《烟草及烟草制品主要大分子物质的测定》第 1 部分 纤维素、半纤维素第 2 部分 木质素技术报告

《烟草及烟草制品主要大分子物质的测定》第1部分纤维素、半纤维素第2部分木质素《烟草及烟草制品主要大分子物质的测定》第1部分纤维素、半纤维素1 1 1 2 3 3 3 4 4 4 5 5 6 6 7 7 7 7 7 7 8 8 9 9 9 11 2 12 13 17 23 25 26 1烟草及烟草制品主要大分子物质的测定第1部分纤维素、半纤维素大分子是指分子量在5000以上的生物学物质，烟草大分子物质主要有纤纤维素是由1000～10000个D-吡喃型葡萄糖基经β-1,4糖苷键联结而成的纤维素、半纤维素是烟草细胞壁的主要成分，约占烟叶、梗丝质量的的影响。蒲俊[7]等人的研究结果表明，纤维素含量与烟叶杂气呈正相关，与香冰[8]等考察了武陵山区烤烟上部叶片纤维素含量与质量指标间相关性。结果显国家局于2023年发布国烟科〔2023〕35号文件《国发2023年度烟草行业标准项目计划的通知》，由福建中烟作为牵头单位，负2和木质素结合在一起，其结合方式和程度对植半纤维素(Hemicellulose)：植物细胞壁中D-木糖基、D-甘露糖基、D-半乳糖基、L-阿拉伯糖剂的作用下半纤维素亦被除去得到酸性洗涤纤维（ADF），后经过72％硫酸酸纤维、酸性洗涤纤维，与纤维素、半纤维素的实际3纤维素的含量，操作简单、环保安全，被农业部《农业生物质原料纤维素、半质原料化学成分的测定第5部分：纤维素、半纤维素、果胶和木质素的测定》该标准不能直接用于烟草基质的检测，需进行优化改进。2、对烟草和烟草制品同时进行分析和验证，开展参数优化与评价，具4试样依次采用80%乙醇-饱和氯化钠溶液去5水应为蒸馏水或至少应L‒(+)‒阿拉伯糖、D-半乳糖、D-(+)-木糖、D-甘露糖、葡萄糖，纯度均≥浓硫酸，98质量分数）。氢氧化钠溶液，50质量分数）。mL水溶解，再加入800mL无水萄糖、7mg木糖、10mg甘露糖于50mL烧杯中，精确至0.1mg，用硫酸稀释63离心机，适用507色谱柱：糖分析柱2.0mm×7），冷却后的酸解液经G4玻璃砂芯坩埚抽滤，用90℃~100℃热水清洗耐压玻——流动相A：水；——进样量：25μL；——温度：20℃。表1检测波形8时间/s电位/V(Ag/AgCl参比）积分0.000.1-0.200.1开始0.400.1结束0.41-2.0-0.42-2.0-0.430.6-0.44-0.1-0.50-0.1-表2高效阴离子色谱梯度洗脱程序时间/minA(%)B(%)C(%)D(%)-20.0000-17.0002030.0002030.149501040.0305020046.03050200（溶液A:水;B:200mmol/LNaOH;C:1mo（％）Cglu——葡萄糖检测质量浓度，单位为微克每毫升(µg/mL）；Cgal——半乳糖检测质量浓度，单位为微克每毫升(µg/mL）；Cman——甘露糖检测质量浓度，单位为微9Cxyl——木糖检测质量浓度，单位为微克每毫升(µg/mL）；Cara——阿拉伯糖检测质量浓度，单位为微）；F——定容后溶液稀释倍数；）；）；）；通过调研与实验发现NY/T3494两步酸解法推荐采用液相色谱-蒸发光散射或示差检测[23]，这两类检测器除稳定性、重现性差外[29]，检测灵敏度低，样品除上述两类设备外离子色谱利用其阴离子交换色谱柱对可溶性糖组分进行单糖pKa（25oC)甘露糖木糖葡萄糖半乳糖阿拉伯糖木糖、半乳糖和阿拉伯糖的pKa值很接近，因此考察了不同NaOH淋洗液浓度降低至3mmol/L，各单糖的保留时间逐渐增加，并且木糖和甘露糖的分离度逐渐提高，当NaOH浓度为2mmol/L时，5种单糖峰形对称，并且达到了完全分离，且保留时间随着pKa值的增大而减小。因此，在后面的实验中，最终采用虑到灭菌锅在行业中普及率不高，项目组考（注：图中显示的葡萄糖的量为其实际质量分数的1/10）得率增加，当加热时间为60min时，纤维二糖的得率最大，而葡萄糖、木糖和甘露糖的得率分别为26.3%、6.5%和2.7%。③当加热时间进一步延长时，纤维二糖的得率快速下降，加热120min时，纤维二糖平均得率降至0.2%，同时，葡萄糖、木糖和甘露糖的得率分别上升至86.8%、7.糖烘箱（%）灭菌锅（%）相对平均偏差%阿拉伯糖0.530.55半乳糖0.330.313.13葡萄糖77.0978.210.72木糖7.627.88甘露糖6.166.573.22木糖和阿拉伯糖，再用离子色谱-电化学检测分析上述单糖来确定纤维素和半纤通过文献调研发现，YC/T216-2013《烟草及烟草制品淀粉的测定连续流标准YC/T251-2008[33]检测萃取液中的葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖等可溶性糖样品不同萃取体积中可溶性糖含量（mg）20mL30mL40mL50mLA（烤烟）85.9B（白肋烟）4.2C（香料烟）81.491.291.391.3D（梗丝）83.599.899.799.8且在高浓度高氯酸环境下，纤维素、半纤维素有酸项目组根据文献，采用90%二甲基亚砜/水溶液50℃温度下振荡萃取12h8、12、16h，检测萃取液中淀粉含样品YC/T216测定值淀粉（%）4hA（烤烟）4.363.643.824.374.35B（白肋烟）0.900.770.880.890.87C（香料烟）6.254.855.436.246.30D（梗丝）0.86样品YC/T216测定值淀粉（%）2h4hA（烤烟）4.363.454.164.334.404.37B（白肋烟）0.900.730.870.880.910.88C（香料烟）6.254.735.686.286.246.29D（梗丝）0.82B白肋烟、D梗丝超声4h就完全萃取出烟叶中的淀粉，因此，项目组将改进采淀粉的去除效果和对萃取时间的影响。称取A（烤萃取剂温度(℃)超声萃取时间（h）淀粉（%）A（烤烟）B（白肋烟）C（香料烟）D（梗丝）5513.860.864.830.965524.040.875.765534.150.896.235544.370.886.245554.390.886.246014.070.884.866024.220.875.946034.370.886.236044.390.896.246054.380.886.246514.020.884.886524.240.886.026534.370.876.236544.360.886.246554.380.896.24需萃取4h完全萃取烟叶中的淀粉；在温度60、65℃时，需3h完全萃取烟叶一称样量（0.50g）条件下，称取A（烤烟）、B（白肋烟）、C（香料烟）、D萃取剂体积（mL）超声萃取时间（h）滤液淀粉（%）A（烤烟）B（白肋烟）C（香料烟）D（梗丝）5034.060.874.916030.895.977034.370.886.2434.390.886.23萃取剂体积（mL）超声萃取时间（h）滤渣淀粉（%）A（烤烟）B（白肋烟）C（香料烟）D（梗丝）5030.32N.DN.D6030.27N.D0.28N.D703N.DN.DN.DN.D3N.DN.DN.DN.D法[23]，对浓酸、稀酸两步酸解过程中半纤维素含量较烟叶高，因此选择薄片样品来开展硫酸浓度（%）纤维素（%）半纤维素（%）656.62706.77726.87756.105.05为考察浓酸常温过程温度对纤维素、半纤维素结果的影响，样品加入2mL结果如表12和图6所示：72%硫酸酸解温度(℃)纤维素（%）半纤维素（%）256.15306.51356.06405.33455.15长趋势；酸解温度30℃条件下，纤维素、半纤维素的结果最大；当酸解温度升度升到40℃后，样品体系颜色明显变深，出现结团不均匀现象，过高温度可能导致烟叶样品炭化，从而引起纤维素、半纤维素结果的偏低。因此选择30℃作为选择浓酸常温过程合适的酸解时间，样品加入2mL72%硫酸溶液后分在72%硫酸酸解时间（h）纤维素（%）半纤维素（%）4.806.202.06.75.68烘箱酸解温度(℃)纤维素（%）半纤维素（%）5.695.996.266.095.55升高，且120℃时纤维素、半纤维素数值达到最大；110℃则酸解时间不够，酸解不完全；而125℃时，酸解温度过高，酸解的单糖进一步的损失，导致了烘箱酸解时间(h)纤维素（%）半纤维素（%）4.535.942.020.056.872.56.583.06.54放置时间（h）样品待测液（%）纤维素半纤维素测定结果036936726.596.536.746.796.666.726.54统计结果RSD（%）斜率，b1b0斜率不确定度，s（b1）统计临界值，t0.95,5t0.95,5×s（b1）|b1|<t0.95,5×S（b1）-0.0010.022.570.04通过-0.0036.670.692.57通过图10，按时间顺序分别为：阿拉伯糖，半乳糖，葡萄糖，木糖，甘露糖。以糖；）标准品线性回归方程相关系数（R2）检出限(μg/mL）定量限(μg/mL）阿拉伯糖y=3.273x-0.011070.99980.00220.0073半乳糖y=3.6158x-0.03140.99980.00360.0120葡萄糖y=4.4229x+0.06240.99980.00460.0153木糖y=4.0952x+0.00480.99970.00420.0140甘露糖y=2.3196x-0.02660.99900.00220.0073指标检出限（%）定量限（%）纤维素（以葡萄糖计）0.020.07半纤维素（以木糖计）0.020.06样品12345均值（%）RSD均值RSDA烤烟第一天第二天第三天第四天第五天6.266.136.346.246.366.056.546.195.956.556.396.316.046.496.386.216.636.226.386.486.016.646.266.316.256.076.532.222.512.481.851.766.292.64B白肋烟第一天第二天第三天第四天第五天6.566.436.376.546.636.456.846.596.056.536.396.616.816.346.796.686.716.546.526.836.226.586.446.216.416.466.636.556.336.642.692.302.583.292.656.52香料烟第一天第二天第三天第四天第五天6.256.396.476.156.376.486.596.266.236.676.166.726.076.446.276.636.086.626.496.556.286.076.476.316.586.246.132.702.681.852.541.066.342.83D梗丝第一天第二天第三天第四天第五天2.001.441.040.90样品12345均值RSD均值RSDA烤烟第一天第二天第三天第四天第五天2.642.612.442.432.462.502.702.392.552.552.692.682.412.382.492.712.562.542.422.632.622.562.482.512.622.632.622.452.462.553.132.512.442.842.972.543.39B白肋烟第一天第二天第三天第四天第五天2.422.412.372.432.242.422.492.352.322.372.412.432.432.192.322.382.542.252.162.342.512.442.222.172.342.432.452.342.192.832.102.624.213.472.354.36香料烟第一天第二天第三天第四天第五天2.492.452.692.472.552.592.612.732.672.762.622.482.662.622.582.522.562.712.582.642.612.522.692.562.662.572.522.702.582.642.252.520.972.893.082.602.58D梗丝第一天第二天第三天第四天第五天4.975.025.375.254.975.264.985.445.095.235.055.374.885.195.135.454.905.195.245.355.524.975.265.135.411.231.292.711.895.173.19由表可知，测得纤维素日内、日间RSD≤2.83％、半纤维素的日内、日间％，样品样品纤维素含量（mg）加入微晶纤维素量（mg）回收率（%）RSDA（烤烟）31.930.861.698.3~101.297.7~100.398.2~101.6B（白肋烟）32.930.861.697.5~103.498.3~99.296.5~100.62.230.821.60C（香料烟）31.730.861.697.4~100.497.8~102.7D（梗丝）57.425.651.296.6~101.598.6~102.497.5~100.8样品样品半纤维素含量（mg）加入木聚糖量（mg）回收率%RSD%A（烤烟）5.210.420.896.3~101.596.5~100.997.8~99.72.161.700.91B（白肋烟）5.210.420.897.1~104.397.4~101.898.5~102.82.69C（香料烟）5.210.420.896.2~102.597.8~100.898.6~101.22.36D（梗丝）25.420.841.698.8~103.698.2~101.5表23不同实验室纤维素检测结果和统计处理数据表（单位%）样品编号实验室1实验室2实验室3实验室4实验室5实验室6实验室7平均值RSD16.726.746.897.557.156.876.786.964.3023.4532.3546.446.386.507.266.366.736.545.5656.546.156.556.796.096.326.374.1567.086.957.277.466.286.066.706.837.5376.936.606.757.466.656.386.776.795.0287.307.307.417.717.046.697.007.214.58表24不同实验室半纤维素检测结果和统计处理数据表（单位%）样品编号实验室1实验室2实验室3实验室4实验室5实验室6实验室7平均值RSD12.812.922.923.012.922.932.842.912.3124.945.245.654.925.135.3036.496.446.786.476.413.0542.602.852.882.882.702.682.682.754.1552.852.392.562.532.242.322.292.468.6662.712.762.692.632.312.292.562.567.4772.682.772.632.782.542.482.512.634.6282.823.052.952.962.832.772.842.893.3540mL80%乙醇-饱和氯化钠溶液去除可溶性糖等干扰，用70mL90%二甲亚砜溶拉伯糖的浓度计算半纤维素含量。本方法各种糖的线性良好，R2＞0.999，检出限0.0022mg/L-0.0046mg/L，满足检测要求；纤维素含量的日内、日间RSD≤[1]张力田．碳水化合物化学[M]．北京:轻工业出版社，1988,66.[2]王瑞新.烟草化学[M].北京:中国农业出版社,2003.[3]于建军.卷烟工艺学[M].北京:中国农业出版社,2003,13-23.[4]左天觉.烟草的生产、生理和生物化学[M].朱尊权,等.译.上海:上海远东出版社,1993:371-373.[5]李兴波,闫克玉,丁海燕,等.河南烤烟(40级)细胞壁物质含量及其规律性研究[J].郑州轻工业学院学报,1999,14(3):27-30.[6]闫克玉,闫洪洋,李兴波,等.烤烟烟叶细胞壁物质的对比分析[J].烟草科技,2005(10):6-11.[7]蒲俊,刘彦岭.烤烟纤维素含量与烟叶品质的相关性研究[J].中国农业文摘:农业工程,2019,31(2):67-70.[8]刘晓冰,孟霖,梁盟,等.武陵山区烤烟上部叶片纤维素、木质素含量与质量指标间相关性研究[J].中国农学通报,2015,31(7):235-240.[9]张槐苓,葛翠英,穆怀静,等.烟草分析与检验[M].郑州:河南科学技术出版社,1994:103-111.[10]郭小义,戴云辉,郭紫明,等.应用纤维素测定仪测定烟草中的纤维素[J].烟草科技,2009(1):43-46.[11]廖臻,王岚,蒋次清,等.烟草中总细胞壁物质含量的测定方法[P].中国:CN102221512A,2011-10-19.[12]杨蕾,陶自伟,潘纯祥,等.超声和酶解除杂质法测定烟草中总细胞壁物质含量[J].中国烟草学报,2016,22(2):108-114.[13]尚军,吕祥敏,王鹏,等.流动分析法测定烟草中的纤维素[J].烟草科技,2012(7):40-42.[14]张红漫,郑荣平,陈敬文,等.NREL法测定木质纤维素原料组分的含量[J].分析实验室,2010,29(11):15-18.[15]张文博,贺建龙,蒋浩,等.木质纤维物质中纤维素和半纤维素含量的测定[J].江苏农业科学,2017,45(5):281-284.[16]刘永刚,冉宜骏,高铭泽,等.桑叶中纤维素和木质素含量的测定[J].饲料研究,2019，42(7):58-60.[17]王倩,宋晓霞,周帅,等.食用菌栽培基质中木质纤维素组分测定方法的建立[J].食用菌学报,2019,26(4):100-106.[18]SchlotzhauerWS，SchmeltzI，HickeyLC.Pyrolyticformationofphenolsfromsomehighmolecularweighttobaccoleafconstituentsandrelatednon-tobaccomaterials[J].TobaccoScience，1967,11:31-34.[19]SchlotzhauerWS，ChortykOT，HigmanHC，etal.Pyrolyticstudiesonfractionssequentiallyextractedfromtobacco[J].TobaccoNewYork，1969,13:153-155.[20]SchlotzhauerWS，ChortykOT.Pyrolyticstudiesontheoriginofphenoliccompoundsintobaccosmoke[J].TobaccoScience,1981,25(6):6-10.[21]ZaneA，WenderSH.Pyrolysisproductsofrutin,quercetin,andchlorogenicacid[J].TobaccoScience,1963,7:21-23[22]YC/T347-2010烟草及烟草制品中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸洗木质素的测定洗涤剂法[S].[23]NY/T3494-2019农业生物质原料纤维素、半纤维素、木质素测定[S].[24]王瑞，田耀旗，谢正军.玉米淀粉在DMSO/水体系中溶解性与精细结构变化[J].食品与机械,2017(3):27-30.[25]YC/T216-2013烟草及烟草制品淀粉的测定连续流动法[S].[26]郭小义,戴云辉,郭紫明,等.应用纤维素测定仪测定烟草中的纤维素[J].烟草化学，2009(1)：43-46.[27]孔兰芬，侯英，潘纯祥,等.重铬酸钾氧化-连续流动法测定烟草中纤维素含量[J].江西农业学报,2018,30(6):71-74.[28]JJF1343-2022标准物质的定值及均匀性、稳定性评估[S].[29]RfelliG，SartiniE．Characterisationofbrewpubbeercarbohydratesusinghighperformanceanionexchangechromatographycoupledwithpulsedamperometricdetection[J].FoodChemistry,2014,142(1)：152-158.[30]石彩玲,田侠,孙一鸣,等．离子色谱一脉冲积分安培法同时测定甘薯中10种可溶性糖组分[J].中国食品学报，2023,23(9)：324-328.[31]SluiterA，HamesB，RuizR，etal.Determinationofstructuralcarbohydratesandlignininbiomass［R］.Golden：NationalRenewableEnergyLaboratory，2008.[32]SluiterJB，RuizRO，ScarlataCJ，etal.Compositionalanalysisoflignocellulosicfeedstocks.1.Reviewanddescriptionofmethods［J］.JournalofAgriculturalandFoodChemistry，2010，58（16）：9043-9053.[33]YC/T251-2008烟草及烟草制品葡萄糖、果糖、蔗糖的测定离子色谱法[S][34]赵冰，庞字辰，梁焕秋，等．淀粉结构研究技术进展[c]/“食品工业新技术与新进展”学术研讨会暨2014年广东省食品学会年会论文集．广州：广东省食品学会，2014：4.[35]杨小雨,刘正辉,李刚华,等.高效液相体积排阻色谱法测定稻米支链淀粉链长的相对分子质量分布[J].中国农业科学,2013(16):3488-3495.1《烟草及烟草制品主要大分子物质的测定》1 1 1 1 3 3 4 4 4 4 4 5 6 6 6 6 7 7 7 7 7 7 8 8 9 91 9 9 10 11 12 17 19 19 21 21 1烟草及烟草制品主要大分子物质的测定第2部分木质素是影响烟叶原料质量的关键指标之一[1-3]。在卷烟抽吸过程中，木质素通过燃烧烟的安全性有重要影响[4,5]。同时，木质素对感官质量的影响具有两面性，在烟质素含量越高，产生的青杂气息、烧纸味越重[6-8]。综上所述，烟草中的木质素2），三种羟基苯丙烷单体（图2），即愈创木基丙烷（G基）、紫丁香基（S基）、3木质素的测定方法有Klason法、紫外分光光度法、红外光谱定量分析法和酸性洗涤纤维、酸洗木质素的测定洗涤剂法》[18]，是改进后的Klaso法先用酸性洗涤剂去除糖类、蛋白质、半纤维素及脂肪等成分后，再以72％的《农业生物质原料纤维素、半纤维素、木质素测定》（NY/T3494-2019）操作简单、环保安全；但由于烟草中的蛋白质含量较高[1、通过相关文献调研和前期预研，拟定以两步酸解法为前处理方法，灰2、对烟草和烟草制品同时进行分析和验证，开展参数优化与评价，具体4 ↓↓ ↓本方法规定了烟草及烟草制品中主要大分子物质木质素含量的两步酸解测试样依次采用80%乙醇-饱和氯化钠溶液去除色素、90%二甲亚砜-水溶液去5水应为蒸馏水或至少应达到于100mL烧杯中，用硫酸稀释液溶解，转移至100mL容量瓶定容，得到浓度6离心机，适用50mL7醇-饱和氯化钠水溶液，超声30min后4000r/min离心5min，弃上清液，得醇将经醇洗后的试样用70mL90%二甲亚砜-水溶液冲洗至150mL锥形瓶，），水浴酸解后，在耐压玻璃管中缓慢加入56mL水，旋紧盖子，置于120℃采用紫外分光光度计在205nm波长下测定标准工作溶液和试样溶液的吸光8ASL——试样中酸溶木质素含量，单位为质量分数（%m0——称样量，单位为克（g）；A——滤液中酸溶木质素浓度，单位为微克每毫升(μg/mLV——滤液定容体积，单位为毫升（mL）；D——滤液定容后溶液的稀释倍数；AIL——试样中酸不溶木质素含量，单位为质量分数（%m0——称样量，单位为克（g）；m1——玻璃砂芯坩埚和酸不溶残渣的质量，单位为克（gm2——玻璃砂芯坩埚和灰分的质量，单位为克（g）；9Lig=ASL+AIL………（3）Lig——试样中木质素总含量，单位为质量分数（%）；ASL——试样中酸溶木质素含量，单位为质量分数（%类等物质也影响后续的抽滤过程。通过文献调研发现，YC/T216-2013《烟草及烟草制品淀粉的测定连续流动法》采用25mL80%乙醇-饱和氯化钠溶液可洗样品经除色素、除蛋白质干扰两步萃取除去可溶物，剩余的骨架大约在40%~60%，为了提高检测的准确性，需加大样品称样量。因此，项目组借鉴YC/T216-2013对加大样品称样量后的萃取剂醇-饱和氯化钠溶液，混匀过滤后准确移取1mL用80%乙醇溶液-饱和N.DN.DN.DN.D注:N.D为未检出萃取温度对蛋白质的去除效果的影响。在同一称样量（0.50g）条件下，分别加N.DN.DN.DN.DN.DN.DN.DN.DN.D为考察不同萃取剂用量、不同萃取时间对超声效果的影响，在同一称样量12340.24N.D1234N.DN.DN.DN.DN.DN.DN.DN.DN.D1234N.DN.DN.DN.DN.DN.DN.DN.DN.D因此，本实验采用含90%二甲亚砜水溶液70mL在60℃条件下超声3.0h合物，采用酸水解是解离木质素的常用方法[22]，而酸解过程中酸浓度、温度、时间等因素对木质素/纤维素/半纤维素是否高效完全水解起着关键作用。因此，件下酸解2小时），结果如表5和图5所示：ASLAILLig由图表可知：当酸度从65%升到72%时，酸溶木质素逐渐上升，酸不溶木溶/酸不溶木质素趋于稳定；当酸度由75%继续升高到80%时，由于高酸度造成质[24]，造成酸溶/酸不溶木质结果偏高，因此选择72%硫酸溶液作为浓酸酸解条为考察浓酸过程温度对木质素结果的影响，样品加入2mL72%硫酸溶液后ASLAILLig在同一平台上；当酸解温度从35℃升到45℃时，酸溶/酸不为选择浓酸酸解过程合适的酸解时间，样品加入2mL72%硫酸溶液后在和图7所示：ASLAILLigASLAILLig件下，酸溶/酸不溶木质素呈微小波动，而总木质素则基本稳定在同一平台上；ASLAILLig致酸解不完全物质混入酸不溶木质素，引起木质素测定结果偏高。酸解时间从0127斜率，b1截距b0统计临界值，t0.95,4t0.95,5×s（b1）|bt0.95,5×S（b）度对时间变量无明显差异，31天内标准储备溶液的稳定性良好。因此，储存条件确定为：在0℃~4℃下避光密闭保存，有效期1个月。为考察样品前处理后待测溶液酸溶木质素的稳定性，将待测液在室温放01236斜率，b1截距b0斜率不确定度，s（b1）统计临界值，t0.95,4t0.95,5×s（b1）2.57b1对1系列标准溶液进行紫外分光光谱分析，并对在205nm下的其吸2=0.999412345（%）RSDA(烤烟)2.552.492.602.532.6112345（%）RSD（%）RSDA(烤烟)％，96.7~99.9香料烟、5号白肋烟、6号雪茄烟、7号烤烟12345678123456712345678123456712345678[1]ChenFang,TobimatsuY,Havkin-FrenkelD,etal.Apolymerofcaffeylalcoholinplantseeds[J].ProcNatlAcadSciUSA,2012,109(5):1772-1777.[2]臧亚楠，孔宁川，李地艳，等.烟草木质素的研究概况[J].云南农业大学学报,201530(5):822-828.[3]WuS,ArgyropoulosDS.Animprovedmethodforisolatinglignininhighyieldandpurity[J].PulpandPaperScience,2003,29(7):235-240.[4]任晓红.烤烟细胞壁物质与烟叶质量的关系[D].郑州：河南农业大学2007.[5]邓宇.烟叶中木质素的测定、裂解和降解研究[D].江苏:江南大学食品工程,2006.[6]谭洪,王树荣,骆仲泱,等.木质素快速热裂解试验研究[J].浙江大学学报:工学版,2005,39(5):710-714.[7]闰克玉.烟草化学[M].郑州:郑州大学出版社,2002:43-56.[8]闫克玉,闫洪洋,李兴波,等.烤烟烟叶细胞壁物质的对比分析[J].烟草科技，2005(10):6-11[9]SluiterA，HamesB，RuizR，etal.Determinationofstructuralcarbohydratesandlignininbiomass［R］.Gold