广西贺州市平桂区平桂高级中学高三第一次调研测试新高考生物试卷及答案解析

广西贺州市平桂区平桂高级中学高三第一次调研测试新高考生物试卷注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．以下关于利用酵母菌进行的相关实验和科学研究的叙述中，不正确的是（）A．差速离心：细胞中细胞器的分离B．模型构建：研究种群数量变化规律C．单因子对照实验：呼吸方式判断D．同位素标记：出芽生殖时细胞膜的流动性2．下列关于以洋葱为实验材料的叙述，不正确的是A．可以用洋葱鳞片叶内表皮细胞和吡罗红甲基绿染色剂观察核酸在细胞内的分布情况B．滴加0.3g·mL-1蔗糖溶液后的洋葱鳞片叶外表皮细胞可观察到原生质层与细胞壁分离C．洋葱根尖分生区细胞呈正方形，解离和染色后可观察到染色体和叶绿体的形态D．低温诱导培养的洋葱，其根部同时存在染色体数目正常和数目发生改变的细胞3．2020年初，武汉出现不明原因肺炎，经检测由一种RNA病毒--COVID-19（新型冠状病毒）引起，下列相关叙述中，错误的是（）A．COVID-19比T2噬菌体更易发生变异B．某患者4小时内体温维持在1．2℃不变，该过程中产热量等于散热量C．已经痊愈的患者如果再次感染该病毒，其记忆细胞可以产生大量抗体与抗原结合D．被病毒侵染的肺部细胞在效应T细胞的作用下裂解死亡，属于细胞凋亡4．下列遗传病中，属于染色体结构变异引起的是（）A．猫叫综合征 B．特纳氏综合征C．苯丙酮尿症 D．青少年型糖尿病5．下列关于激素、抗体、酶和神经递质的叙述，正确的是（）A．酶、激素、抗体的化学本质都是蛋白质B．乙酰胆碱与特定分子结合后可在神经元之间传递信息C．激素和抗体都具有特异性，都只能作用于特定的靶细胞D．激素、神经递质均在细胞外发挥作用后被灭后6．某小组用性反转的方法探究某种鱼类(2N=32)的性别决定方式是XY型还是ZW型，实验过程如图所示。其中投喂含有甲基睾丸酮(MT)的饲料能将雌仔鱼转化为雄鱼，投喂含有雌二醇(ED)的饲料能将雄仔鱼转化为雌鱼，且性反转不会改变生物的遗传物质（性染色体组成为WW或YY的胚胎致死）。下列有关分析错误的是A．对该种鱼类进行基因组测序时需要测定17条染色体上DNA的碱基序列B．若P=1:0，Q=1:2，则该种鱼类的性别决定方式为XY型C．若P=1:2，Q=0:1，则该种鱼类的性别决定方式为ZW型D．无论该种鱼类的性别决定方式为哪种，甲和丙杂交后代中雌鱼：雄鱼=1:17．《庄子·人间世》中庄子对弟子说：“山木自寇也，膏火自煎也，桂可食，故伐之；漆可用，故割之。人皆知有用之用，而莫知无用之用也”。语句中相关生态学原理错误的是（）A．“寇”“煎”“伐”“割”有利于能量流向对人类有益的部分B．“膏火自煎”使得生态系统能量利用率降低C．“伐之”、“割之”均不利于生物多样性的保护D．“无用之用”指生物多样性的间接价值和潜在价值8．（10分）图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，在其他条件相同且适宜的情況下，测得一段时间内装置中相关物质含量的变化如曲线乙所示，下列关于传统发酵技术的叙述不正确的是（）A．图乙中曲线①、②可分别表示装置甲中O2浓度、酒精浓度的变化B．用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀a、bC．果酒、果醋和腐乳制作所需的适宜温度均为30℃D．果酒、果醋和腐乳制作所用的菌种不全是原核生物二、非选择题9．（10分）为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。（1）将草甘膦抗性基因作为_____，与Ti质粒用相同的_____和DNA连接酶处理构建基因表达载体。（2）用_____处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_____的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'根据上述序列应选择引物_____（填字母）进行PCR。A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计_____种引物，其原因是_____。（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否_____。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____过程，获得转基因水稻。10．（14分）埃博拉病毒（EBV）是一种单链RNA病毒。如图是埃博拉病毒侵染后引起的人体免疫反应部分图解。据图回答下列问题：（1）图示免疫过程为_______免疫。图中效应T细胞识别被病毒侵入的宿主细胞并与之结合依赖于细胞膜表面的________。效应T细胞使靶细胞解体后，病毒就失去了_________的基础，从而被吞噬、消灭（2）埃博拉病毒侵入人体后，除引起图中涉及的免疫反应外，也能引起另一种免疫反应：被_____细胞摄取和处理，暴露出这种病毒所特有的_____，并将这种特有物质传递给T细胞，刺激T细胞产生______，这些物质能引起受到刺激的B细胞分化为_________细胞，然后这种细胞分泌抗体，抗体与病毒相结合，发生凝集或形成沉淀。11．（14分）自然界里有多种微生物，将其进行合理的筛选、培养和应用，能给医药和化工等生产领域带来巨大经济效益。回答下列问题。（1）对培养基进行灭菌时，多采取____________法，而对接种环或涂布器灭菌时则用____________法，若要将微生物采用平板划线法进行分离操作，在固体培养基表面连续进行了5次划线，则需要对接种环灼烧____________次。平板划线在做第二次及其后的划线操作时，要从上次划线的____________开始划线，最后一次划的线不能与第一次划的线____________。（2）将接种后的固体培养基和一个未接种的固体培养基放入恒温箱中____________培养，以减少培养基中的水分挥发。其中，培养未接种的固体培养基是为了____________。长期保存菌种时，应将培养的菌液与____________充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存。（3）甲、乙两组同学用稀释涂布平板法测定某种微生物的数量，在同一稀释倍数下每隔一段时间记录数据（统计时间内微生物总数小于环境容纳量），得到以下结果：培养时间(小时)24487296甲组菌落均值(个)18253632乙组菌落均值(个)20283832计数时最好取培养____________小时记录的菌落数作为实验结果，一方面是由于培养时间较短，会遗漏菌落数目，另一方面是由于____________。12．光呼吸是所有进行光合作用的细胞在光照和高氧低二氧化碳情况下发生的一个代谢过程。它是光合作用一个损耗能量的副反应。即绿色植物在照光条件下的呼吸作用。特点是有机物在被分解转化过程中虽也放出CO2，但不能生成ATP，使光合产物被白白地耗费掉。所以光呼吸越强，光合生产率相对就低。光呼吸现象产生的分子机制是O2和CO2竞争Rubisco酶。在暗反应中，Rubisco酶能够以CO2为底物实现CO2的固定，而当O2浓度高、CO2浓度低时，O2会竞争Rubisco酶。Rubisco酶以O2为底物，对五碳化合物进行加氧氧化。光呼吸使光合作用产物损失的具体过程如图所示。水稻、小麦等C3植物的光呼吸显著，通过光呼吸损耗光合作用新形成有机物的1/4，而高粱、玉米等C4植物的光呼吸消耗很少，只占光合作用新形成有机物的2%~5%。与C3植物相比，C4植物代谢的不同点是，C4植物叶肉细胞的细胞质基质具有一种特殊的PEP羧化酶，它催化如下反应：PEP+HCO3—→苹果酸（C4）+Pi。苹果酸进入维管束鞘细胞，生成CO2用于暗反应，再生出的丙酮酸（C3）回到叶肉细胞中，进行循环利用。叶肉细胞包围在维管束鞘细胞四周，形成花环状结构。PEP羧化酶与CO2的亲和力是Rubisco酶的60倍，也就是PEP羧化酶能固定低浓度的CO2。水稻和小麦作为养活全世界几乎40%人口的主要作物，它们的产量近几年越来越难满足全球快速增长的食物需求。目前，国际上有很多科研人员致力于提高水稻、小麦的光合速率的研究，旨在提高粮食作物产量。（1）在光呼吸过程中，有机物被氧化分解，却无ATP生成，而ATP能应用于___________________（写出三条）等生命活动中，故会造成有机物浪费的结果。（2）有观点指出，光呼吸的生理作用在于高温天气和过强光照下，蒸腾作用过强，植物失水过多，____________大量关闭，导致CO2供应减少。此时的光呼吸可以消耗光反应阶段生成的多余的____________，并且光呼吸的最终产物还可以作为暗反应阶段的原料，这是有重要正面意义的。（3）综合文中信息，请解释C4植物光呼吸比C3植物小很多的原因__________。（4）请根据高中所学知识和本文中的信息，在基因水平上写出两条具体的提高水稻、小麦光合作用的研究思路__________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

1、分离细胞器的方法是差速离心法。2、放射性同位素可用于追踪物质的运行和变化规律．用放射性同位素标记的化合物，化学性质不改变，通过追踪放射性同位素标记的化合物，可用弄清化学反应的详细过程。3、模型是人们为了某种特定目的而对认识所作的一种简化的概括性的描述，模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法。高中生物《分子与细胞》提出模型的形式包括物理模型、概念模型和数学模型等。【详解】A、分离各种细胞器常用差速离心法，A正确；B、种群数量增长的曲线采用了数学模型构建法，B正确；C、探究酵母菌细胞的呼吸方式采用单因子对照实验法，C正确；D、可用荧光标记法标记细胞膜的蛋白质分子研究细胞膜的流动性，D错误。故选D。【点睛】本题考查课本基础实验的实验方法，对教材基础实验需要理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能。能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用，并对实验现象和结果进行解释、分析、处理，需要平常对实验细节加以积累。2、C【解析】

1、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验的原理：甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，利用甲基绿和吡罗红混合染色剂对细胞染色，同时显示DNA和RNA在细胞中的分布，观察的结果是细胞核呈绿色，细胞质呈红色，说明DNA主要分布在细胞核，RNA主要分布在细胞质。2、当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中，由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，液泡逐渐缩小，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，即发生了质壁分离．浓度差越大，细胞失水也多，质壁分离现象越明显。3、洋葱根尖细胞有丝分裂装片制作的步骤是取材→解离→漂洗→染色→制片。【详解】A、可用人口腔上皮细胞或洋葱鳞片叶内表皮细胞作为实验材料，利用吡罗红甲基绿染色剂染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布，A正确；B、滴加0.3g·mL-1蔗糖溶液后，洋葱鳞片叶外表皮细胞会发生渗透失水，使原生质层与细胞壁分离，B正确；C、洋葱根尖分生区细胞呈正方形，解离和染色后可观察到染色体的形态和分布，但根尖分生区细胞不存在叶绿体，C错误；D、低温抑制分裂过程中纺锤体的形成，但只有部分细胞内的染色体数目加倍，D正确。故选C。【点睛】本题考查课本基础实验的原理和选材，意在考查学生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用；并对实验现象和结果进行解释、分析、处理。3、C【解析】

体温的恒定是产热量与散热量维持恒定的结果；同一种抗原再次侵入机体时，机体内的记忆细胞迅速增殖和分化形成效应细胞，并分泌免疫活性物质发挥免疫作用；靶细胞在效应T细胞的作用下的裂解、死亡过程属于细胞凋亡。【详解】A、T2噬菌体为DNA病毒，COVID-19为RNA病毒，因此，COVID-19比T2噬菌体更易发生变异，A正确；B、体温的恒定是产热量与散热量维持恒定的结果，因此，某患者4小时内体温维持在1.2℃不变，该过程中产热量等于散热量，B正确；C、已经痊愈的患者经历了特异性免疫过程，体内存在该病毒的记忆细胞，当该病毒再次感染时，其记忆细胞可以迅速增殖和分化形成浆细胞，浆细胞分泌大量抗体与该病毒特异性地结合，C错误；D、被病毒侵染的肺部细胞在效应T细胞的作用下裂解死亡，属于细胞凋亡过程，D正确。故选C。4、A【解析】

人类遗传病分为单基因遗传病、多基因遗传病和染色体异常遗传病：（1）单基因遗传病包括常染色体显性遗传病（如并指）、常染色体隐性遗传病（如白化病）、伴X染色体隐性遗传病（如血友病、色盲）、伴X染色体显性遗传病（如抗维生素D佝偻病）；（2）多基因遗传病是由多对等位基因异常引起的，如青少年型糖尿病；（3）染色体异常遗传病包括染色体结构异常遗传病（如猫叫综合征）和染色体数目异常遗传病（如21三体综合征）。【详解】A、猫叫综合症起因于第五号染色体短臂上片段的缺失，是染色体结构变异引起的，A正确；B、特纳氏综合征患者的染色体组成为XO，表现为女性卵巢和乳房等发育不良，是染色体数目变异引起的，B错误；C、苯丙酮尿症是基因突变引起的遗传病，C错误；D、青少年型糖尿病是由多对等位基因异常引起的，与染色体变异无关，D错误。故选A。5、B【解析】

本题考查的知识点是激素、抗体、酶和神经递质。酶是活细胞产生的，在细胞内外都起作用，酶绝大多数是蛋白质，少数是RNA。神经递质：是指神经末梢释放的特殊化学物质，它能作用于支配的神经元或效应器细胞膜上的受体，从而完成信息传递功能。浆细胞产生的抗体与相应的抗原发生特异性结合。【详解】A、酶是蛋白质或RNA，只有部分激素的化学本质是蛋白质（如性激素属于脂质），抗体都是蛋白质，A错误；B、乙酰胆碱与特定分子即突触后膜上的受体结合后，能将化学信号转变成电信号，从而在神经元之间传递信息，B正确；C、激素具有特异性，只是作用于靶细胞，但是有些激素的靶细胞是全身的组织细胞，如甲状腺激素；抗体具有特异性，可以作用于抗原，而抗原不一定具有细胞结构，如某些大分子物质也可以是抗原，C错误；D、有些激素如性激素是在细胞内发挥作用的，D错误。故选B。6、C【解析】

若该鱼为XY型性别决定方式，则甲为XX，经MT处理后，甲XX与乙XX杂交后代全是雌性，即P=1：0；丙是XY，经ED处理后，丙XY与丁XY杂交，后代中XX（雌性）:XY（雄性）=2：1；若该鱼的性别决定方式是ZW型，则甲为ZW型，经MT处理后，与乙ZW杂交，后代中ZW（雌性）：ZZ（雄性）=P=2:1；丙为ZZ，经ED处理后，与丁ZZ杂交，后代中全是雄性。【详解】A、该鱼有性染色体，故进行基因组测序时需要测定15条常染色体+2条性染色体，共17条染色体上DNA的碱基序列，A正确；B、该种鱼类的性别决定方式为XY型，甲XX与乙XX杂交后代中，P=1:0，丙XY与丁XY杂交后代中，Q=1:2，B正确；C、若该种鱼类的性别决定方式为ZW型，则甲ZW与乙ZW杂交后代中，P=2:1，丙ZZ与丁ZZ杂交后代中，Q=0:1，C错误；D、若为XY型，则甲XX与丙XY杂交，后代中雌性：雄性=1:1；若为ZW型，甲ZW与丙ZZ杂交，后代中雌性：雄性=1:1，D正确。故选C。【点睛】XY型性别决定方式中，雌性的性染色体组成为XX，雄性为XY；ZW性别决定方式中，雌性为ZW，雄性为ZZ。7、C【解析】

庄子的话意思是“山上的树木，因长成有用之材，而被人砍伐；膏能燃烧照明而受煎熬；桂树因为可以吃，所以被人砍伐；漆树因为可以用，所以被人割皮。人们只知道有用的好处，哪里知道无用的好处。”【详解】A、“寇”“煎”“伐”“割”都是为人类所用，其能量流向对人类有益的部分，A正确；B、“膏火自煎”使得生态系统能量利用率降低，B正确；C、“伐之”不利于生物多样性的保护，“割之”只是在树上割开口子，漆树依然可以生长，对生物多样性保护无影响，C错误；D、“无用之用”指生物多样性的间接价值和潜在价值，D正确。故选C。8、C【解析】

题图分析：图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，其中充气口a是在连接充气泵进行充气用的；排气口b是在酒精发酵时用来排出CO2的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是防止空气中微生物的污染。图乙表示图甲发酵装置中相关物质含量的变化。①物质随发酵时间延长逐渐下降，②物质随发酵时间延长逐渐上升。【详解】A、酵母菌开始进行有氧呼吸，不断消耗氧气，因此曲线①表示装置甲中O2浓度的变化，酵母菌发酵过程中不断产生酒精，因此曲线②表示装置甲中酒精浓度的变化，A正确；B、果醋发酵时需要氧气，因此用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀a、b，B正确；C、果酒、果醋和腐乳的制作所需的适宜温度分别是18~25℃，30～35℃，15~18℃，C错误；D、果酒、腐乳制作所用的菌种分别是酵母菌、毛霉，都是真核生物，果醋制作所用的菌种是醋酸菌，是原核生物，D正确。故选C。二、非选择题9、目的基因限制性核酸内切酶CaCl2潮霉素BD2保证基因的两条反向平行的链都做模板，且其上碱基序列不同表达再分化【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）用相同的限制性内切酶切割目的基因和质粒后露出相同的黏性末端再用DNA连接酶连接，从而构建基因表达载体，题中以草甘膦抗性基因作为目的基因。（2）依据图中信息，农杆菌用CaCl2处理后变成感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在含有标记基因表达的潮霉素培养基中筛选，从而获得含目的基因表达载体的农杆菌。（3）根据已知草甘膦抗性基因的部分序列以及双链DNA分子的结构特点（反向平行），再结合DNA复制（PCR中）的特点，即子链合成的方向是从5’到3’，应选择引物B、D进行PCR扩增。（4）为使基因的两条反向平行的链都做模板，而且其碱基序列不同，所以，PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计2种引物。（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否表达。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过再分化过程，获得转基因水稻。【点睛】本题主要考查基因工程的应用相关知识，识记和理解目的基因的获取、表达载体的构建以及目的基因的检测等知识是解答本题的关键。10、细胞糖蛋白（或特异性受体）寄生吞噬抗原淋巴因子浆【解析】

1、体液免疫过程为：（1）感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外，大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；（2）反应阶段：B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞；（3）效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应。2、细胞免疫过程为：（1）感应阶段：吞噬细胞摄取和处理抗原，并暴露出其抗原决定簇，然后将抗原呈递给T细胞；（2）反应阶段：T细胞接受抗原刺激后增殖、分化形成记忆细胞和效应T细胞，同时T细胞能合成并分泌淋巴因子，增强免疫功能。（3）效应阶段：效应T细胞发挥效应。【详解】（1）图示免疫过程涉及效应T细胞攻击靶细胞使靶细胞裂解过程，为细胞免疫。图中效应T细胞通过细胞膜表面的特异性受体（糖蛋白）识别被病毒侵入的宿主细胞并与之结合。效应T细胞使靶细胞解体后，病毒就失去了寄生的基础，从而被吞噬、消灭。（2）埃博拉病毒侵入人体后，除引起图中涉及的细胞免疫外，也能引起体液免疫反应：被吞噬细胞摄取和处理，暴露出这种病毒所特有的抗原，并将这种特有物质传递给T细胞，刺激T细胞产生淋巴因子，淋巴因子能引起受到刺激的B细胞分化为浆细胞，由浆细胞分泌抗体，抗体与病毒相结合，发生凝集或形成沉淀。【点睛】本题考查体液免疫和细胞免疫相关知识，掌握相关知识结合题意答题。11、高压蒸汽灭菌灼烧灭菌6末端相连（或相接、相交等意思正确）倒置作为对照组，排除培养基被杂菌污染甘油72培养时间过长，两个或多个菌落连成一个菌落【解析】

1、微生物培养的关键是无菌操作技术，无菌操作过程中的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法灭菌。高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌。无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌。微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。2、平板划线操作的基本步骤是：（一）右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口通过火焰，将已冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口通过火焰并塞上棉塞。（二）左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。（三）烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。（四）将平板倒置，放入培养箱中培养。【详解】（1）对培养基进行灭菌时，多采取高压蒸汽灭菌法，而对接种环或涂布器灭菌时则用灼烧灭菌法。接种环在每次接种前都要灼烧灭菌，最后一次接种完也要灭菌，所以在固体培养基表面连续进行了5次划线，则需要对接种环灼烧6次。平板划线在做第二次及其后的划线操作时，要从上次划线的末端开始划线，使菌体的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终获得由单个菌体形成的单个菌落。最后一次划的线不能与第一次划的线相连。（2）将接种后的固体培养基和一个未接种的固体培养基放入恒温箱中倒置培养，以减少培养基中的水分挥发。培养未接种的固体培养基是为了作为对照组，排除培养基被杂菌污染。长期保存菌种时，应将培养的菌液与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱保存。（3）根据表中数据可知，甲组和乙组中的菌落数都在72时达到最大，由此推知最好取72小时记录