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文档简介
一、项目来源
根据《广西标准化协会关于下达2021年第二批团体标准制修定项
目计划的通知》(桂标协〔2021〕4号)文件精神,由广西壮族自治区
林业局提出,广西壮族自治区林业科学研究院、广西壮族自治区国有
雅长林场、玉林市林科所共同起草的团体标准《香合欢组培苗生产技
术规程》。
二、项目背景及目的意义
广西是我国最重要的木材产区,2018年木材产量达3175万m3,
约占全国木材产量的40%。然而,传统大面积人工林纯林种植造成的
生态危机问题、森林病虫害问题及营林效益降低问题,都在迫使人们
探求调整树种结构,选择高价值乡土阔叶树种,改变营造林方式,营
造健康森林。
香合欢为豆科高大落叶乔木,是合欢属的三大硬木树种之一,在
中国和印度、缅甸、越南、马来西亚等东盟国家有分布,在我国主要
分布在广西、海南、广东、云南、贵州、四川、台湾等省(区)。香合
欢生长快、冠幅小、干型通直、出材率高,木材为硬重散孔材(密度
0.843g/cm3),心材明显比例大,色泽纹理美观,具有不易开裂变形、
抗虫耐腐,耐冲击强度高,加工性良好等特点,目前市场价格在
5000-10000元/m3之间,可作为高价值用材树种优先推广种植。同时,
香合欢具有耐干热高温、耐土壤瘠薄、抗台风、生物固氮能力强等优
1
良特性,是土壤改良、水土保持林建设的优良生态保护修复型树种。
目前,国内外对香合欢的研究主要集中在药用价值与开发、地理分布、
群落特征等方面,木材供应主要依靠越南、缅甸进口和国内天然林砍
伐。许多林业生产单位、集体和个人看到了香合欢这一树种的发展前
景,纷纷制定了生产造林计划。初步统计,未来3年内全区将累计营
造香合欢人工林达5万亩。
广西壮族自治区林业科学研究院团队通过在全国范围内实地调
查,摸清了香合欢种质资源现状,掌握了香合欢分布范围、生长环境、
栽培及加工利用情况,制定了香合欢良种改良策略,收集国内典型分
布区香合欢种质材料,在广西林科院、广西国有雅长林场、融水县贝
江河林场、广西国有大桂山林场、南宁世纪天洋农业有限公司进行了
香合欢苗木培育试验与生产,累计生产优质苗木80多万株。在造林栽
培方面,截止至2020年11月,研究团队已在广西壮族自治区国有雅
长林场、融水县国营贝江河林场、广西壮族自治区国有钦廉林场、广
西壮族自治区国有七坡林场、广西壮族自治区国有高峰林场、广西壮
族自治区国有大桂山林场、南宁市良庆区南州林场、柳州市苗圃林场、
柳州市三伯岭林场,柳州市冲马岭林场等单位累计完成香合欢示范造
林10000余亩,在香合欢栽培技术方面,积累了丰富的实践经验。同
时,香合欢研究团队在百色建立了首个香合欢优良单株无性系种子园,
在广西国有雅长林场建立了首个香合欢采种母树林,解决当前各地香
合欢规模化发展对优质种子的需求。然而,传统育苗方式植株遗传分
化大,苗木参差不齐,上山造林差距较大。
2
组培做为一种繁殖手段,具有繁殖系数高,短期内大规模出苗,
有效保障种苗优良性状等独特优势,选择优良的香合欢单株进行组织
培养,培养香合欢优质壮苗,有利于提高香合欢的繁殖效率,快速有
效地解决香合欢良种严重不足的问题,提高人工林的质量与产量,加
快香合欢良种的推广。通过对香合欢组培苗生产技术的规范化建设,
构建香合欢组培快繁技术体系,实现无性系产业化育苗,为提供满足
市场需求的优质香合欢苗木,制定组培苗生产标准是非常必要的。
香合欢作为发展前景广阔的高价值用材树种、水土保持林树种,
在全区林业开展树种结构调整、林相改造、森林质量精准提升的背景
下,通过制定团体标准《香合欢组培苗生产技术规程》,对建设壮苗繁
育生产示范基地,规范香合欢组培快繁技术标准,试验示范与推广具
有重要意义。同时本标准的制定符合我国生态优先绿色发展战略,能
有效缓解我区传统大面积人工林造成的生态危机问题,凸显广西木材
产业优势,进而实现与东盟国家高价值树种培育技术标准的共通共融
共享,为当前广西“木材战略储备基地建设工程”、“珍贵树种示范基地
建设工程”以及“树种结构调整和林相改造提升工程”、乡村振兴提供技
术支持与样板。
三、项目编制过程
(一)成立标准编制工作组
团体标准《香合欢组培苗生产技术规程》项目任务下达后,广西
壮族自治区林业科学研究院成立了标准编制工作组,起草单位制定了
起草编写方案与进度安排,明确任务职责,确定工作技术路线,开展
3
标准研制工作。具体标准编制工作由广西壮族自治区林业科学研究院、
广西壮族自治区国有雅长林场、玉林市林科所等起草单位组成标准编
制工作组,编制工作组成员如下:张烨、李松海、卢娟、覃玉凤、肖
玉菲、张晓宁、覃子海、钟连香、魏秋兰、林东、陈博雯、刘海龙、
黄玲。
编制工作组下设三个组,分别是资料收集组、草案编写组、标准
实施组。
资料收集组负责国内外有关香合欢组培苗生产技术的文献资料的
查询、收集和整理工作,查阅前人对香合欢组培苗生产技术的研究情
况和目前对香合欢组培苗生产技术的研究进展。
草案编写组负责起草标准草案、征求意见稿和标准编制说明、送
审稿及编制说明的编写工作,包括后期召开征求意见会、网上征求意
见,以及标准的不断修改和完善。
标准实施组负责《香合欢组培苗生产技术规程》团体标准发布后,
组织香合欢组培苗生产的相关林场、护林工开展标准宣贯培训会,对
标准进行详细解读,让相关企业的工作人员了解标准,并根据标准对
香合欢组培苗生产按标准要求的产地环境条件、生长指标、采种与处
理、苗木培育、造林、抚育管理、采伐更新、检查验收、建档等操作
进行,保证香合欢达到应有的生长指标,并对标准实施情况进行总结
分析,不断对团体标准提出修正意见。
2020年1月-3月,主要进行香合欢组培快繁技术的优化及熟化研
究工作,逐步形成了一套较成熟的香合欢组培苗生产技术体系。前期
的理论研究与实验基础为本标准的制定打下了坚实基础。
2021年4月,广西壮族自治区林业科学研究院林业生物技术研究
所及所有关人员召开《香合欢组培苗生产技术规程》开题论证会,确
4
定编制原则、编制框架、内容和相关参考资料,并进行分工,确定由
广西壮族自治区林业科学研究院林业生物技术研究所主要负责《香合
欢组培苗生产技术规程》编制工作。
2021年5月-6月,广西壮族自治区林业科学研究院确定了参与标
准编制的主要人员,成立了团体标准《香合欢组培苗生产技术规程》
编制组,收集了相关国家标准、行业标准和外省标准,在收集的资料
和标准的基础上进行了汇合、整理、分析、总结,对香合欢组培苗生
产技术进行了完善、补充、进一步优化,确定了团体标准《香合欢组
培苗生产技术规程》的基本内容和思路。
2021年7月-8月,经过编制小组成员反复研讨,形成了标准的编
制原则及纲要。以试验数据、调查材料为依据,再次对收集的资料进
行分析研究和处理,经反复讨论和修改,不断完善,形成了工作组讨
论稿。
2021年9月-10月,召开编制小组会议,通过标准编制工作方案,
明确编制小组成员,确定任务分工以及进度安排。对工作组讨论稿的
框架、条款等进行了讨论,并结合文献资料与生产实践实际情况,修
改本标准,并向科研院校、林场等单位专家咨询意见,并组内讨论提
出完善修改意见,修改形成征求意见稿和(征求意见稿)编制说明。
四、标准制定原则和依据
1.编制原则
本标准按照中华人民共和国标准GB/T1.1-2020《标准化工作导则
第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定进行编写,内容和
要求参考了相关法律法规,引用了现行有效的国家标准、行业标准。
引用的具体标准和法律法规如下:
GB6000主要造林树种苗木质量分级
GB/T15776造林技术规程
5
本标准规定了香合欢组培苗生产技术的术语和定义、外植体采集
和处理、初代培养、继代培养、生根培养、瓶苗移栽、苗木出圃、档
案管理。
本标准的制定以香合欢组培苗规范化繁育技术研究的数据为基
础,以推进广西香合欢组培苗培育标准化,实现香合欢无性系育苗规
模化生产,遵循科学性、先进性、合理性和适用性的原则,力求做到
科学规范、指标准确、可操作性强,既与国家相关标准接轨,又符合
广西实际情况,具有较强的实用性,对香合欢组培苗生产有积极的推
动作用。
本标准编写过程中注意与香合欢组培技术相关法律法规的协调问
题,在内容上与现行法律法规、标准协调一致。
2.编制依据
本标准各项技术指标确定的依据,主要是经过多年对香合欢组培
苗培育技术的优化、熟化,系统的分析总结,同时也参照了其他树种
的相关标准。
3.关键技术指标依据
3.1试验方法
(1)外植体的选取及采集
选择经审定的香合欢良种或天然群落中干形通直、生长茂盛、健
康无病虫害的香合欢植株为优良单株;采伐或环割后,采集当年生健
壮的萌芽条。
(2)消毒方式的筛选:剪去大部分叶片,用清水冲洗干净,并用
去磷洗涤剂刷洗外植体,然后用自来水冲洗。在超净工作台上,用75%
的酒精、0.1%的HgCl2、2%NaClO、0.5%KMnO4溶液按下表(表1)
消毒方式进行消毒;消毒过程中用玻璃棒不断搅拌,消毒结束再用无
菌水冲洗3~5次,用灭过菌的吸水纸吸干水分,备用;每个处理共60
6
个茎段,设3个重复。
表1香合欢茎段消毒试验设计
处理消毒方式消毒方式
10.1%的HgCl26min
20.1%的HgCl215min
375%酒精10s0.1%HgCl26min+0.5%KMnO410min
40.1%HgCl26min+2%NaClO5min
50.5%KMnO410min
62%NaClO20min
(3)初代培养
取吸干水分的外植体,在无菌条件下,将切口部分剪掉后,插入
初代诱导培养基,每个处理共60个茎段,设3个重复,每瓶培养基
接种1个茎段。在温度为25±3℃、光照强度1500~2500Lx、光照时
间10~12h/d下培养5~10天,获取初始芽;
初代培养基的筛选:MS为基本培养基,以6-BA浓度(0、1.0、
1.5、2.0mg/L)、ZT浓度(0、0.05、0.1、0.2mg/L)、IBA浓度(0、
0.01、0.05、0.1mg/L)为因素设计3因素4水平L16(34)的正交试
验(表2)。
表2激素浓度对香合欢初代培养影响正交设计表
处理编号激素浓度(mg/L)诱导率(%)
7
6-BAZTIBA
13(1.5)1(0)2(0.01)52.61
22(1.0)4(0.2)3(0.05)37.31
34(2.0)4(0.2)4(0.1)45.42
42(1.0)1(0)4(0.1)40.53
53(1.5)4(0.2)1(0)36.22
63(1.5)2(0.05)4(0.1)29.85
74(2.0)1(0)3(0.05)48.51
81(0)4(0.2)2(0.01)20.05
93(1.5)3(0.1)3(0.05)37.35
101(0)1(0)1(0)11.36
111(0)3(0.1)4(0.1)14.43
122(1.0)3(0.1)1(0)30.36
134(2.0)2(0.05)1(0)49.12
141(0)2(0.05)3(0.05)15.33
152(1.0)2(0.05)2(0.01)33.27
164(2.0)3(0.1)2(0.01)46.93
T10.09c0.36a0.54a
T20.16a0.21b0.36b
T30.27a0.48b0.45c
T40.43a0.32c0.61b
(4)继代培养:待初次培养的外植体茎段生长至≥5cm时,将其
转入继代培养基上培养。接入的茎段经过10d~20d培养,将增殖芽
分株为单芽或小丛,继续转入继代培养基。转接前均需剪切上部叶片,
保持芽体高度3.0cm左右。继代转接代数不宜超过30代;在温度为
25±3℃、光照强度1500~2500Lx、光照时间10~12h/d下培养5~10天,
获取继代芽;
继代培养基的筛选:MS培养基为基本培养基,添加适量核黄素和
8
抗坏血酸,以2-iP浓度(0、1.0、2.0、3.0mg/L)、NAA浓度(0、0.1、
0.3、0.5mg/L)、IBA浓度(0、0.01、0.05、0.1mg/L)为因素设计3
4
因素4水平L16(3)的正交试验(表3)。
表3激素浓度对香合欢继代增殖培养影响正交设计表
激素浓度(mg/L)
处理编号增殖系数
2-iPNAAIBA
13(2.0)1(0)2(0.01)4.6
22(1.0)4(0.5)3(0.05)5.3
34(3.0)4(0.5)4(0.1)7.9
42(1.0)1(0)4(0.1)3.8
53(2.0)4(0.5)1(0)8.7
63(2.0)2(0.1)4(0.1)7.5
74(3.0)1(0)3(0.05)6.9
81(0)4(0.5)2(0.01)3.1
93(2.0)3(0.3)3(0.05)8.5
101(0)1(0)1(0)2.3
111(0)3(0.3)4(0.1)3.0
122(1.0)3(0.3)1(0)4.4
134(3.0)2(0.1)1(0)7.3
141(0)2(0.1)3(0.05)4.1
152(1.0)2(0.1)2(0.01)5.2
164(3.0)3(0.3)2(0.01)8.7
T10.37b0.16b0.32a
T20.26b0.44a0.26b
T30.39a0.49a0.29c
T40.48a0.33a0.45b
(5)生根培养:对继代丛芽进行筛选,选取生长健壮、芽高为
3cm的单芽,在无菌条件下接种到生根培养基中,进行生根培养,培
9
养15~20天,获取生长健壮的组培生根苗;
生根培养基的筛选:½MS为基本培养基,加入适量核黄素,以IBA
浓度(0、0.1、0.5、1.0mg/L)、GRR浓度(0、0.1、1.0、1.5mg/L)、
4
GA3浓度(0、0.1、0.3、0.5mg/L)为因素设计3因素4水平L16(3)
的正交试验(表4)。
表4激素浓度对香合欢生根培养影响正交设计表
激素浓度(mg/L)
处理编号生根率(%)
IBAGRRGA3
13(0.5)1(0)2(0.1)72.3
22(0.1)4(1.5)3(0.3)89.6
34(1.0)4(1.5)4(0.5)86.5
42(0.1)1(0)4(0.5)68.1
53(0.5)4(1.5)1(0)80.3
63(0.5)2(0.1)4(0.5)79.5
74(1.0)1(0)3(0.3)74.2
81(0)4(1.5)2(0.1)73.5
93(0.5)3(1.0)3(0.3)81.2
101(0)1(0)1(0)49.8
111(0)3(1.0)4(0.5)54.9
122(0.1)3(1.0)1(0)61.7
134(1.0)2(0.1)1(0)75.1
141(0)2(0.1)3(0.3)60.2
152(0.1)2(0.1)2(0.1)62.3
164(1.0)3(1.0)2(0.1)75.9
T10.73b0.54b0.43b
T20.49a0.65a0.62a
T30.51a0.58a0.37a
T40.39b0.47a0.44a
10
(6)炼苗移栽:选取根数3条以上、根长达到1cm以上、生长健
壮的组培生根苗,移到室外育苗大棚进行炼苗3~7天,之后用清水洗
掉根部培养基,移栽入育苗容器中,淋透水;
(7)苗木出圃:待组培苗苗高达到20cm以上时,生长健壮、无
病虫害的苗木可出圃造林。
3.2实验结果及结论
(1)外植体用浓度为0.1%的HgCl2溶液或2%次氯酸钠中浸泡
15~20min,消毒效果最佳。选用生长健壮无病虫害侵染的外植体,搭
配使用多种消毒剂,把握合适的消毒时间非常重要。
(2)正交试验表明MS培养基+BA2.0mg/L+白糖3%+琼脂
5.5g/L,pH值为5.8为香合欢初代培养的最优培养基组合。经过反复
的实验发现BA浓度在1.0~2.0mg/L时初代培养效果都比较好,ZT浓
度和IBA浓度对初代培养的影响不明显。
(3)正交试验表明MS+核黄素0.015g/L+抗坏血酸0.02g/L+2-ip
2.0mg/L+NAA0.4mg/L+白糖3%+琼脂5.5g/L,pH值为5.8为香
合欢继代增殖培养的最优培养基组合。经过反复的实验发现2-ip浓度
在1.0~3.0mg/L、NAA浓度在0.1~0.5mg/L时继代增殖效果都比较好,
IBA浓度对初代培养的影响不明显。
(4)正交试验表明1/2MS+核黄素0.015g/L+IBA1.0mg/L+GRR
1.5mg/L+GA30.5mg/L+白糖1.5%+琼脂6.0g/L,pH值为5.8。经
过反复的实验发现IBA浓度在0.1~1.0mg/L、GRR浓度在0.1~1.5
mg/L、GA3浓度在0.1
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