不能在冰箱（4℃）保存标本或菌种，在冰箱中比在室温中死的更快。

第9章球菌_12.检验方法（1）直接检查法②瘀斑（出血点）

皮肤酒精消毒70%干燥后刺破瘀血点挤出带血的组织液印片张(2)灭菌小皮试注射器美蓝染色阳性率

Grams70％~80%′接种分离培养min第9章球菌_1（2）分离培养检查法①常规法

②安瓿法

置第9章球菌_14.鉴定依据（1）形态染色特点（2）菌落特征（3）生化反应能力强，葡麦+氧化酶+（4）血清凝集试验阳性（5）G+Cmol%50~52第9章球菌_1二、淋病奈瑟菌（Neisseriagonorrhceae）

（一）生物学性状1.形态与染色（1）G-双球菌，球形或肾形，两球菌接触面平坦，形似一对黄豆。（2）无芽胞无鞭毛，有荚膜，有的淋病奈瑟菌有菌毛。（3）急性患者尿道脓汁标本中，可见细菌被吞噬于中性粒细胞内，慢性淋病时多在细胞外。第9章球菌_12.培养特点（1）营养要求高