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文档简介

病毒的致病作用及检测

病毒必须进入细胞并利用宿主细胞大分子合成机制和能量装置进行复制,因此在许多方面,病毒复制研究就是病毒与其宿主相互作用的研究。这一研究不仅有助于阐明病毒感染和致病的生物学和分子生物学机理,而且对于病毒感染的诊断与控制具有重要的意义。(1)溶解型病毒引起宿主细胞破坏和死亡,将病毒释放到细胞外(2)稳定型病毒复制较慢,宿主细胞并不一定死亡,新生的病毒颗粒可出芽到细胞外一、病毒对真核细胞的感染可呈现不同的反应(3)结合型

病毒的DNA与宿主的DNA结合到一起,宿主细胞一起增殖,并不释放到细胞外,导致肿瘤产生。相对于植物病毒而言,对于病毒感染动物细胞的过程了解更为详尽,所以主要以动物病毒为例介绍病毒感染对真核细胞的影响。

病毒感染引起的致细胞病变效应或细胞损伤是因病毒的基因产物的毒性作用所引起,或是病毒复制的必需步骤的次级效应,而且以后者更为普遍。病毒感染引起细胞死亡的原因非常复杂,但至少有两种方式:一是由于病毒对宿主细胞的毒性作用可导致细胞坏死;二是活化了细胞程序性死亡途径导致细胞凋亡。在有些情况下,二者可同时发生。

1、病毒感染的致细胞病变效应

2、病毒感染对宿主大分子合成的影响(1)宿主细胞转录的抑制许多真核生物病毒,特别是杀细胞病毒具有干扰宿主大分子合成的能力。(2)宿主细胞翻译的抑制许多病毒感染细胞后都会抑制宿主细胞mRNA的翻译,其结果是为病毒蛋白质合成提供更多的核糖体亚单位、翻译起始因子、tRNA和氨基酸前体。

(3)宿主细胞DNA复制的抑制3、病毒对细胞结构的影响

无致细胞病变效应或致细胞病变效应弱的病毒感染对宿主细胞结构几乎无任何影响,而致细胞病变效应很强的病毒则可能对宿主细胞膜、细胞骨架等结构造成严重影响。

(1)病毒对宿主细胞膜的影响

一些具有有融合活性的表面蛋白的有包膜病毒能够启动细胞之间的融合,形成多核细胞如合胞体病毒。(2)病毒对细胞骨架的影响·

许多病毒的感染会导致细胞骨染纤维系统的瓦解。由于细胞骨架在维持细胞形态中起一定作用,所以病毒引起细胞骨架的改变是受染细胞结构变化的原因之一。

(3)包涵体

病毒复制复合物、转录复合物、复制和装配中间体、核壳和毒粒经常累积在宿主细胞的特定区域而形成病毒工厂或包涵体结构,这些结构在细胞质和/或细胞核的定位反映了一种特定病毒的复制位点。这些新结构的装配可以改变或取代宿主细胞组分,并成为细胞病变的一种形式。

(4)细胞凋亡

许多病毒能够诱发细胞凋亡,其机制较为复杂且各不相同。通常病毒感染细胞后通过关闭或干扰宿主细胞正常合成代谢诱发细胞凋亡,或者由病毒编码的蛋白因子直接作用于细胞与凋亡有关的因子及蛋白水解酶而诱发细胞凋亡。越来越多的资料表明病毒感染与细胞凋亡有着密切的联系,许多病毒的致细胞病变效应往往是诱发细胞凋亡的结果。

细胞凋亡可能是宿主在细胞水平抵御病毒感染的一种机制,通过局部受染细胞的凋亡可限制病毒的繁殖与传播以拯救整个器官和个体。另一方面,为了生长与繁衍,有些病毒进化获得凋亡抑制基因,它们在感染早期即开始表达,抑制宿主细胞凋亡,使病毒顺利完成复制周期。细胞凋亡的过程

在这种情况下,病毒诱发的细胞凋亡和凋亡抑制同时存在于受染细胞,它们相互作用协调着病毒与细胞的关系,使病毒在细胞内能够顺利复制。二、机体的病毒感染

对于动物、植物的机体而言,病毒感染的意义与细胞的病毒感染有很大的区别,这是一个更为复杂且不断变化着的过程,是病毒与机体相互作用所产生的各种现象的总和。1、机体病毒感染的类型

机体的病毒感染可按不同的形式进行分类。根据感染症状的明显程度,可分为显性感染和隐性感染(非显性感染)。根据感染过程,症状和病理变化发生的主要部位,可分为局部感染和系统感染。根据病毒在机体内存留时间的长短以及病毒与宿主相互作用的方式,可分为急性感染和持续性感染。

2·构成机体病毒感染的因素

机体内病毒感染的表现形式和结果由病毒、机体和环境条件三者的综合作用决定。

(1)病毒

病毒的特征,即病毒的致病性和毒力直接影响病毒感染的表现与结果。包括:

A.病毒的致病性是指特定的病毒种引起感染过程的能力,是病毒种的特征。B.病毒的毒力是指同种病毒的不同毒株的致病性的强弱,是病毒株的特征。C.病毒的数量是引起病毒感染的另一个必要条件,它与病毒的毒力以及机体对病毒的敏感性有关。病毒的毒力越强,引起机体感染的剂量越小,反之则越大。

在一些复杂病毒,如痘病毒、疱疹病毒中发现病毒编码受体和病毒因子,这些病毒基因组编码的产物能以不同方式影响病毒的感染过程。病毒因子是病毒编码的,与机体的免疫调节因子或效应因子结构相似的蛋白质,如痘病毒编码的生长因子,它们可刺激感染灶邻近细胞的代谢,使其成为病毒感染的靶细胞,促进病毒进一步繁殖;

病毒编码受体是由病毒编码的,可与免疫效应因子或调节因子结合的细胞受体类似物,其主要作用是阻断和抑制细胞因子与其受体结合,从而抑制宿主的免疫反应,使病毒自身得到保护。(2)机体

病毒侵入机体后,病毒在细胞内的活性,病毒在体内的传播以及病毒感染的表现和结果,不仅取决于病毒的质和量,同时亦取决于机体的防御结构和防御功能状态。对病毒感染的免疫和抵抗是完整机体的一种生理功能,以保护机体免于感染或严重感染。此外,机体的年龄、激素分泌水平、生理状态、营养状况、中枢神经活动以及非免疫抵抗的遗传因素等一系列十分复杂的因素,都影响机体的病毒感染过程。(3)环境条件

机体生存所处的生态环境、气候条件中所可能存在的多种生物或非生物因子,以及诸如人的生活方式、动物的饲养管理方式和植物的栽培方式等因素,均能作用于病毒和/或机体而间接影响病毒的感染过程。病毒感染的检查方法与防治原则三病毒感染的检查方法1、 本采集与送检:用于分离培养的标本:血清学诊断的标本:采取急性期、双份血清2、常规分离与鉴定动物接种鸡胚接种组织培养

细胞培养

原代细胞培养传代细胞培养三大培养方法病毒在细胞内增殖的指标2、红细胞吸附正常细胞病变细胞(CPE)病毒的快速诊断光镜-----包涵体电镜免疫荧光ELISA分子生物学技术杂交SouthernblotPCRNorthernblot

病毒的血清学诊断中和试验补体结合试验血凝抑制试验免疫扩散等病毒感染的防治免疫预防人工主动免疫灭活疫苗:ND疫苗狂犬疫苗禽流感疫苗口蹄疫疫苗,禽霍乱疫苗等减毒活疫苗:ND疫苗猪瘟疫苗乙脑疫苗布病疫苗传喉疫苗

亚单位疫苗:禽

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