2025届云南省玉溪市通海县第二中学高考仿真卷生物试卷含解析

2025届云南省玉溪市通海县第二中学高考仿真卷生物试卷注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．甲地因森林火灾使原有植被消失，乙地因火山喷发被火山岩全部覆盖，之后两地均发生了群落演替。关于甲、乙两地群落演替的叙述，错误的是A．甲地和乙地发生的演替类型相同B．若没有外力干扰，甲地可重现森林C．地衣会比苔藓更早地出现在乙地火山岩上D．甲、乙两地随着时间延长生物多样性逐渐增多2．某种大型肉食动物迁入一新的生态系统后，大型肉食动物对当地的小型肉食动物和某些植食性动物有捕食和驱赶作用。一段时间内，下列情况不会发生的是（）A．增加物种丰富度导致营养结构更加复杂B．某些生产者的个体数量增加后保持稳定C．使植食性动物之间的竟争优势发生改变D．生态系统各营养级生物同化能量均减少3．下列关于动物细胞培养及融合技术的叙述，正确的是（）A．细胞融合即细胞杂交，指由2个或多个细胞融合成1个细胞的现象B．一个脾细胞和一个骨髓瘤细胞融合而成的杂交细胞称为杂交瘤细胞C．滋养层细胞可对细胞克隆起到支持生长的作用D．“多莉”克隆过程中，营养限制性培养的目的是使细胞周期同步化，最终有利于重组细胞中核基因表达的分子开关的启动4．下图表示获得玉米多倍体植株采用的技术流程。下列有关说法不正确的是（）A．可用秋水仙素或低温诱导处理发芽的种子B．可用显微镜观察根尖细胞染色体数目的方法鉴定多倍体C．得到的多倍体植株一般具有茎杆粗壮、果穗大等优点D．将得到的多倍体植株进行花药离体培养又可得到二倍体5．下列关于生物学实验的说法叙述不正确的是（）A．通过荧光标记技术，可以知道基因在染色体上的位置B．预实验的目的是为了减少实验误差C．土壤中小动物类群丰富度的研究常用取样器取样的方法进行采集、调查D．盐酸可用于催化蛋白质、脂肪和淀粉的水解6．据报道，科研人员选取成人皮肤细胞，将其培育成神经干细胞后，放入特制的环境中，诱导组织进一步生长发育，最终形成一个豌豆大小的“微型人脑”。这个组织已经达到9周胎儿大脑的发育水平，但尚不能独立思考。下列描述正确的是A．由成人皮肤细胞培育出微型人脑的过程中，处于分裂期的细胞不进行DNA复制和蛋白质合成B．若培育过程中因感染病毒出现癌变，则癌变细胞的基因组中整合有病毒癌基因以及与致癌有关的核酸序列C．若培育过程中出现细胞凋亡，则酶的活性都下降D．由成人皮肤细胞培育成微型人脑，体现了细胞的全能性7．下列关于进化的叙述，正确的是（）A．自然选择是进化的前提B．进化发生的标志是生殖隔离的出现C．遗传多样性的下降不利于生物的适应性进化D．若某小鼠接受辐射而基因突变，则该小鼠发生了进化8．（10分）下列生活中的实例和对应的生物解释（或原理）错误的是（）A．糖尿病患者不能口服胰岛素进行治疗——口服后蛋白质被水解，失去功效B．矿工职业病硅肺﹣﹣硅尘破坏吞噬细胞的溶酶体膜，内溶物释放后破坏细胞结构C．新宰的猪肉放置一段时间再煮更新鲜——这与肌细胞线粒体的活动密切相关D．酷夏时节，户外工作人员需要补充盐汽水——保证体内水盐平衡二、非选择题9．（10分）新的研究表明，专性嗜热菌株的嗜热酶在处理食品和造纸工业废水、芳香族化合物、氰药、重金属及其他有机难降解物质等方面具有重要作用。如图甲所示为降解污染物过程中由该酶催化的反应与未使用该酶的非催化反应的自由能变化情况。请据图回答问题：（1）化学反应时必定会经过一个过渡态——活化络合物。过渡态具有比反应物分子和生成物分子都要高的势能。催化剂的实质就是与反应物分子结合，改变过渡态的势能，图甲中a和b中为催化反应活化能的是____________，酶可以很大程度地____________反应活化能。（2）大多数酶属于蛋白质，少数酶属于____________，影响其活性的因素主要有____________，所有的酶都____________（填“有”或“没有”）调节生物体生命活动的作用。（3）细胞中的绝大多数生理过程靠ATP____________（填“直接”或“间接”）提供能量。但也有例外，如在人体小肠绒毛细胞的细胞膜上，葡萄糖主动运输载体蛋白在Na+顺浓度梯度从细胞外扩散到细胞内时，“捎带着”把葡萄糖转运到细胞内（如图乙）。所以，小肠绒毛细胞以主动运输的方式吸收葡萄糖时，ATP____________（填“直接”或“间接”）提供能量。10．（14分）某科研小组通过农杆菌转化法将黑麦草的抗旱基因P转入野生型拟南芥，以验证基因P的功能，其流程如图所示。回答下列问题：（1）利用PCR技术从黑麦草的DNA中分离并克隆目的基因P，______________（填“需要”或“不需要”）用限制酶进行预处理，其原因是_________________________。（2）用SmalI和SalI这两种限制酶分别对含有基因P的DNA和质粒进行双酶切，然后连接形成①______________。与双酶切相比，用同一种限制酶对二者进行单酶切的缺点是容易造成基因P或质粒自身环化、______________。（3）将②的花序浸入农杆菌悬浮液以实现转化，在适宜条件下培养，收获@的种子，在含潮霉素（一种抗生素）的MS培养基上筛选得到③，这表明质粒载体携带的选择标记是______________。（4）基因P表达的蛋白P是脯氨酸合成过程所需的一种关键酶，而脯氨酸在细胞中的积累既可提高植物的抗旱性，又可抑制蛋白P的酶活性。研究发现，蛋白P的第128位苯丙氨酸若变为丙氨酸，该抑制作用则显著降低。请据此提出进一步提高植物抗旱性的一种简要思路______________。11．（14分）鸸鹋油提取自澳洲动物鸸鹋（一种当地常见鸟类）的背部脂肪，具有很多用途，如促进伤口愈合，缓解关节炎等，也常与一些抗菌成分混合制成抗菌药物，近年来受到研究人员的关注。（1）随着抗菌药物被广泛使用，病原菌的抗药性基因频率发生___________（填“定向”或“不定向”）改变，人们迫切希望发现新结构的抗菌化合物。（2）前期研究发现鸸鹋油的水溶性较差，所以不能在___________培养基上出现清晰的抑菌圈，故将醇鹊油与乙醇和Tween81（一种乳化剂）混合均匀制成乳液。为确定鸸鹋油的最小抑菌浓度（MIC），研究人员进行了以下实验：①将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌分别___________到LB培养基中，在37℃摇床条件下培养。摇床振荡培养的原因是___________。②一段时间后将上述培养基稀释为一定浓度的菌悬液，加入不同稀释浓度的鸸鹋油乳液并振荡混匀，培养21h后测定菌体的存活状况，结果如下表。鸸鹋油浓度/%菌体生长情况大肠杆菌金黄色葡萄球菌沙门氏菌1+++1．11156+++1．11313+++1．11625-++1．1125--+1．125--+1．15--+注：“+”表示有菌生长；“-”表示无菌生长。上述结果显示：_______________。（3）常见抗菌药物青霉素的抗菌机理是抑制细菌细胞壁的合成。有人提出鸸鹋油可增大菌体细胞膜的通透性。已知多数细菌体内存在β—半乳糖苷酶，可催化乳糖水解生成_________________和半乳糖，邻硝基酚-β半乳糖苷（ONPG）是一种乳糖类似物，可进入菌体，被β-半乳糖苷酶水解为邻硝基苯酚（一种黄色物质）。分光光度计可定量检测溶液中某种物质的含量。为确定鹊油能否增大菌体细胞膜通透性，请你根据上述原理写出实验思路____________。12．萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、A【解析】

甲地因森林火灾使原有植被消失，但原有的土壤条件基本保留，甚至还保留了植物的种子或其他繁殖体，甲地发生的演替属于次生演替；乙地因火山喷发被火山岩全部覆盖，植被彻底消失，乙地发生的演替属于初生演替。【详解】A、由以上分析可知：甲地发生的演替属于次生演替，乙地发生的演替属于初生演替，A错误；

B、无论是初生演替，还是次生演替，若没有外力干扰，都可演替到森林阶段，B正确；

C、初生演替要依次经历裸岩阶段、地衣阶段、苔藓阶段、草本植物阶段、灌木阶段、森林阶段，C正确；

D、演替的最终结果使生物多样性增加，生态系统稳定性增加，D正确。

故选：A。2、D【解析】

一个完整的生态系统包括生物部分和非生物部分，非生物部分包括阳光、空气、水、温度等，生物部分由生产者、消费者和分解者组成。生态系统的能量流动和物质循环都是通过食物链和食物网的渠道实现的，物质是能量的载体，使能量沿着食物链(网)流动，而能量又作为动力，使物质能够不断地在生态系统和无机环境之间循环往复。【详解】A、某种大型肉食动物迁入一新生态系统后，对当地的小型肉食动物和植食性动物有捕食和驱赶作用，使物种丰富度增加、营养结构更加复杂，与题意不符，A错误；B、植食性动物数量减少，对植物的捕食减弱，会导致某些生产者的个体数量增加后保持稳定，与题意不符，B错误；C、根据题意可知，某种大型肉食性动物迁入到一个新的生态系统时，对低营养级肉食性动物与植食性动物有捕食和驱赶作用，故某种植食性动物可能在竞争中失去原有竞争优势，与题意不符，C错误；D、某种大型肉食动物迁入一新生态系统后，改变了植食性动物竞争优势状况，但生态系统各营养级同化能量变化不能确定，不可能出现各个营养级生物同化量都减少的情况，D正确。故选D。3、D【解析】

细胞融合与细胞杂交细胞融合指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象。细胞融合可以在基因型相同或不同的细胞间进行，其中基因型不同的细胞间的融合就是细胞杂交。由于细胞杂交中染色体容易丢失,动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法也类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。提高细胞克隆形成率的措施有：选择适宜的培养基、添加血清(胎牛血清最好)、以滋养细胞(如经射线照射本身失去增殖力的小鼠成纤维细胞)支持生长、激素(胰岛素等)刺激、使用CO2培养箱、调节pH等。【详解】A、动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般为两个细胞的融合，其中基因型不同的细胞间的融合就是细胞杂交，A错误；B、抗体生成细胞和瘤细胞的融合叫做杂交瘤技术，据此可知，一个经过免疫的脾细胞与一个骨髓瘤细胞融合而成的杂交细胞称为杂交瘤细胞，B错误；C、滋养细胞可对细胞克隆起到支持生长的作用，不是滋养层细胞支持生长，C错误；D、多莉”克隆过程中，营养限制性培养的目的是使细胞周期同步化，最终有利于重组细胞中核基因表达的分子开关的启动，D正确。故选D。4、D【解析】

多倍体育种是指利用人工诱变或自然变异等，通过细胞染色体组加倍获得多倍体育种材料，用以选育符合人们需要的优良品种。多倍体是指由受精卵发育而来并且体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体。多倍体育种的原理是染色体畸变。单倍体是具有体细胞染色体数为本物种配子染色体数的生物个体。配子发育来的均为单倍体。【详解】A、秋水仙素能抑制纺锤丝的形成，可用秋水仙素或低温诱导处理发芽的种子，使细胞中的染色体数目加倍，A正确；B、多倍体细胞中的染色体数目多，可用显微镜观察根尖细胞染色体数目的方法鉴定多倍体，B正确；C、得到的多倍体植株含有多套遗传物质，一般具有茎杆粗壮、果穗大等优点，C正确；D、将得到的多倍体植株进行花药离体培养得到的是单倍体，D错误。故选D。5、B【解析】

盐酸既能催化蛋白质水解，也能催化脂肪和淀粉分解；土壤中小动物类群丰富度的调查常用取样器取样法进行采集。对于活动能力强、活动范围大的个体调查种群密度时适宜用标志重捕法，而一般植物和个体小、活动能力小的动物以及虫卵等种群密度的调查方式常用的是样方法。【详解】A、通过荧光标记技术，可以判断基因与染色体的位置关系，A正确；B、预实验的目的是为进一步实验摸索条件，不是为了减少实验误差，B错误；C、调查土壤中小动物类群丰富度常用取样器取样法，C正确；D、盐酸既能催化蛋白质水解，也能催化脂肪和淀粉分解，D正确。故选B。6、B【解析】

1、细胞全能性是指已经分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。细胞全能性以细胞形成个体为标志。

2、细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程。细胞凋亡是生物体正常的生命历程，对生物体是有利的，而且细胞凋亡贯穿于整个生命历程。

3、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质：基因的选择性表达。

4、癌细胞的主要特征：

（1）无限增殖；

（2）形态结构发生显著改变；

（3）细胞表面发生变化，细胞膜上的糖蛋白等物质减少，易转移。【详解】A、处于分裂期的细胞不进行DNA复制，但是有少量蛋白质合成，A错误；B、若培育过程中因感染病毒出现癌变，则癌变细胞的基因组中整合有病毒癌基因以及与致癌有关的核酸序列，B正确；C、细胞的凋亡与基因的选择性表达有关，此过程中与凋亡相关的基因的表达能力上升，与凋亡相关的酶的活性增强，C错误；D、由成人皮肤细胞培育成微型人脑，但没有形成完整个体，因此不能体现细胞的全能性，D错误。7、C【解析】

种群是生物进化的基本单位，生物进化的实质是种群基因频率的改变。突变和基因重组，自然选择及隔离是物种形成过程的三个基本环节，通过它们的综合作用，种群产生分化，最终导致新物种形成。在生物进化过程中，突变和基因重组产生生物进化的原材料，自然选择使种群的基因频率定向改变并决定生物进化的方向，隔离是新物种形成的必要条件。【详解】A、进化的基本单位是种群，不是个体，生物进化的实质是种群基因频率发生改变，某小鼠发生基因突变，种群基因频率不一定改变，A错误；B、进化发生的标志是基因频率的改变，B错误；C、遗传多样性的下降使可遗传变异的类型减少，不利于生物的适应性进化，C正确；D、基因突变只是提供了生物进化的原材料，不能决定生物进化方向，D错误。故选C。【点睛】本题考查生物进化的相关知识，意在考查学生的识记能力和对生物进化的原因及过程的理解，把握知识间联系，形成知识网络的能力；能运用所学知识解释生物学问题的能力。8、C【解析】

1、蛋白质类药物不能口服，因为口服后被水解；2、溶酶体内有多种水解酶，一旦溶酶体膜破裂被释放出来，会破坏细胞结构，使细胞死亡；3、动物体刚死时溶酶体不破裂，一段时间后其中的酶会随其破裂溢出；溶酶体内含有蛋白酶原，能在细胞死亡后被激活成为蛋白酶，催化肌肉细胞间的胶原蛋白水解，使肌肉变得松软，烹调后更加鲜嫩；4、大量出汗时会带走体内的水分和无机盐，因此需要补充盐汽水以保证体内水盐平衡。【详解】A、糖尿病患者不能口服胰岛素进行治疗，是因为胰岛素是蛋白质，口服后被水解，失去功效，A正确；B、硅肺是肺部吸入硅尘后，硅尘被吞噬细胞吞噬，吞噬细胞中的溶酶体缺乏分解硅尘的酶，而硅尘却能破坏溶酶体膜，使其中的水解酶释放出来，破坏细胞结构，使细胞死亡，最终导致肺功能受损引起，B正确；C、动物体刚死时溶酶体不破裂，一段时间后其中的酶会随其破裂溢出，溶酶体内含有蛋白酶原，能在细胞死亡后被激活成为蛋白酶，催化肌肉细胞间的胶原蛋白水解，使肌肉变得松软，烹调后更加鲜嫩，C错误；D、酷夏时节，户外工作人员大量出汗，带走体内的水分和无机盐，因此需要补充盐汽水以保证体内水盐平衡，D正确。故选C。【点睛】本题考查学生运用生物学知识解决实际生活与生产相关问题，相关的知识点有蛋白质的水解、矿工职业病硅肺的形成原因、溶酶体的功能和体内的渗透压平衡，一个题目综合考查了四个知识点，有一定难度。二、非选择题9、a降低RNA温度和pH没有直接间接【解析】

考查识图能力及图表中信息提取和处理能力；考查酶的概念、ATP的功能等基本知识【详解】（1）根据图甲可知a表示“和酶结合的过渡态”，b是没有酶时的活化能，显然酶可以很大程度地降低反应活化能。（2）大多数酶属于蛋白质，少数酶属于RNA，影响其活性的因素主要有温度、PH等，酶只有催化作用，都没有调节生物体生命活动的作用。（3）ATP是直接能源物质，细胞中的绝大多数需要能量的生理过程靠ATP直接提供能量。根据“但也有例外”，“捎带着”等语义可知ATP间接为小肠上皮细胞吸收葡萄糖提供能量。【点睛】关键：图甲信息的提取，a表示酶与底相结合的活化能，b代表无酶催化的活化能；图乙“绝大多数生理过程靠ATP”，“但也有例外”，“捎带着”等信息的分析。10、不需要使用基因特异性引物可以从模板DNA中扩增出特定基因重组质粒（重组DNA分子）基因P和质粒反向连接潮霉素抗性基因定点诱变改造目的基因P，使其编码的蛋白P的第128位苯丙氨酸替换为丙氨酸；将改造后的基因转入受体植物，以期提高受体植物的抗旱性【解析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。从分子水平上检测目的基因的方法：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。【详解】（1）使用基因特异性引物可以从模板DNA中扩增出位于两个引物之间的特定基因序列，无需限制酶预先切取模板。（2）目的基因和质粒载体的连接物称为重组质粒或者重组DNA分子。用同一种限制酶对含有目的基因的DNA和质粒进行单酶切，因为获得的末端相同，所以容易造成目的基因或质粒自身环化、目的基因和质粒反向连接。（3）MS培养基中添加潮霉素进行筛选，由此可见，质粒载体携带的标记基因是潮霉素抗性基因。（4）蛋白P的第128位苯丙氨酸若变为丙氨酸，脯氨酸抑制蛋白P的酶活性的作用则显著降低。但是，如何将蛋白P的第128位苯丙氨酸变为丙氨酸，这就必须从根本上相应地改造抗旱目的基因P，将改造后的基因转入受体植物，以期提高受体植物的抗旱性。【点睛】本题涉及选修模块3“现代生物科技专题”中基因工程和蛋白质工程等知识，选取真实科研案例作为试题情境，考查考生对PCR的原理和应用、限制酶的作用特点、连接酶的作用、质粒载体的作用及特点，以及蛋白质工程的思路等知识的理解，考查应用所学知识解决实际问题的能力。11、定向固体接种供氧、目的菌与营养物质充分接触大肠杆菌对鸸鹋油较为敏感，最小抑菌浓度约为1．11625%，对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度约为1．1125%，并且鸸鹋油对沙门氏菌没有表现出抑菌性葡萄糖将大肠杆菌（或其他细菌）置于培养液中培养一段时间，再加入ONPG和一定浓度（≥MIC）的鸸鹋油，对照组不加鸸鹋油。一段时间后利用分光光度计测量邻硝基苯酚的量，记录并比较。【解析】

微生物的实验室培养，常用到培养基，培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。抑菌圈法又叫扩散法，是利用待测药物在琼脂平板中扩散使其周围的细菌生长受到抑制而形成透明圈，即抑菌圈，根据抑菌圈大小判定待测药物抑菌效价的一种方法。【详解】（1）随着抗菌药物被广泛使用，抗药性强的病原菌存活，病原菌的抗药性基因频率提高，发生定向改变。（2）鸸鹋油的水溶性较差，所以不能在固体培养基上出现清晰的抑菌圈。①将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌分别接种到LB培养基中。摇床振荡培养可以提高溶氧量、增加目的菌与营养物质的接触。②从表中可知，不同稀释浓度的鸸鹋油乳液中沙门氏菌均有生长，说明鸸鹋油对沙门氏菌没有表现出抑菌性。1.11625浓度下，大肠杆菌停止生长，1.1125浓度下，金黄色葡萄球菌停止生长，说明大肠杆菌对鸸鹋油较为敏感，最小抑菌浓度约为1.11625%，对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度约为1.1125%。（3）乳糖由一分子半乳糖和一分子葡萄糖组成。邻硝基酚-β半乳糖苷（ONPG）是一种乳糖类似物，可进入菌体，被β-半乳糖苷酶水解为邻硝基苯酚（一种黄色物质）。分光光度计可定量检测溶液中某种物质的含量。为确定鹊油能否增大菌体细胞膜通透性，自变量是鹊油的有无，因变量是菌体细胞膜的通透性。观测指标为邻硝基苯酚的量。因此，实验可设计为：将大肠杆菌（或其他细菌）置于培养液中培养一段时间，再加入ONPG和一定浓度（≥MIC）的鸸鹋油，对照组不加鸸鹋油。一段时间后利用分光光度计测量邻硝基苯酚的量，记录并比较。【点睛】本题以实验的形式考查微生物的培养与筛选，要求学生对实验结果有一定的分析处理能力。12、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：