SN∕T 3536.2-2017 出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法 第2部分：液相色谱-质谱∕质谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法第2部分：液相色谱-质谱/质谱法I14.3氨水：含量为25%～28%。24.13弱阴离子固相萃取(SPE)柱：60mg,3mL或性能相当者。使用前依次用3mL甲醇、3mL乙酸铵溶液(4.10)活化。4.14酸性橙Ⅱ号标准物质：C₁₆H₁N₂NaO₄S,CAS号633-96-5,纯度大于或等于99.0%。4.15酸性橙Ⅱ号标准储备溶液：准确称取0.0100g酸性橙Ⅱ号标准品至100mL容量瓶中，用乙腈(4.1)配制成浓度为100μg/mL的标准储备液，标准储备液可在一18℃条件下储存6个月。4.16酸性橙Ⅱ号标准工作溶液：分别准确移取一定体积的标准储备溶液，根据需要用5mmol/L乙酸铵-乙腈(4.11)稀释成50ng/mL,100ng/mL,150ng/mL,200ng/mL,250ng/mL的标准工作溶液，0℃~4℃冰箱保存，有效期为一周。5仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/M5.2分析天平：感量分别为0.0001g和0.01g5.3固相萃取装置。5.4旋转蒸发器。5.5氮吹仪。5.6旋涡混匀器。5.7组织捣碎机。5.8均质器：转速不低于10000r/min。5.9离心机：转速不低于4000r/min6试样的制备与保存6.1试样制备取代表性样品约500g,混匀，装人洁净容器，密封并标明标识。将黄鱼、柑橘和红瓜子样品或去皮、壳、骨等(不可用水洗涤),取可食部分约500g,切碎或经粉碎机6.2试样保存料试样于-18℃冷冻保存。在抽样和制样操作过程中，应防止样品受到污染或发生含量的变化。37测定步骤7.1提取称取5g(精确到0.01g)均匀试样，置于50mL具塞离心管中，加入5g氯化钠(腈(4.1),均质提取1min,4000r/min离心5min。将上层清液过无水硫酸钠柱(4.8)于100mL浓缩瓶中，下层及残渣再用20mL乙腈(4.1)重复提取一次，合并提取液于同一浓缩瓶中，在40℃水浴中用旋转蒸发浓缩至近干，再用氮气流吹干，用2mL20mmol/L乙酸铵溶液(4.10)溶解浓缩瓶中残渣待将上述待净化液全部转移至经过预活化的弱阴离子固相萃取柱(413)中，控制流速在1mL/min~2mL/min,再分别用2mL及1mL20mmol/L乙酸铵溶液(4.10)洗涤浓缩瓶，过固相萃取柱，弃去流出液。依次用3mL水、1mL甲醇淋洗固相萃取柱最后用3mL5%氨水-甲醇溶液(4.12)洗脱，控制流速在1mL/min~2mL/min,收集洗脱液于15mL刻度离心管中，洗脱液经40℃氮气仪吹干后，用7.3基质标准工作溶液的制备取空白样品，按7.1和7.2操作至“洗脱液经40℃氮气仪吹干后”,加入1.00mL浓度分别为液相色谱-质谱/质谱测定。7.4液相色谱-质谱/质谱条件液相色谱-质谱/质谱条件如下：d)柱温：30℃;h)质谱/质谱参考条件参见表A.1和表A.2。7.5液相色谱-质谱/质谱检测在仪器最佳工作条件下，对基质标准工作液和样液进行测定，外标法定量，样液中待分析物的响应值均应在仪器测定的线性范围内，若超出线性范围应适当稀释，同时用相同稀释倍数的基质标准工作液进行定量。样品基质对标准工作液有一定影响，建议样品处理后尽快检测。7.6液相色谱-质谱/质谱确证如果样液与标准工作溶液的质量色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，允许偏差小于±2.5%,4士257.7空白试验8结果计算和表述A——试样中待测组分的峰面积；9.1测定低限5色谱和质谱参考条件¹时间%%电离方式多反应监测驻留时间SV60.250.500.751.001.25501.752.002.252.502.75时间/min100MRMof2MRMof2ChannelsES-7(资料性附录)不同基质中的回收率表C.1酸性橙Ⅱ号在11种样品中添加回收率范围样品基质回收率范围%样品基质回收率范围%熏肠89yellowcroaker,citrus,orangejuice,smokeing,chili,millet,reThefollowingdocumentsarenecessaryforthisstandard.Formassspectrometrywithelectrosprayionizationandtr4.3AmmoniaWater:with25%～28%ammonium4.4AceticAcid.flask,mixandaddAceticacid(44)topH=4anddilut4.115mmol/Lammonia-AC-Acet4.125%AmmoniaWater-methanolsolutiondilute5methanol(4.2).4.13Weakanionexchangecol99.0%.0℃~4℃,thevalidityis1week.4.17Membranefilt5.1Liquidchromatography-massspectrometry,equippedwithdruplemassspectrometerorequival6.1.2Jujubecake,smokedsausage,hotpotpreparationseaTakeapproximately500gofrepresentativesample,c6.1.3Yellowcroaker,Orange,RedTakeapproximately500gofrshell,fishboneet.(donotfuzhushouldbestoreditonitrile(4.1).Combinetheeluantandtheextraction,andconcenTakeablanksample,accorde)Injectionvolu士25X—theresiduecontentoV—thefinalvolumeofsamplem—thecorrespondingmassoftestsampleinthefinalscitrus,ora